越橘提取物对RPE细胞氧化损伤和血管生成的抑制作用

目的:探讨越橘提取物对视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞氧化损伤和血管生成的抑制作用。方法:①将人RPE细胞(ARPE-19)分为对照组、模型组、越橘提取物组,模型组给予0.5 mmol/L3-吗啉代亚胺(3-morpholinosydnonimine,SIN-1)处理24 h,越橘提取物组给予10ng/mL越橘提取物处理1h后,再给予0.5 mmol/L SIN-1处理24 h。细胞活性检测法(Cell Counting Kit-8,CCK-8)测定各组细胞活性,流式细胞术检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。②将人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)分为对照组、模型组、越橘提取物组,模型组给予10 ng/mLVEGF处理8 h,越橘提取物组给予10 ng/mL越橘提取物处理12 h后,再给予10 ng/mLVEGF处理8 h。划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,管腔形成实验检测细胞血管生成情况。结果:①越橘提取物在质量浓度≤10 ng/mL对ARPE-19细胞无明显毒性。给予SIN-1处理后,ARPE-19细胞活性明显降低,而预孵10 ng/mL越橘提取物可使细胞活性恢复接近至正常(P<0.001),后续实验均选用该浓度。同时,越橘提取物可降低SIN-1诱导的ARPE-19细胞内ROS水平(P<0.0001)。②给予VEGF处理后,HUVEC细胞迁移和侵袭能力增强,而预孵越橘提取物可使细胞迁移和侵袭能力减弱(P<0.0010)。同时,越橘提取物可抑制VEGF诱导的HUVEC细胞小管形成(P<0.0001)。结论:越橘提取物具有较强的抗氧化能力和抗血管生成活性,为其作为潜在治疗年龄相关性黄斑变性治疗药物提供了科学依据。

樟叶越橘化学成分及其生物活性研究进展

综述了樟叶越橘中分离得到的化学成分,主要为熊果苷类衍生物、糖苷类及酚酸类化合物,并介绍了主要成分的提取和含量测定方法,总结了樟叶越橘化学成分的抗氧化、抑制黑色素生成、抑制酪氨酸酶活性以及抗炎、保肝、降血脂、抗血栓、降血糖、抗病毒和防治果蔬灰霉病等生物活性。探讨了樟叶越橘在保健品、日化品、药品以及果蔬保鲜等领域的开发应用潜力,并对未来的研究提出了展望,以期为樟叶越橘的深入研究和可持续利用提供参考。

长白山北坡不同海拔笃斯越橘种群年龄结构、动态特征及保育建议

以长白山北坡野生笃斯越橘(Vaccinium uliginosum L.)为研究对象,采用梯度格局法设置标准地,调查海拔800、1 000、1 200、1 400、2 200 m野生笃斯越橘种群数量,通过静态生命表、存活曲线、死亡率和消失率曲线综合分析种群数量动态变化规律。结果表明:1)长白山北坡野生笃斯越橘繁育期(龄级Ⅱ和Ⅲ)、繁育前期(龄级Ⅰ)和繁育后期(龄级Ⅳ)个体数占比分别为87.0%、11.9%和1.1%,符合年龄金字塔第二类型特征。2)龄级Ⅱ的基株个体数占比在各海拔均为最高,其中,海拔800 m和1 400 m分别达81.0%和71.3%;龄级Ⅰ在海拔1 000 m的个体数占比最高(15.2%);龄级Ⅳ在海拔800 m的个体数占比最高,但仅为2.2%,在1 400、2 200 m几乎为0,因此,基株整体呈稳定型。繁育期的分株个体数占比随海拔升高而升高,整体呈稳定型,但海拔1 400 m龄级Ⅰ分株个体数占比最高,达68.0%;龄级Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ的占比分别为31.0%、1.0%和0,因此,该海拔的分株为增长型种群。3)基株种群的存活曲线在各海拔均呈DeeveyⅠ型凸曲线,死亡率随龄级增加逐渐下降;分株种群存活曲线在1 400 m介于DeeveyⅠ型和DeeveyⅡ型之间,其他海拔均为DeeveyⅠ型,死亡率随龄级增加呈先升高后降低趋势。4)幼龄种群储备不足以及繁育期高死亡率是长白山笃斯越橘种群趋于衰退的主要原因,建议重点保护生命力旺盛的幼龄植株,在繁育期死亡率较高的海拔区段严格管理,控制人为过度采摘和生境破坏。同时,深入探究笃斯越橘繁殖特性与人工更新技术,提高对野生笃斯越橘的生态保护意识。

