高效液相色谱双波长切换法测定石韦配方颗粒中8种有效成分

建立高效液相色谱双波长切换法同时测定石韦配方颗粒中原儿茶酸、咖啡酸、绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C 8种成分含量。采用Waters Atlantis T3-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%(体积分数)磷酸溶液作为流动相梯度洗脱,流量为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为260 nm和330 nm,进样体积为10μL。8种成分在各自质量浓度范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数均为0.9999,方法检出限为16.45~89.15μg/L,加标平均回收率为95.76%~99.86%,测定结果的相对标准偏差为0.07%~0.44%(n=6)。该方法操作简单、高效,能同时检测石韦配方颗粒中8种成分的含量,可用于石韦配方颗粒样品中的含量测定及产品质量监控。

超高效液相色谱法双波长法同时测定二妙丸中5种成分的含量

目的建立二妙丸中盐酸小檗碱、盐酸黄柏碱、盐酸巴马汀、木兰花碱及苍术素等5种成分的含量测定方法。方法采用超高效液相色谱法,色谱柱:Waters BEH(2.1 mm×100 mm,1.7μm),乙腈-0.1%磷酸(每100 m L加十二烷基硫酸钠0.1 g)为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 m L·min^(-1),盐酸黄柏碱、木兰花碱、盐酸小檗碱、巴马汀检测波长为280 nm;苍术素检测波长为340 nm;柱温:30℃。结果盐酸小檗碱、黄柏碱、巴马汀、木兰花碱及苍术素5种成分在一定范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系;精密度,稳定性,重现性等均符合方法学要求;平均回收率在96.8%~99.3%之间,RSD均小于2.8%。结论建立的方法简便快捷,准确度高,重现性好,可为二妙丸的质量控制提供依据。

超高效液相色谱-多元统计分析法评价蜂胶提取物质量

目的建立超高效液相色谱法(ultra performance liquid chromatography,UPLC)快速测定蜂胶提取物中的14种化学成分,结合多元统计分析方法对不同厂家的蜂胶提取物质量进行综合评价。方法收集来自不同厂家的17批蜂胶提取物样品,采用UPLC采集色谱图,甲醇-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,同时测定咖啡酸、p-香豆酸、阿魏酸、异阿魏酸、3,4-二甲氧基肉桂酸、咖啡酸苯乙酯、阿替匹林C、槲皮素、山奈素、芹菜素、异鼠李素、乔松素、白杨素、高良姜素的含量,运用统计学软件进行主成分分析(principal component analysis,PCA)、聚类分析(clustering analysis,CA)、偏最小二乘-判别分析(partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA),筛选分析质量差异标志物。通过熵权法计算各指标权重,将结果应用于优劣解距离法(technique for order preference by similarity to ideal solution,TOPSIS)和秩和比法(rank sum ratio,RSR)构建综合评价模型,评价不同批次的蜂胶提取物质量优劣。结果14个指标成分在各自的浓度范围内线性关系良好(r≥0.9992),平均加样回收率是96.37%~102.21%,相对标准偏差小于2%。化学计量学结果表明17批样品聚为4类,同一个厂家的样品聚为一类,不同厂家的样品存在明显差异,3,4-二甲氧基肉桂酸、异阿魏酸、槲皮素、高良姜素、阿替匹林C、咖啡酸苯乙酯可能是影响厂家质量差异的潜在标志物。通过熵权-TOPSIS、熵权-RSR以及两者相结合的方式构建的综合质量评价模型,对不同批次蜂胶提取物的质量优劣排序结果较为一致。结论基于UPLC的多指标测定方法准确便捷,结合PCA、CA、PLS-DA和TOPSIS-RSR建立的评价模式能够有效分析不同厂家的差异性,为蜂胶提取物的整体质量评价提供参考。

