鸡传染性法氏囊病病毒VP5的原核表达、多抗制备及初步应用

传染性法氏囊病(infectious bursal disease virus,IBD)是由传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)引起的一种主要危害雏鸡的急性传染病。在IBDV编码的5个蛋白中,VP5是IBDV唯一可以缺失基因的蛋白。本研究克隆了IBDV优势流行毒株的VP5蛋白编码基因,利用原核表达系统表达了VP5蛋白,通过免疫BALB/c小鼠制备VP5多抗,并对多抗进行了鉴定和检测不同IBDV毒株的应用。结果显示,IBDV优势流行毒株的VP5蛋白实现了可溶性表达,分子质量约为17 kDa;制备的VP5多抗特异性良好,ELISA效价可达1:64000;VP5多抗可通过IFA和Western Blot检测识别IBDV rHLJ0504-HT株,不识别VP5基因缺失株。结果表明:试验成功表达了IBDV优势流行毒株的VP5蛋白,并制备了VP5多抗;VP5多抗可对IBDV及其VP5编码基因缺失毒株进行鉴别检测。本研究对于IBDV检测方法的建立以及VP5编码基因功能的进一步研究提供了物质基础。

鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒的初步应用

为建立鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒,该研究以灭活纯化的鸡传染性法氏囊病病毒作为包被抗原,连续制备了3批次鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒中试产品。结果表明:该试剂盒对IBDV阳性血清检测的灵敏度可达1∶6400;对鸡新城疫病毒、鸡减蛋下降综合征病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡抗网状内皮组织增生症病毒、鸡马立克氏病病毒、禽流感病毒H5亚型、鸡传染性贫血病毒阳性血清和SPF鸡阴性血清均无交叉反应;批内和批间重复性的变异系数分别在4.21%和5.07%以内。应用该试剂盒和某进口同类ELISA试剂盒对258份临床白羽肉鸡血清样品同时进行对比检测,相对敏感性、相对特异性和符合率分别为98.44%、96.97%和98.06%。可见,该试验建立的鸡传染性法氏囊病病毒ELISA抗体检测试剂盒具有有操作简便、特异性强、灵敏度高的特点。

一株麻鸡传染性法氏囊病毒新型变异株的分离鉴定

近几年,鸡传染性法氏囊病毒新型变异株在我国广泛流行,主要发生于肉鸡,其致病力弱、隐蔽性强但能造成法氏囊严重萎缩。本研究从山东济宁地区临床出现法氏囊萎缩的发病麻鸡中采集法氏囊病料,接种SPF鸡胚进行病毒分离,通过RT-PCR方法进行病毒鉴定,将分离毒株回归SPF鸡进行致病性试验,同时对其主要抗原基因VP2进行进化分析。结果发现,该毒株能致死鸡胚;对其VP2基因进行测序比对和进化树分析发现,其与近几年的新型变异株基因序列的进化关系较近,同源性为96.1%~99.2%;人工感染SPF鸡第7 d法氏囊即出现较为明显的萎缩,第14 d萎缩更为明显,囊体比显著小于对照组(P<0.01)。本研究分离到的麻鸡源传染性法氏囊病毒JN22株属于新型变异株,能导致SPF鸡法氏囊显著萎缩。

2022年我国鸡传染性法氏囊病病毒遗传进化分析

近年来,由传染性法氏囊病病毒(IBDV)变异株引起的非典型传染性法氏囊病(IBD)给我国养禽业带来了新的威胁。为了解IBDV变异株流行规律,对2022年全国范围内的3000份疑似IBD样品进行分子流行病学调查,结果表明16.9%(507/3000)检测为IBDV阳性,随机选择354份阳性样本进行基因型鉴定,变异株占比达89.0%(315/354)。选择5株代表毒株VP2基因进行遗传进化分析,结果表明代表毒株与国内外流行变异毒株处于同一遗传进化分支,与新型变异株SHG19的氨基酸同源性高达98.9%~99.3%;且FJ220325-1毒株氨基酸关键位点在七肽区326位由丝氨酸变异为亮氨酸,提示IBD流行特征正在发生变化,但抗原性及毒力是否发生变化需要进一步验证。研究丰富了IBDV变异株的流行病学数据,可为做好相关防控工作提供理论参考。

