超抗原SEB诱导的免疫耐受与细胞因子无关

目的研究超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)诱导的耐受效应和耐受调节机制。方法收集SEB活化10天的细胞,充分洗涤后做为效应细胞,分别与刀豆蛋白(ConA)、脂多糖(LPS)和白介素-2(IL-2)共同培养,用MTT方法测定细胞的耐受性应答反应。正常淋巴细胞在与ConA、LPS、IL-2共同培养的同时添加效应细胞,用MTT方法测定效应细胞的抑制性应答反应功能。流式细胞技术解析耐受性效应细胞类型。结果效应细胞对ConA、LPS和IL-2的应答反应能力明显降低(P<0.01,n=3),但保持对ConA的应答反应能力。效应细胞抑制正常淋巴细胞与ConA、LPS和IL-2的应答反应(P<0.01,n=3),尤其抑制ConA和IL-2诱导的细胞增殖。SEB活化的效应细胞中CD8+NK1.1+、TcRVβ8+NK1.1+和CD4+NK1.1+NKT细胞以及TcRVβ8+T、CD8+T细胞数量明显增加(P<0.01和P<0.05,n=4)。结论超抗原SEB诱导的耐受性应答反应是效应细胞的直接作用,与细胞因子无关;这些效应细胞能抑制T淋巴细胞增殖,并保存识别ConA的受体功能。

超抗原SEB活化的NKT细胞亚群及耐受功能的研究

目的研究多肽类抗原-超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B(staphylococcal enterotoxin B,SEB)活化的NKT细胞亚群及耐受特征。方法小鼠脾细胞分别与SEB和ConA体外培养,MTT方法测定细胞增殖;特异性耐受特征的研究使用体外活化第3天的细胞,吸出上清后添加二次抗原ConA、LPS、IL-2,继续培养3 d,MTT方法测定细胞对二次抗原的应答反应能力。用流式细胞测定法解析SEB和ConA体外活化的淋巴细胞在第0、5、10和15天时的T和NKT淋巴细胞亚群。结果SEB和ConA均诱导了小鼠淋巴细胞在体外增殖;SEB活化的淋巴细胞对ConA、LPS和IL-2的二次应答反应能力消失,细胞增殖的OD570nm值由一次应答反应的0.433±0.07分别下降到0.19±0.01、0.14±0.02和0.15±0.04(P<0.01)。ConA活化的淋巴细胞的二次应答反应依然存在并依赖IL-2。SEB活化的淋巴细胞是CD4+NK1.1+和CD8+NK1.1+NKT细胞,而不是CD4-CD8-NKT细胞。ConA活化的淋巴细胞是CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞并包括了CD4-CD8-/CD3+NK1.1+NKT细胞。结论除了α-Calcer脂多糖类抗原能够活化NKT细胞,多肽类超抗原SEB也能活化NKT细胞并具有特异性免疫耐受功能。能够介导免疫耐受的NKT细胞亚群可能是SEB活化的CD4+、CD8+NKT细胞而不是CD4-CD8-/CD3+NK1.1+NKT细胞。

超抗原SEB诱导的免疫耐受参与免疫赦免部位的应答反应

目的:探讨超抗原葡萄球菌肠毒素B(SEB)诱导的耐受性是否参与免疫赦免部位的应答反应。方法:以LEW大鼠作为受体,F344大鼠作为供体,进行角膜移植。将受体鼠随机分成5组,即在手术前7 d及移植后7 d,以球旁途径分别注射30μg/kg、60μg/kg、90μg/kg和120μg/kg的SEB组和注射生理盐水的阴性对照组。阳性对照组分别为移植后注射糖皮质激素(GC)、FK506、环孢素A((CsA)和白介素-1受体拮抗剂(IL-1 ra)组。镜下观察移植后30 d内角膜的浑浊、水肿和新生血管,用抗排斥反应指数记录移植片存活天数。采用NK1.1-PE荧光抗体进行组织染色,观察移植后不同时间受体鼠角膜片的炎症细胞浸润和受体鼠眼局部NK细胞的变化。结果:注射120μg/kg SEB的大鼠移植片比生理盐水对照组的存活天数延长了22 d。与FK506、CsA、IL-1ra和GC组相比也明显延长。120μg SEB/kg受体鼠的移植片排斥反应指数为3.42±2.18,明显低于对照组6.58±3.15(P<0.01)。其中水肿指数和新生血管指数明显降低。组织染色结果显示,SEB注射后NK细胞数量增加。结论:注射SEB能降低大鼠角膜移植的排斥反应,提示SEB诱导的耐受性参与了免疫赦免部位的应答反应。

APO-1/Fas及其配体介导超抗原SEB诱导的淋巴细胞凋亡

为了探讨超抗原诱导的淋巴细胞凋亡机制．本实验采用超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B（SEB）处理人外周血单个核细胞，采用流式细胞术检测细胞DNA断裂的百分率；同时动态观察了细胞表面APO-1、FasL的表达及细胞内Bcl－2蛋白的表达。结果表明，SEB不但可引起人外周血淋巴细胞凋亡，而且可诱导淋巴细胞表达APO-1和FasL。细胞凋亡的百分率与细胞表面APO-1和FasL的表达呈正相关（r＝0．71，r＝0．98），与细胞内Bcl－2表达呈负相关（r＝－0．72）。由此可见，APO－1／Fas及其配体参与了超抗原SEB诱导的淋巴细胞凋亡。