越橘原花青素的提取及其体外抗氧化活性研究

以越橘干果为原料,采用超声波辅助双酶酶解法提取越橘原花青素,以越橘原花青素得率作为评价指标,研究料液比、纤维素酶与果胶酶质量比、酶解pH、酶解时间和超声时间对越橘原花青素得率的影响。单因素试验和响应面法优化获得越橘原花青素提取条件为:料液比1∶30(g/mL),纤维素酶与果胶酶质量比为1∶1.2,酶解pH 5.0,酶解时间90 min,超声时间50 min,该条件下提取的越橘原花青素得率为9.38%;越橘原花青素具有较强的抗氧化活性,其对羟自由基、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和超氧阴离子自由基的最高清除率分别为97.84%、96.47%和94.47%,半数抑制浓度IC50分别为0.354、0.394、0.387 mg/L,对三者的清除能力均高于抗坏血酸。

外源水杨酸对越橘休眠期花芽抗寒性的影响

本试验以六年生越橘‘北陆’为供试材料,研究不同浓度外源水杨酸(SA)对休眠期越橘花芽生理生化特性的影响。结果显示,越橘花芽的渗透调节物质含量、酶促反应系统和非酶促反应系统均随着休眠时间的变化呈先明显上升后缓慢下降的趋势。喷施适宜浓度的SA可以降低休眠期低温对越橘花芽的伤害,增加休眠期越橘花芽中的可溶性蛋白(SP)、可溶性糖(SS)含量和脯氨酸(Pro)的积累,降低丙二醛(MDA)含量,提高花芽抗氧化保护酶SOD、POD活性并上调抗坏血酸-谷胱甘肽(AsA-GSH)循环系统。综合表明,外源SA参与低温胁迫下越橘植株的生理响应,并且具有明显的浓度效应,其中1.0 mmol·L^(-1) SA对低温胁迫的缓解效果最好,10.0 mmol·L^(-1) SA则会加重低温对越橘植株的伤害。

笃斯越橘E3连接酶基因VuARI2的克隆及其抗寒功能分析

【目的】通过克隆笃斯越橘E3泛素连接酶基因VuARI2及分析其在拟南芥中异源表达,探索笃斯越橘VuARI2基因在低温胁迫响应中的功能。【方法】以笃斯越橘为材料,用RT-PCR和RACE技术从茎中克隆获得VuARI2基因,并对其进行系统生物信息学分析;用qRT-PCR技术分析该基因在不同组织中及低温胁迫处理下的表达模式;在拟南芥中异源表达VuARI2并对其进行冷驯化后表达水平、生理指标及冰冻处理后的抗寒性分析。【结果】VuARI2基因编码区长1770 bp,编码589个氨基酸。泛素连接酶VuARI2与野山茶、咖啡树、葡萄和河岸葡萄ARI2蛋白的氨基酸序列同源关系较近。qRT-PCR结果显示,VuARI2基因表达具有组织特异性,在叶和花芽中VuARI2的表达量显著高于根和茎中;茎和花芽VuARI2表达受低温诱导较显著。转基因植物的VuARI2基因表达量在冷驯化后显著高于野生型;总叶绿素含量降幅显著低于野生型;脯氨酸和可溶性糖含量显著高于野生型;超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶活性均显著高于野生型,而相对电导率和丙二醛含量显著低于野生型。冷驯化后转基因植物在冰冻低温下存活率显著高于野生型,相对电导率显著低于野生型,提高了植物抗寒性。【结论】克隆获得了笃斯越橘VuARI2基因,过表达VuARI2基因可以提高植物抗寒性。