双波长高效液相色谱法同时测定祛白颗粒中二苯乙烯苷、阿魏酸及丹皮酚的含量

目的:建立双波长高效液相色谱切换法同时测定祛白颗粒中定量指标二苯乙烯苷、阿魏酸及丹皮酚含量的方法。方法:采用双波长高效液相色谱法,色谱柱:ODS(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇:0.1%磷酸为流动相进行梯度洗脱,流速:1.0 ml·min^(-1);柱温:35℃,进样体积:10μl,检测波长:丹皮酚为274 nm、阿魏酸和二苯乙烯苷为320 nm。结果:3种有效成分的线性范围分别为1.56~156.00μg·ml^(-1)(r_(二苯乙烯苷)=0.999 8)、1.00~100.0μg·ml^(-1)(r_(阿魏酸)=0.999 8),1.61~161.00μg·ml^(-1)(r_(丹皮酚)=0.999 7);平均加样回收率100.33%~100.76%,RSD均小于2%(n=6)。结论:该含量测定方法简便易行、稳定可靠、专属性强,可用于祛白颗粒的质量控制。

超高效液相色谱法测定果蔬中4种双酰肼类农药残留

建立同时测定果蔬中抑食肼、甲氧虫酰肼、环虫酰肼、虫酰肼4种双酰肼类农药残留的超高效液相色谱法。方法用含1%氨水的甲醇溶液对样品进行提取,提取液经过乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)和十八烷基硅烷键合相(C18)基质分散净化后,采用Agilent RRHD SB-C18柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm)分离,Agilent 1290 Infinity超高效液相色谱仪DAD检测器进行检测。可在4 min内完成对4种双酰肼类农药的检测,且在0.05~10μg/mL范围内具有良好的线性关系,相关系数R在0.9986~0.9998之间,方法定量为12.94~17.32μg/kg,方法检出限为3.882~5.196μg/kg。在0.05~2.5 mg/kg范围内,平均加标回收率为72.4%~100.4%,相对标准偏差为2.1%~6.1%。该方法灵敏度高、选择性好、操作简单,适用于果蔬中4种双酰肼类农药残留的同时快速分析。

酒大黄(唐古特大黄)配方颗粒超高效液相色谱指纹图谱及化学模式识别研究

目的为酒大黄(唐古特大黄)配方颗粒的质量评价提供参考。方法采用超高效液相色谱(UPLC)法,色谱柱为CORTECS UPLC T3柱(100 mm×2.1 mm,1.6μm),流动相为甲醇-0.05%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为0.25 mL/min,检测波长为265 nm,柱温为35℃,进样量为1μL。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)建立21批样品的UPLC指纹图谱,并进行相似度评价。采用聚类分析(CA)法、主成分分析(PCA)法、正交偏最小二乘-判别分析(OPLS-DA)法评价样品质量,并筛查标志性成分。结果共标定并指认出18个共有峰。21批样品的指纹图谱相似度均大于0.950,3种分析方法均将样品分为3类,OPLS-DA法分析显示,异莲花掌苷、白藜芦醇-4'-O-β-D-(6''-O-没食子酰)葡萄糖苷、儿茶素、大黄酚、没食子酸、番泻苷A、莲花掌苷和大黄酚-1-O-β-D-葡萄糖苷为制剂的标志性成分。结论该方法简单可行,可为酒大黄(唐古特大黄)配方颗粒的质量评价提供参考。

双波长高效液相色谱法同时测定对二甲苯及其氧化产物

采用双波长高效液相色谱法同时测定对二甲苯及其氧化产物的含量。通过二极管阵列检测器进行光谱扫描,选择在210nm下检测对甲基苯甲醇和对二甲苯,在254nm检测其余物质。优化了流动相及其梯度洗脱程序,将流动相乙腈比例降至20%~30%,各色谱峰能实现较好的分离。采用液相色谱法和气相色谱-质谱法研究了溶剂对对羧基苯甲醛和对甲基苯甲醛的影响。对羧基苯甲醛和对甲基苯甲醛可与溶剂甲醇反应生成缩醛。方法的检出限(3S/N)为0.07~0.8mg·L-1。各物质的回收率在99.2%~100%之间,相对标准偏差(n=6)小于2.5%。

