Zn诱导的菹草叶抗氧化酶活性的变化和超微结构损伤

本文以培养在不同浓度梯度Zn溶液中的菹草为材料 ,研究Zn对植物的影响。培养第 5天 ,测定叶内抗氧化酶系统活性等指标的变化 ,并用透射电镜观察对细胞超微结构的损伤。结果表明 :低浓度 (<2 0mg/L)在短期内 (5d)未对菹草产生影响 ,各生理指标呈上升趋势。当培养浓度为 5 0mg/L时SOD和CAT活性达到峰值 ,而其他指标则下降 :其中POD活性和叶绿素含量高于对照 ,而可溶性蛋白含量则比对照低。 1 0 0mg/L培养浓度各指标均明显降低。同时电镜观察发现过量Zn损伤了细胞的超微结构。当培养浓度大于 5 0mg/L时 ,叶绿体被膜断裂 ,叶绿体解体。线粒体脊突膨大 ,线粒体空泡化。细胞核核膜断裂 ,核仁散开。这说明过量Zn削弱了细胞抗氧化酶的活性 ,同时对细胞超微结构产生致死性损伤 ,从而导致细胞死亡。

金丹活性部位对MIRI大鼠心肌病理形态及超微结构损伤的影响

目的:探讨金丹活性部位对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌病理形态及超微结构损伤的影响。方法:采用金丹活性部位对心肌缺血再灌注损伤大鼠进行干预,于光镜、电镜下观察其对大鼠心肌病理形态及超微结构损伤的影响。结果:与模型组比较,水洗脱组、60%乙醇洗脱组大鼠心肌病理形态及超微结构损伤明显改善。结论:金丹活性部位可明显改善心肌病理形态及超微结构损伤,说明其具有较好的保护大鼠心肌的作用。

缺血预适应对再灌注性心肌超微结构损伤和细胞凋亡的保护作用

目的 :研究体外循环 (CPB)中缺血预适应 (IPC)对缺血再灌注心肌超微结构损伤的保护作用及其对细胞凋亡的影响。方法 :建立猫 CPB模型并随机分成 3组。对照组 (n=30 )仅作单纯并行 CPB转流 ;缺血再灌注组 (IR组 ,n=30 )于 CPB开始 4 5 m in后阻断升主动脉 (ACC) 6 0 m in,开放主动脉恢复再灌注 90 m in;IPC组 (n=30 )于 ACC前进行 3轮 IPC(ACC5 min后开放 1 0 m in) ,余同 IR组。应用透射电镜观察心肌超微结构的变化 ,计算心肌细胞凋亡率 ,并结合细胞化学方法观察心肌超微结构中过氧化氢 (H2 O2 )电子致密物沉积的产生及细胞内 Ca2 +分布情况。 结果 :IR组 ACC6 0 min心肌细胞超微结构损伤较重 ,尤其是线粒体及血管内皮细胞肿胀明显 ,再灌注期间进一步加重 ,至再灌注结束时 ,未见明显改善 ;IPC组心肌细胞超微结构损伤较 IR组明显减轻。至再灌注 90 min时 ,IR组和 IPC组均可发现一定数量的凋亡心肌细胞 ,心肌细胞凋亡率分别为(8.82 7± 0 .973) %和 (2 .2 4 3± 0 .2 4 6 ) % ,两者之间具有显著性差异 (P<0 .0 5 ) ;IR组在心脏恢复再灌注后 ,其心肌中血管内皮细胞管腔面可见较多的 H2 O2 电子致密物沉积 ,而且细胞内 Ca2 + 分布也明显增加 ;IPC组 H2 O2 电子致密物沉积和细胞内Ca2 +

针刺对缺血再灌心肌超微结构损伤的保护作用

家兔经戊巴比妥钠麻醉,开胸结扎冠脉左室支20min松结再灌5min后,缺血区心肌细胞超微结构呈现明显损伤:细胞水肿、线粒体嵴结构破坏基质中甚至出现无定形致密小体、肌原纤维排列紊乱乃至挛缩或断裂、细胞核染色质凝聚、细胞质糖元颗粒减少或消失等。心内膜下层细胞超微结构损伤程度较心外膜下层严重。缺血和再灌期于“内关”相应部位施加电针治疗的动物,其心肌细胞超微结构损伤明显减轻,表现为不出现细胞水肿或程度较轻、正常线粒体增多、肌原纤维挛缩或断裂减少,细胞核染色质解聚等。由于心外膜下层缺血区超微结构损伤较轻,电针的这种保护作用更为明显。

