不可复性牙髓炎患者血清可溶性B7-H3、CX3趋化因子受体1水平变化及其临床意义

目的检测不可复性牙髓炎患者可溶性B7-H3(sB7-H3)、CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)水平变化,探讨二者在预后中的评估价值。方法选取104例不可复性牙髓炎患者为病例组,其中急性牙髓炎52例、慢性牙髓炎52例,根据治疗结果分为预后好组83例和预后差组21例;选同期体检健康者101例为健康组。采用酶联免疫吸附法检测血清sB7-H3、CX3CR1水平。结果病例组血清sB7-H3、CX3CR1水平高于健康组(P<0.05)。急性牙髓炎患者血清sB7-H3、CX3CR1水平高于慢性牙髓炎患者(P<0.05)。预后差组治疗前后血清sB7-H3、CX3CR1水平高于预后好组(P<0.05);血清sB7-H3、CX3CR1水平不同时间、组间及交互作用比较,差异有统计学意义(P<0.05)。预后差组病情为急性的患者比例高于预后好组(P<0.05)。sB7-H3、CX3CR1是不可复性牙髓炎患者预后差的独立影响因素(P<0.05)。结论不可复性牙髓炎患者血清sB7-H3、CX3CR1水平升高,二者可能成为评估不可复性牙髓炎病情及治疗效果的重要指标。

血清钙离子水平、神经肽Y、CX3C趋化因子受体1对带状疱疹后遗神经痛的预测价值及其与神经系统损伤的相关性分析

目的探讨血清钙离子水平、神经肽Y、CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)对带状疱疹后遗神经痛(PHN)的预测价值及其与神经系统损伤的相关性。方法回顾性选取2019年3月到2022年3月解放军东部战区总医院收治的60例带状疱疹患者作为研究对象进行分析,将其作为观察组,对所有患者分别给予镇痛药物、抗惊厥药物以及抗菌药物进行常规治疗,并在治疗2个月后对所有患者进行疼痛数字评分量表(NRS)评分,将NRS评分≥4分,且将向相邻区域或皮肤病区域出现持续性疼痛的23例患者设为PHN组,将其余37例患者设为非PHN组,对比两组患者一般临床资料与治疗前钙离子、神经肽Y、CX3CR1水平,并应用Logistic回归分析钙离子、神经肽Y、CX3CR1对PHN的预测价值。60例带状疱疹患者治疗6个月后对其进行QST诊断,并选取同期体检的60名健康者作为对照组,对比观察组与对照组患者定量感觉测试(QST)诊断结果,并对比两组患者治疗后钙离子、神经肽Y、CX3CR1水平,分析钙离子、神经肽Y、CX3CR1与QST诊断结果的相关性,随后建立受试者工作特征(ROC)曲线,分析钙离子、神经肽Y、CX3CR1对PHN神经系统损伤的诊断效能。结果PHN组与非PHN组患者性别构成比、年龄、体重指数、合并冠心病、高血压、发病部位比较,差异均无统计学意义(P>0.05),PHN组患者合并糖尿病患者比率,坏疽型或出血型患者比率,NRS评分,治疗前的神经肽Y、CX3CR1水平均高于非PHN组,治疗前的钙离子水平低于非PHN组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果表明,治疗前钙离子、神经肽Y、CX3CR1为PHN的独立影响因素(P<0.05)。治疗后,观察组热痛觉、冷痛觉、温觉、冷觉、神经肽Y、CX3CR1高于对照组,钙离子低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。采用Spearman相关法分析神经系统损伤QST诊断各因子与钙离子、神经肽Y、CX3CR1表达水平的相关性。结果显示,QST诊断热痛觉、冷痛觉、温觉、冷觉各因子与钙离子呈负相关,与神经肽Y、CX3CR1呈正相关(P<0.05)。钙离子、神经肽Y、CX3CR1三者联合对神经系统损伤诊断的敏感度与特异度明显高于单一预测(P<0.05)。结论PHN患者血清神经肽Y、CX3CR1水平呈高表达,钙离子呈低表达;治疗前对PHN患者进行钙离子、神经肽Y、CX3CR1检测可预测患者远期后遗神经痛情况,且治疗后钙离子、神经肽Y、CX3CR1三者联合可提升对患者远期神经系统损伤的诊断价值。

