肾病综合征患者超氧化物歧化酶、脂类检测结果分析

通过测定３１例临床确诊的肾病综合征（ＮＳ）患者和４６例健康体检者的超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、ＴＣ、ＴＧ、ＨＤＬ—Ｃ、ＬＤＬ—Ｃ；目的是了解肾病综合征患者的脂质代谢情况，探讨其并发症发生的原因。结果ＮＳ患者ＴＣ、ＴＧ、ＬＤＬ—Ｃ明显增高，ＨＤＬ—Ｃ、ＳＯＤ明显降低，与对照组对比有显著差异。结论ＮＳ患者存在严重脂质代谢异常，血液的高凝状态是引起肾病综合征并发症的主要原因。

玉米功能短肽的制备及其类超氧化物歧化酶活性研究

目的制备具有类超氧化物歧化酶 (SOD)活性的玉米功能短肽 ,并与SOD进行活性比较。方法以玉米蛋白粉为原料 ,采用酶水解的方法 ,经SephadexG 2 5分离 ,以TNBS法测定各组分的平均链长 ,用邻苯三酚自氧化法测定各组分的抗氧化活性 ,同时与SOD进行活性比较。结果含有 2～ 6个氨基酸残基的玉米功能短肽 ,对邻苯三酚自氧化具有较好的抑制作用 ,玉米功能短肽 (浓度 10mg ml)的抑制率为 2 1.78%。

莲铜锌超氧化物歧化酶cDNA的克隆和序列分析

用RT—PCR方法，从中国莲（Nelumbo nucifera）幼叶cDNA中成功扩增出铜锌超氧化物歧化酶（CuZnSOD）全长序列，并进行测序分析．该cDNA序列全长461bp，包括起始密码子和终止密码子．其中编码区段为456bp，共编码152个氨基酸，其编码蛋白的相对分子质量为1．552×10^4，等电点为4．515．与GenBank中其他物种的CuZnSOD进行同源性比较，发现其核苷酸序列相似性高达80％～86％，氨基酸序列相似性达89％～94％．所有已知的CuZnSOD的关键活性位点在该蛋白中均保守存在．将其与一些典型的单子叶和双子叶植物的该蛋白进行进化树分析，为富有争议的莲的系统学地位的确定，在分子生物学上为莲的系统学地位的确定提供了一个依据．该基因已在GenBank登记，序列号为DQ227345．

用醇类从酵母菌中释放超氧化物歧化酶

研究了一种用醇类有机溶剂处理法从酵母菌中选择性地释放超氧化物歧化酶(SOD)的方法。当采用异丙醇浓度为90％,浸泡120min,抽提缓冲液为50mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0)时,抽提20h,SOD释放的活力为300u/ml,杂蛋白释放量最少,SOD比活达300u/mg。SOD释放率可达90％,和传统的超声波法和机械法相比,而比活提高了25倍。这种方法不需要任何复要设备,操作简单,成本低廉,在释放SOD同时,可达到初步纯化SOD的效果。

条斑紫菜锰超氧化物歧化酶基因克隆与序列分析

为研究紫菜抗逆抗病的分子机制,以本实验室建立的条斑紫菜表达序列标签（EST）和全长cDNA富集文库,结合PCR技术,克隆了条斑紫菜编码锰超氧化物歧化酶（Mn-SOD）的cDNA及基因组DNA全长序列,并进行了序列特性相关分析.研究结果表明：该基因cDNA序列全长为958个核苷酸,包含一个完整Mn-SOD基因的ORF,编码224个氨基酸和终止密码子;该基因在基因组中序列长度为1416bp,包含4个外显子和3个内含子,这既不同于高等植物的6个外显子和5个内含子,也不同于人的5个外显子和4个内含子;该基因编码区密码子的平均GC含量为60.9%,第三位密码子的GC含量高达84.9%;序列中包含4个与Mn^2＋的结合位点及一个保守的金属结合结构域,预测分子量为24469.09Da,等电点为5.99;条斑紫菜Mn-SOD与人的相关蛋白具有类似的空间结构,都有6个跨膜α螺旋结构域;由cDNA序列推导的氨基酸序列与莱茵衣藻相似性为57.7%,系统发生分析表明条斑紫菜Mn-SOD与绿藻莱茵衣藻和硅藻海链藻的亲缘关系较近.这是该基因在红藻门中的首次报道.

