越橘提取物对RPE细胞氧化损伤和血管生成的抑制作用

目的:探讨越橘提取物对视网膜色素上皮(retinal pigment epithelial,RPE)细胞氧化损伤和血管生成的抑制作用。方法:①将人RPE细胞(ARPE-19)分为对照组、模型组、越橘提取物组,模型组给予0.5 mmol/L3-吗啉代亚胺(3-morpholinosydnonimine,SIN-1)处理24 h,越橘提取物组给予10ng/mL越橘提取物处理1h后,再给予0.5 mmol/L SIN-1处理24 h。细胞活性检测法(Cell Counting Kit-8,CCK-8)测定各组细胞活性,流式细胞术检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。②将人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)分为对照组、模型组、越橘提取物组,模型组给予10 ng/mLVEGF处理8 h,越橘提取物组给予10 ng/mL越橘提取物处理12 h后,再给予10 ng/mLVEGF处理8 h。划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,管腔形成实验检测细胞血管生成情况。结果:①越橘提取物在质量浓度≤10 ng/mL对ARPE-19细胞无明显毒性。给予SIN-1处理后,ARPE-19细胞活性明显降低,而预孵10 ng/mL越橘提取物可使细胞活性恢复接近至正常(P<0.001),后续实验均选用该浓度。同时,越橘提取物可降低SIN-1诱导的ARPE-19细胞内ROS水平(P<0.0001)。②给予VEGF处理后,HUVEC细胞迁移和侵袭能力增强,而预孵越橘提取物可使细胞迁移和侵袭能力减弱(P<0.0010)。同时,越橘提取物可抑制VEGF诱导的HUVEC细胞小管形成(P<0.0001)。结论:越橘提取物具有较强的抗氧化能力和抗血管生成活性,为其作为潜在治疗年龄相关性黄斑变性治疗药物提供了科学依据。

气相色谱-三重四极杆串联质谱法测定蔓越橘提取物中的88种农药残留

采用改进的快速、简单、便宜、有效、稳定和可靠的前处理方法(quick,easy,cheap,effective,rugged,safe,即QuEChERS法),结合气相色谱-三重四极杆串联质谱(GC-MS/MS)检测技术,建立了蔓越橘提取物中88种农药残留的分析方法。样品由含1%乙酸的丙酮-正己烷(1∶1,v/v)溶剂提取,乙二胺-N-丙基甲硅烷(PSA)与石墨化碳(GCB)净化后,采用GC-MS/MS技术在多反应监测(MRM)模式下测定,外标法定量。蔓越橘提取物中88种农药在0.001～0.2 mg/L范围内线性关系均良好;所有农药的方法定量限(LOQ,信噪比(S/N)≥10)均低于31.5μg/kg;在5、25和50μg/kg添加水平下,88种农药的平均回收率为71.4%～116.6%,相对标准偏差(RSD)为2.4%～16.9%。该方法样品前处理简单快速,灵敏度、准确度和精密度均符合农药多残留检测技术的要求,适用于蔓越橘提取物中88种农药残留的快速筛查测定。

越橘提取物对非增生性糖尿病视网膜病变患者对比敏感度的影响

目的观察越橘提取物(vaccinium myrtillus extracts,VME)治疗轻中度非增生性糖尿病视网膜病变(non-proliferative diabetic retinopathy,NPDR)的疗效及对比敏感度(contrast sensitivity,CS)的变化。方法选择轻中度NPDR患者75例(均选择右眼),随机分为试验组和对照组,试验组42例42眼,对照组33例33眼。试验组予以VME 200 mg,每天3次,口服;对照组予以安慰剂维生素C片,100 mg,每天3次,口服;疗程为8周。于用药前后行最佳矫正视力(BCVA)检查,同时行6 c·d-1和12 c·d-1模式下CS的检测。结果共有69例轻中度NPDR患者(试验组38眼,对照组31眼)完成了8周的临床观察。用药前两组间患者一般情况,性别、年龄、空腹血糖、糖化血红蛋白等指标无明显差异(均为P>0.05);用药前试验组和对照组BCVA分别为0.232和0.192,差异无统计学意义(t=0.189,P=0.239);试验组治疗后BCVA值为0.220,较用药前提高0.012,但差异无统计学意义(t=1.273,P=0.211)。试验组患者在用药前中高频模式下(6 c·d-1和12 c·d-1)的平均CS分别为85.656和47.281,与对照组相比,差异均无统计学意义(均为P<0.05)。应用VME治疗后,试验组的CS值较治疗前明显增高,分别为89.313和50.941,差异均有统计学意义(均为P<0.001);与对照组相比较差异均有统计学意义(t=7.538、11.868,均为P<0.001)。结论 VME可改善NPDR患者的CS,对糖尿病视网膜具有保护作用。