基于胶质细胞GR/CX3CR1双信号探讨柴金解郁安神片含药血清减轻体外抑郁模型大鼠ACC神经元突触损伤的机制

目的:基于胶质细胞糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)/CX3C趋化因子受体1(CX3C chemokine receptor 1,CX3CR1)双信号探讨柴金解郁安神片(CJJY)含药血清对体外抑郁模型中大鼠前扣带皮层(anterior cingulate cortex,ACC)神经元突触损伤的保护机制。方法:原代培养SD大鼠ACC脑区星形胶质细胞、小胶质细胞和神经元,并分别进行鉴定;采用200μmol/L皮质酮(corticosterone,CORT)联合1 mg/L脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)建立模拟抑郁环境的体外细胞模型,实验设正常组、模型组(CORT+LPS)、GR阻断剂(GR-)组(CORT+LPS+RU486)、GR激动剂(GR+)组(CORT+LPS+dexamethasone)、CX3CR1阻断剂(CX3-)组(CORT+LPS+AZD8797)、CX3CR1激动剂(CX3+)组(CORT+LPS+fractalkine)、CJJY组(CORT+LPS+CJJY含药血清)、CJJY联合GR激动剂(CJJY/GR+)组(CORT+LPS+CJJY含药血清+dexamethasone)组和CJJY联合CX3CR1激动剂(CJJY/CX3+)组(CORT+LPS+CJJY含药血清+fractalkine);高内涵细胞成像分析技术观察星形胶质细胞、小胶质细胞和ACC神经元形态学变化;ELISA法检测细胞上清液中促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)、促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasing hormone,CRH)、CORT、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6和谷氨酸(glutamate,Glu)水平;免疫荧光染色检测星形胶质细胞中GR和囊泡谷氨酸转运体1(vesicular glutamate transporter 1,VGluT1)表达水平,以及小胶质细胞中CX3CR1和腺苷A2A受体(adenosine A2A receptor,A2AR)表达水平;Nissl染色和β-tubulin染色观察神经元突触损伤情况。结果:CJJY含药血清能减轻体外抑郁模型中大鼠星形胶质细胞损伤,抑制小胶质细胞激活,同时抑制细胞上清液中ACTH、CRH、CORT、TNF-α、IL-1β、IL-6和Glu水平异常增高(P<0.05或P<0.01),有效调控GR、VGluT1、CX3CR1和A2AR表达异常(P<0.05或P<0.01),并减轻大鼠ACC神经元树突和树突棘损伤。结论:CJJY含药血清通过调控胶质细胞GR/CX3CR1双信号而减轻体外抑郁模型中大鼠ACC神经元突触损伤。

