基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱联用技术的荆莲核消方化学成分分析

基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MSE),结合UNIFI软件对荆莲核消方(JLHXF)进行化学成分解析。使用Supelco Ascentis?Express C18色谱柱(3.0 mm×50 mm,2.7μm)在乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)的流动相体系下进行梯度洗脱;利用电喷雾离子源(ESI)在正、负离子模式下进行扫描,借助UNIFI软件及相关文献对成分进行分析鉴定。通过UPLC-Q-TOF-MSE技术在正、负离子模式下采集复方的质谱数据,通过化合物的精确相对分子质量和串联质谱数据采用UNIFI软件辅助解析,结合对照品质谱信息及相关文献,共鉴定和推断出187个化学成分,其中黄酮类化合物77个、有机酸类化合物41个、萜类化合物26个、苯丙素类化合物24个、苯酞类化合物12个以及其他类化合物7个。UPLC-Q-TOF-MSE技术可快速鉴定出荆莲核消方中的化学成分,准确性较高,为该方药效物质基础研究提供了可靠依据。

基于超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱联用技术的黄英咳喘糖浆化学成分分析

采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS^(E)),结合UNIFI科学信息系统分析鉴定黄英咳喘糖浆中化学成分。使用Waters CORTECS Shield RP18 C18色谱柱(4.6 mm×100 mm,2.7μm)和乙腈(A)-0.1%甲酸水溶液(B)流动相系统进行梯度洗脱;质谱采用电喷雾(ESI)离子源,通过UPLC-Q-TOF-MS^(E)技术在正、负离子模式下采集质谱数据,将化合物精确相对分子质量和串联质谱信息通过UNIFI软件进行辅助解析,结合对照品质谱信息以及相关参考文献,共推断和鉴定出化合物93个,其中包含生物碱类9个、黄酮类43个、三萜及三萜皂苷类21个、氰苷类2个、有机酸类13个、其它类6个。UPLC-Q-TOF-MS^(E)法可快速、高效地对黄英咳喘糖浆进行全成分分析,为进一步筛选该药的药效成分、提高产品质量控制标准提供了科学依据。

基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术对牛尾菜甾体皂苷类化学成分及其质谱裂解规律的分析

目的:采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对牛尾菜中甾体皂苷类成分进行表征和鉴定,并分析其质谱裂解规律。方法:采用美国菲罗门ACE色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,在正、负离子模式下对牛尾菜提取物进行质谱检测。结果:通过离子碎片信息和文献数据的对比,共指认出53个甾体皂苷类成分,其中螺甾烷醇型31个、呋甾烷醇型7个、孕甾烷醇型15个。结论:实验结果丰富了甾体皂苷类化合物数据库,为研究牛尾菜的药效物质基础和同属其他植物的甾体皂苷成分提供了参考依据。

基于UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS技术分析藏药粗壮秦艽的化学成分

目的用超高效液相色谱-电喷雾/四级杆飞行时间串联质谱联用(UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS)技术对粗壮秦艽的主要化学成分进行定性分析。方法色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以1 mL·L^(-1)甲酸(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^(-1),柱温为40℃,进样量为1μL,质谱用电喷雾(ESI)离子源,在正、负离子模式下采集数据。结果通过分析二级高分辨质谱结合对照品数据及相关文献,共鉴定出39个化合物,包括环烯醚萜类21个、三萜类9个、黄酮类3个和其他类成分6个。结论基于UPLC的高效分离能力和MS的高灵敏检测优势,用UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS技术可快速分析粗壮秦艽中的化学成分,为粗壮秦艽化学成分的提取、分离及其药效物质基础研究提供科学依据。

厚朴超临界提取物大鼠体内外化学成分的UPLC/Q-TOF-MS分析

目的采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC/Q-TOF-MS)对厚朴超临界萃取(SFE)提取物进行大鼠体内外化学成分分析。方法用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以水(A)/乙腈(B)梯度洗脱,使用ESI离子源,负离子模式下采集数据。初步分析提取物的化学成分、给药后吸收入血成分及其代谢情况。结果厚朴SFE提取物中检测到和厚朴酚、厚朴酚、龙脑基厚朴酚等5个化学成分,其中厚朴酚原型成分吸收入血,并初步鉴定其3个代谢物。结论厚朴酚是厚朴SFE提取物在体内的直接作用物质,结合其代谢产物分析,有助于阐明厚朴SFE提取物的体内药效物质基础。