越橘叶黄酮脂质体制备及对HepG2细胞的影响

对红豆越橘叶采用超声辅助提取和AB-8型大孔树脂纯化获得了黄酮含量高的馏分(L6),经HPLC-MS分析越橘叶黄酮为主要成分。以L6为芯材,采用乙醇注入法制备了脂质体L6-Lips,经不同质量分数羧甲基壳聚糖(CMCS)水溶液修饰制备了CMCS-L6-Lips。通过FTIR、粒径分析、Zeta电位和透析法对CMCS-L6-Lips进行了表征,探究其在不同pH下体外释放能力及对HepG2细胞抑制能力。结果表明,L6的黄酮含量可达899.44 mg/g,主要含有芦丁、槲皮素、槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷、槲皮素3-O-鼠李糖苷-7-O-葡萄糖苷、圣草酚-7-O-葡萄糖苷、儿茶素和绿原酸7种成分;CMCS溶液质量分数与CMCS-L6-Lips粒径、包封率、Zeta电位具有相关性。添加质量分数为0.4%CMCS水溶液时脂质体表面修饰效果最佳,此时,Zeta电位为–35.65 mV,表明CMCS成功附着在L6-Lips表面,且CMCS-L6-Lips颗粒之间的排斥力明显更强,稳定性更高。CMCS-L6-Lips具有pH敏感性,在pH=4.0时体外释放能力最高,动力学方程符合Weibull模型,为骨架溶蚀释放;CMCS-L6-Lips可有效抑制HepG2细胞增殖,减缓细胞迁移能力并阻滞细胞停留在S期和G2期。脂质体包封有效提高了越橘叶黄酮的溶解性,使细胞对药物摄取的能力提升,而CMCS的修饰增加了脂质体的靶向能力,有利于治疗肿瘤。

不同修剪方式对平茬处理后越橘树体更新复壮的影响

探究平茬处理后不同修剪方式对衰老越橘树体更新复壮的影响,以12年生北高丛越橘“瑞卡”为试验材料,对其采用不同修剪时间、不同修剪措施处理,探究对其生长指标、花芽形成数量及光合特性的影响。根据主成分分析法对各处理综合评价后发现,修剪方式相同时,2023年6月15日处理植株在生长及光合特性等方面的综合表现均优于7月15日处理植株;在短截处理中,各处理均未形成花芽,其余指标综合评价为轻度短截>中度短截>重度短截;在疏枝处理中,各处理综合评价表现为重度疏枝>中度疏枝>轻度疏枝;在疏枝+短截处理中,选留10~15个主枝的情况下,轻度短截综合评价得分最高,中度短截次之,重度短截最低。其中6月15日选留10~15个基生枝且剪留2/3的综合得分最高,是该试验中最适用于生产实践的处理方法。

越橘叶现代药理作用研究进展

越橘叶为越橘属(vaccinium)植物,杜鹃花科(ericaceae)的叶,分布于东亚、北美、北欧的高山地带。我国大兴安岭牙克石地区野生越橘分布较为集中,且蕴藏量大,具有很高的开发利用价值。越橘叶味苦,性温;归肾、膀胱经,具有解毒、利湿的功效。《吉林中草药》中记载:“其利尿,治淋证及尿道炎”民间用于治疗肾结石、尿道炎、膀胱炎、糖尿病等。《俄罗斯国家药典》(第十一版)也记载越橘叶传统上用作尿路感染(UTI)的抑菌剂和利尿剂[1]。国外对于越橘叶的研究主要集中在其化学成分方面,研究其所含诸多酚类物质及其抗氧化能力。而国内对于红豆越橘的研究主要集中在栽培技术以及叶黄素。