单核细胞CX3C趋化因子受体1表达联合PLT对经皮冠状动脉介入治疗后支架内再狭窄的应用

目的探讨单核细胞CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)表达联合血小板计数(PLT)对经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后支架内再狭窄(ISR)的应用价值。方法 2015年11月至2017年3月在天津泰达国际心血管病医院就诊的经冠状动脉造影(CAG)确认的74例ISR患者和40例不明显病变患者纳入试验研究,对照组为125例无冠状动脉疾病的志愿者,并同期随访首次经PCI治疗的69例患者。用流式细胞术分析单核细胞CX3CR1膜蛋白表达,血液分析仪检测外周血PLT;利用Spearman相关、ROC曲线分析CX3CR1表达及CX3CR1表达联合PLT与ISR的关系;应用Kaplan-Meier模型评估CX3CR1表达及CX3CR1表达联合PLT对ISR的预测价值。结果 ISR组、不明显病变组、对照组CX3CR1表达分别为12.0%(7.5%,17.6%)、9.1%(4.9%,12.5%)、7.2%(5.6%,9.8%),Hc=26.50,P<0.001。ISR组CX3CR1表达高于对照组(Z=5.15,P<0.001)和不明显病变组(Z=2.65,P=0.008)。ISR组、不明显病变组、对照组PLT分别为(211.65±46.40)×10^9/L、(182.82±39.80)×109/L、(241.44±52.33)×10^9/L,F=21.97,P<0.001。ISR组PLT高于不明显病变组(t=3.24,P=0.002),低于对照组(t=-3.88,P<0.001)。不同Gensini积分间CX3CR1表达(Hc=3.54,P=0.351)及PLT(Hc=2.02,P=0.121)差异均无统计学意义。CX3CR1表达与吸烟(r=0.257,P=0.027)及PLT(r=0.246,P=0.036)呈正相关。CX3CR1表达联合PLT诊断ISR的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.816,敏感性为63.0%,特异性为86.2%。Kaplan-Meier分析显示,CX3CR1表达联合PLT预测远期ISR Log-rank χ2=8.982,P=0.003,阳性预测值(PPV)为21.7%,阴性预测值(NPV)为97.8%,敏感性为83.3%,特异性为71.4%。结论单核细胞CX3CR1及PLT可能是潜在的ISR的辅助诊断指标和远期排除ISR的阴性预测指标。

趋化因子CX3C受体1基因rs3732378多态性与急性冠状动脉综合征的相关性

目的探讨趋化因子CX3C受体1(CX3CR1)基因rs3732378单核苷酸多态性与急性冠状动脉综合征(ACS)的相关性。方法连续收集中国北方汉族人群951例,其中男性520例,女性431例,年龄35~75岁。根据冠状动脉造影(CAG)结果分为2组:(1)病例组(n=512):ACS患者;(2)对照组(n=439):非冠心病患者。病例组根据CAG检查血管病变支数分为3个亚组。采用测序法测定CX3CR1基因rs3732378单核苷酸多态位点的基因型。用多因素Logistic回归分析CX3CR1基因rs3732378多态性与ACS发病风险的关系。应用酶联免疫吸附法检测血浆中趋化因子CX3C配体1(CX3CL1)表达水平。结果两组CX3CR1基因rs3732378的基因型及等位基因的分布频率无显著性差异(P>0.05)。rs3732378多态位点与ACS发病风险的总体和分层分析结果表明,CX3CR1基因rs3732378多态位点的3种基因型TT、TC和CC均不能增加ACS的发病风险(P>0.05)。亚组分析显示,rs3732378多态位点的基因型和等位基因与冠状动脉血管病变支数无相关性(χ2=0.135,P=0.998;χ2=0.026,P=0.987)。病例组和对照组血浆中CX3CL1表达水平在rs3732378三种基因型无差异(P>0.05)。结论 CX3CR1基因rs3732378多态位点不是ACS的易感基因,rs3732378多态性没有增加中国北方汉族人群ACS的风险。

