莪术黄芪超滤膜提取物对人肝癌细胞株HepG2凋亡的诱导作用

目的观察莪术黄芪超滤膜提取物对人肝癌细胞株HepG2是否具有凋亡诱导作用。方法四氮唑蓝比色(MTT)法观察莪术黄芪超滤膜提取物对人肝癌细胞株HepG2细胞的抑制率;应用流式细胞术,DNA凝胶电泳方法检测细胞凋亡的发生。结果 (1)莪术黄芪超滤膜提取物对人肝癌细胞株HepG2的生长有明显的抑制作用,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),抑制作用与剂量及时间呈显著性正相关;(2)莪术黄芪超滤膜提取物诱导人肝癌细胞株HepG2发生凋亡,1.6 g/L处理,72 h效果最佳。结论莪术黄芪超滤膜提取物抑制人肝癌细胞株HepG2生长并促其凋亡。

当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢致PC12细胞凋亡的影响

目的观察当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢(H2O2)致PC12细胞凋亡的影响,探讨其作用机制。方法 H2O2诱导PC12细胞凋亡,构建氧化损伤神经细胞凋亡模型。实验分为正常对照组、模型组及中药低、中、高剂量组,中药各组给予不同剂量当归红芪超滤膜提取物。流式细胞术检测细胞凋亡率,激光共聚焦显微镜检测细胞线粒体膜电位变化,Western blot检测Bax、Bcl-2和cleaved Caspase-3的蛋白表达。结果与模型组比较,中药各剂量组细胞凋亡率明显降低,线粒体膜电位升高,Bax、cleaved Caspase-3蛋白表达均减弱,Bcl-2表达增强,Bcl-2/Bax比值升高(P<0.05)。结论当归红芪超滤膜提取物具有抗H2O2诱导的PC12细胞凋亡的作用。

当归、红芪超滤膜提取物对培养乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的影响

目的探讨当归、红芪超滤膜提取物对心肌细胞缺氧/复氧损伤的影响。方法通过给原代培养乳鼠心室肌细胞进行缺氧1h/复氧1h,建立缺氧/复氧(A/R)心肌细胞损伤模型。于复氧期开始随机将心肌细胞分为正常对照组(C)、缺氧/复氧组(A/R组)、药物低剂量组(LD)、药物高剂量组(HD),于药物作用24h后测定各组缺氧/复氧后细胞损伤指标肌酸激酶(CK)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、髓过氧化物酶(MPO)。结果LD、HD组MDA、MPO、肌酸激酶(CK)明显较A/R组降低(P<0.01),SOD明显增高(P<0.01)。结论当归、红芪超滤膜提取物(10万分子量)可减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤。

bcl-2/bax凋亡基因诱导大鼠卵巢颗粒细胞凋亡以及当归黄芪超滤膜提取物的干预作用

目的:观察当归黄芪超滤膜提取物对体外培养大鼠卵巢颗粒细胞增殖及对bcl-2/bax凋亡蛋白表达的影响。方法:用当归黄芪超滤膜提取物处理体外培养的大鼠卵巢颗粒细胞,用MTS法检测培养24、48和72 h增殖率以及用westren bolt法检测bcl-2/bax凋亡蛋白。结果:当归黄芪超滤膜提取物可以促进颗粒细胞的增殖,并且呈一定的量效和时效关系,随着当归黄芪超滤膜提取物浓度的增加,其促增殖能力逐渐减低,最佳作用浓度0.375 g/L;选取最佳作用浓度,检测48 h的bcl-2/bax凋亡蛋白表达,发现bcl-2/bax为1.523。各组比较有统计学意义(P<0.05)。结论:当归黄芪超滤膜提取物有促进卵巢颗粒细胞增殖作用,促进卵泡发育,提高血清激素水平,达到恢复卵巢功能的目的。

当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢致PC12细胞氧化损伤的影响

目的观察当归红芪超滤膜提取物对过氧化氢(H2O2)致PC12细胞氧化损伤的影响。方法 H2O2诱导PC12细胞构建氧化应激损伤模型;不同剂量当归红芪超滤膜提取物(0.38、0.75、1.5 g/L)干预;MTT法测定细胞存活率;生化法检测细胞内MDA、LDH、SOD含量;双氯荧光黄乙酸乙酯(DCF-DA)染色,检测细胞内ROS含量。结果 200μmol/L H2O2作用6 h成功诱导PC12细胞氧化应激损伤;与空白对照组比较,H2O2模型组细胞存活率下降,细胞内LDH、MDA、ROS含量增多,SOD含量下降(P<0.05);与H2O2模型组相比,当归红芪超滤膜提取物各剂量组细胞存活率明显上升,细胞内LDH、MDA、ROS含量降低,SOD含量增加(P<0.05)。结论当归红芪超滤膜提取物可修复H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤。