氟碳乳剂稀释血液对缺血心肌超微结构的保护作用

本实验观察了国产氟碳乳剂对兔缺血心肌超微结构损伤程度的影响。实验结果表明,阻断冠脉血流15 min时用氟碳乳剂稀释血液,可使缺血1h时心肌超微结构的损伤程度明显减轻。

TNF-α、NO在梗阻性黄疸兔肝细胞超微结构损害中作用的实验研究

目的 :探讨肿瘤坏死因子 (TNF-α)、一氧化氮 (NO)、内毒素 (LPS)在梗阻性黄疸 (OJ)肝细胞 (HC)超微结构损伤中的作用和相互关系及临床意义。方法 :3 2只兔随机分成四组。正常对照组 (NC组 ) 8只 ;OJ模型组2 4只 ,均做胆道结扎 (BDL)、切断复制 OJ模型 ,分别于术后 3、7、1 4d门静脉抽血测定 TNF-α、NO及血清生化指标。并对兔 HC超微结构电镜下动态观察。结果 :OJ组肝脏肿大、胆汁淤积、胆囊、胆总管近端扩张明显、充满胆汁。血清生化指标明显升高 ,以可溶性直接胆红素为主 ,证实为 OJ,与 NC组比较差异显著 (P <0 .0 1 )。血清TNF-α、NO值亦高于 NC组 ,BDL术后 7d达峰值 ,1 4d仍高于正常水平 (P <0 .0 1 )。且血清 TNF-α、NO与血清生化指标变化呈明显正相关 (r值分别为 0 .86、0 .89、 P <0 .0 1 ) ,与肝脏损伤程度和 HC超微结构损伤程度亦呈正相关。结论 :TNF-α、NO与 OJ病理过程密切相关 ,LPS诱导产生的 TNF-α、NO,是肝脏损伤 HC超微结构损伤和肝纤维化形成的重要因素。NO在此过程中似还呈现一种保护作用 。

13-甲基十四烷酸对氧反常诱导大鼠胚脑皮质神经元凋亡和形态学损伤的保护作用

目的探讨13-甲基十四烷酸(13-MTD)对氧反常诱导大鼠胚脑皮质神经元凋亡和形态学损伤的保护作用。方法原代培养大鼠胚脑皮质神经元,并以神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫荧光法鉴定。将神经细胞随机分为正常对照组、模型组和不同剂量13-MTD组,每组设6个复孔。氧糖剥夺3h/再复氧糖24h(OGD3h/R24h)方法制备神经元氧反常模型,于再复氧糖即刻分别给予13-MTD 5、10、20、40mg/L干预。倒置相差显微镜下观察神经细胞形态改变;磺酰罗丹明B(SRB)法测定神经细胞存活率;吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)染色法观察神经细胞凋亡;透射电子显微镜下观察神经元超微结构的改变。结果与正常组比较,模型组神经元呈现病理改变,神经细胞存活率显著下降(P<0.01),细胞凋亡显著增多(P<0.01),神经元超微结构损伤明显,可见核内染色质边集或凝聚成块状,胞质内细胞器明显减少甚至消失,线粒体肿胀、嵴断裂甚至消失等;与模型组比较,不同剂量的13-MTD可有效改善上述变化(P<0.05,P<0.01),使神经元形态及其超微结构损伤明显恢复,且存在剂量依赖关系,以13-MTD 20mg/L改善更显著(P<0.01)。结论 13-MTD对氧反常诱导的大鼠胚脑皮质神经元损伤具有明显保护作用,其可能通过改善神经细胞形态和线粒体超微结构损伤,减少神经元凋亡,提高细胞存活率。