基于UPLC/Q-TOF-MS技术的毛茛生物碱类成分快速分析鉴定(英文)

应用液质联用技术UPLC/Q-TOF-MS建立一种有效快速分析鉴定毛茛生物碱类成分的方法并研究其质谱裂解规律。采用液质联用技术UPLC/Q-TOF-MS,根据毛茛生物碱类成分的一级质谱数据,二级特征裂解碎片及标准品比对鉴定毛茛生物碱类成分。共鉴定了12种生物碱类成分,并探讨了其裂解规律。首次从毛茛中分离鉴定了12种生物碱类物质,建立了一种有效的基于UPLC/Q-TOF-MS鉴定毛茛生物碱类成分的方法。

应用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析生物诱导后雷公藤悬浮细胞化学成分

利用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱连用技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)和化学计量学结合的方法,分析生物诱导后雷公藤悬浮细胞体系中化学成分的变化.分析样品相似度、层次聚类分析(HCA)和主成分分析(PCA),建立554个共有峰的质谱指纹图谱.结果表明:通过对雷公藤离体培养体系中的质谱指纹图谱分析,鉴定了104种化学成分;生物诱导后雷公藤悬浮细胞和培养液中部分化学成分质量分比显著升高,雷公藤内酯乙、山海棠酸衍生物1、TH1、雷公藤甲素衍生物2、雷酚内酯、雷公藤甲素衍生物1、雷酚新内酯质量比分别提高了7.41,6.50,6.07,5.85,3.63,1.59,1.13倍;质荷比(m/z)为224,278,678,701的未鉴定成分质量比分别提高了2.88,1.57,4.04,6.27倍.

基于UPLC-Q-TOF-MS技术快速分析裂叶独活中香豆素类成分

目的以超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱联用(UHPLC-Q-TOF/MS)技术建立裂叶独活中香豆素类化学成分的快速定性分析方法。方法采用Waters Acquity UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱;流速:0.25 mL·min^(-1);柱温:40℃;进样量:2μL。采用电喷雾离子源正离子TOF MS全扫结合IDA-MS2扫描模式收集样品质谱数据。应用PeakView软件中Xic Manager、Formula Finder等模块分析计算,并根据对照品裂解规律、相关文献和各色谱峰的二级碎片离子,鉴定裂叶独活中香豆素类化合物。结果从裂叶独活中共鉴定出34个香豆素类化合物,其中29个为该植物相关文献的首次报道。结论裂叶独活中不同类型香豆素具有独特的裂解规律。所建立的裂叶独活香豆素类化学成分定性分析的方法准确、可靠、高效,适用于香豆素类成分快速鉴定,可为裂叶独活成分及其药效物质基础研究提供参考。

黄芪及其蜜炙品的UPLC/Q-TOF-MS分析

目的采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC/Q-TOF-MS)进行黄芪及其蜜炙品的成分分析,并比较蜜炙前后主要成分的变化。方法采用ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱,以0.1%(体积分数)甲酸-乙腈-异丙醇体系梯度洗脱,使用ESI离子源,正、负离子模式下采集数据。应用Markerlynx软件进行主成分分析(principal component analysis,PCA),比较药材炮制前后成分变化。结果通过PCA分析,可以很好地区分蜜炙前后的黄芪药材,并鉴定了包括毛蕊异黄酮、芒柄花素、汉黄芪素、3,9-二-O-甲基尼森香豌豆紫檀酚在内的8种蜜炙前后质量分数变化较大的化合物。结论借助UPLC的快速分离和Q-TOF-MS测定的精确分子量信息,结合PCA模式识别方法可以有效地对黄芪药材蜜炙前后化学成分变化进行分析鉴定。

