超敏荧光定量PCR法核酸检测与乙肝两对半联用在乙肝防控中的临床应用效果比较

目的分析超敏荧光定量PCR法核酸检测与乙肝两对半联用在乙肝防控中的应用效果。方法选取2018年1月至2018年12月本院接收的160例乙肝患者血清样板,通过基于磁珠法自动化核酸提取的超敏荧光定量PCR法与化学发光法分别检测乙肝病毒脱氧核糖核酸及乙肝两对半。结果160例样本中,总计检测出血清类型12种,其中小三阳与大三阳分别占比为57.50%和20.00%。160例样本超敏荧光定量PCR总阳性率为61.88%(99/150)。小三阳和大三阳阳性率分别为66.30%和90.63%,HBV-DNA平均含量分别为(51.62±3.19)×105 IU/mL和(72.51±2.41)×105 IU/mL;在HBV-DNA及超敏荧光定量PCR阳性率方面,小三阳与大三阳比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论以磁珠法自动化核酸提取为基础的超敏荧光定量PCR法,可对病毒载量准确监测,检测下限最低为10 IU/mL,联合传统乙肝两对半,可取得显著乙肝临床诊断效果,为临床用药指导及治疗奠定基础。

超敏荧光定量PCR法核酸检测与乙肝两对半联用在乙肝防控中的临床应用

目的探究超敏荧光定量PCR法核酸检测与乙肝两对半联用在乙肝防控中的临床应用.方法以我院患者为例,本研究主要选取2018年1月~2018年8月在我院接受治疗检查的100例乙肝患者,给予其血清样本采集工作,并将化学发光法和超敏荧光定量PCR法分别进行乙肝两对半和乙肝病毒脱氧核糖核酸展开检测工作.结果给予100例患者乙肝两对半检测,其中,小三阳占58.00%,大三阳占20.00%,样本的超敏荧光定量PCR总阳性率达到60.00%.结论从超敏荧光定量PCR法进行入手,能够得出对病毒载量的测定,在对其进行检测时,其下限低到10 IU/ml,在将这种方法与传统检测方法进行相比较的情况下,联合用法能够实现临床的准确诊断,具有用药指导,同时还需要对疗效进行监测.

超敏荧光定量PCR法核酸检测与乙肝两对半联用在乙肝防控中的临床应用

目的探讨超敏荧光定量聚合酶链反应(PCR)法核酸检测与乙型肝炎(乙肝)两对半联用在乙肝防控中的临床应用。方法 155例乙肝患者分别采集血清样本,利用化学发光法和基于磁珠法自动化核酸提取的超敏荧光定量PCR法分别进行乙肝两对半和乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)检测。结果 155例样本中乙肝两对半共检出12种血清类型,其中小三阳占58.06%,大三阳占20.00%。155例样本超敏荧光定量PCR总阳性率为62.58%,检测下限低至10 IU/ml,其中小三阳阳性率为66.67%,HBVDNA平均含量(6.17±0.91)lg IU/ml;大三阳阳性率为90.32%,HBV-DNA平均含量(6.98±1.02)lg IU/ml。小三阳和大三阳组超敏荧光定量PCR阳性率及HBV-DNA平均含量比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论基于磁珠法自动化核酸提取的超敏荧光定量PCR法可准确测定病毒载量,检测下限低至10 IU/ml,与传统乙肝两对半联用有助于乙肝的临床诊断、用药指导及疗效监测。

荧光实时定量PCR法检测流感病毒核酸的质控结果分析

目的分析浅析荧光实时定量PCR法检测流感病毒核酸的质控结果。方法在2021年5月至2022年11月期间,120例流感病毒感染样本进行研究。对这些样本的流感病毒RNA进行了核酸抽提,并利用PCR实时荧光定量技术进行检测以评估其效果。结果运用该技术检测到乙型流感病毒44例,甲1型40例,以及甲3型36例。所有检测结果均符合分子生物学操作的质控标准,合格率达到100.0%。结论实时核酸PCR技术在临床流感病毒检测中被广泛应用。PCR实时荧光定量检测法在流感病毒核酸检测中的表现精确且迅速,适宜作为应对突发公共卫生事件的首选检测手段。