2株肉鸡源传染性法氏囊病病毒的分离鉴定

为了解传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)的流行情况,监测其优势流行毒株的基因型变化,对疑似IBDV感染的临床病料进行检测,通过有限稀释法对IBDV毒株进行分离纯化,对分离毒株进行遗传进化分析和致病力分析。结果显示:从阳性病料中成功分离得到2株纯净的IBDV毒株;遗传进化分析结果显示,HN-2022-1株属于经典株,其VP2蛋白高变区具备经典毒株分子标志;AH-2022-1株属于HLJ0504样超强毒株,存在节段重配现象,其VP2蛋白高变区除具备超强毒株分子标志外,还具备经典株、早期变异株分子标志。此外,AH-2022-1株在VP2蛋白第一亲水区还发现了3处从未报道过的氨基酸突变,这导致第一亲水区的亲水性下降,可能引起该毒株发生毒力变化。致病力分析结果显示,2株IBDV均可引起严重的法氏囊萎缩,发病率100%,但仅AH-2022-1株可引起20%死亡率,与HLJ0504样株报道的60%~80%死亡率并不一致。提示:IBDV处于不断进化中,IBDV经典毒株仍在我国持续流行,研究结果为我国IBDV感染的防控提供了一定参考。

鸡传染性法氏囊病毒变异株的分离鉴定与致病性研究

为了分析和研究扬州地区某养殖场中鸡传染性法氏囊病毒变异株的致病性,本文选取发生鸡传染性法氏囊病的30只病鸡作为研究对象,采集病料组织,进行病毒分离鉴定和致病性研究。病鸡呈典型的临床病理症状,RT-PCR检测的琼脂糖凝胶电泳显示有一条大小为709 bp的特异性电泳条带,测序比对分析发现该鸡群中存在两种类型的变异病毒株,分别命名为IBDVYZ-1和IBDVYZ-2。琼脂扩散试验显示IBDV阳性对照毒株(BC6/85)、分离毒株IBDVYZ-1、分离毒株IBDVYZ-2三株病毒株的琼脂板样品孔均出现了明显的白色沉淀线,阴性对照却未见任何明显的沉淀线。IBDVYZ-1病毒株的ELD50为105.5/0.2 mL,IBDVYZ-2病毒株的ELD50为106.5/0.2 mL,IBDV阳性对照毒株(BC6/85)的ELD50为106.0/0.2 mL。人工接种感染SPF鸡14 d后,IBDVYZ-1病毒株的致死率为70.0%(7/10),IBDVYZ-2病毒株的致死率为100.0%(10/10),IBDV阳性对照毒株(BC6/85)的致死率为90.0%(9/10)。本研究成功分离鉴定出鸡传染性法氏囊病毒变异株,并在致病性方面展开了研究,这为今后江苏扬州地区的鸡传染性法氏囊病的科学有效防治提供参考价值。

鸡传染性法氏囊病毒接种鸡胚成纤维细胞工艺优化

鸡传染性法氏囊病是一种急性、高度接触性传染病,主要侵害幼龄鸡。传染性法氏囊病灭活疫苗通常采用强毒接种鸡胚成纤维细胞(CEF)进行病毒的培养。本试验采用细胞培养转瓶培养CEF方法接种病毒对转瓶内细胞接种密度、种毒接种量及收获病毒时间进行了优化,筛选出传染性法氏囊病毒培养的最佳工艺参数(转瓶),为扩大生产稳定的鸡传染性法氏囊病灭活疫苗奠定了基础。

我国部分地区A2dB1型传染性法氏囊病病毒新型变异株的鉴定及序列分析

为持续了解传染性法氏囊病病毒新型变异株(Novel variant infectious bursal disease virus,nVarIBDV)在我国流行情况,研究收集2021—2022年6个主要养禽地区疑似传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)鸡病料,采用RT-PCR进行检测,并对11株IBDV代表毒株的基因组双节段代表区段VP2-HVR和VP1-B-marker进行基因测序及序列分析。结果显示:所检测病料的IBDV阳性率为20.65%(19/92),其中11株IBDV代表毒株均为A2dB1型nVarIBDV。研究表明,nVarIBDV在我国主要养禽地区仍持续流行,而且出现了值得注意的新的突变位点,有必要进行持续的IBDV流行病学监测。

鸡传染性法氏囊病的诊断及防控

鸡传染性法氏囊病是由传染性法氏囊病毒感染鸡导致的一种高接触性传染病。该病对感染的青年鸡和雏鸡危害较大。该病发病急,病程短,具有2~3天的潜伏期,发病率高达60%以上,致死率高。病毒主要通过损害法氏囊,造成机体免疫力下降,从而继发其他疾病,给我国养鸡业带来巨大的经济损失。为降低该病的发病率,本文主要从该病的病原特性、流行特点、临床诊断及防治措施等方面进行归纳总结,以供养殖人员参考。

鸡传染性法氏囊病的科学防治

在我国养鸡业中,目前鸡传染性法氏囊病主要采用疫苗接种来预防,但效果并不理想,而且会产生严重的不良反应,因此需要采取药物预防控制该病的发生与流行。科学防治鸡传染性法氏囊病的前提是准确诊断,该病具有高度接触性和致死性且容易复发,给养殖户带来很大经济损失。为了有效防控该病,必须采取一系列综合性的防控措施,包括但不限于加强消毒和饲养管理,以及预防该病对免疫系统的抑制作用,以避免混合感染和并发症的发生。

