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剑麻超氧化物歧化酶基因鉴定及低温胁迫表达分析
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作者 陈莉莎 李玉波 +3 位作者 胡晓丽 杨欣丽 易克贤 黄兴 《中国热带农业》 2024年第1期23-27,22,共6页
剑麻是热带地区重要的纤维作物,生产中易受到寒害威胁而造成减产。超氧化物歧化酶(SOD)是一种重要的保护酶,在植物应答低温等逆境条件胁迫过程中起重要作用。前人研究已初步明确超氧化物歧化酶在剑麻低温处理后起重要作用,但其在剑麻中... 剑麻是热带地区重要的纤维作物,生产中易受到寒害威胁而造成减产。超氧化物歧化酶(SOD)是一种重要的保护酶,在植物应答低温等逆境条件胁迫过程中起重要作用。前人研究已初步明确超氧化物歧化酶在剑麻低温处理后起重要作用,但其在剑麻中的基因序列及分子调控机制尚未明确。在已发表的剑麻转录组数据库中鉴定出5个SOD基因,遗传进化分析显示其在不同植物物种中进化较保守。实时定量PCR结果显示低温胁迫后5个基因表达模式均呈先上升后下降趋势,且均与SOD活性变化显著正相关(P<0.05)。其中2个CSD基因和1个FSD基因与SOD活性极显著正相关(P<0.01),表明这3个基因在应答低温胁迫过程中起重要作用。研究鉴定了剑麻SOD基因并初步明确其应答低温胁迫表达模式,为深入开展剑麻抗寒机制研究提供了重要基础。 展开更多
关键词 剑麻 超氧化物歧化酶基因 低温胁迫 基因表达
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超氧化物歧化酶的生理功能及其在动物生产中的应用前景 被引量:1
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作者 江慧琼 刘雅婷 陈清华 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期945-954,共10页
氧化应激会导致机体内的氧化与抗氧化的失衡,从而产生过多的活性氧(reactive oxygen species,ROS)基团造成细胞和组织的损伤、机体炎症等疾病,影响机体的生长发育。超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)是存在于生物体内的一种抗... 氧化应激会导致机体内的氧化与抗氧化的失衡,从而产生过多的活性氧(reactive oxygen species,ROS)基团造成细胞和组织的损伤、机体炎症等疾病,影响机体的生长发育。超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)是存在于生物体内的一种抗氧化金属酶,它能够通过歧化反应催化超氧阴离子自由基(superoxide anionradical,O2-),从而清除动物机体内过多的ROS。研究发现,SOD不仅在抗氧化功能上具有专一性、高效性,能够减缓机体衰老,并且还能在一定程度上提高动物肠道健康、生产性能和调节机体免疫功能。在集约化畜禽养殖、生产机器的大规模使用情况下,辐射对于动物所造成的损伤需要引起关注,有效地利用SOD的抗辐射功能以缓解或改善辐射对于机体的影响,值得进一步探索。目前,针对缓解机体氧化应激的添加剂主要有维生素、微量元素、植物提取物等,而利用SOD来缓解动物氧化应激、提高生产性能的研究相对较少,主要源于天然SOD提取成本高、分子质量大、易失活等。但随着人工合成SOD的出现,降低了制备SOD的成本,且SOD具备高活性、小分子易吸收的特点,这使得SOD在畜禽生产中的应用逐渐增多,未来可以挖掘更多SOD的应用潜力,将SOD更广泛地应用于动物生产中。笔者对SOD抗氧化、抗衰老、抗炎症、抗辐射、调节机体免疫等生理功能进行了总结,以期为SOD在动物生产中的应用提供更多理论依据。 展开更多
关键词 超氧化物歧化酶(sod) 生理功能 动物生产 应用
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小麦超氧化物歧化酶基因家族鉴定及盐胁迫下响应锌钾的表达分析 被引量:3
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作者 杨林林 韩敏琦 +1 位作者 高嘉 杨胜敏 《山东农业科学》 北大核心 2023年第8期11-20,共10页