荧光定量PCR法与培养法检测解脲支原体结果比对分析

目的通过比较荧光定量PCR法(qPCR)和培养法在解脲支原体(UU)检测中的符合率,为临床解脲支原体检测方法的选择提供参考依据。方法收集近期就诊于该院112例患者的生殖道分泌物标本,分别采用qPCR法与培养法检测UU。结果在112例标本中,UU培养法阳性53例,阳性率为47.32%,qPCR法阳性61例,阳性率54.46%(χ2=1.143,P=0.285>0.05)。61例qPCR法阳性的UU浓度范围1.60×10^(3)-1.04×10^(7)copy/mL,其中10^(3)copy/mL 12例(19.7%),10^(4)copy/mL 15例(24.6%),10^(5)copy/mL 22例(36.1%),10^(6)copy/mL 9例(14.7%),10^(7)copy/mL 3例(4.9%)。培养法阴性而qPCR法阳性病例9例,qPCR法测定浓度范围10^(3)~10^(5)copy/mL。结论qPCR法检测UU的阳性率略高于培养法,两种方法不符合结果的UU测定浓度分布在10^(3)-10^(5)copy/mL之间。

荧光定量PCR探针熔解曲线法在结核分枝杆菌耐药基因检测中的应用研究

探讨在结核分枝杆菌耐药基因检测中,对其予以荧光定量PCR探针熔解曲线法,观察分析应用价值。方法 本研究的时长段在2022年6月到2023年6月,统共1000例结核患者接受治疗,所有病患都拓展了抗结核药物的测验,且每一位患者的标本均予以荧光定量PCR探针熔解曲线法检测,药物敏感性测定结果为黄金基准,考察判辨荧光定量PCR探针熔解曲线法对利福平医药品、异烟肼医药品、乙胺丁醇医药品、链霉素医药品的诊断效能。结果 针对1000例的标本中,经过液体药敏试验检测显示对利福平药物耐药例数250例,役使溶解曲线观察耐药性包含了240例患者;对异烟肼医药有耐药性的液体药敏试验500例,应用溶解曲线检测耐药性包含了470例;经过液体药敏试验检测显示对乙胺丁醇药物耐药例数170例,予以熔解曲线法显示耐药140例。经过液体药敏试验检测显示对乙胺丁醇药物耐药例数300例,役使溶解曲线观察耐药性包含了240例患者。熔解曲线法对利福平医药品、异烟肼医药品、乙胺丁醇医药品、链霉素医药品的灵敏度分别为84.00%、84.00%、47.06%、66.67%;特异度分别为96.00%、90.00%、84.34%、94.29%;准确度分别为93.00%、97.00%、91.00%、86.00%。结论 在结核分枝杆菌耐药基因检测中,对其予以荧光定量PCR探针熔解曲线法,可得到较高的应用价值,灵敏度、特异度、准确度较高,可筛查结核病患者对利福平、异烟肼、乙胺丁醇等药物的耐药性,为临床治疗疾病提供可靠的依据。

鸭乙型肝炎病毒核酸荧光定量PCR方法的建立及应用

目的:建立鸭乙型肝炎病毒核酸(DHBV DNA)荧光定量的方法。方法:根据DHBV DNA S基因区的序列设计扩增所需3条引物,通过偶联反应用AmpliSensor荧光信号标记半巢式引物,经过前期不对称扩增、半巢式扩增及在线检测建立DHBV DNA阳性标准品QPCR的标准曲线,并将70份鸭血清分别用荧光定量PCR方法和地高辛标记的DHBV DNA探针斑点杂交的方法检测,比较结果的相关性。结果:DHBV DNA阳性标准品经过30次循环后,扩增产物经2％琼脂糖凝胶电泳检测,可以看出有180bp、70bp两个片段,与设计的片段大小相符,扩增产物的浓度与标准品的起始浓度成正比,扩增指数的数值大小与该循环时已合成的扩增产物的量成正比,起始浓度的大小与要合成的一定扩增产物的量所需的循环次数成反比。用荧定量PCR方法和斑点杂交的方法检测血清中DHBV DNA的结果有良好的相关性(r=0.97,P<0.01,v=58)。结论:荧光定量PCR方法可作为检测DHBV DNA含量的一个重要手段。