双波长高效液相色谱法同时测定蓝芩口服液中5种化学成分的含量

目的建立同时测定蓝芩口服液中5种化学成分(绿原酸、栀子苷、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素)含量的高效液相色谱方法。方法采用Agela venusil MP C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以0.1%甲酸甲醇溶液-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),绿原酸和栀子苷的检测波长为240 nm,黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的检测波长为275 nm,柱温30℃,进样量20μL。结果 5个成分在考察的浓度范围内,浓度与峰面积之间呈良好的线性关系(r> 0.9993);回收率(n=3)均在97.0%～102.0%,RSD均小于2.2%。结论本方法简便快速,精密度高,重复性好,可用于蓝芩口服液的质量控制。

双波长HPLC法同时测定消炎灵胶囊中四种成分的含量

目的:建立双波长HPLC法同时测定消炎灵胶囊中苦玄参苷Ⅰ_(A)、苦玄参苷Ⅰ_(B)、甘草苷、甘草酸含量,对市售消炎灵胶囊中苦玄参和甘草质量进行研究与评价。方法:使用HPLC,选择Waters Xselect C_(18)色谱柱,以乙腈为流动相A,0.1%磷酸溶液为流动相B进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长237 nm(甘草苷、甘草酸)、264 nm(苦玄参苷Ⅰ_(A)、苦玄参苷Ⅰ_(B))。结果:65批消炎灵胶囊4种成分线性关系良好(r=0.9998~1.0000),平均加样回收率为97.6%~98.6%(RSD值均小于1%)。部分企业消炎灵胶囊不同批次间4种成分含量存在较大差异,说明各批次间均一性较差。提示各生产企业加强对药材质量控制。结论:该方法简单快捷,可同时测定4个成分含量,并具有良好精密度、重复性和稳定性,为消炎灵胶囊中苦玄参苷Ⅰ_(A)、苦玄参苷Ⅰ_(B)、甘草苷、甘草酸质量评价提供参考。

双波长高效液相色谱法测定米豆腐中4种防腐剂

目的建立双波长高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)同时测定米豆腐中苯甲酸、山梨酸、丙酸、脱氢乙酸的分析方法。方法在碱性条件下提取4种目标物,加蛋白沉淀试剂,沉淀大米中的蛋白质,分离样品溶液后再酸化,用双波长高效液相色谱法同时检测4种防腐剂。结果 4种组分在1.00～100μg/mL范围内线性关系良好,相关系数均在0.9991～0.9996(n=6),平均加标回收率在86.0%～95.2%(n=3)。结论该方法同时测定4种防腐剂,前处理简单、快速,定量准确,灵敏度高,可用于米豆腐的质量控制。

双波长高效液相色谱法同时测定风湿安泰片中柚皮苷、淫羊藿苷含量

目的建立同时测定风湿安泰片中柚皮苷、淫羊藿苷含量的高效液相色谱法。方法采用Agilent Extend C18色谱柱,流动相为乙腈-水梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,柱温为30℃,柚皮苷和淫羊藿苷检测波长分别为283,270 nm。结果柚皮苷、淫羊藿苷进样量分别在0.148 0-1.850 0μg,0.432 0-5.400μg范围内与峰面积积分值线性关系良好,r=0.999 5,1.000 0;平均回收率分别为97.38%,97.43%,RSD分别为0.84%,0.74%（n=6）。结论该方法简便、准确、灵敏、重复性好,可作为风湿安泰片中柚皮苷、淫羊藿苷的质量控制方法。