基于HS-SPME-GC-MS和PCA分析野生红豆越橘与苹果汁最佳混酿比例的研究

以野生红豆越橘和苹果汁为原料,研究两者不同混酿比例对野生红豆越橘混酿果酒理化指标、香气成分和感官特性的影响。采用顶空固相微萃取-气质联用(HS-SPME-GC-MS)和主成分分析(PCA)方法对不同混酿比例的野生红豆越橘果酒进行香气成分分析。结果表明:9种样品中共检测出154种香气成分,其中共有成分17种,醇类、酯类是野生红豆越橘果酒香气的重要组成部分。主成分分析结果显示,9种样品中共提取出8个主成分,其中第一主成分共45种,贡献率为36.935%,第一主成分包括大马士酮、癸酸、苯乙酮等。感官评价结果显示,野生红豆越橘与苹果汁体积比例为4∶6的酒样感官评分最高,为90分,酒体口感清爽,醇香浓郁,典型性强。由此可知,野生红豆越橘与苹果汁体积比为4∶6的酒样能完全发酵,野生红豆越橘与苹果果香平衡协调,其他比例混酿果酒醇类或酸类较高,香气复杂,口感粗糙。

越橘叶黄素片的毒理学安全性评价研究

对越橘叶黄素片的食用安全性进行毒理学评价。依据食品安全性毒理学评价程序和方法进行急性毒性试验、遗传毒性试验(Ames试验、骨髓细胞微核试验和精子畸形试验)、大鼠30 d喂养试验。小鼠急性毒性试验经口最大耐受剂量(MTD)均>20.0 g/kg·BW,属无毒级。Ames试验、骨髓细胞微核试验和精子畸形试验结果均为阴性,表明受试物无致突变作用。大鼠30 d喂养试验,试验动物均生长发育良好,体重、摄食量、血液学、血液生化学、脏器系数及病理组织学相关指标均未见异常变化。越橘叶黄素片急性毒理分级属无毒级,无遗传毒性,在本实验剂量范围内。越橘叶黄素片属于安全性保健食品。

高丛越橘(Vaccinium.corymbosom L.)果实采后香气成分分析

采用静态顶空和气相色谱—质谱联用技术,对采后贮藏过程中高丛越橘品种"都克"和"蓝丰"的果实香气成分进行检测。结果表明:2个品种果实采后共检测出77种挥发性成分,以醇类、酯类、萜类物质为主。其中"都克"果实中醇类物质在整个贮藏过程中没有明显的变化;酯类物质在采后4 d迅速减少,之后缓慢增加;萜类物质在采后4 d迅速增加,之后迅速减少。"蓝丰"果实中的醇类物质在采后4 d迅速减少,之后没有明显的变化;酯类物质在采后4 d略有减少,之后迅速减少,在第14 d又迅速增加;萜类物质在第4 d略有减少,之后迅速减少。总体看2个品种贮藏过程中特征香气以酯类物质为主,在采后4 d,萜类物质的特征香气成分略有变化,但是不影响果实鲜食风味,之后萜类物质的特征香气值降低,在"蓝丰"果实中完全消失。

笃斯越橘对心肌细胞氧化损伤的保护及UPLC-MS分析

目的:探讨笃斯越橘对氧化损伤心肌细胞的作用。方法:以笃斯越橘果实为原料提取得到粗提物1个,并进一步纯化得到4个柱层析组分,建立H_(2)O_(2)氧化模型,考察提取物及纯化产物对氧化损伤细胞存活率的影响,并对最优组分进行成分分析。结果:笃斯越橘粗提物及4种纯化产物均能提高氧化损伤H9c2心肌细胞的存活率,其中30%乙醇水溶液洗脱组分效果最好,能有效减少ROS和MDA生成,提高SOD活性;对该组分进行超高效液相色谱-质谱联用(UPLC-MS)分析,鉴定出花色苷14种。结论:笃斯越橘果实提取及纯化产物均对H_(2)O_(2)引起的H9c2心肌细胞氧化损伤具有保护作用。