国产磁珠法试剂在荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒核酸中的应用

目的:评价国产磁珠法试剂在荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒核酸的临床应用价值。方法:首先,用国产磁珠法试剂B与进口磁珠法试剂A(罗氏试剂)对78例标本进行乙型肝炎病毒核酸的平行测定,比较其相关性。然后,对8个梯度浓度的结果重复检测3次,评价其精密度。最后,用试剂B与煮沸裂解法试剂C对58例标本进行比较,评价其阳性检出率。结果:在相关性方面,试剂A与试剂B显著相关(r=0.987,P<0.05)。在精密度方面,3次重复检测结果之间差异无显著性(F=0.999,P>0.05)。在阳性检出率方面,试剂B阳性检出率(60.34%)高于试剂C(39.77%)。结论:国产磁珠法试剂与进口磁珠法试剂相关性强,精密度和阳性检出率高,且价格较低廉,适合临床推广使用。

荧光定量PCR检测HCV RNA两种核酸提取法的比较

本文探讨两种核酸提取方法对HCVRNA结果的影响。现报告如下。 1材料和方法 1.1标本来源采集2009年2月～2009年10月徐医附院肝炎门诊疑似丙肝感染患者血清标本92份,男56人,年龄（16～83）岁;女36人,年龄（16～75）岁。

两种HBV-DNA核酸提取法对荧光定量PCR结果的影响

目的比较免核酸提取法与煮沸裂解法对HBV—DNA提取后荧光定量PCR检测结果的影响。方法用两种前处理方法不同的试剂盒检测7．0×102～7．0×107IU／ml的HBV—DNA阳性标准品和84例临床小三阳患者血清，对结果进行重复性、相关性分析。并计算两种方法对低浓度HBV—DNA值的阳性检出率。结果阳性标准品HBV—DNA浓度大于103IU／ml样本的均值两种方法比较，相关性良好（线性相关，r=0．993），CV比较发现，免核酸提取比煮沸裂解的CV要小。临床小三阳患者84例HBV—DNA浓度在1酽～103IU／ml的标本，免核酸提取法阳性检出率为25％高于煮沸裂解法的11．9％（P=0．015）。结论免核酸提取法操作简单，结果稳定可靠，线性范围宽，有益于乙肝病毒感染窗口期的早期诊断。

荧光定量PCR法检测丙型肝炎病毒核酸的临床意义

丙型肝炎是一种主要经血液传播的疾病,HCV感染可导致肝脏慢性炎症、坏死和纤维化,部分患者甚至可发展为肝硬化及肝癌[1],对人类的健康和生命危害极大,已成为严重的社会和公共卫生问题。抗-HCV检测可反映HCV的感染或既往感染,而HCV-RNA定量检测是反映HCV复制的特征指标,是抗病毒治疗的依据。本文对277例抗-HCV阳性患者同时进行HCV-RNA定量检测,

实时荧光定量PCR检查在献血者乙型肝炎病毒核酸检测中的应用

目的探究献血者乙型肝炎病毒(HBV)核酸检测中,实时荧光定量PCR检查的应用价值。方法选取2022年10月至2023年9月宁德市中心血站10403份献血者标本,对其进行乙型肝炎病毒检测。ELISA检测用A、B两种不同试剂进行初检、复检,对检测阴性的血液标本进一步行核酸检测。结果经ELISA检测,A试剂初检乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阳性率为0.57%(59/10403);B试剂复检HBsAg阳性率为0.65%(68/10403)。对阴性血液标本进一步核酸检测,A试剂初检HBsAg阴性标本的阳性率为0.261%(27/10344);B试剂复检HBsAg阴性标本的阳性率为0.174%(18/10335)。结论献血者HBV检测使用核酸检测有助于提高血液筛查的准确性,保障用血安全。