过表达CC趋化因子受体7的C3H10 T1/2细胞具有更强的免疫抑制效应

目的研究过表达CC趋化因子受体7(CCR7)的C3H10 T1/2小鼠间充质干细胞系在小鼠皮肤移植模型中,是否具有比原始C3H10 T1/2细胞更强的免疫抑制作用。方法培养扩增稳定的小鼠C3H10 T1/2细胞,并利用慢病毒工具导入EGFP-CCR7基因;以C57BL/6小鼠为供体获取皮片,以BALB/c小鼠为受体建立小鼠同种异系皮肤移植模型;实验动物分4组:CCR7+C3H10 T1/2细胞组、C3H10 T1/2组、同种异系对照组和同系对照组(受者小鼠移植同系小鼠皮片),分别于移植模型成功当天,经尾静脉注射1×106C3H10 T1/2细胞、1×106CCR7+C3H10 T1/2细胞、等体积生理盐水(对照组);观察皮片移植后的存活情况,并于皮片移植第12天,测定小鼠脾淋巴细胞中Th17细胞与调节性T细胞(Treg)的比例,HE染色观察皮片病理变化。结果受者小鼠皮片移植后12 d,外观、组织病理形态观察以及流式细胞术检测结果表明,CCR7+C3H10 T1/2细胞与C3H10 T1/2细胞的皮片存活情况均优于同种异系对照组;CCR7+C3H10 T1/2细胞皮片移植后存活情况优于C3H10 T1/2细胞组,且移植免疫反应程度轻于C3H10 T1/2细胞组。结论 CCR7+C3H10 T1/2细胞相对于正常的C3H10 T1/2细胞,拥有更好的免疫抑制效应,可有效的降低移植免疫炎性反应,改善移植物的生存状态。

CX3CR1通过调控巨噬细胞极化影响肾间质纤维化

目的:CX3C趋化因子受体1(CX3C chemokine receptor 1,CX3CR1)与CX3C趋化因子配体1(CX3C chemokine ligand 1,CX3CL1)结合后促使巨噬细胞等炎症细胞向受损部位迁移,巨噬细胞极化与肾间质纤维化相关。本研究旨在探讨CX3CR1是否通过调控巨噬细胞极化来影响肾间质纤维化的进展。方法:建立C57/B6小鼠单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)肾间质纤维化模型,并将其分为CX3CR1抑制剂组与模型组,分别连续5 d腹腔注射CX3CR1抑制剂AZD8797或生理盐水,于建模后第7天取小鼠建模侧肾脏。分别采用苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色和Masson染色观察肾间质炎症细胞浸润和胶原纤维沉积情况。采用反转录聚合酶链反应(reverse transcription PCR,RT-PCR)和蛋白质印迹法检测小鼠肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin,α-SMA)、纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)、CX3CR1的mRNA表达和CX3CR1蛋白质表达情况。采用全基因组测序鉴别2组肾组织的差异表达基因并用RT-PCR验证精氨酸酶-1(arginase-1,Arg-1)的差异表达。采用流式细胞术检测2组肾组织M2型巨噬细胞占比。结果:CX3CR1抑制剂组小鼠肾间质炎症细胞浸润明显减少,胶原纤维沉积明显减轻。CX3CR1抑制剂组小鼠肾组织中CX3CR1 mRNA及蛋白质水平、α-SMA和FN mRNA水平均明显低于模型组(均P<0.05)。全基因组测序显示2组肾组织中差异表达前5位的基因依次为Ugt1a6b、Serpina1c、Arg-1、Retnla和Nup62,RT-PCR证实CX3CR1抑制剂组Arg-1 mRNA水平明显高于模型组(P<0.001)。流式细胞术结果显示CX3CR1抑制剂组小鼠肾脏中Arg1+CD206+M2型巨噬细胞占比明显高于模型组(P<0.01)。结论:抑制CX3CR1的表达可有效缓解小鼠肾间质纤维化,其机制可能与巨噬细胞向M2型极化及Arg-1的表达上调有关。

