神经细胞老化过程中细胞内脂质过氧化反应程度和超氧化歧化酶活性的动态变化

目的:观察体外培养的小鼠神经母细胞瘤细胞A2无血清培养条件下分化成神经细胞过程中,细胞内脂质过氧化的主要产物-丙二醛和自由基清除剂超氧化物歧化酶的变化,探讨脂质过氧化反应程度和抗氧化能力与细胞老化的相关性。方法:实验于2004-04/2005-02在上海第二医科大学附属仁济医院神经内科神经生物学实验室进行。①建立神经细胞老化实验模型:传代培养的小鼠神经母细胞瘤细胞A2中加入无血清培养液后,在37℃、含体积分数为0.05的CO2的空气中培养,24h后换培养液,以后每隔3d更换培养液;按不同的培养天数分为培养1,7和14d组,各组在培养至相应的天数后终止培养。②评估神经细胞变化的指标检测:采用显微荧光分光光度计测定细胞老化指标脂褐素水平(相对荧光值)反映细胞老化程度;以比色法测定细胞内丙二醛浓度评估细胞脂质过氧化程度,亚硝酸盐比色法得出超氧化物歧化酶活性反映细胞的抗氧化能力。结果:①细胞内脂褐素相对荧光值:培养1,7和14d组分别是(11.55±0.9)%,(22.41±1.99)%和(29.51±4.57)%,组间比较差异显著(F=478.04,P<0.01)。②丙二醛浓度:培养1,7和14d组分别是(0.90±0.20),(1.91±0.19)和(2.98±0.20)μmol/L;组间比较差异显著(F=148.31,P<0.01)。③超氧化物歧化酶活性:培养1,7和14d组分别是(685.30±107.85),(372.07±74.35)和(175.04±29.67)μkat/L:组间比较差异显著(F=66.10,P<0.01)。结论:①随着无血清培养天数的增加,小鼠神经母细胞瘤细胞A2细胞内脂褐素逐渐增多,细胞在不断衰老。②细胞内丙二醛浓度随细胞老化而不断增加,而超氧化物歧化酶活性却随着细胞老化而下降。说明神经细胞的老化与细胞内脂质过氧化反应呈正相关,与细胞的抗氧化能力呈负相关。③体外神经细胞老化实验研究模型是科学和客观的,具有很强的应用价值。

牙髓炎组织超氧化阴离子自由基的测定分析

近年来,已知在机体中,O2?及其派生的活性氧类与炎症有关。活性氧类对机体有机物的合成、分解,对蛋白质、酶的变化等都具有有害作用。但是,到目前为止,在人牙髓炎的病理过程中是否涉及自由基和活性氧的作用,国内、外尚未见文献报道。

传统聚丙烯和聚酯补片修补腹股沟疝对患者疼痛及血浆超氧化物歧化酶、丙二醛水平影响的比较

背景:聚酯及聚丙烯补片是腹股沟疝修补常用的补片材料,两种材料有各自的特点。目的:观察不同材质补片修复后男性腹股沟疝患者血浆超氧化物歧化酶、丙二醛水平以及疼痛变化,以期为补片选择提供一定的参考。方法:纳入120例男性腹股沟疝患者,分3组治疗(n=40),对照组进行传统的疝修复手术;聚丙烯补片组及聚酯补片组进行无张力疝修补手术,分别植入聚丙烯补片与聚酯补片。记录手术时间、补片固定时间、住院时间、拔出尿管时间、下床活动时间;修复前及修复后12,24,48,72 h,采用目测类比评分评估患者疼痛情况;修复前及修复后1,2,7 d,检测患者血浆超氧化物歧化酶及丙二醛水平。结果与结论:(1)聚酯补片组、聚丙烯补片组手术时间短于对照组(P<0.05);聚酯补片组、聚丙烯补片组住院时间、下床活动时间短于对照组(P<0.05);3组间拔出尿管时间比较差异无显著性意义;两补片组补片固定时间比较差异无显著性意义;(2)修复后12,24,48,72 h,3组目测类比评分均较修复前显著降低(P<0.05),3组间比较差异无显著性意义;(3)术后1,2,7 d,聚酯补片组超氧化物歧化酶水平低于聚丙烯补片组(P<0.05);(4)术后1,2,7 d,聚酯补片组、聚丙烯补片组丙二醛水平高于对照组(P<0.05),聚酯补片组丙二醛水平高于聚丙烯补片组(P<0.05)。(5)结果说明,传统疝修复与无张力疝修复均可明显缓解男性腹股沟疝患者的疼痛,补片植入能够影响腹股沟疝患者血浆超氧化歧化酶、丙二醛水平,但聚丙烯补片的影响较小。