非编码RNA在传染性法氏囊病病毒感染中的研究进展

传染性法氏囊病(infectious bursal disease, IBD)是由传染性法氏囊病病毒(IBD virus, IBDV)引起的急性、高度传染性和免疫抑制性禽类疾病。近年来,随着新型变异毒株的出现,IBDV仍然威胁着全球家禽养殖业的健康发展,宿主和IBDV之间的“战役”似乎永不停息。因此,迫切需要制定一种更全面和更有效的策略来控制该疾病,而深入了解IBDV与宿主之间的相互作用,将有助于开发新型疫苗。非编码RNA(non-coding RNA,ncRNAs)是一类丰富的不编码蛋白质的RNA分子,其中包括微小RNA(microRNAs, miRNAs)、长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNAs)和环状RNA(circular RNA,circRNAs)。近年来,研究发现ncRNAs广泛参与IBDV与宿主的相互作用过程,在IBDV感染中发挥重要的调控作用。本文阐述了宿主miRNAs、lncRNAs和circRNAs在IBDV感染中的作用,以期为IBDV的感染与致病机制研究提供理论参考和新思路。

肉鸡源传染性法氏囊病新型重排毒株的分离鉴定及遗传进化分析

[目的]明确云南某肉鸡场疑似传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染病例的病原类型及分子特征,以了解IBDV新型重排毒株在肉鸡中的流行情况、分子进化趋势,为制定有效的传染性法氏囊病(IBD)防控和疫苗选用策略提供参考依据。[方法]对疑似IBDV感染的病鸡法氏囊进行研磨处理后,采用巢式RT-PCR进行检测,后将IBDV阳性的法氏囊组织悬液接种于9日龄SPF鸡胚并进行病毒分离,对病毒的vVP2和VP1-b基因扩增并进行遗传变异分析。[结果]成功分离出一株新型IBDV重排毒株(命名为YN-YX221110),接种9日龄SPF鸡胚后,胚体整体呈现弥漫性出血,头、颈以及背部皮肤有出血点。基于vVP2基因序列,分离株YN-YX221110与新型变异株(nvIBDV)参考株的核苷酸相似性最高,为93.2%~97.9%,分离株YN-YX221110的vVP2基因222A特征性氨基酸位点与UK661、HK46等超强毒株(vvIBDV)参考株相同,249K、256V、279N、284A、294L、299S等位点与新型变异株(nvIBDV)参考株中的SHG19相同;在基于vVP2基因的遗传进化树中,分离株YN-YX221110与GX-QZ191002、SHG19等nvIBDV参考株聚为一支,属于A2d分支。基于VP1-b基因序列,分离株YN-YX221110与参考株中的经典毒株(cIBDV)类似株核苷酸相似性最高,为97.8%~98.4%,分离株YN-YX221110的vVP2基因特征性氨基酸位点240D、242D、287T、390L和393E与致弱毒株(attIBDV)参考株中的B87、Gt相同;在基于VP1-b基因序列的系统发育进化树中,分离株YN-YX221110与参考株Gt、B87和CEF94等cIBDV类似株中的attIBDV聚为一支,属于B1a分支。分离株YN-YX221110基因型为A2dB1a。[结论]成功分离得到肉鸡源IBDV分离株YN-YX221110,其A片段来源于nvIBDV,B片段来源于cIBDV类似株中的attIBDV,为新型IBDV重排毒株。

鸡传染性法氏囊病的分析诊断和防控

传染性法氏囊病是一种急性、高度接触性、发病率高的病毒性传染病,这种疾病不仅导致鸡的生产性能下降,还可引发免疫抑制和缺陷,加大了鸡的淘汰率,给养殖场(户)带来较大的经济损失,危害性极强。因此,对疾病进行鉴别与诊断,做好疫病的防控工作。1鸡传染性法氏囊病的分析1.1法氏囊病毒的基本特征法氏囊病毒是一种引起鸡法氏囊病变的病原体,因其具有强烈的传染性也被叫做传染性法氏囊病毒。

鸡传染性法氏囊病及防控要点

鸡传染性法氏囊病是由鸡传染性法氏囊病毒引起的常见病毒病,该病以地方流行性为主,具有较强的传染性、较快的传播速度和较高的致死率,严重危害鸡的健康生长及养鸡业的稳定发展。基于此,本文着重对鸡传染性法氏囊病的发病趋势及防控要点进行了探讨。