当归红芪超滤膜提取物抑制过氧化氢诱导的大鼠心肌细胞凋亡及相关基因表达

目的探讨当归红芪超滤膜提取物对心肌细胞凋亡相关基因bc l-2、bax蛋白表达的影响。方法用高浓度的过氧化氢(400μmol/L)在W istar乳鼠原代培养的心肌细胞上建立细胞凋亡模型,用不同浓度的当归红芪超滤物(3.75、7.5、15 g/L)进行治疗。光镜下观察细胞形态;逆转录-多聚酶链反应和蛋白印迹法检测bc l-2、bax蛋白在心肌细胞中的表达情况。结果与正常对照组相比,高浓度过氧化氢损伤组bc l-2 mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05);bax mRNA及蛋白表达显著增加(P<0.05);bc l-2/bax比值显著降低(P<0.01),差异具有统计学意义。与损伤组比较,高浓度和中浓度药物治疗组bc l-2 mRNA及其蛋白表达显著增加(P<0.05);bax mRNA及其蛋白表达显著降低(P<0.05);bc l-2/bax比值显著增加(P<0.01),差异具有统计学意义。低浓度药物治疗组则对bc l-2、bax表达无显著改变。结论当归红芪超滤膜提取物可通过上调bc l-2/bax的比值抑制心肌细胞的凋亡,对心肌细胞具有抗凋亡的保护作用。

当归黄芪超滤膜提取物含药血清对辐射心肌成纤维细胞增殖和胶原的影响

目的:观测当归黄芪超滤膜提取物含药血清对辐射心肌成纤维细胞增殖和胶原的影响。方法:用胰酶-胶原酶消化法分离培养乳鼠心肌成纤维细胞,建立体外培养体系,将已经过药物干预24h的第2代细胞进行剂量10Gy的辐照,继续培养48h,检测细胞增殖、超氧化物歧化酶、羟脯氨酸含量的变化。结果:与空白组相比,模型组细胞增殖抑制,超氧化物歧化酶活力下降,羟脯氨酸含量增加;与模型组相比,药物组细胞增殖明显受到促进,超氧化物歧化酶活力提高,脯氨酸含量下降。结论:辐射明显抑制细胞增殖,提取物含药血清能剂量依赖性的促进辐照后细胞增殖,去除氧自由基,但对胶原含量并无影响。

smad4和cyclinA蛋白在大鼠卵巢颗粒细胞中的表达及当归黄芪超滤膜提取物对其的增殖作用

目的:观察smad4和cyclin A蛋白在体外培养大鼠卵巢颗粒细胞中的表达以及当归黄芪超滤膜提取物对其的增殖作用。方法:以不同剂量的当归黄芪超滤膜提取物作用于体外培养的大鼠卵巢颗粒细胞,用MTS法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞24、48和72小时的增殖情况,并用westren bolt法监测smad4和cyclin A蛋白的表达。结果:smad4和cyclin A蛋白在颗粒细胞高表达,随着细胞增殖作用的增加,其表达也逐渐增加;当归黄芪超滤膜提取物可促进颗粒细胞的增殖,并且呈一定的量效和时效关系,最佳作用浓度为0.375g/L;各组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:当归黄芪超滤膜提取物有促进卵巢颗粒细胞增殖的作用,能促进卵泡发育,与上调smad4和cyclin A蛋白表达有关。

莪术黄芪超滤膜提取物诱导人SGC7901胃癌细胞凋亡的研究

目的:观察莪术黄芪超滤膜提取物对人SGC7901细胞是否具有凋亡诱导作用。方法:四氮唑蓝比色法(MTT法)观察莪术黄芪超滤膜提取物对人SGC7901细胞细胞的抑制率;应用流式细胞术,DNA凝胶电泳方法检测细胞凋亡的发生。结果:(1)莪术黄芪超滤膜提取物对人SGC7901细胞的生长有明显的抑制作用,与对照组相比有显著性差异(P<0.01),抑制作用与剂量及时间呈显著性正相关。(2)莪术、黄芪超滤膜提取物诱导人SGC7901细胞发生凋亡,1.6g/L处理,72h效果最佳。结论:莪术黄芪超滤膜提取物抑制人SGC7901细胞生长并促其凋亡。