7个关节超声评分和超氧化物歧化酶在类风湿关节炎疾病活动度评估中的应用

背景:类风湿关节炎是一种慢性、累及全身多个关节的自身免疫性疾病。目前已发现类风湿关节炎患者体内氧化应激反应异常,提示氧化应激参与类风湿关节炎的疾病进程。在对类风湿关节炎患者的治疗中,超声作为常见的影像学工具,在评价疗效上受到重视。目的:探讨7个关节超声评分和超氧化物歧化酶在类风湿关节炎疾病活动度评价中的应用价值。方法:选取2016年4月至2017年4月期间在桂林医学院附属医院风湿免疫科就诊(门诊及住院)的类风湿关节炎患者163例,根据28个关节疾病活动指数(DAS28)分为稳定期(n=20)、轻度(n=30)、中(n=70)、重度活动期(n=43)。另选同期健康体检者50例。检测所有受试者血清超氧化物歧化酶水平。以高频超声观察类风湿关节炎患者优势侧肢体7个关节,进行US7评分。应用US7评分及超氧化物歧化酶对类风湿关节炎疾病活动度进行评估。结果与结论:轻、中、重度活动期的类风湿关节炎患者血清超氧化物歧化酶水平均低于健康体检者和稳定期类风湿关节炎患者。US7评分中,重度活动期类风湿关节炎患者的滑膜炎灰阶超声评分和能量多普勒评分、腱鞘炎和肌腱炎灰阶超声评分高于稳定期;骨侵蚀在各个活动度类风湿关节炎患者之间无明显差异。超氧化物歧化酶水平与滑膜炎灰阶超声评分、滑膜炎能量多普勒评分、DAS28和类风湿因子负相关;DAS28与滑膜炎灰阶超声评分、滑膜炎能量多普勒评分、腱鞘炎及肌腱炎灰阶超声评分和腱鞘炎及肌腱炎能量多普勒评分正相关。DAS28、超氧化物歧化酶与骨侵蚀无明显相关性。提示超氧化物歧化酶与US7评分中除骨侵蚀以外的指标和DAS28密切相关,超氧化物歧化酶和US7评分可用于评估类风湿关节炎疾病活动度。

黄粉虫中提取纯化超氧化歧化酶的工艺研究

本研究以黄粉虫粉为原料,经盐析沉淀,DEAE-Sepharose FF阴离子交换柱层析和Sephadex G200凝胶过滤层析等纯化步骤,获得了其中的一种超氧化物歧化酶(SOD)。酶的纯化倍数为78.3倍。SDS-PAGE电泳显示为均一的蛋白谱带。经鉴定该酶为Cu.Zn-SOD。本研究为从黄粉虫中提取SOD提供了一种较好的工艺。

牛血清白蛋白对超氧化物歧化酶的化学修饰

目的 :通过化学修饰提高超氧化物歧化酶 (SOD)的稳定性 ,考察金属离子在不同浓度下对SOD活性的影响。方法 :用戊二醛作为交联剂 ,用牛血清白蛋白 (BSA)将牛红细胞超氧化物歧化酶进行化学修饰 ,得到SOD的修饰酶。对比研究三种SOD∶修饰酶 ,混合酶及天然酶的理化性质。结果 :修饰酶等电点降低 ,对温度、pH的稳定性较天然酶有很大提高 ,对胰蛋白酶和胃蛋白酶也表现出很强的耐水解性。二价离子Mg2 + 、Mn2 + 对三种SOD活力均有不同程度的抑制作用 ,Ca2 + 、Zn2 + 、Cu2 + 对修饰酶活力有激活作用 ,一价离子K+ 对三种OSD活力均无明显影响。结论 :修饰酶较天然酶的稳定性有很大的提高 ,加入Ca2 + 、Zn2 + 、Cu2

部分正常菌群分离菌株的超氧化歧化酶活性的测定

为了进一步研究部分正常菌群的生理和病理机制,我们测定了这些菌株的SOD活性和脂质过氧化物(LPO)变化,发现皮肤常住菌的分离株的混合培养时,SOD活性增加,说明它们具有协同作用。此外,对其它菌株SOD活性测定结果可知,类杆菌和双歧杆菌的SOD活性最低,其它菌株也有一定的SOD活性,如乳杆菌的SOD活性为47.47～98.98μg/ml,大肠杆菌的SOD活性为127.12μg/ml肠球菌的SOD活性为172.5μg/ml。