结核杆菌检验中涂片抗酸染色法与荧光定量PCR法的价值对比

目的比较涂片抗酸染色法与荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法在检验结核杆菌中的价值,为肺结核诊断提供依据。方法选取2021年8月至2023年8月本中心就诊的60例疑似肺结核患者,采集患者痰液标本,分别采用荧光定量PCR法、涂片抗酸染色法对其进行检测,并将痰培养所得结果作为本研究的“金标准”,就两种检测方法的具体诊断效能(特异度、准确度与灵敏度、阳性预测值、阴性预测值)进行对比。结果在疑似肺结核患者60例当中,通过痰培养确诊肺结核患者38例,所占比重为63.33%;荧光定量PCR法诊断阳性36例,涂片抗酸染色法为34例。荧光定量PCR法检测的特异度(95.45%)、准确度(93.33%)、灵敏度(92.11%)、阳性预测值(97.22%)、阴性预测值(87.50%)均较涂片抗酸染色法(68.18%、70.00%、71.05%、79.41%、57.69%)高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用荧光定量PCR法对结核杆菌进行检测,其在诊断肺结核方面的效能,优于涂片抗酸染色法,更具适用性。

胶体硒法HIV快速检测与实时荧光定量PCR法检验的一致性研究

目的:探究胶体硒法人类免疫缺陷病毒(HIV)快速检测与实时荧光定量PCR法检验的一致性。方法:选取2020年1月—2021年1月到艾滋病自愿咨询检测(VCT)门诊就诊的987例患者为研究对象,均接受胶体硒法、实时荧光定量PCR法检验,以免疫印迹法为金标准,比较不同检测方式的诊断效能、不同检测方式之间检验的一致性,对比不同方式对“窗口期”弱阳性抗体检测情况及不同检测方式的一致性。结果:987例疑似HIV高感染风险患者中,经免疫印迹法检测发现,373例阳性,614例为阴性;胶体硒法与实时荧光定量PCR法比较无统计学差异(P>0.05)。胶体硒法诊断结果与免疫印迹法诊断结果之间具有一致性(Kappa值=0.539),等级为中度;实时荧光定量PCR法与免疫印迹法诊断结果之间具有一致性(Kappa值=0.872),等级为高度;经免疫印迹法检测45份“窗口期”弱阳性抗体实时荧光定量PCR法检测43例阳性,胶体硒法检测42例阳性,实时荧光定量PCR法的灵敏度、准确度均显著高于胶体硒法(P<0.05)。胶体硒法与实时荧光定量PCR法胶在“窗口期”弱阳性抗体诊断结果中的一致性较差(Kappa值=0.357)。结论:胶体硒法与实时荧光定量PCR法对HIV检测的效果具有一致性,实时荧光定量PCR法准确性略高;胶体硒法与实时荧光定量PCR法在“窗口期”弱阳性抗体诊断结果中的一致性较差,实时荧光定量PCR法在“窗口期”弱阳性抗体血清检测中具有较高的检测价值。

传统方法、荧光定量PCR法、LAMP法检测痰液标本中肺炎链球菌的价值

目的:分析传统方法、荧光定量聚合酶链反应(PCR)法、环介导恒温扩增技术(LAMP)法检测痰液标本中肺炎链球菌的价值。方法:选取2022年1月—2023年7月医院收治的100例肺炎患者,均按相同方法严格采集患者的痰液标本后,采用痰培养法、荧光定量PCR法、LAMP法检测肺炎链球菌,分析不同检测方法的检测价值。结果:100例肺炎患者痰液标本经痰细菌培养法、荧光定量PCR法、LAPM法检测结果比较,差异无统计学意义(P>0.05),与痰细菌培养法相比,荧光定量PCR法、LAPM法对肺炎链球菌检测一致性高(Kappa=0.826、0.830,P<0.05)。以痰细菌培养法作为金标准,荧光定量PCR法、LAPM法对肺炎链球菌检测价值比较,无统计学差异(P>0.05)。结论:传统方法、荧光定量PCR法、LAMP法检测痰液标本中肺炎链球菌均有较高价值。