越橘提取物中花色苷及游离花青素的测定

目的研究建立越橘提取物中花色苷及游离花青素的检测标准。方法采用高效液相色谱法(HPLC)同时测定花色苷类成分及游离花青素的含量。结果游离花青素的含量以矢车菊素为对照测定,其在4.75~475.24 ng的范围内线性关系良好(r=1.0000),加样回收率为101.7%,RSD为1.3%(n=9)。花色苷的含量以矢车菊素-3-O-葡萄糖苷为对照测定,其在51.03~5103.24 ng的范围内线性关系良好(r=1.0000),加样回收率为99.4%,RSD为0.5%(n=9)。结论本文建立的游离花青素检查方法及花色苷类成分含量测定方法简便、准确,可作为越橘提取物的质量控制标准。

蔓越橘提取物对高脂大鼠氧化损伤的影响

为了探讨蔓越橘提取物对高脂大鼠氧化损伤的作用。试验选取50只体重120 g左右的SD雄性大鼠为试验动物,随机分成正常组、模型组和高、中、低3个试验组,每组10只。饲喂试验8周后,分别测定各组大鼠肝脏中丙二醛(MDA)含量与超氧化物歧化酶(SOD)活性、血清中甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量与丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)的活性。试验结果显示,与模型组比较,中、高剂量组中的TG降低显著(P<0.05),且试验组低剂量组的HDL-C量变化显著(P<0.05);饲喂蔓越橘提取物的试验组血清ALT、AST和ALP活性均有明显上升,并呈现一定剂量效应关系;试验各组大鼠肝脏中SOD活性明显增强(P<0.01),而MDA的生成量逐渐减少。结果表明,蔓越橘提取物能减轻高脂大鼠肝脏氧化损伤和脂质蓄积。

调脂胶囊中越橘提取物的质量控制探讨

目的:建立调脂胶囊中越橘提取物含量的测定方法。方法:采用分光光度法,在546 nm处测定。结果:其线性回归方程为C=2.259 8A-0.039 6,r=0.994 4。平均回收率=97.3%,RSD=1.3%。结论:该测定方法简便快捷,结果准确可靠,可用于此胶囊中越橘提取物的含量测定。

欧洲越橘提取物对拘束负荷小鼠前列腺氧化应激状态的改善作用

目的研究欧洲越橘(Vaccinium myrtillus L).提取物对拘束负荷小鼠前列腺氧化应激状态的影响。方法采用拘束负荷诱发小鼠前列腺过氧化状态,以100及200mg/kg二种不同剂量的欧洲越橘提取物水溶液连续7d灌胃给药,硫代巴比妥酸法测定小鼠前列腺组织中丙二醛(MDA)含量,荧光酶标仪测定抗氧化能力指数(ORAC)水平,HPLC法测谷胱甘肽(GSH)含量,比色法测定超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-P)X活性。结果与模型组相比,欧洲越橘提取物可显著降低前列腺MDA水平,同时显著升高前列腺组织ORAC值和GSH含量,此外欧洲越橘提取物对前列腺组织SOD和GSH-PX活性降低具有明显缓解作用(P<0.05或P<0.01)。结论欧洲越橘提取物对拘束负荷引起的小鼠前列腺氧化应激状态具有一定改善作用,其作用机制可能与欧洲越橘中富含的花青素可以提高前列腺组织抗氧化能力及改善脂质过氧化过程有关。

越橘提取物中花青素分析及其体外抗氧化活性

研究越橘提取物中花青素的组成与含量及其体外抗氧化活性。实验采用高效液相色谱与质谱联用法对越橘提取物中的花青素组成进行鉴定,并以矢车菊素-3-O-葡萄糖苷为标准品测定了花青素的含量。以VC为对照,测定越橘提取物对DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基的清除能力和还原力。结果表明,越橘提取物中含有14种花青素,包括飞燕草素、矢车菊素、矮牵牛素、芍药素和锦葵素类;越橘提取物中花青素的总含量为408.74μg/mg,其中,矢车菊素类花青素含量最高,为159.93μg/mg,占总含量的39.12%;体外抗氧化实验表明,越橘提取物的DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和羟基自由基清除能力的IC50分别为26.16、13.07、1.91 mg/mL,还原力在浓度为250μg/mL时达到0.617。本研究为越橘的开发利用提供一定理论与数据基础。