超氧化离子水的体外杀菌试验

目的 研究超氧化离子水对细菌、病毒的杀灭效果。方法 通过定量杀菌试验、乙型肝炎表面抗原破坏试验、金属腐蚀性试验进行比较杀菌性能。结果 在无有机物存在的条件下 1 5s可杀灭细菌繁殖体 ,作用 3 0s可破坏乙型肝炎表面抗原 ,作用1 0s可杀灭枯草杆菌的芽孢 ,对金属腐蚀性小。结论 超氧化离子水对微生物有较强杀灭作用 ,可作为医院消毒使用。

高温锻炼对粒用苋幼苗叶片中可溶性蛋白、超氧化物歧化酶及膜耐热性的影响

探讨了粒用苋幼苗在高温锻炼过程中叶片可溶性蛋白、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）及其同功酶的变化规律，以及与叶片细胞膜耐热性的关系。发现叶片膜蛋白在高温下的高稳定性可能是粒用苋耐热的原因之一；ＳＯＤ在热锻炼过程中对维持膜蛋白的稳定，提高膜的耐热性起了一定的保护作用。

复发性口疮患者超氧化物歧化酶的临床研究

作者对74名复发性口疮(RAU)患者和100名健康人作血液超氧化物歧化酶(SOD)活性测定,分别为779.6±198.8和418.3±205.6(P<0.01)。对30名患者在间隙期进行复查,发现SOD虽有回升,但仍低于正常人。对40名口疮患者使用SOD药膜及安慰膜,通过自身交叉试验观察疗效,结果:SOD药膜的有效率为90％,明显优于安慰剂。其作用机理可能为有效地清除了病损区大量的超氧自由基,从而加速了组织的愈合。

动物肝脏中超氧化物歧化酶活性的测定

本文采用微量连苯三酚自氧化法测定动物肝脏中超氧化歧化酶活性,方法操作简单,精密度好,灵敏度高,可广泛应用于动物肝脏中超氧化歧化酶活性的测定。

越冬期间无花果枝条电解质渗出率与超氧化物歧化酶活性的关系

超氧化物歧化酶(SOD)是生物体内一个重要的活性氧自由基清除剂。植物在低温下的SOD活性变化已逐渐引起人们的重视。低温下黄瓜细胞中SOD活性下降,并且表现为抗寒性差的品种下降剧烈,而抗寒性强的品种则慢。至于落叶果树在低温下SOD活性变化等尚未见报道。

牛血超氧化物歧化酶(bovine superoxide dismutase)生产工艺研究

将红细胞连续分离、热变性以及超滤技术应用在牛血 SOD生产制备中 ,使 SOD生产成本大幅降低 ,实现牛血 SOD生产工业化 .实验表明 ,冷冻血球和新鲜血球在酶的收率、纯度以及比活等方面无明显差别 ;热变性、超滤、丙酮沉淀等各工艺步骤酶的活性以及收率基本稳定 ;通过重组 SOD技术使失去铜锌离子失活的酶蛋白恢复酶的催化活性 .

益气化瘀补肾法对颈椎病动物超氧化歧化酶活力的影响

目的 :观察中医益气化瘀补肾法对颈椎病模型动物相关组织成分超氧化歧化酶 (SOD)的影响。方法 :用健康成年新西兰大白兔 42只 ,随机分为益气化瘀补肾组 ,益气化瘀组 ,补肾组 ,消炎痛组 ,模型对照组 ,正常对照组 7组 ,按静力平衡失调造模方法造成颈椎病模型 ,按组给药 ,到期后分别取动物血清、颈椎间盘组织血清、颈椎间盘组匀浆用黄嘌呤氧化酶法测定其中的SOD的变化。结果 :益气化瘀补肾法能明显提高颈椎病动物血清、颈椎间盘组织匀浆SOD活力 ,与模型组相比有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :中医益气化瘀补肾法有提高颈椎病模型动物血清、颈椎间盘组织匀浆SOD活力的作用。

视网膜下液超氧化物歧化酶活性测定

对24例孔源性视网膜脱离病人的视网膜下液铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Za SOD)和锰超氧化物歧化酶(Mn SOD)活性进行了初步测定。结果表明:总SOD 活性26±9(Nu/ml),Cu/Zn SOD 活性22±8(Nu/ml),Mn SOD 2±1(Nu/ml).与自身血清比较,SRF 中Mn SOD 活性占总SOD 活性的百分比明显降低。