UPLC-Q-TOF-MS法分析苗药黑骨藤提取物中的化学成分

目的:建立黑骨藤提取物中化学成分的分析方法,为进一步阐明黑骨藤药效物质基础提供参考。方法:以70%乙醇为溶剂制备黑骨藤提取物。采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS)对提取物进行成分分析,色谱柱为Agilent Eclipse Plus C_(18),流动相为0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈(梯度洗脱),流速为0.25 mL/min;采用电喷雾离子源,在负离子扫描模式下检测。通过碎片离子信息、相关文献以及对照品比对,确定黑骨藤提取物中的化学成分。结果:在黑骨藤提取物中共分离出了23个化合物,并确定了9个化合物。其中,5、8、9、16、17、18、22、23号峰通过与对照品比对分别确定为5-O-咖啡酰基奎宁酸、3-O-咖啡酰基奎宁酸、4-O-咖啡酰基奎宁酸、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、杠柳毒苷、杠柳苷元;13号峰通过碎片离子和文献比对推断为(1S,3R,4R,5R)-3-{([2E)-3-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-propenoyl]oxy}-1,5-dihydroxy-4-{([2E)-3-(4-hydroxy-3,5-dimethoxyphenyl)-2-propenoyl]oxy}cyclohexanecarboxylic acid。结论:建立的UPLC-Q-TOF-MS法可以快速、高效、准确地分析黑骨藤提取物中的化学成分。

UPLC-Q-TOF-MS/MS鉴定马钱苷大鼠体内代谢产物

目的采用超高效液相色谱与串联四级杆飞行时间质谱仪联用技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)分析鉴定大鼠灌胃马钱苷后其在尿液中的代谢产物,阐明马钱苷代谢途径。方法大鼠灌胃给予马钱苷,收集给药前后的尿样,经固相萃取进行预处理,采用超高液相色谱C18色谱柱,流动相为乙腈-1%甲酸水,梯度洗脱,采用动态背景扣除(DBS)触发信息关联采集(IDA)进行MS/MS数据采集。结果经MetabolitePilot代谢物分析软件处理后,根据MS/MS给出质谱碎片信息对代谢产物进行结构推测,共鉴定马钱苷代谢物3种,并归纳了马钱苷在大鼠体内的代谢过程。结论该方法简单可靠,灵敏度高,可用于体内微量成分的分析鉴定。

基于UPLC-Q-TOF-MS的茅苍术入血成分及其抗溃疡的网络药理学机制研究

目的阐明茅苍术的入血成分及其抗胃溃疡的作用机制。方法首先,根据超高液相色谱与四级杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS)分析了大鼠体内茅苍术主要的入血性成分,其次,利用网络药理学方法进一步分析大鼠入血成分抗胃溃疡的作用机制。结果共鉴定出茅苍术中9个原型入血成分,分别是汉黄芩苷、苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅲ、β-桉叶醇、苍术素、棕榈酸、酪氨酸。全体成分共有66个靶点,疾病靶点1203个,茅苍术成分-胃溃疡交集靶点共20个,包括肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-6(IL-6)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、内皮型一氧化氮合酶(NOS3)、白细胞介素-10(IL-10)等;GO和KEGG富集分析提示交集靶点主要参与AGE-RAGE、P13K-Akt等信号通路;分子对接显示苍术酮、白术内酯Ⅰ、苍术素与肿瘤坏死因子、白细胞介素-6、血管内皮生长因子A、内皮型一氧化氮合酶、白细胞介素-10有较强的结合能力。结论茅苍术中共有9个入血成分,其中苍术酮、白术内酯Ⅰ、苍术素可能通过作用于肿瘤坏死因子、白细胞介素-6等靶点基因进而对P13K-Akt等信号通路产生调控作用,最终发挥治疗胃溃疡的作用。