阿尔茨海默病患者血清IL-1β、CX3CR1联合Hcy检测对认知功能的预测价值分析

目的探讨阿尔茨海默病(AD)患者血清白细胞介素-1β(IL-1β)、CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)联合同型半胱氨酸(Hcy)检测对认知功能的预测价值。方法选取98例AD患者作为AD组,根据认知功能障碍程度分为轻中度组(65例)和重度组(33例),选择同时期健康体检者100例为对照组。比较各组血清IL-1β、CX3CR1、Hcy水平,采用Logistic回归分析AD患者认知功能障碍程度的风险因素,绘制ROC曲线分析血清IL-1β、CX3CR1联合Hcy表达水平对AD认知功能障碍程度的诊断价值。结果AD组血清IL-1β、Hcy水平高于对照组,CX3CR1水平低于对照组(P<0.01)。重度组受教育年限低于轻中度组(P<0.01)。重度组血清IL-1β、Hcy水平高于轻中度组,CX3CR1水平低于轻中度组(P<0.05)。回归分析结果显示,受教育年限、CX3CR1是认知功能障碍程度的保护因素,而IL-1β、Hcy是认知功能障碍程度的危险因素(P<0.05)。ROC分析显示,血清IL-1β、CX3CR1、Hcy诊断认知功能障碍程度的截断值分别为4.12 ng/L、150.60 ng/L、20.12μmol/L,AUC分别为0.870、0.895、0.864,敏感度分别为75.80%、87.90%、75.80%,特异度分别为90.80%、83.10%、87.70%,联合预测的AUC为0.953,敏感度、特异度为97.00%、83.10%。结论AD患者血清IL-1β、Hcy水平升高,CX3CR1水平降低,均与认知功能障碍程度有关,联合检测可辅助临床对AD病情进行诊断。

趋化因子CX3C配体1和CX3C趋化因子受体1水平与慢性心力衰竭患者心功能和预后的相关性

目的分析趋化因子CX3C配体1(CX3CL1)和CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)水平与慢性心力衰竭(CHF)患者心功能分级和预后的相关性。方法回顾性分析中国人民解放军东部战区总医院和武汉亚洲心脏病医院2021年6月至2023年6月200例CHF患者的临床资料,患者均接受心力衰竭标准化治疗。记录患者的基线临床资料;采用酶联免疫吸附法检测CX3CL1和CX3CR1水平;采用纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级方法进行心功能分级。患者随访时间截至2023年12月,根据预后将患者分为预后不良组(全因死亡和心力衰竭再入院)和预后良好组。相关性分析采用Pearson法;采用多因素Logistic回归分析影响CHF患者预后不良的独立危险因素。结果200例患者中,NYHA心功能分级Ⅰ~Ⅱ级80例,Ⅲ~Ⅳ级120例。NYHA心功能分级Ⅲ~Ⅳ级患者CX3CL1和CX3CR1明显高于NYHA心功能分级Ⅰ~Ⅱ级患者[(3.34±0.45)mg/L比(2.45±0.26)mg/L和(8.71±0.92)mg/L比(2.53±0.35)mg/L],差异有统计学意义(t=15.99和57.34,P<0.01)。预后不良组(40例)年龄<60岁比例、合并冠心病率、CX3CL1、CX3CR1、体质量指数和超敏C反应蛋白明显高于预后良好组(160例)[82.50%(33/40)比10.62%(17/160)、90.00%(36/40)比68.12%(109/160)、(3.26±0.77)mg/L比(2.25±0.27)mg/L、(8.35±2.01)mg/L比(2.48±0.31)mg/L、(26.80±3.55)kg/m2比(24.74±2.76)kg/m2和(9.31±2.19)mg/L比(3.58±2.28)mg/L],吸烟史率和左心室射血分数明显低于预后良好组[37.50%(15/40)比46.88%(75/160)和(30.14±5.77)%比(59.40±6.58)%],差异有统计学意义(P<0.01)。Pearson相关分析结果显示,CX3CL1和CX3CR1与NYHA心功能分级呈正相关(r=0.29和0.34,P<0.05),与预后呈负相关(r=-0.54和-0.36,P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,CX3CL1和CX3CR1为影响CHF患者预后不良的独立危险因素(OR=2.110和1.566,95%CI 0.445~3.125和0.270~3.455,P<0.01)。结论CX3CL1和CX3CR1与CHF患者心功能分级密切相关,入院时可考虑结合此两项指标对患者进行初步评估并予以针对性干预,以改善预后。