双波长高效液相色谱法同时检测环孢素A及伏立康唑血药浓度

目的建立快速、同时测定人血中环孢素A及伏立康唑血药浓度的方法。方法采用双波长高效液相色谱(HPLC)法,色谱柱为Diamonsil RP-C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.01 mol/L醋酸铵洗脱,检测波长环孢素A为215 nm,伏立康唑为256 nm,流速为1 mL/min。结果伏立康唑及环孢素A保留时间分别为5.32 min和6.48 min,血药浓度线性范围分别为30～1 500 ng/mL和200～10 000 ng/mL,准确度均在95.0%以上;日内、日间精密度的RSD均小于15%(n=5)。结论该方法灵敏、稳定,结果准确、可靠,可用于同时测定环孢素A及伏立康唑的血药浓度。

高效液相色谱双波长检测法测定维C银翘片中4种组分的含量

建立了高效液相色谱测定维C银翘片中维生素C、对乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏和绿原酸4种组分含量的方法。研究优化了样品提取的溶剂与超声提取条件、色谱分离条件和检测波长等,采用了SinochromODS-BP(4.6mm×200mm,5μm)色谱柱,以0.05mol/LKH2PO4(pH3.0,含1%三乙胺)-乙腈(75:25,v/v)为流动相,双检测波长260nm和326nm等分离检测条件。结果表明,维生素C、对乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏和绿原酸的测定线性范围均比较宽,方法平均回收率大于99.4%,相对标准偏差(RSD)小于1.8%(n=5),而且测定方法快速、简便、准确,非常适合维C银翘片类药物的质量控制。

超高效液相色谱法测定稳定性肥料中双氰胺含量的不确定度评定

根据行业标准《肥料增效剂双氰胺含量的测定》(NY/T 2877—2015),采用超高效液相色谱法测定稳定性肥料中双氰胺的含量,对测定过程中的不确定度来源进行了分析,主要为标准溶液配制、标准曲线拟合、样品制备、样品测量重复性等4个方面。按《测定不确定度评定与表示》(JJF 1059.1—2012)的规定进行不确定度计算,双氰胺含量的测量不确定度来源主要为标准溶液配制与标准曲线拟合。稳定性肥料中双氰胺的合成标准不确定度为0.0024%,扩展不确定度为0.005%,测定结果为0.168%±0.005%(k=2)。

高效液相色谱法测定刺五加超临界提取物中异嗪皮啶的含量

用高效液相色谱法在线检测刺五加超临界提取物中异嗪皮啶的含量 ,采用ODS色谱柱 ,检测波长为 345nm ,流动相为乙腈 /超纯水 (v/v) =2 /8,异嗪皮啶加样回收率1 0 0 .8% ,RSD为 2 .0 % ,该方法简便 ,结果准确可靠。

超高效液相色谱法同时测定肿节风中6个成分的含量

建立了同时测定肿节风中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、迷迭香酸、异嗪皮啶6个成分含量的超高效液相色谱方法。采用Waters Acquity UPLC BEH C_(18)柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm)分离,以乙腈-水(各含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^(-1),检测波长330 nm,柱温35℃;以异嗪皮啶为参照物,计算其与其余5种目标物的相对校正因子,并考察了不同色谱仪、色谱柱、流动相、流速、柱温对相对校正因子重现性的影响;通过相对校正因子计算各成分的含量,实现一测多评,同时采用外标法测定肿节风中各成分的量,并对一测多评计算值与外标法实测值进行配对t检验。肿节风中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、迷迭香酸、异嗪皮啶分别在0.522 0~26.09,1.482~74.13,0.591 0~29.49,0.632 5~31.29,2.612~130.5,0.970 4~48.73μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(r≥0.999 7),仪器精密度、方法重复性、样品稳定性的相对标准偏差(RSD)均不大于1.9%,平均加标回收率为98.6%~101.5%,RSD(n=6)不大于1.9%。所建立的相对校正因子重现性良好,外标法实测值与一测多评法计算值无显著性差异(P>0.05),均可用于肿节风中5个咖啡酰类和1个香豆素类成分的同时定量测定。