UPLC-Q-TOF-MS/MS分析苗药云实皮的化学成分

目的:建立全面、快速分析苗药云实皮化学成分的方法,为该药质量控制和药效物质基础研究提供参考。方法:采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)。色谱柱为Agilent SB-C18,流动相为0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液(梯度洗脱),流速为0.25 mL/min,柱温为30℃,进样量为2μL;电喷雾离子源,正、负离子模式全程扫描,扫描范围为m/z 50~1500,毛细管电压为4.5 kV,雾化气(氮气)压力为1.2 Bar,去溶剂气为氮气,去溶剂气流速为8 L/min,去溶剂气温度为200℃。使用Data Analysis 4.2软件分析各成分峰的碎片离子信息,结合相关文献和对照品质谱图指认云实皮的化学成分。结果:在正离子模式下,共确定并指认9个化合物,峰1、2、3、4、5、6、7、8、9分别为儿茶素、原苏木素B、表儿茶素、没食子酸乙酯、槲皮素、木犀草素、3-去氧苏木查耳酮、异甘草素、亚油酸;在负离子模式下,共确定21个色谱峰,并指认了其中13个,峰3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、15、21分别为儿茶素、短叶苏木酚酸、原苏木素B、表儿茶素、没食子酸乙酯、表儿茶素没食子酸酯、槲皮素、白藜芦醇、苏木查耳酮、木犀草素、3-去氧苏木查耳酮、异甘草素、亚油酸。结论:成功建立了可分析云实皮化学成分的UPLC-Q-TOF-MS/MS法。

基于UPLC-Q-TOF-MS的α-别隐品碱在大鼠体内的代谢产物分析

目的分析α-别隐品碱经灌胃给药后在大鼠体内的代谢产物,阐明其在大鼠体内的代谢途径。方法大鼠灌胃给药α-别隐品碱20 mg·kg-1后,分别收集血浆、尿液及粪便样品,采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS)技术进行分析,获得各样品中代谢产物的保留时间、精确分子量、二级碎片信息。利用MetabolitePilotTM代谢软件进行预测,预测结果结合原型化合物的质谱裂解规律进一步进行裂解行为的分析,鉴定α-别隐品碱在大鼠体内的代谢产物。结果共鉴定出25个代谢产物,Ⅰ相代谢产物主要为α-别隐品碱甲氧基去甲基化、亚甲二氧基开环及开环后去甲基、氧化产物,Ⅱ相代谢产物主要为Ⅰ相代谢产物的葡萄糖醛酸、硫酸结合产物及少量葡萄糖基化产物。结论采用UPLC-Q-TOF-MS结合MetabolitePilotTM软件及化合物的质谱裂解规律可实现α-别隐品碱代谢产物的快速分析,为进一步研究其药效物质基础提供参考。

UHPLC-Q-TOF-MS技术在中药及中药复方制剂研究中的应用

超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱串联(UPLC-Q-TOF-MS)技术特点是效率高、灵敏度高、分辨率高,也能获取一些信息,比如离子碎片、化合物的相对分子质量、元素组成等,能迅速确定出相关化合物结构。中药尤其复方制剂是极端复杂的体系,存在多靶点、多组分、多途径的协同效应,这些特征给科研工作者的研究带来了巨大挑战。这项技术使得中药复杂体系的深入研究成为可能。本文对近年UPLC-Q-TOF-MS技术在代谢组学、测定化学成分、血清药物化学、入血成分领域中的应用进行概述,并指出其在中药及中药复方制剂领域中的优势和未来的发展方向。

UPLC-Q-TOF-MS法鉴定消肿止痛液有效部位的化学成分

目的:分析消肿止痛液有效部位的化学成分,为阐明其药效物质基础及将其二次开发为软膏制剂提供依据。方法:采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS)法对消肿止痛液有效部位(经D101大孔树脂分离得到的40%乙醇洗脱部位)进行成分分析。色谱条件为采用Hypersil GOLD a Q C18色谱柱,以0.1%甲酸乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL/min,进样量4μL,柱温30℃;质谱条件为采用电喷雾离子源(ESI)在正/负离子扫描模式(ESI+/ESI-)下进行检测,扫描范围100~2000 Da,碰撞能量45/-45 e V,扩展碰撞器能量10/15 e V。获得图谱后收集化合物的精确分子量、保留时间和多级碎片离子信息,通过与对照品质谱信息及参考文献比对进行化学成分鉴定。结果:共鉴定出48个化合物,在ESI+、ESI-检测模式下分别鉴定出9、39个。其中,酚酸类成分10个、苯丙素类成分8个、蒽醌类成分9个、黄酮类成分3个、生物碱类成分7个、鞣质类成分5个、其他类成分6个。结论:UPLC-Q-TOF-MS法可快速、高效、准确地鉴定消肿止痛液有效部位的化学成分,该部位的主要化学成分为酚酸类、苯丙素类、蒽醌类、生物碱类和鞣质类。