一例鸡传染性法氏囊病和大肠杆菌混合感染的诊治

鸡传染性法氏囊病是由鸡传染性法氏囊病毒引起的一种高度接触性传染病,可引起鸡的法氏囊受损,导致免疫抑制,容易继发感染其他疾病。大肠杆菌是鸡肠道中的一种常在细菌,在某些情况下如免疫抑制或应激等,会导致肠道菌群失调,促进大肠杆菌大量繁殖并引发感染。本文报告了一起鸡传染性法氏囊病毒与大肠杆菌混合感染的病例,经过诊断和治疗,病情得到有效控制。

鸡传染性法氏囊病的防控

传染性法氏囊病(IBD)主要由传染性法氏囊病毒引起,是一种急性且具有高度接触传染性的病毒性疾病,多发于雏鸡群体。传染性法氏囊病(IBD)具有病发病率高、传播快和造成免疫抑制和缺陷等特点。患病鸡感染法氏囊病毒后,体重增长缓慢,鸡只淘汰率大大提高。病情持续加重,病毒持续传播,将引起鸡只大面积死亡,危害性极强。通常3周龄以上的鸡属于易感染鸡群,感染后会有明显的临床症状,容易在鸡群中引起急性暴发。传染性法氏囊病(IBD)的诊断可以通过实验室的病毒分离鉴定、感染试验和琼脂扩散试验等方法进行确诊。对该病防控要注重消毒和饲养管理,依靠综合性的防控措施,严防混合感染和并发症的发生。通过良好的生物安全管理和注射疫苗可有效防控传染性法氏囊病的发生,减少和避免因鸡传染新法氏囊对我国养鸡业经济效益的危害。

鸡传染性法氏囊病的诊断与治疗研究

随着畜禽养殖行业的规模化发展,有关于传染性疾病的诊断方法、治疗方法愈发丰富。传染性法氏囊病是常见的传染性疾病。基于此,为提高鸡群养殖效果,避免此类疾病的大范围暴发,本文简单介绍鸡传染性法氏囊病的流行病学,深入研究该疾病的诊断方法和治疗方法,包括临床诊断、鉴别诊断、实验室诊断,西药治疗和中医治疗,以期促进养鸡行业的健康发展。

一例蛋鸡传染性贫血与法氏囊病混合感染的诊治报告

鸡传染性贫血病(CAV)是由鸡传染性贫血病毒引起的一种鸡免疫抑制病,病鸡表现为贫血、鸡肉髯、面部皮肤及可视黏膜颜色苍白,鸡胸、腿部肌肉出血。该病具有较强的免疫抑制作用,可导致疫苗免疫失败,患有传染性贫血的鸡群很容易混合感染法氏囊病,降低鸡群的生产性能。临夏县某蛋鸡养殖场,饲养罗曼褐蛋鸡1500羽,3周龄时先出现鸡传染性贫血病例,后又继发感染鸡法氏囊病。通过诊断分析,结合各种治疗与防控措施,有效控制了病情蔓延,病鸡恢复健康。现将诊治过程报告如下。

传染性法氏囊病毒新型变异株荧光定量RT-PCR检测方法的建立

传染性法氏囊病病毒新型变异株(Novel variant Infectious bursal disease virus,nVarIBDV)给我国养禽业防控法氏囊带来更大的挑战。目前缺乏快速、灵敏的针对nVarIBDV的检测方法。为解决这一问题,该试验根据已发表的nVarIBD的VP2基因序列,设计了一对引物和一条特异性Taq Man探针,建立了一种nVarIBD的Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法,该方法可通过特异性扩增nVarIBD VP2基因来确定样品是否为IBDV新型变异株。通过构建重组质粒pMD18-T-VP2对引物和探针进行灵敏性和重复性试验,以及特异性检测,最后使用该检测方法对临床样品进行验证。荧光定量RT-PCR结果显示灵敏性可达1.32×10^(1)copies/μL,高于常规RT-PCR的100倍。批内和批间重复试验变异系数(CV)均小于0.5%,结果表明该检测方法有良好的重复性与稳定性。该方法与常见禽病毒核酸无交叉反应,说明检测方法具有较好的特异性。综合本研究结果表明,该研究建立的nVarIBD荧光定量RT-PCR检测方法特异性强、灵敏性高、重复性好,可用于临床样品中IBDV新型变异株的监测。

鸡传染性法氏囊病的诊断与防制

鸡传染性法氏囊病是由传染性法氏囊病毒引起的一种主要危害雏鸡、青年鸡的急性高度接触性传染病。病鸡会出现嗜睡,羽毛逆立,腹泻,粪便呈白色水样,胸肌和腿肌出血,法氏囊肿胀、出血和坏死等典型症状。法氏囊是鸡体内的主要免疫器官,当其受到传染性法氏囊病毒侵害后,会造成机体免疫力下降,增加了对其他病原的易感性,降低鸡群的整体免疫力,甚至造成病鸡死亡。同时,本病也会使疫苗免疫应答降低,甚至造成疫苗免疫失败。