欧洲越橘提取物制剂缓解视疲劳的功效研究

目的考察欧洲越橘提取物制剂缓解视疲劳的功效。方法选择102例符合标准的成人受试者,分为两组,采用双盲法分别口服受试物及安慰剂40天,检查视疲劳症状,测定明视持久度及视力水平。比较试食组与对照组在试验前后的功效性指标和安全性指标的变化。结果试食组眼部疲劳症状与自身比较、与对照组比较都有显著减轻(P<0.05);试食组明视持久度与对照组比较有显著提高(P<0.05);试食组视力水平与对照组比较无明显变化(P>0.05)。受试者各项安全性指标均未见明显变化。结论欧洲越橘提取物复合制剂能够明显缓解视疲劳。

顶空-气相色谱法测定越橘提取物中的10种溶剂残留量

目的建立顶空-气相色谱法测定保健食品原料越橘提取物中正己烷、乙醇、苯、甲苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、苯乙烯、1,2-二乙基苯和二乙烯苯10种溶剂残留量的分析方法。方法样品经顶空进样器95℃平衡30 min,分流比为5:1(V:V),采用HP-FFAP石英毛细管柱(60 m×0.32 mm,1.0μm)分离,程序升温,氢火焰离子化检测器(flame ionization detector,FID)检测。结果10种溶剂分离效果良好,在其各自对应的浓度范围内线性关系良好(r≥0.9988);方法检出限(limits of detection,LODs)为0.02~1.07 mg/kg;3个添加水平下,平均回收率为92.7%~116.4%,相对标准偏差在0.2%~5.1%(n=3)之间。结论该方法简便快速、结果可靠,可用于保健食品原料越橘提取物的溶剂残留量的测定。

越橘提取物和抗阻运动对MIRI大鼠心脏保护作用的影响

越橘(Vaccinium myrtillus L.)含有丰富的花青素、黄酮类化合物和酚酸,这些化合物具有多种生物效应,已被广泛用于果汁和食品生产或用作膳食补充剂。近年来,越来越多的研究集中于寻找有效的心脏保护策略以减轻MIRI。本研究旨在评估越橘提取物(Vaccinium myrtillus L. extract, VME)和抗阻运动(RE)在心肌缺血再灌注损伤大鼠模型上的协同心脏保护作用。通过多组比较,本研究分析了VME和RE对心肌损伤标志物、氧化应激、炎症反应、心肌细胞凋亡率以及Nrf2/HO-1信号通路的影响。结果显示,VME和RE组合治疗能显著降低心肌细胞凋亡率,减少炎症标志物TNF-α、CRP和IL-6的表达,同时增加抗氧化酶活性并激活Nrf2/HO-1信号通路。这些发现提示,越橘提取物联合抗阻运动可能通过减轻氧化应激和炎症反应,以及激活Nrf2/HO-1通路,从而发挥心脏保护作用。本研究强调了越橘提取物作为一种有前景的心脏保护剂的潜力,其自然来源和多重保护机制为心血管疾病的治疗提供了新的视角。

欧洲越橘提取物对弱视患儿双眼对比敏感度的影响

目的研究口服欧洲越橘提取物对弱视患儿双眼对比敏感度的作用。方法收集2012年7－9月在温州医科大学附属眼视光医院门诊就诊的单眼或双眼弱视患者120例，按随机表分为治疗组（60例）和对照组（60例）。治疗组在常规弱视治疗的基础上服用欧洲越橘提取物3个月，对照组单纯进行常规弱视治疗。随访3个月后观察双眼最佳矫正视力和对比敏感度的变化。结果治疗期间两组弱视眼最佳矫正视力和对比敏感度各空间频率均有不同程度的改善，治疗组视力改善较对照组明显，差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组和对照组弱视眼的对比敏感度均有提高，两组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）；治疗组中单眼弱视者的“健眼”高空间频率对比敏感度明显改善，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论服用欧洲越橘提取物对改善弱视患儿视觉功能有一定作用，尤其能一定程度改善弱视患儿“健跟”的对比敏感度。

