超高效液相色谱-串联四级杆飞行时间质谱法快速筛查尿液中58种毒品及滥用药物

目的建立超高效液相色谱-串联四级杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF/MSE)快速筛查人体尿液中58种毒品及滥用药物的方法。方法样品经甲醇蛋白沉淀法进行前处理。目标物经ACQUITY UPLC HSS C18色谱柱分离,以0.1%甲酸-乙腈溶液及5mmol/L甲酸铵-水溶液(pH=3)为流动相进行梯度洗脱,质谱采用电喷雾电离正离子全扫描模式(MS^E)检测。利用UNIfi软件建立数据库,并对样品进行筛查分析。结果人体尿液中58种毒品及滥用药物的检出限(LOD,3S/N)在0.2~25.0ng/mL之间,用UNIFI软件对尿液样品中添加的58种毒品及滥用药物进行快速筛查,通过数据库比对,目标化合物均被检出。结论方法的准确性高,操作简单、快速,适用于尿液中毒品及滥用药物的快速筛查。

大鼠血清和尿液中4种鹅膏肽类毒素代谢特征的超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱分析

目的建立血清和尿液中4种鹅膏肽类毒素的超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱测定方法,考察和分析4种鹅膏肽类毒素在大鼠体内的代谢特征,为中毒样品的采集提供科学依据。方法血清样品用乙腈+0.1%TFA二氯甲烷提取,残渣用流动相溶解;尿液样品则直接过0.22μm微孔滤膜;样品溶液经HSS T3色谱柱分离后用ESI-QTOF MS进行测定;选取SD健康大白鼠分别用4种鹅膏肽类毒素染毒,按需收集不同时间段的尿液和血液进行分析。结果血清和尿液样品的检出限分别为10 ng/ml和5 ng/ml,加标回收率分别为77.4%~95.6%和73.8%~103.8%,相对标准偏差在3.0%~18.0%和1.2%~25.4%。大鼠染毒尿液中均检出4种毒素,鹅膏毒肽的含量明显比鬼笔毒肽的含量高,大鼠染毒血清中仅14%检测到毒素的存在。结论检测方法适用于中毒事件生物样品中4种鹅膏肽类毒素的检测和确证分析,采集中毒8 h内的尿液对检出鹅膏毒肽的几率最大。

基于UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS技术分析藏药粗壮秦艽的化学成分

目的用超高效液相色谱-电喷雾/四级杆飞行时间串联质谱联用(UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS)技术对粗壮秦艽的主要化学成分进行定性分析。方法色谱条件为ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),以1 mL·L^(-1)甲酸(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速为0.4 mL·min^(-1),柱温为40℃,进样量为1μL,质谱用电喷雾(ESI)离子源,在正、负离子模式下采集数据。结果通过分析二级高分辨质谱结合对照品数据及相关文献,共鉴定出39个化合物,包括环烯醚萜类21个、三萜类9个、黄酮类3个和其他类成分6个。结论基于UPLC的高效分离能力和MS的高灵敏检测优势,用UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS技术可快速分析粗壮秦艽中的化学成分,为粗壮秦艽化学成分的提取、分离及其药效物质基础研究提供科学依据。

UPLC-Q-TOF-MS法鉴定消肿止痛液有效部位的化学成分

目的:分析消肿止痛液有效部位的化学成分,为阐明其药效物质基础及将其二次开发为软膏制剂提供依据。方法:采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS)法对消肿止痛液有效部位(经D101大孔树脂分离得到的40%乙醇洗脱部位)进行成分分析。色谱条件为采用Hypersil GOLD a Q C18色谱柱,以0.1%甲酸乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)为流动相进行梯度洗脱,流速0.4 mL/min,进样量4μL,柱温30℃;质谱条件为采用电喷雾离子源(ESI)在正/负离子扫描模式(ESI+/ESI-)下进行检测,扫描范围100~2000 Da,碰撞能量45/-45 e V,扩展碰撞器能量10/15 e V。获得图谱后收集化合物的精确分子量、保留时间和多级碎片离子信息,通过与对照品质谱信息及参考文献比对进行化学成分鉴定。结果:共鉴定出48个化合物,在ESI+、ESI-检测模式下分别鉴定出9、39个。其中,酚酸类成分10个、苯丙素类成分8个、蒽醌类成分9个、黄酮类成分3个、生物碱类成分7个、鞣质类成分5个、其他类成分6个。结论:UPLC-Q-TOF-MS法可快速、高效、准确地鉴定消肿止痛液有效部位的化学成分,该部位的主要化学成分为酚酸类、苯丙素类、蒽醌类、生物碱类和鞣质类。

UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS测定缓解体力疲劳类保健品中非法添加的化学物质

目的：利用超高效液相-串联四级杆-飞行时间液质联用系统（UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS），建立快速可靠灵敏的测定缓解体力疲劳类保健食品中违法添加西地那非、他达拉非、伐地那非、红地那非、豪莫西地那非、羟基豪莫西地那非、那莫西地那非、氨基他达拉非、伪伐地那非、硫代艾地那非、那红地那非和育亨宾等12种化学药品的液质联用检测方法。方法：采用UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS液质联用仪，以Agilent ZORBAX Eclipse plus C18为色谱柱；以0.1%甲酸-0.01 mol/L乙酸铵水溶液和甲醇梯度洗脱，流速为0.3 mL/min；ESI正离子模式，一级、二级质谱全扫描，进行 UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS的定性及定量分析。结果：经方法学验证，本方法在2～80μg/mL浓度范围内线性良好、精密度（RSD%）小于2%、回收率在80.5%～98.7%之间。结论：本方法快速、准确、灵敏度高、分离度高，为快速筛查缓解体力疲劳类保健食品中非法添加化学物质提供有力工具。

基于UHPLC-Q-TOF-MS/MS及网络药理学探讨葛根芩连汤治疗代谢综合征的潜在作用机制

目的基于超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱联用技术(UHPLC-Q-TOF-MS/MS)与网络药理学方法探讨葛根芩连汤治疗代谢综合征(Metabolic syndrome,MetS)的潜在作用机制。方法采用UHPLC-QTOF-MS/MS方法分析葛根芩连汤的化学成分;通过Swiss Target Prediction数据库筛选葛根芩连汤中4味中药的成分靶点;通过Genecards、TTD、OMIM数据库检索MetS疾病相关靶点;采用Venny 2.1平台对葛根芩连汤作用靶点与疾病靶点取交集,获得葛根芩连汤治疗MetS的关键靶点;构建“活性成分-靶点”网络及关键靶点蛋白互作(PPI)网络;采用DAVID数据库对关键靶点进行GO功能及KEGG通路富集分析。结果从葛根芩连汤中鉴定出50个化学成分,共筛选出20个关键活性成分,得到葛根芩连汤治疗MetS的关键靶点174个。筛选出SRC、MAPK3、STAT3、HSP90AA1、MAPK8等核心靶点。GO功能富集分析涉及379条生物过程、65条细胞组分和100条分子功能。KEGG通路分析得到Ras信号通路、Rap1信号通路、PI3K-Akt信号通路、VEGF信号通路等108条相关通路。结论明确了葛根芩连汤的化学成分,预测得到葛根芩连汤治疗MetS的药效物质基础及分子机制,可为中药复方研究提供参考。