黄芪超滤膜提取物对人SGC7901胃癌细胞增殖及转移的影响

目的:研究黄芪超滤膜提取物对人SGC7901胃癌细胞增殖和转移的影响。方法:应用四氮唑蓝比色法(MTT法)测定黄芪超滤膜提取物对人SGC7901胃癌细胞增殖的抑制作用,应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法、Western-Blot法研究黄芪超滤膜提取物对SGC7901胃癌细胞环氧化酶(COX-2)、血管内皮生长因子-c(VEGF-c)表达的影响。结果:黄芪超滤膜提取物对SGC7901胃癌细胞的增殖有一定的抑制作用,使SGC7901胃癌细胞阻滞于G0/G1期,对SGC7901胃癌细胞COX-2、VEGF-c的表达有显著抑制作用。结论:黄芪超滤膜提取物能有效抑制SGC7901胃癌细胞的增殖周期,并可抑制COX-2、VEGF的表达。

当归红芪超滤膜提取物含药血清对辐射心肌成纤维细胞SOD和羟脯氨酸的影响

目的观察当归红芪超滤膜提取物含药血清对辐射心肌成纤维细胞SOD和羟脯氨酸的影响。方法用胰酶-胶原酶消化法分离培养乳鼠心肌成纤维细胞,建立体外培养体系,通过10万分子量的超滤膜提取物制备不同浓度和不同期限的含药血清。将已经过药物干预24 h的第2代细胞进行辐射剂量为10 Gy的辐射,继续培养24 h,黄嘌呤氧化法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性,碱水解法检测羟脯氨酸含量。结果与空白组比较,模型组SOD活性显著下降,羟脯氨酸含量显著增加(P<0.01);与模型组比较,药物组SOD活性显著升高(P<0.05或P<0.01),且药物组(7 d)显著优于药物组(3 d)(P<0.05),而羟脯氨酸含量下降并不显著(P>0.05)。结论辐射可引起SOD活性下降、羟脯氨酸含量增加,而当归红芪超滤膜提取物能去除氧自由基,并且长期疗效优于短期,但对羟脯氨酸含量并无影响。

当归、红芪超滤膜提取物联合医用直线加速器抑制SMMC-7721细胞生长实验研究

目的:探讨当归、红芪超滤膜提取物联合直线加速器抑制SMMC-7721细胞生长的作用。方法:通过检测Caspase-3活性,观察当归、红芪超滤膜提取物联合直线加速器对SMMC-7721细胞凋亡的影响。利用透射电子显微镜观察SMMC-7721细胞的凋亡形态。结果:通过吸光度检测Caspase-3活性发现,在加药组(6mg/mL)和单纯照射组与正常SMMC-7721细胞中表达的caspase-3蛋白浓度分别为38.07μg/μL、35.24μg/μL和33.25μg/μL,之间无明显差异(P>0.05)。而照射+药组(2mg/mL)、照射+药组(4mg/mL)、照射+药组(8mg/mL)中的表达的caspase-3蛋白浓度分别为39.74μg/μL、40.67μg/μL、40.95μg/μL,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05),而他们之间比较没有统计学意义。照射+药组(6mg/mL)中的表达的caspase-3蛋白浓度为60.01μg/μL,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01),具有剂量依赖性。透射电子显微镜观察细胞凋亡形态也支持以上结果。结论:当归、红芪超滤膜提取物联合直线加速器均能抑制SMMC-7721细胞的增殖和诱导细胞凋亡,两种方法联合后作用加强,提示当归、红芪超滤膜提取物联合直线加速器应用治疗肝癌可能会起到协同增效的作用。