CX3CL1和CX3CR1与动脉粥样硬化性心脏病损伤机制的研究现状

趋化因子Fractalkine(CX3CL1)及其特异性受体CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)、CX3CL1-CX3CR1轴均参与了动脉粥样硬化的形成和发展,并改变了斑块成分和斑块的稳定性。CX3CR1 V249I和CX3CR1 T280M与冠状动脉损伤相关。在动脉粥样硬化斑块中,CX3CL1、CX3CR1通过血管平滑肌细胞(VSMC)和单核细胞/巨噬细胞进行表达,VSMC和单核细胞间相互作用需通过CX3CL1-CX3CR1轴,这种相互作用调节了单核细胞的生存及分化。抵抗素可能通过一系列涉及核因子-κB(NF-κB)、活化蛋白-1(AP-1)、信号转导和转录激活因子(STAT)1/STAT3的机制使CX3CL1和CX3CR1表达上调,进而产生平滑肌细胞的促炎性状态。在不稳定性冠心病及冠状动脉严重病变患者中,血清CX3CL1水平明显升高;血清CX3CR1在冠状动脉狭窄性疾病患者中明显升高,但与冠状动脉狭窄程度无相关性。通过CX3CL1/CX3CR1的相关研究,可揭示某些炎性介质在动脉粥样硬化性心脏病中的潜在机制和致病作用,从而为临床治疗策略及干预药物的研究提供依据及方向。

单核细胞LOX-1、CX3CR1表达与冠状动脉近段/中段狭窄的关系

目的探讨外周血单核细胞血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)、CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)表达与冠状动脉近段/中段狭窄的关系。方法选取行冠状动脉造影术的患者58例,根据冠状动脉造影结果分为近段/中段狭窄组(至少1支主要冠状动脉血管近段或中段狭窄≥50%,简称狭窄组;47例)和病变不明显组(冠状动脉血管狭窄<50%,11例)。以26名志愿者作为对照组。记录3个组的一般资料及实验室指标,采用流式细胞术测定外周血单核细胞LOX-1、CX3CR1荧光表达强度,以Gensini积分系统来评估冠状动脉病变严重程度,比较单支病变、2支病变及多支(3支及以上)病变患者单核细胞LOX-1、CX3CR1的荧光表达强度。分析单核细胞LOX-1、CX3CR1荧光表达强度与各项指标及Gensini积分之间的相关性,采用多因素逐步Logistic回归分析及受试者工作特征(ROC)曲线评价冠状动脉近段/中段狭窄性疾病的影响因素及其诊断价值。结果狭窄组外周血单核细胞LOX-1、CX3CR1荧光表达强度明显高于病变不明显组及对照组(P<0.01)。狭窄组中单支病变、2支病变、多支病变之间外周血单核细胞LOX-1、CX3CR1荧光表达强度差异均无统计学意义(P>0.05)。狭窄组外周血单核细胞LOX-1、CX3CR1荧光表达强度与左心室射血分数(LVEF)、左心室舒张末期内径(LVDD)、Gensini积分均无相关性(P>0.05)。多因素逐步Logistic回归分析及ROC曲线分析显示,CX3CR1是冠状动脉近段/中段狭窄的影响因素[比值比(OR)=1.771,95%可信区间(CI)1.200~2.616],且具有一定的诊断效力(ROC曲线下面积为0.733)。结论单核细胞LOX-1、CX3CR1高表达可能参与了冠状动脉近段/中段狭窄的病变过程,但与其狭窄程度无关。单核细胞CX3CR1高表达是冠状动脉近段/中段狭窄的影响因素,且对疾病诊断有一定的效力。