分子对接技术结合LC-MS/MS筛选半夏厚朴汤抗PDE4有效成分

目的 采用分子对接技术筛选半夏厚朴汤方中抗磷酸二酯酶4(PDE4)潜在有效成分,结合高分辨质谱技术评价不同提取方法的有效成分含量变化.方法 采用TCMSP等数据库和文献检索方法搜集药味中所含化合物,采用Autodock分子对接软件计算化合物与蛋白质的对接结果,优选结合能较低的化合物作为潜在有效成分,采用超高效液相色谱-串联四级杆飞行时间质谱联用(UPLC-Q-TOF-MS/MS)检测不同提取方法样品中有效化合物分子含量.结果 1028个已报道化合物经对接筛选,得到25个对接结果较好的化合物分子.与高分辨质谱进行比对,对应得到5种化合物分子.考察不同方法的提取效率,以50%乙醇提取得到的baicalein、scutellarein、luteolin、orobol 4种成分的含量较高;以95%乙醇提取得到的apigenin含量较高.结论 半夏厚朴汤中某些分子有通过抑制PDE4作用发挥抗抑郁症作用的潜在作用.不同提取方法对半夏厚朴汤有效成分的含量影响较大,这可能对半夏厚朴汤治疗抑郁症的作用有较大影响.

基于UPLC-Q-TOF-MS技术分析黄刺玫果的化学成分

采用超高效液相色谱-串联四级杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术对黄刺玫果乙醇提取物的化学成分进行定性分析。在负离子模式下扫描,根据色谱峰分子离子峰的精确分子量及元素组成、主要碎片信息、保留时间,并结合刺玫果相关文献和在线数据库检索,从黄刺玫果中共鉴定出53个化合物,包括29个多酚、15个黄酮、2个有机酸和7个脂肪酸化合物。分析结果显示,黄刺玫果乙醇提取物中没食子多酚、鞣花鞣质多酚和黄酮类化合物是其主要的化学成分,且化合物2,3-(s)-六羟基联苯二甲酰基-D-葡萄糖、没食子苷、木鞣质C为首次从黄刺玫果中发现。本分析结果可为黄刺玫果资源在功能性食品开发利用、质量控制及阐明其药效物质基础提供理论参考。

药食同源赶黄草醇提物对中式香肠脂质氧化和蛋白质稳定性的影响及相关性分析

通过超声辅助提取法得到赶黄草醇提物,其总黄酮和总酚含量分别为(17.43±1.41)mg/g和(14.78±0.95)mg/g。同时利用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱技术鉴定出该赶黄草提取物中的43种主要化合物。将0.05%、0.1%、0.3%赶黄草提取物和0.02%丁基羟基茴香醚+二丁基羟基甲苯(1∶1,m/m)分别添加到中式香肠中,研究其对香肠脂质氧化和蛋白质稳定性的影响。通过对中式香肠在不同贮藏时间的酸价、过氧化值、硫代巴比妥酸反应物值、羰基含量、巯基含量和挥发性盐基氮值的测定,发现0.3%赶黄草提取物组的硫代巴比妥酸反应物值在第35天明显低于0.02%丁基羟基茴香醚+二丁基羟基甲苯对照组,添加赶黄草提取物对中式香肠中蛋白质羰基、巯基含量和挥发性盐基氮值的作用也能达到对照组的效果。虽然,赶黄草提取物组中酸价和过氧化值比对照组略高,其所反映的抗脂质氧化能力仍明显优于空白组。因此,赶黄草提取物可作为替代人工合成抗氧化剂的候选之一应用于中式香肠生产,对延长产品品质和货架期有积极的作用。

基于UPLC-Q-TOF/MS技术的橘皮竹茹汤血清药物化学初步研究

[目的]对橘皮竹茹汤进行血清药物化学初步研究。[方法]大鼠灌胃橘皮竹茹汤冻干粉,采集含药血清。采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱联用(UPLC-Q-TOF/MS)技术,对橘皮竹茹汤冻干粉样品、空白血清及给药血清图谱进行比较,并利用Peakview和MetabolitePilot数据处理软件,根据质谱所提供的保留时间、精确相对分子质量及二级质谱裂解碎片来鉴定和推测其血中移行成分。[结果]橘皮竹茹汤冻干粉灌胃给药后,从血清中检测出41个入血成分,其中原型成分13个、代谢产物28个。[结论]初步确定了橘皮竹茹汤的入血成分,为阐明其药效物质基础提供了依据。