维生素E和硒对糖尿病肾病及高血压肾损害时丙二醛及超氧化歧化酶的作用观察

目的 研究维生素E、硒作为氧自由基清除剂对氧自由基脂质氧化物丙二醛 (MDA)和抗氧化防御系统的超氧化歧化酶 (SOD)的影响。方法 测定糖尿病肾病患者 2 7例、高血压肾损害患者 30例及糖尿病合并高血压伴肾损害患者 2 5例 ,测定维生素E和硒治疗前后的血清MDA、SOD的活力浓度。结果 3组患者治疗前MDA和SOD水平均高于正常值 ;治疗 3个月后MDA值均明显降低 ,与治疗前相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;SOD值均略有降低 ,与治疗前相比 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 维生素E和硒治疗后血清MDA水平降低 ,表明氧自由基清除剂能有效清除氧自由基 ,改善细胞代谢及功能。由于所选病例均为早期肾损害者 ,治疗前血清SOD出现代偿性增高 。

冠心病患者选择素P、L、E、一氧化氮及超氧化歧化酶水平变化及其相关性

目的 观察冠心病患者选择素 P、L、E(SP、SL、SE) ,一氧化氮 (NO)及超氧化歧化酶 (SOD)的变化及 SP、SL、SE与 NO、SOD之间的关系。方法 70例冠心病患者 (男 5 5例 ,女 15例 )分为四个亚组 :非心绞痛组 30例 ,陈旧性心肌梗死组 10例 ,心绞痛组 2 0例 ,缺血性心肌病组 10例。对照组 2 0例 ,比较两组选择素 P、L、E及 NO、SOD水平 ,并作相关性分析。结果 缺血性心肌病组、心绞痛组、陈旧性心肌梗死组、非心绞痛组 SP、SL、SE、NO、SOD均显著高于对照组 (P<0 .0 5～ P<0 .0 1) ;缺血性心肌病组、心绞痛组 SP、SL、SE及 NO、SOD显著高于非心绞痛组(P<0 .0 1) ;陈旧性心肌梗死组 SE、NO及 SOD明显高于非心绞痛组 (P<0 .0 5～ P<0 .0 1) ;与心绞痛组比较 ,缺血性心肌病组 SP、SL、SE、NO明显升高 (P<0 .0 1) ,SOD则无明显差异 (P>0 .0 5 ) ,与陈旧性心肌梗死组比较 ,缺血性心肌病组 SP、SL、SE、NO、SOD均有显著升高 (P<0 .0 1)。SP、SL、SE分别与 NO、SOD正相关 (r=0 .6 0、0 .6 2、0 .5 9P<0 .0 1;r=0 .5 4、0 .5 8、0 .5 1,P<0 .0 1)。

桑叶缺铁性失绿症与超氧化物歧化酶活性及膜脂过氧化的关系

研究了生长在石灰性土壤上的桑树春季新梢不同叶位叶的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POX)、过氧化氢酶(CAT)的活性及膜脂过氧化产物丙二醛(MDA)的含量和电导率的变化。发现:(1)失绿叶的膜脂过氧化产物MDA的含量明显高于正常叶,含量增加的百分率上位叶大于中位叶和下位叶。(2)细胞膜透性(电导率表示)与膜脂过氧化水平的增加及变化趋势相平行。(3)失绿叶的SOD、POX及CAT的活性有不同程度的下降,SOD活性下降较小,而POX、CAT的活性下降幅度较大。(4)膜脂过氧化水平、膜透性的增加和SOD、POX、CAT活性的降低与叶绿素含量的下降变化相一致。说明在桑树缺铁性失绿过程中,可能存在着活性氧毒害而损伤细胞膜的结构,破坏生理代谢的协调性,加速衰老。

脑梗塞与红细胞胆固醇、血液超氧化物歧化酶、过氧化脂质水平关系探讨

检测１０９例脑梗塞患者和１００例健康对照者红细胞胆固醇（Ｅ－Ｃｈ）含量、血浆和红细胞超氧化物歧化酶（Ｐ－ＳＯＤ、Ｅ－ＳＯＤ）活性及血浆和红细胞过氧化脂质（Ｐ－ＬＰＯ、Ｅ－ＬＰＯ）含量的结果表明，患者组Ｅ－Ｃｈ、ＰＬＰＯ、Ｅ－ＬＰＯ平均含量皆显著高于对照组（Ｐ＜０．０５～０．００１），Ｐ－ＳＯＤ、Ｅ－ＳＯＤ平均活性皆显著低于对照组（Ｐ＜０．００１）；患者病情随Ｅ－Ｃｈ含量升高而加重，呈直线相关；患者Ｅ－Ｃｈ含量随Ｐ－ＳＯＤ、Ｅ－ＳＯＤ活性下降而升高，随Ｐ－ＬＰＯ、Ｅ－ＬＰＯ含量上升而升高，均呈直线相关。提示脑梗塞患者红细胞膜内脂质代谢异常与体内氧自由基反应和脂质过氧化反应病理性加剧有一定程度的相关性。