超氧化物歧化酶(SOD)是抗氧化系统的关键酶,在保护植物免受各种生物和非生物胁迫方面发挥着至关重要的作用。然而关于小麦(Triticum aestivum L.)SOD基因家族对盐胁迫的表达模式及响应锌(Zn)和钾(K)的功能知之甚少。本研究以‘西农979... 超氧化物歧化酶(SOD)是抗氧化系统的关键酶,在保护植物免受各种生物和非生物胁迫方面发挥着至关重要的作用。然而关于小麦(Triticum aestivum L.)SOD基因家族对盐胁迫的表达模式及响应锌(Zn)和钾(K)的功能知之甚少。本研究以‘西农979’为试验材料,基于全基因组分析,对小麦SOD家族成员进行鉴定和生物信息学分析,并分析相关基因在盐胁迫下响应Zn、K的表达情况。结果表明,在小麦中共鉴定出10个SOD基因(TaSDs),包括4个Cu/Zn-SOD基因(TaCSD1~TaCSD4)、4个Fe-SOD基因(TaFSD1~TaFSD4)和2个Mn-SOD基因(TaMSD1、TaMSD2)。系统发育分析表明,TaSDs可分为Cu/Zn-SODs、Fe/Mn-SODs两大类,共7个亚组。基因结构、序列基序及启动子分析表明,所有TaSDs都具有1~7个内含子和2~7个外显子,不同TaSDs具有不同的氨基酸序列组成和高度保守的活性位点残基,且每个TaSDs的启动子中存在许多与应激反应和植物激素相关的顺式作用元件。转录组表达谱分析表明,不同TaSDs对盐分表现出不同的表达模式,TaCSD3可能是响应盐胁迫的关键基因;经RT-qPCR分析明确,TaCSD3是响应盐胁迫的靶向SOD基因,同时受Zn、K协同正向调控。本研究结果可为后续小麦耐盐育种改良提供理论依据。 展开更多
关键词 小麦 超氧化物歧化酶 基因 盐胁迫 锌-钾相互作用
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裸果木超氧化物歧化酶基因家族鉴定及对盐胁迫的响应分析
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作者 齐建伟 鲁松松 +2 位作者 黄海霞 张婷 周晓瑾 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2023年第5期856-867,共12页
【目的】鉴定裸果木超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)基因家族成员组成,分析在NaCl胁迫下裸果木SOD基因在叶组织中的表达调控模式,并探索裸果木SOD基因家族对环境的适应性进化机制。【方法】以裸果木叶组织为材料,利用植物生... 【目的】鉴定裸果木超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)基因家族成员组成,分析在NaCl胁迫下裸果木SOD基因在叶组织中的表达调控模式,并探索裸果木SOD基因家族对环境的适应性进化机制。【方法】以裸果木叶组织为材料,利用植物生理学和生物信息学相关方法初步对裸果木SOD基因家族进行鉴定和盐胁迫下的表达分析。【结果】共鉴定到7个SOD成员,FSD、CSD和MSD 3个亚家族组成模式为2∶3∶2,均受到纯化选择。裸果木SOD基因共包含7个蛋白保守基序,且均为亲水性蛋白质,但稳定性较差。叶片SOD酶活性随着NaCl质量分数的增大呈先增强后减弱的趋势,且在0.5%NaCl处理下活性最高;在1.5%NaCl处理下,SOD活性也显著高于对照。盐胁迫下,叶组织中FSD、CSD1、CSD3和MSD2基因表达显著上调,其中FSD1和CSD1基因表达最高。CSD1基因存在的变异位点可能会导致其蛋白质活性中心增大。【结论】裸果木SOD基因家族包含7个成员,其中FSD1和CSD1基因在盐胁迫下的高表达可能是裸果木具有较强耐盐能力的原因之一。此外,FSD1和CSD1氨基酸位点突变导致的蛋白质亲水性升高和活性中心增大对提升SOD的催化活性有一定作用。 展开更多
关键词 裸果木 超氧化物歧化酶 基因家族鉴定 表达量 蛋白质结构
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过量表达小麦超氧化物歧化酶(SOD)基因对烟草耐盐能力的影响 被引量:28
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作者 张海娜 李小娟 +1 位作者 李存东 肖凯 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1403-1408,共6页