超抗原SEB可以活化NKT细胞

NKT细胞是一群表达NK1．1＋TcRαβ＋抗原的淋巴细胞亚群，最初是在那些NK1．1＋的小鼠中发现，2000年被命名为第四类的淋巴细胞。小鼠的NKT细胞主要是CD4^＋或者CD4～CD8^-细胞。大量的NKT细胞存在于肝脏，大约占T淋巴细胞的30％，外周血、脾脏中很少，只占2％前后。NKT细胞的作用主要有两个方面，效应功能和调节功能；它可以抑制Th1细胞的过激，控制IL-2，IFN-γ的产生和后期的细胞增殖，可以调节Th2细胞的细胞因子产生，使T细胞分化朝Th2方向偏移；它也可以在Th1细胞抵抗感染和肿瘤时提供帮助以及可以阻止部分细胞的分化，控制自身免疫病的发生和发展。NKT细胞的活化主要依靠类脂多肽类抗原如半乳糖神经酰胺（alpha-galactosylceramide，简称α-Galcer）和类似于MHCI类抗原的CDId递呈抗原。目前还无法证明其它脂类或糖脂类抗原能否激活NKT细胞，并使其发挥功能。我们以往的研究发现葡萄球菌肠毒素B（SEB）作为耐受原不仅能诱导淋巴细胞的耐受，在异基因骨髓移植、皮肤移植和角膜移植中都显示出明显抗排斥效应。在外周淋巴细胞移植中，用SEB可诱导带有供体淋巴细胞表面分子特征的微嵌合体形成；

1日龄雏鸡接种超抗原SEB和MDV后脾与胸腺淋巴细胞IFN-γ的体外诱生

为研究超抗原 (SAg)在禽类诱导的免疫机理和进一步揭示MDV(马立克氏病病毒 )感染的免疫学规律 ,采用NO-释放法 ,设计用雏鸡骨髓巨噬细胞为靶细胞检测 1日龄雏鸡接种超抗原SEB和MDV后脾与胸腺淋巴细胞IFN -γ体外诱生的动态变化。结果发现 ,超抗原SEB(SAG -SEB)可提高脾与胸腺淋巴细胞IFN -γ体外诱生水平 ,其中 ,高剂量(1ng/只 )引起短时加强后下降 ,而低剂量 (0 .0 1ng)则出现缓升缓降现象 ;而MDV接种则抑制脾与胸腺淋巴细胞IFN-γ体外诱生 ;SAg -SEB能增强雏鸡细胞免疫 ,主要表现于接种初期 (1- 10dPI) ,而MDV却在接种后 1- 2 5d间降低细胞免疫 ;说明超抗原SEB和MDV虽然均可引起鸡T细胞增殖 ,但对鸡免疫细胞IFN -γ的体外诱生作用不同。

超抗原SEB对直肠腺癌TIL扩增的研究

目的观测超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)对直肠腺癌肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的激活扩增作用。方法以SEB和细胞因子IL-2分别刺激扩增人中分化直肠腺癌TIL,比较分析TIL细胞数的变化,IL-2和TNF-α分泌的变化。结果SEB对直肠腺癌TIL有较强大的刺激作用。无论在细胞数量的增加,还是在促进细胞因子的分泌方面,SEB均显示了其对TIL强大的刺激功效。和IL-2相比,SEB对直肠腺癌TIL的刺激更为迅速,早期SEB的刺激作用较IL-2强大,后期则较IL-2弱。结论SEB是一种良好的TIL激活剂。

重组超抗原SEB—scFv融合蛋白的体内抑瘤作用

以单克隆抗体（mAb）作为载体的宫颈癌靶向治疗目前取得了一定的进展，但是多次使用会产生人抗鼠抗体反应（HAMA），限制其临床应用，同时完整抗体分子量大、穿透能力差、血液清除率慢致使肿瘤／血比值低，为克服mAb的上述缺点，我们在克隆出抗宫颈癌单克隆抗体轻、重链可变区基因的基础上，利用重组聚合酶链反应反应（PCR）方法制备抗宫颈癌单链抗体（scFv），

免疫耐受对角膜移植片长期存活的价值——对本期两篇论著《细胞因子和树突状细胞参与超抗原SEB诱导高危角膜移植免疫抑制的研究》及《自然杀伤T细胞结膜下注射防治大鼠角膜移植免疫排斥反应的初步研究》的点评

穿透性角膜移植是治疗角膜盲的主要手段，尽管角膜是器官移植的免疫赦免部位，但同种异体免疫排斥反应仍是角膜移植片失败的主要原因。据统计，18％的常规角膜移植或75％的高危角膜移植患者会发生排斥反应。

淋巴细胞表面APO—1受体的表达与其凋亡敏感性的相关？…

采用ＦＡＣＳ及ＤＮＡ电泳等方法，检测了抗ＡＰＯ－１单抗对超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素Ｂ（ＳＥＢ）活化不同天数的人外周血淋巴细胞凋亡的影响，结果发现，ＳＥＢ可诱导淋巴细胞表达ＡＰＯ－１受体，并用随着ＡＰＯ－１受体表达量的影响，抗ＡＰＯ－１抗体诱导其凋亡的数目也随之增多，由此可见，ＡＰＯ－１受体是介导ＳＥＢ活化的淋巴细胞凋亡的主要途径。