越橘果实大小遗传规律及其与花冠、叶面积的相关性研究

【目的】揭示越橘果实大小遗传规律,了解果实大小与花冠、叶面积的相关性,为杂交亲本选择与选配、杂交后代早期筛选提供参考依据。【方法】利用果实大小有明显差异的大果越橘品种Berkeley和小果资源N6为亲本组配正反交遗传群体,共计314株,连续3 a(年)测量果实单果质量并进行遗传分析;根据果实大小选择55份品种/品系构成自然群体,测量单果质量、花冠大小及叶面积进行相关性分析,利用遗传群体验证源自自然群体的相关性是否能在遗传群体中稳定遗传。【结果】越橘果实单果质量在正反交群体中均呈正态分布,表现为多基因控制的数量性状遗传特点,大果亲本做母本的群体其单果质量分布范围、群体中间值、平均值大于小果亲本做母本的群体,说明越橘果实大小存在母性遗传特性;供试正反交群体果实大小平均值(分别为1.46 g和1.79 g)均偏向低值亲本N6(1.11 g),远低于高值亲本Berkeley(2.90 g),说明越橘果实大小遗传存在明显的趋小变异,广义遗传力(H2)大于0.90,说明变异主要来自遗传效应,遗传潜能大,环境效应影响小;自然群体果实大小与花冠大小(R=0.81,P=2×10^(-12))、果实大小与叶面积均呈极显著正相关(R=0.85,P=2×10^(-14)),而在遗传群体中果实大小与花冠、叶面积未表现出明显的相关性,仅有部分杂交后代遗传了上述正相关性。【结论】越橘果实大小存在母性遗传特性,受小果亲本影响大,存在明显的趋小劣质遗传变异;揭示了越橘自然群体中,花冠大小、叶面积与果实大小存在极显著正相关的一般性结论,但受限于亲本遗传基础,在供试的遗传群体中相关性呈遗传不稳定性。

金银花多酚与红豆越橘乙醇提取物协同护肤

以金银花多酚和红豆越橘乙醇提取物为原料,采用称重法、稀释透过率法、2,2′-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除实验、酪氨酸酶抑制实验、弹性蛋白酶抑制实验、联合指数(CI)考察了金银花多酚与红豆越橘乙醇提取物单独及不同质量比联合应用在保湿、防晒、抗氧化、抑制黑色素和抗衰老方面的功效。结果显示,m(金银花多酚)∶m(红豆越橘乙醇提取物)=1∶2、1∶4在保湿性能方面具有协同作用;m(金银花多酚)∶m(红豆越橘乙醇提取物)=4∶1、2∶1和1∶1时在抗UVB性能方面具有协同作用;5个复配比例在清除ABTS和DPPH自由基方面均有协同作用,CI值分别为0.79±0.036、0.83±0.041、0.85±0.026、0.96±0.03、0.98±0.027和0.69±0.046、0.67±0.039、0.78±0.031、0.89±0.018、0.97±0.029;除m(金银花多酚)∶m(红豆越橘乙醇提取物)=4∶1外,其他复配比例在抑制酪氨酸酶活性方面均表现出协同作用,m(金银花多酚)∶m(红豆越橘乙醇提取物)=2∶1、1∶1、1∶2、1∶4复配物的CI值分别为0.71±0.054、0.68±0.047、0.76±0.033、0.81±0.06,m(金银花多酚)∶m(红豆越橘乙醇提取物)=1∶1、1∶2和1∶4时在抑制弹性蛋白酶活性方面具有协同作用,CI值分别为0.84±0.053、0.88±0.042、0.86±0.041。金银花多酚与红豆越橘乙醇提取物联合应用在多个护肤功能上具有协同增效作用。结合其在5个护肤功能上的协同效果及表现能力综合分析,m(金银花多酚)∶m(红豆越橘乙醇提取物)=1∶1为最优复配比。

机械抚育对笃斯越橘植株、光合及结实的影响

采用不同强度平剪处理,研究机械抚育对笃斯越橘的植株形态、光合及结实的影响。结果表明,强、中(Tms、Tmm)处理对新枝长和枝粗具有显著的促进效应;机械抚育处理总体上改变了笃斯越橘光合速率、蒸腾速率和水分利用效率的日变化进程,均值与对照相比局部差异达到显著水平;Tms、Tmm处理对提高果实产量具有显著影响。机械抚育处理经过生长恢复后,笃斯越橘生长势、产量效果与留茬高度呈反向相关。