美国白蛾核型多角体病毒超氧化物歧化酶基因的序列分析和表达

根据测序结果 ,HcNPVsod的核苷酸序列与BmNPVsod的完全一致 ,与AcNPVsod的核苷酸序列相比 ,同源性达到 97 2 % ;推测HcNPVsod编码 1 51个氨基酸 ,与BmNPVsod的完全一致 ,与AcNPVsod编码的氨基酸相比 ,有三个氨基酸的差别。按基酸序列分析表明 ,HcNPVSOD蛋白中含有对SOD结构和活性必需的氨基酸残基 ,在HcNPVsod中均是保守的。SOD活性测定表明酶活为 1 47 0

水稻细胞质铜锌超氧化物歧化酶基因的序列和表达分析

以水稻(Oryza sativa)品种Cpslo17幼穗为材料,通过RT-PCR克隆了长度为698bp的编码水稻细胞质铜锌超氧化物歧化酶基因(OsCu/Zn-SOD)。序列分析表明其覆盖基因完整编码框,编码由152个氨基酸组成的蛋白,它与玉米(Zea maize)Cu/Zn-SOD基因序列的相似率为88%。TargetP和ChloroP预测编码蛋白N端无信号肽序列,且此编码区段有8个外显子和7个内含子。利用Swiss-Model站点预测OsCu/Zn-SOD三维结构,并分析其铜锌离子结合位点的结构。RT-PCR结果表明OsCu/Zn-SOD在水稻不同品种均有表达,但表达量存在差异,OsCu/Zn-SOD在Cpslo17的分裂旺盛的幼嫩组织如幼穗、开花期花序和未成熟种子中表达量较高,而在叶片中表达量相对较低,在愈伤组织中表达微弱。

野桑蚕铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆分析与原核表达

超氧化物歧化酶是野桑蚕保护酶体系的重要酶类。利用RT-PCR方法克隆出野桑蚕铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)cDNA(EMB I登陆号:AM410997),其开放阅读框ORF长465 bp,编码154个氨基酸。同源性及系统进化分析表明,推导出的氨基酸序列与3种果蝇的同源性平均为69.3%,与线虫为57%,各物种中与Cu/Zn结合的残基高度保守。利用ExPASy的ScanProsite以及PSort和TMpred对此编码的蛋白质结构和功能域分析,预测出其具有2段Cu/Zn-SOD特异序列,且该蛋白不存在信号肽以及跨膜区。将Cu/Zn-SOD cDNA克隆到pET-28 a(+)表达载体,测序鉴定后以IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳鉴定其表达的融合蛋白质分子量为19.4 kD。

虾夷扇贝铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆与转录表达特性分析

利用RACE和克隆等方法得到了虾夷扇贝铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)基因全长cDNA序列,该序列全长1 064 bp,5'和3'非编码区(UTR)分别为61 bp和541 bp,开放阅读框(ORF)462 bp,编码153个氨基酸和一个终止密码子。分析发现,此氨基酸序列含有形成二硫键的两个半胱氨酸残基以及4个铜结合位点、4个锌结合位点,与已知的Cu/Zn-SOD结构相似,与其它物种同源性较高。进行虾夷扇贝组织分布及发育过程中不同时期的实时荧光定量监测,发现鳃中Cu/Zn-SOD基因mRNA相对表达量最高,肾次之,血淋巴中最低;不同发育阶段Cu/Zn-SOD表达量变化明显,其中受精卵和早期D形幼体两个时期表达量相对较高。