红花水煎液干预硬皮病小鼠的血清代谢组学研究

目的 基于超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)技术探讨红花水煎液对硬皮病小鼠血清代谢组的影响,旨在寻找血清中的内源性差异代谢物及其相关代谢通路,以阐释红花水煎液治疗硬皮病的作用机制。方法 将雌性Balb/c小鼠随机分为对照组、模型组、红花水煎液组,每组8只。除对照组外,其余2组均皮下注射200μg·mL^(-1)博来霉素0.1 mL,每天1次,连续28 d,复制硬皮病小鼠模型。造模同时进行药物干预,红花水煎液组给予1.5 g·kg^(-1)红花水煎液灌胃,每日1次,连续28 d。观察各组小鼠的一般情况;采用Sirius Red染色法观察皮肤、肺组织病理变化;免疫组化法测定皮肤、肺组织中结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达;ELISA法检测血清及皮肤组织中血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)水平;应用UPLC-Q-TOF/MS技术进行血清样品的分离和数据采集,通过主成分分析(PCA)及正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)法分析红花水煎液对内源性差异代谢物的影响,并通过MetaboAnalyst 3.0数据库分析其代谢通路。结果 (1)与对照组比较,模型组小鼠出现精神状态沉郁纳呆,嗜睡,攻击性弱,背部皮肤变硬增厚、有结痂;小鼠皮肤成纤维细胞及胶原纤维明显增加,肺组织胶原纤维明显增多,出现弥漫性肺纤维化病变;小鼠皮肤及肺组织中CTGF表达量显著升高(P<0.01);皮肤及血清中Ang Ⅱ的表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,红花水煎液组小鼠饮食量增加,动作灵敏且攻击性变强,背毛不同程度生长、有光泽,总体状态好转;小鼠皮肤及肺组织成纤维细胞及胶原纤维减少,纤维束变细,组织形态趋于正常;小鼠皮肤及肺组织中CTGF表达量显著降低(P<0.01);皮肤及血清中的Ang Ⅱ含量显著下降(P<0.01)。(2)在正、负离子模式下共筛选鉴定出13种与硬皮病密切相关的潜在生物标志物。与对照组比较,模型组小鼠血清中胆碱、L-左旋肉碱、白三烯A4、维甲酸含量明显升高(P<0.05,P<0.001),L-缬氨酸、牛磺酸、苯乙酰甘氨酸、柠檬酸、棕榈酰-L-肉碱、亮氨酸、L-苯丙氨酸的含量均明显降低(P<0.05,P<0.001)。与模型组比较,红花水煎液组小鼠血清中牛磺酸、胆碱、丙酰肉碱、棕榈酰-L-肉碱、L-左旋肉碱、L-酪氨酸、白三烯A4、亮氨酸、苯乙酰甘氨酸、柠檬酸含量明显回调(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。13个潜在生物标志物共涉及11条代谢通路,其中7条与硬皮病密切相关。结论 红花水煎液对硬皮病小鼠的治疗作用可能与其改善血清中内源性差异代谢物的水平,调节氨基酸代谢、能量代谢等有关通路密切相关。

辅助降血糖类保健食品非法添加化学物质检测方法研究

目的：利用超高效液相-串联四级杆-飞行时间液质联用系统（UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS）,建立快速可靠灵敏的测定辅助降血糖类保健食品中非法添加二甲双胍、丁二胍、苯乙双胍、甲苯磺丁脲、格列齐特、吡格列酮、罗格列酮、格列波脲、格列吡嗪、瑞格列奈、格列美脲、格列本脲和格列喹酮13种化学药品的液质联用检测方法。方法：采用UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS检测,以Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18为填充柱;0.1%甲酸-0.01 mol/L乙酸铵水溶液和甲醇梯度洗脱,流速0.3 mL/min;ESI正离子模式,一级、二级质谱全扫描,进行UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS的定性及定量分析。结果：此方法经过验证,线性良好（r〉0.99）、精密度RSD〈3%、样品回收率在74.1%-90.0%之间,检出限在9.29-60.0 ng/mL之间,均能满足辅助降血糖类保健食品非法添加化学成分筛查的要求。结论：此方法快速、准确、灵敏度高、分离度高,可为辅助降血糖类保健食品非法添加筛查检测提供有力工具。