脊髓CX_3CR_1在骨癌痛大鼠吗啡耐受形成中的作用

目的观察骨癌痛-吗啡耐受大鼠脊髓背角CX3C趋化因子受体1（CX3CR1）蛋白表达的变化,探讨CX3CR1在骨癌痛大鼠吗啡耐受形成中的作用及其与小胶质细胞之间的关系。方法成年雌性SD大鼠48只,随机分为4组（n=12）：对照组（C组）、假手术组（S组）、骨癌痛-吗啡耐受组（BM组）、BM＋米诺环素组（BM＋m组）。C组不作任何处理;S组大鼠仅手术暴露右侧胫骨上段;BM组大鼠右侧胫骨上段骨髓腔注入Walker 256乳腺癌细胞10μL（4×105个细胞/mL）制作骨癌痛模型,第9天开始鞘内给予20μg/kg吗啡,2次/d,连续7 d;BM＋m组在BM组处理方法的基础上,手术后第16天再连续3 d鞘内注射米诺环素250μg/kg。分别于术前,术后第3、6、9、12、15、18天测定大鼠机械缩足阈值（MWT）和机械缩足持续时间（MWD）,各组于术后18 d处死大鼠,取脊髓L4~6节段组织,采用Western blot法测定CX3CR1蛋白表达,免疫组化法检测小胶质细胞标记物OX-42水平。结果 BM组大鼠在鞘内给予吗啡第7天（即术后第15天）形成较稳定的吗啡耐受,表现为MWT值下降,明显低于C组和S组（均P〈0.01）,而MWD上升,明显高于C组和S组（均P〈0.01）,术后第18天两指标与BM＋m组比较差异也有统计学意义（均P〈0.05）。BM组大鼠吗啡耐受形成后脊髓背角CX3CR1蛋白和OX-42表达明显高于C组和S组（均P〈0.01）,而BM＋m组注射米诺环素后脊髓CX3CR1蛋白和OX-42表达低于BM组（均P〈0.05）。结论脊髓CX3CR1可能在骨癌痛大鼠慢性吗啡耐受的形成中发挥重要作用,小胶质细胞活化使脊髓CX3CR1蛋白表达上调。

CD14、HIF-1α、CX3CL1与儿童急性牙髓炎易感性关系及诊断价值

目的探讨脂多糖信号受体(CD14)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、趋化因子CX3C的配体1(CX3CL1)与儿童急性牙髓炎(AP)易感性的关系。方法选取2018年1月至2020年12月本院收治的82例儿童AP患者(AP组)及40例健康儿童(对照组),比较两组基线资料、CD14、HIF-1α、CX3CL1,并比较不同CD14、HIF-1α、CX3CL1水平患者疼痛视觉模拟评分法(VAS)评分,分析CD14、HIF-1α、CX3CL1与VAS评分关系以及儿童AP易感性的相关影响因素,评价各指标诊断AP的价值。结果 AP组中CD14、HIF-1α、CX3CL1水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);CD14、HIF-1α、CX3CL1高水平患者VAS评分高于低水平患者,差异有统计学意义(P<0.05);CD14、HIF-1α、CX3CL1与VAS评分正相关(P<0.05);CD14、HIF-1α、CX3CL1与儿童AP的易感性相关(P<0.05);CD14、HIF-1α、CX3CL1联合诊断AP的曲线下面积(AUC)最大,为0.926。结论血清CD14、HIF-1α、CX3CL1水平升高可能增加儿童AP易感性,并与疼痛程度存在良好线性关系,联合检测上述指标有助于儿童AP诊断。