柞蚕铜锌超氧化物歧化酶基因的克隆与表达分析

超氧化物歧化酶(SOD)是生物体内的重要保护性酶类。采用RT-PCR方法克隆了柞蚕(Antheraea pernyi)铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)基因的ORF序列。生物信息学分析表明,该序列共编码154个氨基酸,具有Cu/Zn-SOD的保守性结构特征,与家蚕(Bombyxmori)、美国白蛾(Hyphantria cunea)、野桑蚕(Bombyx mandarina)以及果蝇(Drosophila melanogaster)Cu/Zn-SOD基因的同源性分别是81.5%、81.7%、81.5%、66.7%。柞蚕蛹经紫外线照射处理后用半定量PCR方法检测,发现照射不同时间脂肪体内Cu/Zn-SOD基因的转录水平存在差异,在照射5 min后开始增加,至10 min时为转录高峰,15 min时又呈下降趋势。

子宫肌瘤血清性激素 超氧化物歧化酶测定与分析

目的 :探讨子宫肌瘤患者血中性激素水平与超氧化物歧化酶的含量及其相互关系。方法 :采用放谢免疫法 (RIA)对 4 0例子宫肌瘤患者 (肌瘤组 )和 2 0例健康女性 (对照组 )测定血清中促卵泡成熟素 (FSH)、促黄体生成素 (L H)、垂体泌乳素 (PRL)、睾酮 (T)、雌二醇 (E2 )、孕酮 (P)和超氧化物歧化酶 (SOD)含量 ,并做统计学处理。结果 :子宫肌瘤患者无论增殖期或是分泌期血中 E2、P、PRL 均显著高于对照组 (P<0 .0 5 ) ;而 FSH、L H、T与对照组无显著性差异 (P>0 .0 5 )。SOD与对照组比较有显著性差异 (P<0 .0 1)。结论 :E2、P、PRL 增高对子宫肌瘤的发生发展可能起协同作用 ,而 SOD也参与了肿瘤的发生与发展。

电泳中介微分析法测定超氧化物歧化酶

基于超氧化物歧化酶（SOD）对邻苯三酚自氧化的抑制作用和电泳中介微分析（EMMA）技术建立了一种测定SOD的新方法.采用“三明治”式不同pH缓冲液部分填充法,有利于邻苯三酚的自氧化反应,便于观察SOD的抑制作用,有利于反应产物与反应物的分离.对溶液填充模式、反应条件等实验参数进行了优化.在最优条件下,邻苯三酚自氧化反应的抑制率I与SOD浓度C在1.00×10^2～6.00×10^2 μg/L范围内呈良好的线性关系,回归方程为： I （%）= 0.0895C （μg/L） ＋17.633 （r＝0.9973）.

测定超氧化物歧化酶活性的一种新的极谱分析方法

报道一种测定超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性的新的极谱分析方法。在０．１２５ ｍｏｌ／ＬＮＨ３·Ｈ２Ｏ－０．７５ ｍｏｌ／Ｌ ＮＨ４ Ｃｌ－２．５％ ＮａＳＯ３－０．５％吐温－８０（ｐＨ＝ ８．８± ０．３）的介质中，ＳＯＤ在－０．５２Ｖ（νｓＳＣＥ）处产生一氧极谱催化波。ＳＯＤ在１．０ × １０３ Ｕ／Ｌ～４．０ ×１０３ Ｕ／Ｌ的活性含量范围内与催化电流呈线性关系，检出限为８．０×１０２ Ｕ／Ｌ。用ＳＯＤ标准溶液进行标准加入回收测定，平均回收率为９９．６％，ＲＳＤ为０．３％。本方法具有灵敏度高、重现性好、试剂易得、使用安全等特点。

夏威夷椰子超氧化物歧化酶基因片段的克隆与序列分析

以热带植物夏威夷椰子(Chamaedoreacostricana)基因组DNA为模板,根据SOD基因保守序列设计特异引物进行PCR扩增,得到特异基因片段.回收该基因片段,与pMD182T载体连接,并转化到感受态大肠杆菌ER2566细胞,获得Cu·ZnSOD基因片段的克隆.序列分析表明夏威夷椰子Cu·ZnSOD基因片段含3个外显子和3个内含子,编码64个氨基酸,与玉米、红薯和白杨相应氨基酸序列的同源性分别为82.81%,81.25%,81.25%和79.69%.