UPLC-DAD Q TOF MS/MS法快速检测降血压类保健食品及中成药中添加的20个化学药物

目的:利用超高效液相-串联四极杆-飞行时间液质(UPLC-DAD Q TOF MS/MS)联用系统,建立快速可靠灵敏的测定降压类保健食品及中成药中违法添加阿奇沙坦、硝苯地平、拉西地平、奈比洛尔等20个化学药物的液质联用检测方法。方法:采用UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS联用仪,以Waters HSS T3 C18(100 mm×2.1 mm, 1.8μm)为色谱柱,以0.1%甲酸水溶液(A)和甲醇-乙腈(1∶1)(B)为流动相,梯度洗脱(0 min, 5%A;0~8 min, 5%A→95%A;8~11 min, 95%A;11~11.2 min, 95%A→5%A;11.2~12 min, 5%),流速为0.3 mL·min^(-1);进样体积1μL;ESI正、负离子模式,一级、二级质谱全扫描,进行UPLC-DAD-Q-TOF-MS/MS的定性及定量分析。结果:经方法学验证,本方法在1~50μg·mL^(-1)浓度范围内线性良好、精密度(RSD)小于3%、回收率在80.5%~98.7%。应用该方法在15批样品中均含有非法添加的药物成分,其中14批样品检出2个及以上多种药物成分;9批样品均检出托拉塞米、坎地沙坦酯、拉西地平;另有一批样品检出乐卡地平和奈比洛尔,在降压类保健食品及中成药产品中首次检出。结论:本方法快速、准确,灵敏度高,在涵盖12个补充检验标准中的成分的基础上扩大了检验范围,为快速筛查降血压类保健食品及中成药中非法添加化学药物提供有力技术支撑。

湿热泄泻模型大鼠的尿液代谢组学研究

目的应用基于超高效液相色谱-串联四级杆飞行时间二级质谱联用(UPLC-Q/TOF-MS/MS)尿液代谢组学方法筛选湿热泄泻潜在代谢标志物,探讨大鼠湿热泄泻发病机制。方法采取高糖高脂(HF)+高温高湿(HH)+腹腔注射产肠毒性大肠杆菌(EC)建立大鼠湿热泄泻模型,采集大鼠造模各阶段(高糖高脂,高温高湿,攻毒)尿液样本,应用尿液代谢组学技术分析样本,多元统计分析方法分析代谢数据。结果筛选出左旋谷酰基-左旋半胱氨酸、左旋甲酰犬尿氨酸、5-羟基-N-甲酰犬尿氨酸、核黄素-5-磷酸、亚油酸、左旋色氨酸和褪黑素等7个潜在代谢标志物。结论湿热泄泻涉及色氨酸代谢、核黄素代谢与亚油酸代谢等代谢通路,表明大鼠体内出现能量、氨基酸及脂类代谢紊乱,本研究结果为揭示中(兽)医湿热泄发病机制提供了参考依据。

注射用胸腺法新杂质结构鉴定及含量测定

目的:对注射用胸腺法新中与胸腺法新主峰较难分离的杂质结构进行鉴定并测定7家企业样品中杂质的含量。方法:结合使用基质辅助激光解析飞行时间串联质谱(MALDI-TOF/TOF MS)和二维-超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(2D-UPLC-Q-TOF)测定杂质分子量并对结构进行鉴定,同时采用与合成的杂质对照品通过保留时间比对进行结构确认,并且通过HPLC方法对杂质含量进行测定。结果:测得胸腺法新主峰前后5个杂质分别为3个异构体杂质([D-Ser1]-胸腺法新、[D-Asp15]-胸腺法新、[D-Asn28]-胸腺法新)、1个缺失肽杂质([Des-Ala3]-胸腺法新)和1个水解杂质([Asp28]-胸腺法新),杂质含量为0.1%~1.0%。结论:使用两种质谱技术对杂质结构进行鉴定,结果可靠,本研究为完善质量标准以及制定合理的杂质限度提供了依据。