基于SLAF-seq技术的不同类型越橘遗传变异和群体结构研究

【目的】利用越橘属栽培品种及野生资源在全基因组范围内筛选差异SNP分子标记,分析其遗传变异,了解不同类型群体间的遗传变异、基因交流、群体结构,为越橘种质创新提供遗传背景依据。【方法】以越橘属9个种的62份种质资源为材料,利用特异性位点扩增片段测序技术(SLAF-seq)获得的基因组SNP标记比对到品种Draper参考基因组上,进行供试材料遗传研究。【结果】测序获得169.87 Mb reads数据,平均Q_(30)值94.99%,包含172 513个多态性SLAF标签,筛选到高质量SNP标记4 133 595个,均匀分布在越橘12条染色体上。基于SNP标记的系统进化树准确反映了供试野生、北高丛和南高丛类群遗传差异以及品种间系谱遗传关系,反映出野生类型与栽培品种遗传差异显著,供试野生种具有独立的遗传背景且种间无基因交流发生,但野生种到栽培种存在单向的基因流;栽培品种类群存在明显的亚群结构,亚群间存在普遍的基因交流;半高丛品种北陆和南高丛品种军号与北高丛类型紧密聚类,矮丛品种美登、半高丛品种北村、黑珍珠遗传背景倾向于野生种。【结论】栽培品种近亲杂交和骨干亲本高频率使用导致品种间基因交流频繁、同质性高、遗传基础狭窄,野生种具有独立的遗传背景,但存在野生种到栽培种的单向基因流,应加大野生资源发掘利用以拓宽越橘遗传基础。

不同强度机械抚育对笃斯越橘天然林群落多样性的影响

采用机械平剪法,研究不同强度机械抚育处理对笃斯越橘天然林群落多样性的影响。结果表明,不同强度的机械抚育处理对群落多样性均具有促进效应,其中强和中两种处理后的群落具有较高的物种丰富度、多样性和均匀度,比弱处理和对照处理具有更显著的效应和较高的群落异质性。抚育后,经过生长恢复,林分的群落结构得到了优化,利于笃斯越橘天然林的恢复和生长。

外源ABA对低温胁迫下越橘花期和幼果期抗寒性的影响

以半高丛越橘品种‘北陆’为试材,采用综合评价的方法,研究了在低温胁迫下不同浓度外源ABA对花期和幼果期各项抗寒性生理指标的影响,以期得到提高越橘抗寒性的最适ABA浓度。结果表明:在低温胁迫下,对越橘花蕾、花朵以及幼果喷施外源ABA,可使超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性增强,可溶性糖、可溶性蛋白质以及脯氨酸含量增加,并且随着喷施ABA浓度的增大,呈先上升后下降的趋势;外源ABA也能够降低丙二醛(MDA)含量和电解质渗出率,随着喷施ABA浓度的增大,呈先下降后上升的趋势。用隶属函数法对在低温胁迫下各抗寒性指标进行综合性评价,得出喷施浓度为20 mg·L^(-1)的外源ABA可有效缓解越橘花期和幼果期冻害,提高越橘抗寒性。

不同时期喷施6-BA对越橘叶片生理特性及内源激素质量分数的影响

以越橘‘北陆’为试验材料,探究不同时期喷施6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)对越橘叶片的衰老生理指标及内源激素质量分数的影响。结果表明:(1)初花期喷施质量浓度为50、100 mg/L的6-BA,盛花期喷施质量浓度为100 mg/L的6-BA,均能显著提高越橘叶片总叶绿素(Chl(a+b))、可溶性糖(TSS)和可溶性蛋白(SP)的质量分数及超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,降低丙二醛(MDA)质量摩尔浓度。(2)不同时期喷施质量浓度为50、100、150 mg/L的6-BA,均能显著提高内源激素吲哚乙酸(IAA)、玉米素(ZT)和赤霉素(GA_(3))的质量分数,而脱落酸(ABA)在6-AB质量浓度为100 mg/L时明显下降。(3)通过相关性分析得出,不同时期喷施不同质量浓度的6-BA后,内源激素IAA、ZT和GA3质量分数均与叶片中总叶绿素、TSS和SP质量分数及SOD和CAT活性呈正相关;ABA质量分数与抗氧化酶活性呈负相关,与MDA质量摩尔浓度呈正相关。初花期和盛花期喷施6-BA均能影响越橘植株的衰老,且具有明显的浓度效应,均在100 mg/L时效果最佳。