当归红芪超滤膜提取物诱导小鼠骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞的实验研究

目的观察并评价当归红芪超滤膜提取物(简称中药合剂)诱导小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow derived stroma cells,BMSCs)分化为神经样细胞的效果。方法体外培养小鼠BMSCs后加入药物并分为5组:空白组、6g/L中药合剂组(简称低剂量组)、12g/L中药合剂组(简称高剂量组)及3g/L中药合剂联合0.5mmol/Lβ-巯基乙醇用药组(简称联合组)、β-巯基乙醇阳性对照组(简称对照组)。通过甲苯胺蓝染色观察各组诱导分化为神经样细胞的效果,应用免疫组织化学及免疫荧光技术检测分化后细胞所表达的神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)、巢蛋白(nestin)、神经丝蛋白(neurofilament protein,NFP)、微管结合蛋白2(microtubule-associated protein-2,MAP2)及神经胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)5种神经特异性蛋白的差异,并应用流式细胞分析技术(flow cytometry,FCM)检测各组细胞生长周期的变化。结果诱导后细胞形态发生神经样细胞改变,两个中药合剂组的形态特征性均弱于联合组和对照组;除空白组外,上述5种蛋白在各组的表达为阳性,表达程度均为对照组最高(P<0.05),联合组次之(P<0.05);经流式细胞术检测细胞增殖率比较:对照组最低(P<0.05),高、低剂量组较高(P<0.05),联合组次之(P<0.05)。结论中药合剂可较为有效地诱导小鼠BMSCs分化为神经样细胞,诱导能力虽弱于对照组,但对于分化后细胞的增殖作用明显。联合组可有效诱导BMSCs分化为神经样细胞并使细胞有较高的增殖能力,可能是用于临床研究目前较为理想的用药途径。

当归红芪超滤膜提取物调控肾脏缺氧介导的HIF⁃1α信号通路改善DKD大鼠肾脏纤维化的机制

通过当归红芪超滤膜提取物干预糖尿病肾病(diabetic kidneydisease,DKD)模型大鼠,观察DKD大鼠肾脏缺氧介导的缺氧诱导因子⁃1α(hypoxia inducible factor⁃1α,HIF⁃1α)/血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和HIF⁃1α/血小板源性生长因子(platelet⁃derived growth factor,PDGF)/血小板源性生长因子受体(platelet derived growth factor receptor,PDGFR)信号通路的表达,探讨当归红芪超滤膜提取物改善DKD大鼠肾脏纤维化的作用机制。将50只SPF级雄性Wistar大鼠适应性喂养1周后,随机分为空白组7只及造模组,造模组禁食24 h后一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)联合高糖高脂饲料喂养制备DKD模型,造模成功后,将造模组随机分为模型组,当归红芪超滤膜提取物低、中剂量组,各7只,厄贝沙坦组和当归红芪超滤膜提取物高剂量组各8只。给予药物干预12周,观察大鼠一般情况,每周检测大鼠的体质量及血糖,于灌胃第6、12周检测大鼠24 h尿蛋白(urinary protein,UP);末次给药后,检测大鼠肾功能相关指标;Masson染色观察肾组织病理变化;免疫组化法(immunohistochemistry,IHC)检测肾组织脯胺酰羟化酶2(prolyl hydroxylase domain 2,PHD2)、HIF⁃1α蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(real⁃time qPCR)检测肾组织PHD2、VEGF、PDGF、PDGFR mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肾组织HIF⁃1α、VEGF、PDGF、PDGFR蛋白的表达。结果显示,与模型组比较,各给药组大鼠血清中糖化血清蛋白(glycosylated serum protein,GSP)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)水平不同程度降低(P<0.05或P<0.01),呈剂量相关性;大鼠肾脏病理明显改善;大鼠肾脏中PHD2 mRNA表达显著上调(P<0.05或P<0.01),VEGF、PDGF、PDGFR mRNA表达显著下调(P<0.05或P<0.01);大鼠肾脏中HIF⁃1α、VEGF、PDGF、PDGFR蛋白表达水平显著降低(P<0.01);PHD2阳性细胞率表达上升(P<0.01)。综上,当归红芪超滤膜提取物能改善DKD大鼠肾脏纤维化,其机制与抑制肾脏缺氧介导的HIF⁃1α信号通路上关键蛋白的表达并减少细胞外基质(extracellular matrix,ECM)沉积有关。

熟地超滤膜提取物对氯化镉诱导骨髓间充质干细胞增殖及遗传稳定性变化的影响

目的探讨熟地超滤膜提取物对氯化镉（CdCl2）诱导骨髓间充质干细胞（bonemarrowmes—enchymalstemcells，BMSCs）增殖及遗传稳定性变化的影响。方法采用微核实验、染色体分析、流式细胞术观察熟地超滤膜提取物对化学毒性物质CdCl2诱导BMSCs增殖、细胞微核率、染色体畸变率及凋亡率的影响。结果与CdCl2组比较，不同分子量段熟地超滤膜提取物在浓度为0．8g／L对CdCl2诱导的BMSCs有明显的促进增殖作用（P〈0．05）。与对照组比较，CdCl2组细胞微核率、染色体畸变率及凋亡率均明显增高（P〈0．05）；与CdCl2组比较，不同分子量段熟地超滤膜提取物对CdCl2诱导的BMSCs微核率、染色畸变率及凋亡率均明显降低（P〈0．05），其中BMSCs微核率及染色畸变率以10000分子量以下组降低最为明显（P〈0．05），凋亡率以10000-200000分子量组下降明显（P〈0．05）。结论熟地提取物可以减少CdCl2诱导BMSCs的凋亡率，降低BMSCs的微核率和染色体畸变率。