甜叶菊水提物和絮凝上清液成分差异研究

为详细了解甜叶菊水提物和絮凝上清液的化学成分差异,建立超高效液相-串联四级杆飞行时间质谱(ultra-performance liquid chromatography quadrupole time of flight mass spectrometry,UPLC-QTOF-MS)分析方法并在此基础上对两种样品成分进行分析比较。研究结果表明,此方法可有效地将各种化合物分离开来,利用此方法检测比较得出,甜叶菊水提物和絮凝上清液化学成分差异显著,甜叶菊水提物中69种化合物经絮凝后上清液中只含有35种化合物。就去除种类而言,絮凝过程去除绿原酸类和去除黄酮类物质较为显著。

肾康注射液中化学成分的UPLC-Q-TOF-MS分析

目的建立肾康注射液中的化学成分的超高效液相色谱仪联用四级杆串联飞行时间质谱仪(UPLC-Q-TOF-MS)分析方法。方法采用Waters Acquity HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),流动相为0.1%甲酸水溶液–乙腈,梯度洗脱;体积流量为0.4 m L/min;柱温为40.0℃;进样量为2.00μL。质谱检测采用正、负离子模式,电压分别为3.0、2.9k V;离子源温度120℃;脱溶剂气体温度450℃;脱溶剂气体体积流量900 L/h。结果鉴定出了肾康注射液中10个化合物,分别为没食子酸、芦荟大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、丹参素、原儿茶醛、苯乙醛、芦荟大黄素、毛蕊异黄酮、云杉鞣酚-3'-O-葡萄糖苷、白藜芦醇-4'-O-葡萄糖苷、大黄素,并结合文献报道对其药材来源进行了归属。结论建立了一种简单、快速、高效的UPLC/Q-TOF-MS方法对肾康注射液中化学成分进行了鉴定,为阐明肾康注射液的物质基础提供了参考。

基于UPLC-Q-TOF-MS分析人参皂苷元新衍生物干预荷瘤小鼠的血清代谢组学特征

目的:采用糖基三氯乙酰亚胺酯法将D-核糖与拟人参皂苷元DQ半合成得到新型人参皂苷,对其体内外抗肿瘤活性以及作用机制进行研究,通过血清代谢组学分析其代谢途径及产物。方法:以D-核糖和拟人参皂苷元DQ为原料,通过化学方法合成得到新型人参皂苷衍生物,并对其进行结构鉴定;采用MTT比色法测定其对S180细胞、人肺腺癌SPC-A-1细胞、A549细胞的抗肿瘤活性以及对小鼠S180肿瘤细胞的抑制作用,基于细胞代谢组学分析探究其抗肿瘤作用机制。结果:首次通过化学方法半合成得到了新的奥克梯隆(Ocotillol)型人参皂苷,12-核糖基-拟人参皂苷DQ(12-riboside-pseudoginsengenin DQ,RPDQ),鉴定为(20S,24S)-12-O-α-D-呋喃核糖基-达玛-20,24-环氧-3β,12β,25-三醇,产率为38.6%,纯度为99.1%。MTT法检测RPDQ能够明显抑制3种肿瘤细胞的增殖;体内实验证明RPDQ对荷瘤小鼠的实体瘤有抑制作用,能够改善肿瘤细胞组织形态、降低荷瘤小鼠的脏脾和胸腺指数,延长小鼠的生存天数;代谢组学表明RPDQ通过调控花生四烯酸代谢、甘油磷脂代谢、色氨酸代谢等7个代谢途径达到抗肿瘤的作用,通过主成分分析(PCA)和正交偏最小方差判别分析(OPLS-DA)筛选鉴定出16个生物标记物,并研究出RPDQ在小鼠体内发挥抗肿瘤作用相关信号途径网络。结论:RPDQ的合成为此类人参皂苷衍生物的合成与活性研究提供了参考,RPDQ表现出较好的抗肿瘤活性,为拟人参皂苷的进一步研究与开发提供了理论和数据上的支撑。