小鼠感染猪圆环病毒2型的超微结构病变观察

为探讨猪圆环病毒2型(PCV2)对小鼠超微结构的病理损伤及其病毒在细胞内的复制,20只6周龄的昆明小鼠随机平均分成2组(即A组和B组),A组小鼠经腹腔注射PCV2细胞培养物0.1mL/只(含病毒1 000TCID50),B组以同样的方式和剂量注射无菌细胞培养液作为对照。于PCV2感染后14d,处死所有小鼠,取其组织做电镜观察和PCV2PCR检测。结果显示,在电镜下,所有PCV2感染鼠的超微结构病变基本一致,主要表现为淋巴器官、心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脑、肠等脏器实质细胞凋亡或坏死,细胞内线粒体水肿、内质网扩张,间质毛细血管淤血、炎症细胞浸润,并在脾脏、胸腺、淋巴结的淋巴细、巨噬细胞,以及肝细胞,肾足细胞,脑神经细胞的胞浆或胞核内发现病毒包涵体。同时通过PCR检测,所有PCV2感染鼠的组织均可检出PCV2DNA。B组(对照组)小鼠除在淋巴结可见极少数淋巴细胞凋亡外,其他组织均无任何超微结构病变;同时,所有组织也未检出PCV2DNA。由此说明PCV2可在昆明小鼠多脏器实质细胞内复制,并诱导细胞凋亡。

核黄素-紫外线A巩膜胶原交联照射时间与视网膜损伤的关系

目的研究不同照射时间下核黄素-紫外线A巩膜胶原交联术对兔视网膜的影响,寻找照射的安全时间。方法采用随机数表法将60只健康成年新西兰大白兔随机分为对照组(0 min组)和照射10、20、30及40 min组,每组12只,均取左眼进行核黄素-紫外线A巩膜胶原交联照射(370 nm,10 mW/cm 2)。采用光学显微镜和透射电子显微镜观察并比较各组视网膜病理组织学改变;采用生化反应试剂盒检测并比较各组视网膜组织中丙二醛(MDA)浓度及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;采用Western blot法检测并比较各组视网膜组织中SOD、CAT蛋白表达水平。结果光学显微镜下观察到对照组视网膜各层结构排列有序,照射10 min组与对照组相比无明显变化,随着照射时间的延长,视网膜结构损伤逐渐加重。透射电子显微镜下可见对照组光感受器细胞外节膜盘层状结构完整,光感受器细胞内节线粒体结构完整,线粒体嵴结构连续,照射10 min组与对照组相比无明显变化,随着照射时间的延长,视网膜结构损伤逐渐加重。各组视网膜组织中MDA浓度随着照射时间的延长逐渐升高,总体比较差异有统计学意义(F=65.25,P<0.05),其中照射20 min、30 min、40 min组MDA浓度分别为(11.31±1.84)、(14.94±1.04)和(18.25±1.42)nmol/mgprot,明显高于对照组的(1.13±0.02)nmol/mgprot,差异均有统计学意义(均P<0.05);照射20 min、30 min、40 min组MDA浓度依次升高,两两比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。随着照射时间的延长,视网膜组织中SOD、CAT和GSH-Px活性及SOD、CAT蛋白相对表达量均逐渐降低,总体比较差异均有统计学意义(F=44.09、34.18、35.60、115.75、78.86,均P<0.05),其中照射20、30、40 min组与对照组比较,照射20 min、30 min、40 min组两两比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论10 mW/cm 2核黄素-紫外线A巩膜胶原交联照射兔眼10 min是安全的,照射时间过长可引起视网膜损伤。

中国病理生理学会中专教育委员会第四届学术讨论会

中国病理生理学会中专教育委员会第四届学术讨论会于1992年4月20日～24日在上海举行。来自24个省、市、自治区和解放军的126名代表出席了大会。中国病理生理学会副理事长金惠铭教授代表总会致了贺词。会上金惠铭、朱世能教授分别作了专题学术报告,介绍了微循环障碍研究和肿瘤研究进展。经1991年衡阳审稿会议审定的189篇论文进行了大会交流,涉及教育理论、教材、考试、教学方法改革的论文111篇。介绍低氧暴露下小鼠微循环障碍,大鼠急性胰腺炎血清。

应用磁共振弥散张量预测痴呆症

小血管疾病是血管性认知障碍和痴呆最常见的病理基础。这被认为是由于白质(WM)束受损导致神经网络中断。由于弥散张量成像(DTI)已被证明是识别白质束超微结构损伤的敏感方法,因此本研究评估了DTI测量在预测痴呆症发作方面的有效性。本研究创建了优化的多模态MRI标记,用作脑小血管疾病所致血管认知障碍试验中的替代标记(OPTIMAL),以确定DTI测量是否能预测小血管疾病(SVD)引起的痴呆。纳入六组SVD严重程度不同的患者。所有患者均在基线期接受MRI检查,并进行了3年以上的随访。认知使用对SVD敏感的标准化测试进行评估。处理速度用Trail Making Test-B评估。对脑容量和WMH容量进行MRI处理,计算WMH与总脑容量(SVDp)的比值,使用线性回归检验DTI和认知之间的关系。研究发现平均弥散率(MD)中位数与所有队列的认知相关。在对临床标志物进行控制后,较高的MD中位数与较高的痴呆风险相关。三年内MD中位数的变化预测了五年内痴呆症的转变。结论:本研究发现白质改变在痴呆的发病机制中起核心作用。