当归红芪超滤膜提取物对阿霉素致心肌细胞凋亡的影响

目的:研究当归红芪超滤膜提取物(UFE-AH)对阿霉素所致心肌细胞凋亡的影响。方法:取新生1～2 d的Wistar乳鼠,用差速贴壁法原代提取心肌细胞,调整细胞密度1×106/mL,于37℃5%CO2培养箱中密闭培养48 h。用2.5 mg.L-1阿霉素作用于心肌细胞24 h成功建立心肌细胞凋亡模型。实验分5组:正常对照组、阿霉素组(2.5 mg.L-1)、UFE-AH低、中、高剂量干预组(阿霉素造模前2 h预先分别给予3.75,7.5,15 g.L-1当归红芪超滤膜提取物)。四氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞生长抑制率,单细胞凝胶电泳检测DNA损伤,Western blot(蛋白印迹法)检测B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平。结果:与正常组相比,阿霉素组心肌细胞生长抑制率明显增加,且头部DNA含量占总含量的百分数(HDNA%),尾部DNA含量占总含量的百分数(TDNA%),尾长(TL),尾短(TM),尾距(OTM)均明显升高,Bcl-2蛋白表达水平下降、Bax表达水平升高,均有统计学意义(P<0.01);UFE-AH干预组的心肌细胞生长抑制率明显降低,且HDNA%,TDNA%,TL,TM,OTM数值均降低,Bcl-2蛋白表达水平上调,Bax表达水平下调,有显著性差异(P<0.01)。结论:UFE-AH可减轻阿霉素对心肌细胞DNA的损伤,上调Bcl-2/Bax而抑制心肌细胞的凋亡,具有抗心肌细胞凋亡的保护作用。

当归红芪超滤膜提取物对DN大鼠FBG、TG、TC及肾组织TGF-β_1/Smad2/Smad3 mRNA表达的影响

目的观察当归红芪(1∶5)超滤膜提取物对糖尿病肾病大鼠空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)及肾组织TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达的影响,并探讨其相关机制。方法 72只雄性SPF级Wistar大鼠,随机选12只作为正常组(A组),其余60只采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)方法复制DN模型,成模后随机分为模型组(B组)、西药(厄贝沙坦)对照组(C组)、中药(当归红芪超滤膜提取物)低、中、高剂量组(D、E、F组)。连续给药8周,每周测1次FBG;第8周末处死大鼠,采血离心取血清测TG、TC;取大鼠肾组织,Masson染色观察病理形态学改变,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA表达情况。结果 B组FBG高于A组(P<0.01);给药4周后,与B组相比,E、F组FBG明显下降(P<0.05),给药8周后,D、E、F组FBG均明显下降(P<0.05或P<0.01)。与A组相比,B组TG、TC明显升高(P<0.01);与B组相比,E、F组TC降低明显(P<0.05或P<0.01),各药物组TG均明显降低(P<0.05或P<0.01);E组较C组比TG下降更明显(P<0.05)。B组大鼠TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA的表达明显高于A组(P<0.01);C、E、F组TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA的表达均低于B组(P<0.05或P<0.01)。结论当归红芪超滤膜提取物可以降低DN大鼠空腹血糖、甘油三酯、胆固醇,改善肾组织纤维化程度,下调肾组织TGF-β1、Smad2、Smad3 mRNA的表达水平,从而延缓肾纤维化进展,对DN大鼠肾脏发挥保护作用。