利用前期克隆的小麦超氧化物歧化酶(SOD)基因TaSOD1.1和TaSOD1.2,构建融合上述基因编码阅读框(ORF)的双元表达载体。采用农杆菌介导的遗传转化技术,获得了过量表达TaSOD1.1和TaSOD1.2的转基因烟草植株。研究表明,NaCl处理下,与对照相比... 利用前期克隆的小麦超氧化物歧化酶(SOD)基因TaSOD1.1和TaSOD1.2,构建融合上述基因编码阅读框(ORF)的双元表达载体。采用农杆菌介导的遗传转化技术,获得了过量表达TaSOD1.1和TaSOD1.2的转基因烟草植株。研究表明,NaCl处理下,与对照相比,转基因植株伤害较小,叶片失绿面积较少,植株长势明显增强,叶片的SOD活性均明显提高,而MDA含量明显降低。转基因植株的叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量,以及可溶性糖和可溶性蛋白含量也表现与SOD活性相同的趋势。表明在烟草中高表达小麦TaSOD1.1和TaSOD1.2基因,通过外源基因在转录水平上的调节,能增加植株SOD活性,减轻盐分胁迫造成的细胞膜质过氧化,增强植株抵御盐分胁迫的能力。 展开更多
关键词 超氧化物歧化酶(sod)基因 遗传转化 烟草 耐盐能力
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胡杨超氧化物歧化酶基因家族耐逆境的分子机理研究 被引量:1
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作者 鲁松松 白丽霞 +1 位作者 姚耀源 张晓玮 《西南林业大学学报(自然科学)》 CAS 北大核心 2023年第3期42-55,共14页
以已有基因组或转录物组数据的杨柳科树种为参考,采用生物信息学的常规方法,对胡杨SOD基因家族现状、同源关系、蛋白质三维结构及各家族成员对盐胁迫的响应等方面进行了较为系统的分析,以探索其分子水平的适应机理。结果表明:杨柳科树... 以已有基因组或转录物组数据的杨柳科树种为参考,采用生物信息学的常规方法,对胡杨SOD基因家族现状、同源关系、蛋白质三维结构及各家族成员对盐胁迫的响应等方面进行了较为系统的分析,以探索其分子水平的适应机理。结果表明:杨柳科树种基因组中SOD基因家族由Cu,Zn-SOD(CSD)、Mn-SOD(MSD)、Fe-SOD(FSD)3个亚家族组成,胡杨基因组中分别含有7、3、2个SOD基因亚家族成员,其中FSD3已被假基因化而失去功能,FSD1基因在胡杨叶组织中被高表达。MSD亚家族基因在胡杨和毛果杨的根和叶愈伤组织中均具有较高表达量,MSD1基因是盐胁迫条件下唯一持续上调的基因;MSD1(187K-T和202H-N)和MSD2(97R-N)3个氨基酸突变引起四聚体亚基间相互作用增强,使得2种MSD亚型均具有较高的蛋白质稳定性,有利于蛋白质积累到较高的浓度。 展开更多
关键词 胡杨 超氧化物歧化酶 基因鉴定 基因表达 蛋白质结构 胁迫
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超氧化物歧化酶1基因与果蝇寿命和攀爬能力的关系
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作者 石玉霞 曹旭婷 +2 位作者 朱凯 耿磊 陈冬生 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2023年第5期489-495,共7页
目的观察超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase 1,SOD1)基因(sod1)表达对果蝇寿命和运动能力的影响,分析sod1与衰老之间的联系。方法利用RNAi干扰技术,获得sod1敲低果蝇;运用载体构建和显微注射的技术获得sod1过表达效应;通过免疫组织... 目的观察超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase 1,SOD1)基因(sod1)表达对果蝇寿命和运动能力的影响,分析sod1与衰老之间的联系。方法利用RNAi干扰技术,获得sod1敲低果蝇;运用载体构建和显微注射的技术获得sod1过表达效应;通过免疫组织化学的手段定位sod1表达产物。结果sod1表达产物在细胞质中高表达,在细胞核中不表达;sod1全身性敲低果蝇与正常组果蝇相比表现出显著的寿命缩短以及明显的攀爬能力下降现象,而sod1过表达结果则恰恰相反。结论SOD1调控果蝇的衰老和运动能力。 展开更多
关键词 超氧化物歧化酶1基因 果蝇 寿命 衰老 攀爬能力
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芝麻Cu/Zn超氧化物歧化酶基因的全基因组鉴定与分析