红豆越橘提取物对慢性应激小鼠认知功能损伤的影响

目的探究红豆越橘提取物对慢性应激损伤小鼠认知功能的影响。方法将雄性昆明小鼠随机分为空白对照组,应激模型组,氟西汀(4.4 mg·kg-1·d-1)阳性对照组及红豆越橘提取物低、中、高(50,100和200 mg·kg-1·d-1)剂量组,给药组采取连续慢性应激,并灌胃给药18 d,通过水迷宫实验测定小鼠认知记忆能力,测定与抗氧化功能相关的小鼠血清和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量,测定与应激损伤相关的小鼠血清和脑组织中神经递质去甲肾上腺素(NE)、5-羟基色胺(5-HT),糖皮质激素(GC)和乙酰胆碱酯酶(ACh E)活性。结果红豆越橘提取物能够改善应激模型小鼠的认知记忆能力;增加脑组织中SOD、GSH-Px酶活性,降低应激损伤产物MDA的含量;同时抑制血清中GC的升高及Ach E的激活,促进血清及脑组织中5-HT、NE含量的升高。结论红豆越橘提取物能够改善应激损伤小鼠的学习认知能力,其可能机制为通过增强抗氧化能力来降低氧化损伤并改善应激造成的神经递质水平紊乱。

笃斯越橘花色苷提取物对光损伤人视网膜色素上皮细胞的保护作用

目的:通过建立人视网膜色素上皮细胞(hRPE)光损伤模型评价笃斯越橘花色苷对眼睛的保护作用及机理。方法:光损伤设置光强、光照时间、后续培养时间3个影响因素,以细胞存活率和乳酸脱氢酶活性评价模型建立情况;根据越橘花色苷提取物的干预方式分为预防组、应激组和修复组,每组设高、中、低3个浓度,检测细胞存活率和血管内皮生长因子(VEGF)水平评价保护效果。结果:选择光照度2500lx,光照24h后培养24h作为最佳造模条件,细胞损伤率达20%;预防组和应激组能有效保护细胞活力(P<0.01),修复组没有效果,各组都能抑制由光损伤诱导hRPE细胞VEGF的过表达,但是不同浓度之间抑制能力有差异。结论:hRPE细胞光损伤程度呈光照强度和光照时间依赖性;越橘花色苷能通过保护hRPE的细胞活力和VEGF的过表达,实现保护眼科健康、预防眼科疾病的作用。

笃斯越橘花青素提取物对3T3-L1前脂肪细胞生长的抑制作用

目的:研究笃斯越橘花青素提取物对3T3-L1前脂肪细胞生长抑制作用及其作用机理。方法:采用MTT法观察细胞生长抑制并确定半数抑制浓度(IC50),LDH(lactate dehydrogenase)法评价提取物引起的细胞膜损伤,流式细胞计法测定细胞周期,荧光显微镜观察凋亡细胞的形态学特征。结果:笃斯越橘花青素提取物能够有效地抑制3T3-L1前脂肪细胞的生长且IC50约为214μg/mL;LDH实验表明细胞LDH释放率在24、48、72h分别为89.0%、85.2%、67.8%,72h时相对24h或48h明显降低(P<0.05),提取物对3T3-L1前脂肪细胞膜的通透性未见明显增加;笃斯越橘花青素提取物能够有效诱导细胞凋亡,同时在S或G0/G1期产生阻滞,但是对细胞的G2/M期未见明显影响,荧光显微镜观察细胞出现典型凋亡特征。结论:笃斯越橘花青素提取物能有效抑制3T3-L1前脂肪细胞生长的作用,具有开发为天然抗肥胖功能因子的潜在可能。

GC测定越橘提取物中的有机溶剂残留量

目的 采用毛细管气相色谱法测定越橘提取物中的甲醇、乙醇、丙酮3种有机溶剂残留量。方法 采用HP-INNOWAX（30 m×0.320 mm,0.50μm）毛细管色谱柱,氢火焰离子化检测器,程序升温：初始化温度40℃（维持6 min）,以25℃·min^-1速率升温至220℃（维持5 min）;载气为氮气,进样口温度：220℃;检测器温度：250℃。结果 3种有机溶剂完全分离,浓度在考察范围内与峰面积具有良好的线性关系,其中甲醇、乙醇、丙酮的线性范围分别为1.035-10.35,10.018-100.18,0.259-2.59μg·m L^-1,平均回收率分别为97.95%,98.24%,98.10%。结论 本方法灵敏、准确、可靠,能较好地检测越橘提取物中有机溶剂残留量,控制产品质量。