高效液相色谱-双波长法测定黄精中5种活性化学成分的含量

提出了高效液相色谱-双波长法同时测定不同生长期的黄精中腺苷、人参皂苷Rb1、β-谷甾醇、香草酸和甘草素等5种活性化学成分含量的方法。样品5.000 0g经甲醇(70+30)溶液40mL超声提取30min,提取液以Diamonsil钻石C_(18)色谱柱为固定相,以0.1%(体积分数)甲酸溶液和0.1%(体积分数)甲酸-乙腈溶液的混合液为流动相进行梯度洗脱,双波长检测(λ_1=252nm,λ_2=280nm)。在优化的试验条件下,5种活性化学成分的质量浓度在0.5~100mg·L^(-1)范围内与其峰面积呈线性关系,检出限(3S/N)为0.36~0.47mg·kg^(-1)。按标准加入法进行回收试验,回收率在96.0%~101%之间,其相对标准偏差(n=6)均小于3.0%。

超高效液相色谱-质谱联用法及高效液相色谱法在人工虫草菌丝体中虫草素筛查及含量测定中的应用

目的建立超高效液相色谱-质谱联用法(ultra performance liquid chromatography-mass spectrometry,UPLC-MS)及高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)对人工虫草菌丝体中虫草素进行快速筛查及定量测定分析方法。方法样品经水-甲醇(85:15,V:V)提取;超高效液相色谱-质谱联用法进行定性筛查,0.3%甲酸水溶液-甲醇梯度洗脱,正离子多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)模式扫描;高效液相色谱法进行定量测定,水-甲醇(85:15,V:V)等度洗脱后利用紫外检测器检测。结果确定252.0/136.0及252.0/69.0 2对离子对用于MRM定性分析,定性准确性高;定量测定方法中,虫草素在167~1337μg/mL浓度范围内线性关系良好(r^2=0.9997);最低定量限为2.64μg/g;3个不同浓度加标回收率为98.1%~101.0%,相对标准偏差为0.06%~1.24%;精密度、重复性良好。结论该研究结合了UPLC-MS和HPLC各自的分析优势,快速、高效、准确地对人工虫草菌丝体中虫草素进行定性和定量分析,提高了工作效率,大大缩短了分析时间,在样品量较大及探究人工菌丝体培育条件方面具有优势。

超高效液相色谱法测定三七中人参皂苷Rg_1、人参皂苷Rb_1和三七皂苷R_1的含量

目的建立超高效液相色谱(UPLC)法测定三七中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1的含量。方法采用ACQUITY BEH C18(2.1 mm×50 mm,1.7μm)色谱柱;流动相为乙腈-水,梯度洗脱;流速为0.4 mL.min-1;检测波长为203 nm;柱温为35℃;进样体积为2μL。结果三七中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1分别在0.116 8～1.168μg、0.123 6～1.236μg、0.030 0～0.300μg范围内与相应峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率分别为100.1%、99.3%、99.9%,RSD值分别为0.4%、0.6%、1.0%(n=6)。结论较之HPLC法,UPLC法在不影响分离效果的情况下可大大提高三七中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的分析速度,改善分析效果;同时可减少溶剂的消耗。UPLC法可作为替代传统HPLC法的一种更为方便、快捷、可靠的方法。

二极管阵列检测高效液相色谱重叠峰的双波长分析方法

把光度分析的双波长法应用于二极管阵列检测高效液相色谱重叠峰的数据处理。对于色谱峰严重重叠的双组分，只要它们的紫外可见吸收光谱有差异，就可通过计算两个波长下的峰面积（其中一个组分在这两波长时的峰面积之比为常数ｋ，并通过计算另一个组分在ｋ比例系数下的两波长峰面积差）进行定量测定。检测了混合硝基苯类化合物。