一测多评法同时测定没食子药材及制剂西帕依固龈液中5个没食子鞣质

目的:建立同时测定没食子药材及制剂西帕依固龈液中没食子酸(GA)、1-没食子酸酰葡萄糖(1-GG)、没食子酸甲酯(MG)、1,2,3,6-四没食子酰葡萄糖(TeGG)和1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖(PGG)5个没食子鞣质的一测多评方法(QAMS)。方法:采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF MS)法,对没食子药材的主要没食子鞣质进行定性鉴别,并确定待测成分;采用HPLC建立多成分同步测定方法,色谱柱为Phenomenex C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.2%磷酸溶液(B),梯度洗脱(0~20 min,3%A→8%A;20~30 min,8%A→10%A;30~70 min,10%A→15%A;70~100 min,15%A→18%A;100~120 min,18%A→30%A),流速1.0 mL·min^(-1),柱温35℃,检测波长275 nm。以GA为内参物,采用斜率法,分别建立1-GG、MG、TeGG、PGG的相对校正因子(RCFs),并考察其耐用性。采用QAMS法和外标法(ESM)分别计算和比较9批次没食子药材和3批次西帕依固龈液中上述没食子鞣质的含量,以验证QAMS法的准确性和可行性。结果:从没食子中定性鉴别出GA、1-GG、MG、TeGG和PGG 5个含量较高且具有良好生物活性的没食子鞣质,选择作为HPLC定量分析的指标性成分。GA、1-GG、MG、TeGG和PGG的线性范围分别为8.13~520、6.25~400、8.28~530、9.00~576、9.00~576μg·mL^(-1)。1-GG、MG、TeGG和PGG的RCFs分别为1.75、0.95、1.12、1.25,对不同HPLC仪、色谱柱、流速和柱温的耐用性良好(RSD≤5.00%)。采用QAMS法测得9批次没食子药材中GA、1-GG、MG、TeGG和PGG的含量范围分别为3.69%~5.07%、1.26%~1.98%、14.0%~17.4%、19.8%~25.3%、5.93%~9.24%,3批次西帕依固龈液中GA、1-GG和MG的含量范围分别为1.89~2.40、0.0750~0.105、0.874~1.12 mg·mL^(-1)。QAMS法和ESM法测定的含量结果的相对误差均小于3.5%,无显著性差异。结论:以GA为内参物,建立的上述5个没食子鞣质的QAMS法,简便、准确、可靠,节省大量对照品,可用于没食子药材及制剂西帕依固龈液的定量分析及质量控制。

苯醚甲环唑在番茄和土壤中的残留动态研究

采用田间试验方法研究苯醚甲环唑在番茄和土壤中的残留与降解动态,应用超高效液相色谱-串联四级杆液质联用法（UPLC-MS/MS）进行定性和定量分析.结果表明,苯醚甲环唑在番茄中的平均回收率为90.3%-107.1%,变异系数为0.7%-7.8%;在土壤中的平均回收率为80.1%-104.7%,变异系数为7.2%-9.1%.动态研究结果表明：苯醚甲环唑在番茄中的降解比在土壤中快,在山东和河南两地番茄中的降解半衰期分别为3.3-3.8和3.3 d;在土壤中的降解半衰期分别为19.9-22.4和13.1-18.8 d.10%苯醚甲环唑微乳剂在番茄上按照推荐剂量最多施药2次,采收期距最后一次施药3 d,番茄中苯醚甲环唑残留量小于0.158 mg/kg.低于日本和澳大利亚规定的最高残留限量（MRL,0.5 mg/kg）,说明苯醚甲环唑为低残留、易降解农药.