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作者 张文香 崔文宁 +1 位作者 高小宽 梁魁景 《农业与技术》 2023年第20期47-50,共4页
铜/锌超氧化物岐化酶(Cu/Zn-SOD)是植物体内非常重要的一种活性氧清除酶系统,本研究通过blast的方法,在芝麻全因组水平进行Cu/Zn-SOD的鉴定。结果显示,芝麻中含有4条Cu/Zn-SOD,分别命名为SiCSD1、SiCSD2、SiCSD3、SiCSD4。理化性质分析... 铜/锌超氧化物岐化酶(Cu/Zn-SOD)是植物体内非常重要的一种活性氧清除酶系统,本研究通过blast的方法,在芝麻全因组水平进行Cu/Zn-SOD的鉴定。结果显示,芝麻中含有4条Cu/Zn-SOD,分别命名为SiCSD1、SiCSD2、SiCSD3、SiCSD4。理化性质分析表明,4种蛋白质均为酸性蛋白质,除SiCSD3外,均为亲水蛋白。结构域分析发现,蛋白质均含有Cu/Zn-SOD特有的结构域和金属离子结合域,但都不具有跨膜结构和信号肽。亚细胞定位预测分析发现,SiCSD1-3均定位于叶绿体,SiCSD4除了叶绿体,也有可能定位于细胞质。进化树分析发现,SiCSD3与拟南芥AtCSD2聚为一支,SiCSD4与拟南芥AtCSD3聚为一支,SiCSD1和SiCSD2与烟草NpSODC、番茄SlSODC1和SlSODC2聚在一个大的分支。以上结果初步表明,SiCSD1-4具有Cu/Zn-SOD共同的理化性质,其序列的鉴定将为后续功能的研究打下基础。 展开更多
关键词 芝麻 Cu/Zn超氧化物歧化酶 sod 基因 分析
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外源超氧化物歧化酶基因MnSOD在玉米中的过量表达及抗逆性的提高(英文) 被引量:27
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作者 杜娟 朱祯 李晚忱 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期57-63,共7页
为研究过量表达的超氧化物歧化酶基因MnSOD对玉米抗逆性的作用,构建了小麦来源MnSOD基因的单子叶植物高效表达载体,用基因枪法转化优良玉米自交系胚性愈伤组织。经潮霉素梯度浓度培养基筛选,从阳性愈伤组织再生获得9个正常结实的植株。... 为研究过量表达的超氧化物歧化酶基因MnSOD对玉米抗逆性的作用,构建了小麦来源MnSOD基因的单子叶植物高效表达载体,用基因枪法转化优良玉米自交系胚性愈伤组织。经潮霉素梯度浓度培养基筛选,从阳性愈伤组织再生获得9个正常结实的植株。其中5株经PCR和Southern印迹检测表现为阳性,表明外源基因已整合到玉米基因组中。提取SOD酶液,非变性聚丙烯酰胺浓度梯度凝胶电泳分离,用H2O25mmol/L抑制FeSOD和Cu/ZnSOD活性,氯化硝基四氮唑蓝染色检测MnSOD酶活性。Southern印迹呈阳性的5个植株,MnSOD酶活性均高于未转基因的对照。甲基紫精氧化损伤处理后,用电解质渗漏率法测定阳性株系的叶片渗透液的电导率。结果表明,转基因株系的抗氧化损伤能力显著高于对照。 展开更多
关键词 活性氧 超氧化物歧化酶 基因 抗逆性 玉米
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杨梅Cu/Zn超氧化物歧化酶基因(MrSOD1)cDNA的克隆及表达分析 被引量:12
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作者 王芳 董乐 +2 位作者 戴聪杰 林娈 林静 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第22期27-33,共7页
以杨梅叶为材料,利用RT-PCR技术克隆Cu/Zn超氧化物歧化酶基因,并利用半定量RT-PCR方法分析该基因在不同组织中的表达。获得1个杨梅Cu/ZnSOD基因编码区全长cDNA序列,长度为461bp,编码一个由152个氨基酸残基组成的蛋白质。该蛋白质具有Cu/... 以杨梅叶为材料,利用RT-PCR技术克隆Cu/Zn超氧化物歧化酶基因,并利用半定量RT-PCR方法分析该基因在不同组织中的表达。获得1个杨梅Cu/ZnSOD基因编码区全长cDNA序列,长度为461bp,编码一个由152个氨基酸残基组成的蛋白质。该蛋白质具有Cu/ZnSOD的特征信号序列;序列同源性分析表明,其与GenBank中注册的Cu/ZnSOD序列的同源性均在77%以上。该基因命名为MrSOD1(GenBank登录号:GQ404510)。半定量RT-PCR分析显示,MrSOD1在4种组织中表达量为:果>叶>花>枝条。本试验为进一步研究MrSOD1的时空表达特性、调控途径及杨梅抗氧化伤害的分子机理奠定基础。 展开更多