基于UHPLC-Q-TOF-MS/MS技术的中药荆芥穗化学成分表征与鉴定

应用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(UHPLC-Q-TOF-MS/MS)对荆芥穗中的化学成分进行定性分析。采用Agilent poroshell 120 SB-C_(18)色谱柱(3.0 mm×100 mm,2.7μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL·min^(-1),柱温45℃,电喷雾离子源,在正、负离子模式下扫描采集数据,通过对照品比对及PeakView软件分析鉴定化合物。从荆芥穗中共鉴定出97个化合物,其中黄酮类化合物28个,酚酸类化合物23个,脂肪酸类化合物23个,萜类化合物15个以及其他类化合物8个。该研究建立的UHPLC-Q-TOF-MS/MS能快速、准确、较全面地鉴定荆芥穗药材的化学成分,为荆芥穗药效物质基础研究提供参考依据。

基于UPLC-Q-TOF MS技术的血栓心脉宁片成分分析

为全面了解中药大品种血栓心脉宁片(XXT)化学成分,采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱联用技术(UPLC-Q-TOFMS)测定该复方制剂的小分子成分(100~1500u),通过UNIFI天然产物分析平台,比对各成分的精确分子质量、保留时间及质谱碎片离子信息,分析鉴定各化合物结构。结果表明,在XXT中共鉴定出187种化学成分,包括三萜皂苷类、菲醌类、蟾蜍甾二烯类和甾体类及其他结构类型的化合物。血栓心脉宁片富含小分子化学成分且结构类型多样,是其发挥抗血瘀活性及多靶点作用机制的物质基础。该研究可为阐明XXT的药效物质基础和提升质量控制标准提供数据参考。

应用UPLC-QTOF-MS/MS技术测定肝细胞癌患者血清代谢组

目的通过比较肝细胞癌(HCC)和肝硬化(LC)患者血清代谢物,研究HCC代谢谱变化,为寻找HCC早期诊断标志物及治疗新靶点和策略提供依据。方法收集HCC和LC患者血清各50例,应用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-QTOF-MS/MS)对血清代谢物进行鉴定和定量。液相色谱分离采用反相色谱(RPLC)和亲水色谱(HILIC)2种模式,质谱采集包括正、负2种离子化方式。应用Progenesis QI软件进行数据处理,应用EZinfo软件进行主成分分析和正交偏最小二乘判别分析等多元统计分析并筛选差异代谢物。代谢物鉴定通过检索人代谢组数据库(HMDB)和Metlin数据库实现。应用MetaboAnalyst 4.0对差异代谢物进行代谢通路分析。结果应用UPLC-QTOF-MS/MS技术,共检测到87610个特征代谢峰,鉴定出7848种代谢物。通过P<0.05,变量重要性投影指标(VIP)值≥1及HCC与LC比较的差异倍数≥1.5或≤0.67等3个条件筛选出差异代谢物438个,主要包括磷脂、胆汁酸、游离脂肪酸、小肽和氨基酸等,涉及12个代谢通路的变化。结论与LC患者比较,HCC患者的血清代谢组发生显著变化,共有438种差异代谢物参与12个代谢通路的变化,这有助于发现早期诊断标志物和药物靶标。其中50个差异代谢物具有较高的临床诊断价值,值得进一步验证。另外,本研究近8000个代谢物的鉴定表明,所采用的RPLC结合HILIC分离的UPLC-QTOF-MS/MS技术显著提高了代谢物的鉴定覆盖率,可广泛应用于多领域的代谢组学研究。

基于UPLC/Q-TOF MS对故宫纺织品文物中红色染料成分的分析鉴定

对清代红色纺织品的染料进行提取,通过超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(UPLC/Q-TOF MS)对纺织品染料提取液进行分离检测,将其提取液和中国古代常用于染红的植物提取液的指纹图谱进行对比分析,发现该红色纺织品由苏木经过铝盐媒染而成。随后利用该方法对古代常用红色植物染料(红花、苏木、茜草)中的主要色素成分进行分析鉴定,从中分离出红花红色素、氧化苏木素、茜素等多种色素成分,为古代红色纺织品染料来源的判断提供科学依据。