镉对果蝇肠道上皮细胞损伤和调控中肠干细胞增殖、分化机制的研究

重金属元素镉具有较强的生物毒性,是威胁人类健康的重要环境污染物质。为探索镉的过量摄入对生物消化系统的潜在影响,以果蝇中肠系统为实验模型,以不同浓度的氯化镉作为处理因素,探讨其对肠道细胞的损伤作用和调控中肠干细胞增殖、分化的相应机制。通过透射电镜观察,发现镉对果蝇中肠上皮细胞超微结构具有损伤作用,并且损伤程度具有显著的浓度依赖性;免疫荧光结果证实,镉的过量摄入对中肠干细胞(intestinal stem cell,ISC)、成肠细胞(enteroblast,EB)和肠上皮细胞(enterocyte,EC)的数量和比例能够产生影响,且显著促进中肠干细胞的增殖;Real-time RT-PCR检测结果表明,肠道组织中表皮生长因子受体(epidermal growth factor recep-tor,EGFR)和JAK/STAT信号通路配体基因的转录水平显著提高,JAK/STAT信号通路同时被大幅度活化。结果显示:高浓度镉的摄入对果蝇中肠上皮细胞核膜、线粒体和微绒毛等超微结构造成损伤,该类损伤能够诱使果蝇肠道组织上调表达相关配体蛋白,从而激活干细胞的EGFR和JAK/STAT信号通路,从而促进ISC的增殖与分化能力,继而实现对肠道损伤组织进行及时的修复。然而,中肠干细胞增殖信号通路的持续激活以及干细胞的过度增殖同样具有诱发肠道肿瘤发生的潜在可能。

慢性镉暴露对小鼠大脑皮质的毒性损伤作用

为探究慢性镉暴露对小鼠大脑皮质的毒性损伤作用,选取雌性BALB/c小鼠用0(对照组)、5和25 mg/L不同浓度氯化镉自由饮水染毒16个月建立慢性镉中毒模型,试验结束后剖检采集小鼠完整脑组织,测定脑系数;光学显微镜和透射电子显微镜观察大脑皮质病理组织学和超微结构变化;比色法检测大脑皮质中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-P_(X))的活性和还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量。结果显示:与对照组相比,镉处理组脑系数均显著降低(P<0.05);镉处理组大脑皮质细胞核深染、固缩,呈三角形或不规则形,线粒体嵴断裂、溶解,部分呈空泡变性;镉处理组大脑皮质中T-SOD活力极显著下降(P<0.01),CAT活力显著下降(P<0.05),MDA、GSH含量极显著升高(P<0.01),5 mg/L氯化镉组GSH-PX活力显著升高(P<0.05),25 mg/L氯化镉组GSH-PX活力极显著升高(P<0.01)。提示:慢性镉暴露可影响小鼠脑发育,引起小鼠大脑皮质病理损伤、超微结构损伤和氧化损伤。

小剂量X射线致小鼠海马组织细胞损伤及ATM表达改变

目的研究小剂量电离辐射对小鼠海马组织细胞超微结构损伤、DNA损伤及毛细血管扩张性共济失调症突变基因(ataxia telangietisa mutant,ATM)蛋白表达变化。方法 32只ICR小鼠随机分为实验组和对照组,分别行X射线照射(0.4 Gy)和假照射(0 Gy)后于4、12、24、48 h进行取材。电镜观察海马组织细胞超微结构损伤;单细胞凝胶电泳检测DNA损伤;蛋白免疫印迹法检测海马组织中ATM蛋白的表达情况。结果电镜结果显示,X射线照射后,海马组织细胞的超微结构损伤随时间的延长而加重;单细胞凝胶电泳结果显示DNA损伤由4 h开始上升,12 h到达高峰,24 h开始有回落趋势,48 h持续下降;Western blot结果显示ATM蛋白表达随时间的延长而增加。结论小剂量电离辐射致小鼠海马细胞不同程度的超微结构损伤并呈现时间-效应关系;小鼠海马组织中DNA损伤和ATM蛋白表达有明显的时间依赖关系。