关键词 杨梅 Cu/Zn超氧化物歧化酶 基因克隆 组织表达
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板栗铁型超氧化物歧化酶基因(CmFeSOD)的克隆及原核表达 被引量:5
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作者 韩珊 刘裕峰 +6 位作者 朱天辉 刘应高 谯天敏 李姝江 汪煜伶 徐缨络 莫义英 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期935-944,共10页
超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)是逆境条件下清除细胞内活性氧的关键酶,而铁型超氧化物歧化酶(FeSOD)作为该酶系中的关键酶之一,与植物的抗病性关系密切。根据板栗(Castanea mollissimaBl)转录组数据中分析得到FeSOD基因EST... 超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)是逆境条件下清除细胞内活性氧的关键酶,而铁型超氧化物歧化酶(FeSOD)作为该酶系中的关键酶之一,与植物的抗病性关系密切。根据板栗(Castanea mollissimaBl)转录组数据中分析得到FeSOD基因EST序列设计PCR扩增引物,以板栗幼叶的cDNA为模板,采用RT-PCR技术克隆获得CmFeSOD基因cDNA序列,通过生物信息学方法分析该基因的cDNA序列,并推定其氨基酸序列,同时将该基因片段连接到原核表达载体pET28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)并进行不同条件的诱导表达。结果表明,板栗CmFeSOD基因开放阅读框(ORF)大小为705bp,共编码234个氨基酸,推测其蛋白分子质量为26.0165ku,理论等电点(pI)为6.86,具有FeSOD家族的特征基序和保守结构域,GenBank登录号为KY312852。遗传进化分析表明,板栗CmFeSOD与核桃的亲缘关系最近。SDS-PAGE电泳分析表明,通过原核表达获得CmFeSOD蛋白的分子质量约为29ku,CmFeSOD蛋白在30℃,添加0.4mmol/LIPTG,诱导6h表达量最高,主要以包涵体的形式存在。 展开更多
关键词 板栗 超氧化物歧化酶 基因克隆 原核表达
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割手密铜锌超氧化物歧化酶基因(SsSOD-1a)的克隆与分析 被引量:3
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作者 姚艳丽 胡小文 +3 位作者 邢淑莲 徐磊 张树珍 刘洋 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第2期503-508,共6页
本文以高粱超氧化物歧化酶基因(NCBI登录号为XM 002445626.1)c DNA序列为探针,对甘蔗EST数据库进行同源检索、筛选和拼接,通过分子克隆和序列分析验证,获得了1个割手密铜锌超氧化物歧化酶基因全长c DNA序列(Ss SOD-1a,Gene Bank登录号为... 本文以高粱超氧化物歧化酶基因(NCBI登录号为XM 002445626.1)c DNA序列为探针,对甘蔗EST数据库进行同源检索、筛选和拼接,通过分子克隆和序列分析验证,获得了1个割手密铜锌超氧化物歧化酶基因全长c DNA序列(Ss SOD-1a,Gene Bank登录号为KJ002571)。序列全长703 bp,由624 bp的开放读码框,36 bp的5’非翻译区和43 bp的3’非翻译区组成,编码207个氨基酸。氨基酸保守结构域分析表明,该蛋白序列具有铜锌超氧化物歧化酶保守结构域,属于SOD家族。氨基酸同源性分析发现,割手密Ss SOD-1a蛋白序列与鹰嘴豆、高粱、玉米等物种同源关系较近。 展开更多
关键词 割手密 超氧化物歧化酶 基因克隆 PCR
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蜡样芽孢杆菌M22超氧化物歧化酶(SOD)基因在毕赤酵母中的表达及其发酵条件优化 被引量:1