基于锁核酸及等位位点特异性扩增技术的KRAS基因突变检测荧光定量PCR方法研究

基于等位位点特异性扩增的原理,设计锁核酸修饰KRAS基因突变特异性扩增引物,结合封阻探针技术,建立检测KRAS基因突变的荧光定量PCR方法。结果发现,锁核酸修饰的引物及探针可显著提高等位位点特异性扩增技术用于复杂样本中的微量基因突变检测的敏感度,该技术检测KRAS基因突变的敏感性可达0.01%~0.1%。进一步用建立的荧光定量PCR方法检测52例结直肠癌患者血浆标本,并用DNA测序法作为对照,同时用健康人血浆标本建立阴性检测结果判读标准,以初步评价该方法应用于循环DNA中KRAS基因突变检测的可行性。结果发现结直肠癌患者KRAS基因突变主要是G12C、G12A和G12R,而且q PCR法的阳性检出率为46.15%,高于DNA测序法(13.46%),阴性结果与DNA测序法的符合率为100%。此外,结直肠癌患者外周血KRAS基因的突变检出率与文献报道组织标本中的突变检出率及常见突变类型基本相符。上述结果说明该方法检测循环肿瘤DNA(circulating tumor DNA,ct DNA)具有较高的可靠性,可以用于肿瘤患者循环血液中KRAS基因突变的检测。

乙肝肝炎病毒检测中荧光定量PCR法与时间分辨免疫荧光的对比分析

探析荧光定量PCR法与时间分辨免疫荧光在乙肝肝炎病毒检测中的应用效果。方法 选用96例疑似乙肝患者,均进行荧光定量PCR法与时间分辨免疫荧光病毒检测,以细菌培养作为金标准,比较不同检测手段的阳性检出率、检验结果及检测效能。结果 荧光定量PCR法的检测符合率、灵敏度,高于时间分辨免疫荧光法,而特异度低于时间分辨免疫荧光法。结论 荧光定量PCR法和时间分辨免疫荧光两种方法各有优缺点,适用于不同的检测环境和需求。在实际应用中,需要根据检测要求和实际情况进行选择,确保有效性和准确性。

实时荧光定量PCR模板核酸提取方法的比较

对病料核酸提取前处理方法进行优化,选择酚/氯仿法、试剂盒提取法和DNA/RNA同提取法,比较提取效果,为实验室核酸提取提供参考。配制模拟样品,通过实时荧光定量PCR比较3种方法提取效果。结果表明,提取纯度为试剂盒提取法>酚/氯仿法>DNA/RNA同提取法。提取效率为酚/氯仿法>DNA/RNA同提取法>试剂盒提取法。表明各提取方法效果差异显著(P<0.01),为实验室核酸提取提供了参考。

荧光定量PCR检测HCV核酸提取法临床价值分析

目的使用RQ-PCR比较氯仿-异丙醇法和核酸分离柱法提取HCVRNA的临床价值。方法分别用两种核酸提取法提取相同患者的HCVRNA后,采用RQ-PCR技术检测HCVRNA含量,对两种方法的提取效率和重复性进行对比。结果两种方法均能较好地提取RNA,且提取效率相近(P>0.05),但是核酸分离柱法在重复性上更加优于氯仿-异丙醇法。结论两种方法均可被临床采纳,但是核酸分离柱法重复性更高,且毒性低,值得推广。

免核酸提取法与煮沸裂解法对HBV-DNA提取后荧光定量PCR检测结果的影响比较

目的:探究在检测乙型肝炎时,比较免核酸提取法和煮沸裂解法对乙型肝炎病毒DNA提取及使用荧光定量PCR检测结果的影响。方法:选取2015年6月至2017年3月在乙肝防治示范区医院就诊的156例慢性乙型肝炎患者,随机分为对照组(煮沸裂解法)和观察组(免核酸提取法),检测两组的检出率,并分析重复性与相关性。结果:通过对比,观察组的检出率(89.74%,70/78)与对照组(71.79%,56/78)相较,显著升高,差异明显(P<0.05);比较两组的相关性,相关性良好(线性相关,r=0.992);比较两组的重复性,观察组的重复性更好。结论:针对乙型肝炎病毒核酸的提取,免核酸提取法的检出率较高,准确性较高,重复性好,结果稳定,对乙型肝炎病毒的诊断和治疗有很高的临床价值。