大豆、决明和玉米种子超氧化物歧化酶的同工酶分析

本文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析了大豆、决明和玉米种子超氧化物歧化酶的同工酶谱的种类和活性 .结果表明 :(1)大豆种子超氧化物歧化酶 (SOD)同工酶谱带有 7条 ,玉米和决明各有 5条 ,并且大豆和决明有 3条酶带的Rf值 (0 .33、0 .5 5、0 .80 )值相同 ;(2 )每种植物种子都含有自己特有的SOD ;(3)SOD具有明显的种属特异性 。

3种虾类超氧化物歧化酶同工酶比较

[目的]比较日本对虾、克氏原螯虾、凡纳滨对虾不同组织的超氧化物歧化酶(SOD)同工酶差异。[方法]将供试材料进行预处理后,测定各材料SOD活性,并采用聚丙烯酰胶凝胶电泳分析同工酶差异。[结果]SOD活性存在组织差异和种属差异性;电泳谱带在3种虾类中也存在着明显的差异,其中日本对虾和凡纳滨对虾的SOD的电泳谱带和迁移率较为相似,与克氏原螯虾存在明显不同。[结论]SOD同工酶活性比较可揭示虾类的亲缘关系与起源。

白骨壤铜锌超氧化物歧化酶基因片段的克隆与序列分析

以红树植物白骨壤 (Avicenniamarina)基因组DNA为模板 ,根据超氧化物歧化酶基因保守序列设计特异引物进行PCR扩增 ,得到特异基因片段。回收该基因片段 ,与pMD18 T载体连接 ,并转化到感受态大肠杆菌ER2566细胞 ,获得铜锌超氧化物歧化酶基因片段的克隆。序列分析表明白骨壤铜锌超氧化物歧化酶基因片段含4个外显子和3个内含子 ,编码78个氨基酸,与水稻、玉米、红薯和白杨相应氨基酸序列的同源性分别为83.3% ,84.6% ,84.6%和87.2 %。

嗜酸热原体菌的超氧化物歧化酶的结构模建和进化踪迹分析(英文)

为考察来源于极端高温酸性环境中的超氧化物歧化酶,建立了一个由嗜酸热原体菌的sod基因编码的蛋白质的可靠三维分子结构,并对这个蛋白质进行进化踪迹分析识别出了11个踪迹残基?其中,残基Asn39,Gly105和Glu162的位置随机遍布整个结构,其余的残基却全部都明显地聚于一个靠近铁原子的子类当中?由此从在三维结构确认sod基因编码含铁的超氧化物歧化酶。此外,那些被识别的靠近铁原子的踪迹残基可能跟铁的绑定和催化功能直接相关?

哈茨木霉超氧化物歧化酶基因克隆与特性分析

构建了哈茨木霉菌丝的cDNA文库,并获得了3298条ESTs序列,对哈茨木霉(Trichoderma harzianum)ESTs序列本地数据库进行tBlastn检索,获得了哈茨木霉超氧化物歧化酶cDNA序列。cDNA序列全长751 bp,开放阅读框465bp,编码154个氨基酸组成的多肽,蛋白分子量为15.7kD。BlastP同源性分析表明该基因与麦角真菌(Claviceps purpurea)相似性最高为86%;与解脂耶氏酵母菌(Yarrowia lipolytica)相似性最低为72%。三级结构预测表明,其活性中心可能与His47,His49,His64,His72,His81,His121,D84位点有关,并构成其活性中心骨架。