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作者 王爽 齐俊生 +2 位作者 付学池 王琦 梅汝鸿 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第S1期210-,共1页
超氧化物歧化酶(SOD)是一种金属酶,根据活性位点结合的金属离子不同,SOD可分为 CuZn-SOD、Fe-SOD和Mn-SOD以及最近发现的 Ni-SOD和Fe/Zn-SOD。由于SOD可以使超氧阴离子自由基歧化生成过氧化氢和分子氧,从而在防止氧化胁迫方面扮演重要... 超氧化物歧化酶(SOD)是一种金属酶,根据活性位点结合的金属离子不同,SOD可分为 CuZn-SOD、Fe-SOD和Mn-SOD以及最近发现的 Ni-SOD和Fe/Zn-SOD。由于SOD可以使超氧阴离子自由基歧化生成过氧化氢和分子氧,从而在防止氧化胁迫方面扮演重要作用。蜡质芽孢杆菌:M22菌株(Bacillus cereus M22)是本研究室从小麦体内分离的对多种植物病害有良好防治效果的生防细菌。前期研究发现该菌株代谢液及胞内SOD含量较高,可能与其抗病、促生作用有关。根据已经克隆的蜡样芽孢杆菌 Mnl4-SOD的基因序列,设计特异引物,扩增 Mnl4-SOD的编码框序列。扩增产物经相应内切酶消化后与用同样酶消化的酵母分泌型表达载体 pPICZαA连接,转化大肠杆菌DH5α。 展开更多
关键词 超氧化物歧化酶 酵母 sod M22
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人铜锌超氧化物歧化酶(hCu,Zn-SOD)基因在马铃薯中的表达 被引量:2
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作者 刘晓鹏 姜宁 +2 位作者 余伯胜 向常青 袁勤生 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2003年第2期71-74,共4页
目的 构建转基因马铃薯植株 ,以便大规模生产人铜锌超氧化物歧化酶 (hCu ,Zn SOD)。方法 采用RT PCR技术从人肝总RNA中分离扩增了hCu Zn SOD基因 ,并将其重组到植物表达载体pPSCuSOD中 ,用三亲交配法将重组质粒pPSCuSOD转化到农杆菌LB... 目的 构建转基因马铃薯植株 ,以便大规模生产人铜锌超氧化物歧化酶 (hCu ,Zn SOD)。方法 采用RT PCR技术从人肝总RNA中分离扩增了hCu Zn SOD基因 ,并将其重组到植物表达载体pPSCuSOD中 ,用三亲交配法将重组质粒pPSCuSOD转化到农杆菌LBA44 0 4,再用农杆菌介导转化马铃薯。结果 经PCR和PCR Southern分析证明hCu Zn SOD基因已整合到马铃薯基因组中。Westernblot分析证明 ,hCu Zn SOD基因已在马铃薯植株中得到表达。NBT光还原法检测转基因马铃薯块茎中的SOD总酶活性为 192 0U g .FW。 展开更多
关键词 铜锌超氧化物歧化酶 基因 马铃薯 表达 农杆菌 基因克隆 植物表达载体
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杨梅超氧化物歧化酶SOD2同源基因片段的克隆及序列分析
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作者 董乐 王芳 +4 位作者 戴聪杰 林娈 陈端玉 王毓媛 林静 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第19期124-127,共4页
根据植物超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的保守区设计特异性引物,通过RT-PCR技术,克隆杨梅叶超氧化物歧化酶保守区之间的cDNA序列。该序列长233 bp,编码一段由77个氨基酸残基组成的SOD保守区片段,该肽段具有Cu/Zn SOD的特征... 根据植物超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的保守区设计特异性引物,通过RT-PCR技术,克隆杨梅叶超氧化物歧化酶保守区之间的cDNA序列。该序列长233 bp,编码一段由77个氨基酸残基组成的SOD保守区片段,该肽段具有Cu/Zn SOD的特征序列。序列同源性分析表明,该序列与Genbank中已有的其他植物SOD序列的同源性均在86%以上。该基因命名为MrSOD2(Genbank登录号为AB661320)。 展开更多
