超高效液相色谱柱后衍生装置测定饮用水中的草甘膦

目的建立饮用水中草甘膦的超高效液相色谱柱后衍生方法。方法在700 m L水样中分批次加入盐酸进行浓缩,经阳离子交换柱后与衍生剂邻苯二醛、β-巯基乙醇反应,利用荧光检测器检测。以保留时间定性,峰面积定量。结果草甘膦在5~1000 ng范围内呈线性相关。方法精密度良好(RSD<5%,n=6),回收率在80%~100%,检出限为0.1μg/m L(S/N=3)。结论本方法特异性强,灵敏度高,适合于生活饮用水中的草甘膦检测。

柱前衍生化-超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法测定人血清中11种雌激素的方法学研究

目的建立一种快速、高效、灵敏度高、稳定可靠的柱前衍生化-超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法,检测人血清中包括雌酮(E1)、雌二醇(E2)、雌三醇(E3)、2-羟基雌酮(2-OHE1)、16α-羟基雌酮(16α-OHE1)等在内的11种超微量雌激素的浓度。方法采用叔丁基甲醚液-液萃取法,并通过丹磺酰氯对萃取后样品进行衍生化处理,以同位素标记的雌酮-13C作为内标,采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),0.1%甲酸水-乙腈为流动相,以0.3 mL·min^-1流速等度洗脱,柱温40℃,进样量5μL,在电喷雾离子源(ESI)正离子模式下扫描,多重反应监测(MRM)下测定血清中各类雌激素浓度,分析时间5 min。结果丹磺酰氯衍生化法可大幅度提高各种雌激素在ESI源下的离子化效率,血清中11种雌激素的线性范围为20~2000 pg·mL^-1,定量下限均到达20 pg·mL^-1,提取回收率均可达到70%,批内、批间精密度与准确度均在15%以内,血清样本室温放置24 h、反复冻融3次、-4℃进样盘放置24 h、70℃放置1个月均稳定,满足生物样品测定要求。结论该方法分析时间短、灵敏度高、稳定性好、专属性强,可用于临床血清样本中雌激素代谢网络的定量分析。

超高效液相色谱的发展及在分析领域的应用

近年来,超高效液相色谱凭借其超快速,超灵敏等优势越来越受到人们的关注。人们在对超高效液相色谱的原理逐渐完善的同时,对色谱柱填料方面的研究也取得了一系列的突破。随着超高效液相色谱技术的发展以及与质谱等仪器的联用技术的出现,这项技术在食品分析、环境分析、生化分析及药物分析等多个领域显示出重大的理论意义和实际应用价值,具有广阔的发展前景。本文对超高效液相色谱柱的发展及其在多个分析领域的应用进展进行了综述。

高效薄层色谱、柱前衍生-超高效液相色谱和离子色谱分析疏血通注射液中游离氨基酸的比较

动物源性中药注射液富含游离氨基酸,它们参与多肽的体内合成并发挥功效。绝大多数中药注射液国家药品标准和相关文献仅控制或研究多肽水解后的总氨基酸成分,没有针对游离氨基酸进行定性定量分析。本文以疏血通注射液为例,比较了高效薄层色谱(HPTLC)、柱前衍生-超高效液相色谱(UPLC)和离子色谱在注射液游离氨基酸分析的适用性,结果显示HPTLC和柱前衍生-UPLC适用于疏血通注射液中游离氨基酸的分析,而离子色谱分析结果存在较大干扰,不适用于分析要求。采用柱前衍生-UPLC对疏血通注射液中游离氨基酸进行定量分析,共检测出24种氨基酸,其中8种氨基酸是首次在疏血通注射液中被检出,方法重现性和准确性良好,最低检出限均为pmol·m L^(-1)水平。