当归红芪超滤膜提取物对糖尿病肾病大鼠肾组织中NF-κB、TNF-α表达的影响

目的观察当归红芪超滤膜提取物对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾组织中NF-κB、TNF-α蛋白及mRNA表达的影响,探讨其干预DN的机制。方法 60只SPF级雄性Wistar大鼠,随机选取12只作为正常对照组(A组),其余48只采用一次性大剂量(60 mg·kg-1)腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合高脂高糖饲料喂养方法复制DN模型,造模成功后随机分为模型对照组(B组)、厄贝沙坦组(C组)、当归红芪超滤膜提取物低、高剂量组(D、E组)。连续给药8周后计算肾脏肥大指数,分别采用免疫组化法和RT-PCR法检测大鼠肾组织中NF-κB、TNF-α蛋白及mRNA的表达情况。结果 (1)与A组比较,B组大鼠肾脏肥大指数显著升高(P<0.05);与B组比较,C、E组肾脏肥大指数显著下降(P<0.01或P<0.05);(2)免疫组化:B组NF-κB、TNF-α阳性表达明显增多,用药后各组均有不同程度改善,E组改善程度优于D组;(3)与A组比较,B组大鼠肾组织NF-κB、TNF-α的平均光密度值显著升高(P<0.01),用药8周后,C、E组显著下降(P<0.05)且下降程度与D组比较有显著差异。(4)与A组比较,B组大鼠肾组织NF-κB、TNF-αmRNA的表达显著升高(P<0.05);用药8周后,E组显著下降(P<0.05)且下降程度与C、D组比较有显著差异(P<0.05)。结论当归红芪超滤膜提取物可以下调DN大鼠肾组织炎症因子NF-κB、TNF-α蛋白及mRNA表达并且有一定剂量依赖性,可以改善炎症状态、保护肾组织。

当归-红芪超滤膜提取物对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β_1表达的影响

目的:研究当归-红芪超滤膜提取物对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织转化生长因子-β_1(TGF-β_1),Smad信号通路的调控作用,探讨其对DN大鼠的作用及产生该作用可能的机制。方法:采用一次性大剂量(60 mg·kg-1)腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立DN大鼠模型。将DN大鼠随机分为正常组、模型组、厄贝沙坦组及当归-红芪超滤膜提取物低、中、高剂量组,之后开始灌胃给药,每天1次,8周后测空腹血糖(FBG),尿素氮(BUN),血肌酐(SCr),24 h尿蛋白;光镜观察肾组织结构变化;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠TGF-β_1,Smad2/3含量;免疫组化法检测肾组织TGF-β_1,Smad2/3蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测肾组织TGF-β_1,Smad2/3的mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠FBG,BUN,SCr,24 h尿蛋白水平明显升高,ELISA检测大鼠TGF-β_1,Smad2/3含量明显升高,肾组织病理结构异常较为明显,TGF-β_1,Smad2/3蛋白量表达明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,当归-红芪超滤膜提取物各组均不同程度降低了DN大鼠FBG,BUN,SCr,24 h尿蛋白水平(P<0.05);ELISA检测大鼠TGF-β_1,Smad2/3含量降低(P<0.05),肾组织病理结构异常得到改善,TGF-β_1,Smad2/3蛋白量表达减少(P<0.05,P<0.01),TGF-β_1,Smad2/3 mRNA表达减少(P<0.05,P<0.01)。结论:当归-红芪超滤膜提取物可改善DN大鼠肾功能病变,延缓DN慢性病理进展,其机制可能与其抑制TGF-β_1/Smad信号通路有关。

当归补血汤超滤物对大鼠心肌细胞线粒体凋亡通路的影响

目的探讨当归补血汤超滤膜提取物对大鼠心肌细胞线粒体凋亡通路的影响。方法原代培养Wistar大鼠乳鼠心肌细胞,阿霉素诱导心肌细胞凋亡。实验分正常组、阿霉素组(2.5 mg/L)、当归补血汤超滤膜提取物低、中、高剂量干预组(阿霉素造模前,预先给予含30,60,120 mg/L当归补血汤超滤膜提取物完全培养基培养2 h)。MTT法检测各组细胞存活率,荧光显微镜下各组细胞凋亡形态学观察,激光共聚焦技术测定各组心肌细胞线粒体膜电位水平,蛋白印迹法测定各组Bax,Bcl-2,Caspase-3蛋白表达水平。结果与正常组相比,阿霉素组心肌细胞存活数明显降低,可见细胞凋亡及线粒体膜电位降低;Bcl-2蛋白表达水平下降,Bax、Caspase-3表达水平升高(P<0.05);与阿霉素组比较,当归补血汤超滤膜提取物干预组的心肌细胞存活数明显升高,凋亡细胞数目减少,线粒体膜电位升高,Bax、Caspase-3表达水平下调,Bcl-2蛋白表达水平上调(P<0.05)。结论线粒体凋亡通路的激活是阿霉素诱导心肌细胞凋亡的机制之一,当归补血汤超滤膜提取物可调控该通路发挥心肌细胞保护作用。