关键词 杨梅 超氧化物歧化酶 基因克隆 序列分析
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人超氧化物歧化酶(SOD)基因的原核表达与蛋白纯化
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作者 吴文林 陈宇 吴小婷 《泉州师范学院学报》 2011年第4期37-40,49,共5页
从人直肠癌细胞株Colo320中提取总RNA,经RT-PCR扩增出SOD基因片段,经限制性内切酶(BamHⅠ,SmaⅠ)酶切后按正确的读码框顺序插入到pGEX-4T-2表达载体上,重组质粒转化大肠杆菌,经菌落PCR和质粒双酶切鉴定、序列测定确认,证实成功地构建了... 从人直肠癌细胞株Colo320中提取总RNA,经RT-PCR扩增出SOD基因片段,经限制性内切酶(BamHⅠ,SmaⅠ)酶切后按正确的读码框顺序插入到pGEX-4T-2表达载体上,重组质粒转化大肠杆菌,经菌落PCR和质粒双酶切鉴定、序列测定确认,证实成功地构建了人SOD基因融合表达载体.转化菌经IPTG诱导表达,SDS-PAGE显示有与预期大小约44 kD相吻合的融合蛋白带,获得了可溶性表达的目的蛋白,采用Glutathione Sepha-rose 4B亲和层析对重组蛋白进行纯化,获得了纯度很高的目的蛋白. 展开更多
关键词 超氧化物歧化酶 基因重组 表达 纯化
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对羟基苯甲酸丙酯对果蝇超氧化物歧化酶(SOD)基因表达的影响 被引量:3
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作者 蒋芳平 应琼琼 顾蔚 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第19期170-173,共4页
探讨对羟基苯甲酸丙酯(PP)对果蝇超氧化物歧化酶(SOD)基因表达的影响,用含不同质量浓度(0.00、0.20、0.50、1.00、2.00g/L)的PP培养基饲喂果蝇10d后,提取不同PP组果蝇总RNA,采用逆转录PCR方法在mRNA表达水平上研究SOD基因。结果表明:PP... 探讨对羟基苯甲酸丙酯(PP)对果蝇超氧化物歧化酶(SOD)基因表达的影响,用含不同质量浓度(0.00、0.20、0.50、1.00、2.00g/L)的PP培养基饲喂果蝇10d后,提取不同PP组果蝇总RNA,采用逆转录PCR方法在mRNA表达水平上研究SOD基因。结果表明:PP抑制了果蝇体内抗氧化酶Cu,Zn-SOD、Mn-SOD基因的表达,与对照组相比具有显著性差异(P<0.05);随着PP质量浓度的升高,雌果蝇体内Cu,Zn-SOD基因与雄果蝇体内Mn-SOD基因的表达量随之降低,而Mn-SOD基因在雌果蝇体内总体表达量提高。故PP的毒性作用可能与抑制抗氧化酶基因的表达有关,而这种作用因果蝇性别而异。 展开更多
关键词 对羟基苯甲酸丙酯(PP) 果蝇 超氧化物歧化酶(sod) 基因表达
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超氧化物歧化酶(SOD)研究进展 被引量:99
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作者 杜秀敏 殷文璇 +1 位作者 张慧 赵彦修 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2003年第1期48-50,74,共4页
环境胁迫使植物细胞中积累大量的活性氧 ,从而导致蛋白质、膜脂、DNA及其它细胞组分的严重损伤。植物体内有效清除活性氧的酶类包括超氧化物歧化酶 (SOD)、抗坏血酸过氧化物酶 (APX)、过氧化氢酶 (CAT)等 ,其中研究最深入的是SOD。利用... 环境胁迫使植物细胞中积累大量的活性氧 ,从而导致蛋白质、膜脂、DNA及其它细胞组分的严重损伤。植物体内有效清除活性氧的酶类包括超氧化物歧化酶 (SOD)、抗坏血酸过氧化物酶 (APX)、过氧化氢酶 (CAT)等 ,其中研究最深入的是SOD。利用基因工程策略增加这些物质在植物体内的含量 ,从而获得抗逆转基因植株。 展开更多
关键词 超氧化物歧化酶 sod 研究进展 植物 活性氧 氧化损伤
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镉对玉米幼苗活性氧代谢、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性及其基因表达的影响 被引量:32