雌激素及其代谢产物的UPLC-MS/MS法检测在绝经激素治疗女性中的应用研究

目的研究绝经激素治疗(MHT)女性雌激素及其代谢产物,指导临床精准治疗。方法选取17例绝经综合征妇女,根据治疗方法不同分为三组,其中口服雌二醇片/雌二醇地屈孕酮片(1/10 mg)组(A组)5例,口服雌二醇片/雌二醇地屈孕酮片(2/10 mg)组(B组)5例,对照组(未用药)(C组)7例。通过柱前衍生化-超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)法检测绝经女性血清雌激素及其代谢产物水平,分析外源性雌激素补充后血清雌激素及其代谢产物的差异性。结果在接受雌二醇片/雌二醇地屈孕酮片治疗后绝经女性血清中可以检测到22种雌激素及其代谢产物,其中发挥生物学效应的雌酮(E_(1))、雌二醇(E_(2))浓度明显高于其C2、C4、C16-轻基化游离型代谢产物;轻基化代谢产物主要以葡萄糖昔酸/硫酸酯复合物(-G/S)的形式存在,以2-径基雌酮-葡萄糖昔酸/硫酸酯复合物(2-OHE_(1)-G/S)、16α-释基雌酮-葡萄糖昔酸/硫酸酯复合物(16α-OHE_(1)-G/S)为主;甲基化代谢产物主要以2-甲氧基雌酮(2-MeOE_(1))、2-MeOE_(1)-G/S为主。与未接受MHT的绝经女性相比,雌二醇片/雌二醇地屈孕酮片治疗后女性血清中雌激素代谢产物新增测到8种:2-甲氧基雌二醇(2-MeOE_(2)),2-MeOE_(2)-G/S,4-甲氧基雌酮(4-MeOE_(1))、4-MeOE_(1)-G/S、E_(3)、16α-OHE_(1)、16-表雌三醇-葡萄糖昔酸/硫酸酯复合物(16-epiE_(3)-G/S)、17-环雌三醇-葡萄糖昔酸/硫酸酯复合物(17-epiE_(3)-G/S),大部分以结合型或甲基化代谢物存在。结论雌激素及其代谢产物的UPLC-MS/MS法检测可以为MHT的个体化用药方案、风险评估提供数据支持。

柱前衍生化UHPLC-Q-Orbitrap HRMS法测定乙酰唑胺及其胶囊剂中肼的含量

目的:建立柱前衍生化超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法(UHPLC-QOrbitrap HRMS)测定乙酰唑胺及其胶囊剂中肼的含量。方法:以苯甲醛为衍生化试剂,使用NanoChrom ChromCoreTM 120 C18(2.1 mm×150 mm,5μm)色谱柱,以5 mmol·L^-1甲酸铵水溶液(含0.1%甲酸)-乙腈(30∶70)为流动相,流速为0.4 mL·min^-1,正离子(ESI+)模式下平行反应监测(PRM)方式检测。结果:所建方法的专属性、重复性、稳定性均良好。肼的质量浓度在24.6~184.8 ng·mL^-1范围内线性关系良好(r=0.9997),原料的平均回收率为93.8%,胶囊剂的平均回收率为94.3%,9批次样品均未检出肼。结论:该方法简便快捷,准确可靠,适用于乙酰唑胺及其胶囊剂中肼的快速检测,也可为其他药物中肼类杂质的检测提供参考。

氯消毒对水中草甘膦的降解性能研究

目的分析草甘膦在经过氯消毒的饮用水中的分解情况,为农村及边远地区饮用水安全提供科学依据。方法配制总体积相同、草甘膦含量相同但余氯含量不同的系列混合溶液,溶液中草甘膦经超高效液相色谱柱富集分离后,与衍生试剂反应生成强荧光物质,以荧光检测器检测定量,经高效液相串联质谱联用仪进行确认。结果溶液中草甘膦与余氯经过1 h的反应,两者的含量为稳定值,表明草甘膦与余氯在1 h内已经完全反应达到平衡状态;随着余氯浓度的增大,草甘膦的含量逐渐减少直至全部分解,当溶液中余氯浓度大于1.3μg/ml时,溶液中草甘膦检测结果为未检出,经过高效液相色谱-串联质谱联用仪的确认,检测结果具有一致性。结论饮用水中余氯对草甘膦的分解有较大影响,农村及边远地区饮用水通过氯消毒可降低草甘膦对人体健康产生的危害。