天然提取物抗PM_(2.5)诱导A549细胞凋亡的作用

采集北京城区大气可吸入颗粒物中的细颗粒物(PM2.5),用其对人肺腺癌A549细胞染毒,探讨PM2.5对细胞增殖的毒性和诱导细胞凋亡的作用,并且考察了加入不同浓度的红豆越橘提取物和竹叶提取物对其的抗性作用。实验采用MTT法检测细胞增殖作用,采用Annexin V-FITC/PI双染法和流式细胞仪检测细胞凋亡。结果显示:PM2.5浓度<150mg·L-1时可刺激A549细胞增殖,而PM2.5浓度≥150mg·L-1时可抑制细胞增殖;竹叶提取物和红豆越橘提取物浓度<200mg·L-1范围内没有明显的细胞毒性作用,但具有抗PM2.5细胞毒性的作用;与PM2.5单独作用组比较,浓度为50mg·L-1和100mg·L-1的竹叶提取物可明显降低细胞凋亡率(p<0.05);红豆越橘提取物也能够降低PM2.5诱导的A549细胞凋亡率,且有剂量-效应关系(r=-0.958,p<0.05);在相同浓度下(50mg·L-1),竹叶提取物的拮抗保护能力强于红豆越橘提取物。实验结果表明,竹叶提取物和红豆越橘提取物的细胞毒性较低,一定浓度范围内2种提取物对PM2.5诱导的A549细胞凋亡率有拮抗作用。

越橘牛磺酸压片糖果缓解视疲劳的作用研究

目的:研究新型越橘牛磺酸压片糖果缓解视疲劳的作用。方法:筛选纳入106例视疲劳受试者,按随机双盲法分为试食组和对照组各53人。试食组口服越橘牛磺酸压片糖果,对照组口服安慰剂,每日1次,每次2片,连续服用60 d,测定安全性和功效性指标。结果:试食组试食前后自身对比和试食后与对照组组间对比,视疲劳症状明显改善,症状总积分降低,明视持久度增长,自身及组间差异均具有显著差异(P<0.05,P<0.01)。结论:越橘牛磺酸压片糖果具有缓解视疲劳的作用,安全无副作用。

叶黄素越橘咀嚼片的制备及缓解视疲劳评价

目的:研制一种具有缓解视疲劳作用的叶黄素越橘咀嚼片,并筛选和优化叶黄素越橘咀嚼片最佳配方,探讨其缓解视疲劳作用。方法:采用干法制粒法制备叶黄素越橘咀嚼片,通过单因素实验,选择合适的矫味剂(蓝莓果汁粉、柠檬酸)、填充剂(木糖醇、预胶化淀粉)、干性黏合剂(微晶纤维素)、润滑剂(硬脂酸镁)、叶黄素微粒和越橘提取物配比。通过对咀嚼片口感、硬度、脆碎度、颗粒流动性、感官评价等方面的考察筛选配方,通过放大试验确定最佳配方,并选择30例视力易疲劳者进行缓解视疲劳自我评价。结果:叶黄素越橘咀嚼片最佳配方为每片中叶黄素微粒100 mg,欧洲越橘提取物20 mg,木糖醇470 mg,蓝莓果汁粉300 mg,预胶化淀粉250 mg,硬脂酸镁30 mg,微晶纤维素20 mg,柠檬酸10 mg;按此配方所得咀嚼片中叶黄素含量0.94 g/100g,花青素含量0.48 g/100g;缓解视疲劳自我评价显示视疲劳症状明显减轻。结论:叶黄素越橘咀嚼片酸甜可口,色泽均匀,硬度适中,服用方便,具有缓解视疲劳功效。

越橘泡腾片的研制及体外抗氧化活性研究

以越橘提取物和黑加仑提取物为原料,采用多指标综合评分正交试验研究越橘泡腾片的最优配方工艺,并进行抗氧化功能测试。采用湿法制粒,通过单因素实验考察酸源、填充剂、酸源与碳源的比例,崩解剂的用量,越橘提取物和黑加仑提取物的用量及比例;在单因素基础上,采用正交设计试验,以pH值、平均发泡量、崩解时限、感官评价作为综合评分指标,确定最优组合。最终选出的最优组合为:崩解剂46.9%(柠檬酸28%,碳酸氢钠18.9%)、乳糖41.2%、越橘提取物10%、黑加仑提取物1%、三氯蔗糖0.8%、硬脂酸镁0.1%。所得越橘泡腾片具备良好的抗氧化能力,体外抗氧化实验表明,其羟基自由基清除能力和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力的半数清除率(IC50)分别为0.819 mg/ml、1.194 mg/ml,还原能力在浓度为2.0 mg/mL时达到0.504。本实验为泡腾片的生产制作和质量评价提供一定的参考价值和科学依据。