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作者 赵士诚 孙静文 +3 位作者 马有志 汪洪 梁国庆 周卫 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期3025-3032,共8页
【目的】研究镉胁迫对玉米(ZeaMays)幼苗活性氧代谢,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性及其基因表达的影响。【方法】用营养液培养的方法研究了不同镉浓度(0﹑5﹑20和100μmol·L-1)和处理时间(12﹑24﹑48﹑96和168h)下... 【目的】研究镉胁迫对玉米(ZeaMays)幼苗活性氧代谢,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性及其基因表达的影响。【方法】用营养液培养的方法研究了不同镉浓度(0﹑5﹑20和100μmol·L-1)和处理时间(12﹑24﹑48﹑96和168h)下玉米幼苗内活性氧代谢、SOD和CAT活性及其基因表达的变化。【结果】镉处理后植株内超氧自由基(O2-)产生速率迅速升高,24h(叶)或48h(根)后又逐步下降;H2O2随镉浓度和处理时间的增加而大量积累。镉处理的植物SOD活性开始随镉浓度升高,48h后被消耗和抑制逐步下降,但后期100μmol·L-1镉处理的活性仍显著高于其它处理;CAT活性除叶中100μmol·L-1镉处理被抑制降低外均被诱导,开始随镉浓度升高,随后随镉浓度和胁迫时间逐步下降。镉诱导的SOD基因表达与其活性变化相似,而CAT基因表达随镉浓度和处理时间逐步增强,说明在玉米幼苗内镉通过抑制SOD的基因转录抑制其活性,而对CAT,镉胁迫导致其产生了翻译后蛋白修饰。【结论】镉处理诱导了玉米幼苗内活性氧产生、SOD和CAT的活性及基因表达增加,随胁迫的加剧,SOD和CAT的活性和SOD表达被抑制,CAT则产生转录后或翻译后修饰。 展开更多
关键词 玉米 超氧化物歧化酶 氧化氢酶 基因表达
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六点始叶螨内参基因筛选及其在超氧化物歧化酶基因EsSOD表达分析中的应用
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作者 梁晓 陈青 +1 位作者 伍春玲 方永军 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2021年第1期175-181,共7页
为了筛选稳定内参基因分析六点始叶螨超氧化物歧化酶基因EsSOD的表达量,本研究采用geNorm、Bestkeeper、Normfinder和RefFinder软件分析6个候选内参基因actin、gapdh、rpl13、α-tub、β-tub和18sRNA在六点始叶螨幼螨、前若螨、后若螨... 为了筛选稳定内参基因分析六点始叶螨超氧化物歧化酶基因EsSOD的表达量,本研究采用geNorm、Bestkeeper、Normfinder和RefFinder软件分析6个候选内参基因actin、gapdh、rpl13、α-tub、β-tub和18sRNA在六点始叶螨幼螨、前若螨、后若螨和雌成螨中的表达稳定性。结果表明,根据geNorm软件分析得出6个候选内参引物的稳定性从大到小的排序为:actin>β-tub>rpl13>α-tub>gapdh>18sRNA;根据NormFinder软件分析得出的稳定性从大到小的排序为:rpl13>β-tub>actin>α-tub>18sRNA>gapdh;根据BestKeeper软件分析得出的稳定性从大到小的排序为:β-tub>rpl13>actin>gapdh>α-tub>18sRNA;最终根据RefFinder软件的综合分析结果,actin和β-tub是稳定性最佳的2个内参引物。分别以actin和β-tub为内参进行EsSOD基因表达量的RT-qPCR分析,结果表明,与取食感螨橡胶树种质‘IAN2904’后EsSOD表达量相比,不同龄期六点始叶螨取食抗螨橡胶树种质‘IRCI12’后EsSOD表达量均降低。本研究获得了可用于六点始叶螨EsSOD表达量分析的稳定内参引物,为橡胶树种质抗螨性分子机理研究奠定了理论基础。 展开更多
关键词 六点始叶螨 内参基因 超氧化物歧化酶基因Essod 基因表达
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