CX3CR1参与NF-κB在脊髓水平调控大鼠炎性痛的研究

目的:观察鞘内注射核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫氨基甲酸(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对单关节炎(monoarthritis,MA)模型大鼠痛阈值和脊髓中CX3C趋化因子受体-1(CX3C chemokine receptor1,CX3CR1)表达的影响。方法:48只成年雄性Sprague-Dawley大鼠鞘内置管成功后,随机分为4组,即sham组(假手术组)、MA组(单关节炎组)、PDTC预处理组及PDTC后处理组,每组大鼠均为12只。鞘内置管5d后制作MA模型。Sham组:左侧踝关节腔内注射50μL生理盐水,鞘内注射10μL生理盐水;MA组:左侧踝关节腔内注射50μL完全弗氏佐剂(complete Freund'sadjuvant,CFA),鞘内注射10μL生理盐水;PDTC预处理组:鞘内注射10μL PDTC(100μmol/L),30min后左侧踝关节腔内注射50μL CFA;PDTC后处理组:左侧踝关节腔内注射50μL CFA,30min后鞘内注射10μL PDTC(100μmol/L)。于术前及术后不同时间点测定痛阈值,用免疫组织化学法观察L5脊髓节段小胶质细胞的表达情况,并在鞘内注射后第1,3,5,7天取L4-L5脊髓膨大节段检测NF-κB mRNA和CX3CR1mRNA的表达。结果:与MA组相比,sham组、PDTC预处理组及PDTC后处理组的大鼠同侧后肢各时间点痛阈值明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与MA组相比,PDTC预处理组及PDTC后处理组大鼠的L5脊髓节段的小胶质细胞数量明显减少,脊髓中CX3CR1mRNA和NF-κB mRNA的表达均明显减少,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:鞘内注射NF-κB抑制剂PDTC可以缓解CFA所致MA模型大鼠的痛觉异常。其机制可能与NF-κB信号通路通过调节CX3CR1的表达而参与炎性痛的发生、发展有关。

miR⁃143⁃3p通过调控CX3CL1/CX3CR1信号通路对脂多糖诱导肺泡上皮细胞损伤的影响

目的探讨miR⁃143⁃3p通过调控趋化因子(C⁃X3⁃C基元)配体1/趋化因子(C⁃X3⁃C基元)受体1(CX3CL1/CX3CR1)信号通路对脂多糖(LPS)诱导肺泡上皮细胞损伤的影响。方法收集急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)患者及健康体检者外周血血清,标记为ALI/ARDS组和Normal组。双荧光素酶实验证实miR⁃143⁃3p与CX3CL1的靶向关系。体外培养人肺泡上皮细胞A549,并将细胞分成Con⁃trol组、LPS组、LPS+NC mimic组(转染NC mimic)、LPS+miR⁃143⁃3p mimic组(转染miR⁃143⁃3p mimic)、LPS+miR⁃143⁃3p mimic+pcDNA组(共转染miR⁃143⁃3p mimic和pcDNA)、LPS+miR⁃143⁃3p mimic+pc⁃CX3CL1组(共转染miR⁃143⁃3p mimic和pc⁃CX3CL1)。qRT⁃PCR检测miR⁃143⁃3p和CX3CL1、CX3CR1 mRNA表达水平;Western blot检测CX3CL1、CX3CR1蛋白表达;MTT和流式细胞术检测细胞活力和凋亡;ELISA分析肿瘤坏死因子⁃α(TNF⁃α)、白介素⁃1β(IL⁃1β)、白介素⁃6(IL⁃6)、血管内皮生长因子(VEGF)和降钙素原(PCT)水平。结果与Normal组相比,ALI/ARDS组患者外周血中miR⁃143⁃3p表达(0.52±0.05)降低,CX3CL1、CX3CR1的mRNA(1.79±0.08)、(1.65±0.06)和蛋白(1.03±0.15)、(0.98±0.12)表达升高(P<0.05)。与Control组比较,LPS组A549细胞中miR⁃143⁃3p表达减小,细胞活力降低,凋亡率[(23.56±0.85)%]及TNF⁃α、IL⁃1β、IL⁃6、VEGF、PCT含量增加(P<0.05)。miR⁃143⁃3p过表达后,细胞活力升高,凋亡率[(13.74±0.69)%]及TNF⁃α、IL⁃1β、IL⁃6、VEGF、PCT含量降低(P<0.05)。双荧光素酶实验结果显示,miR⁃143⁃3p直接负调控CX3CL1表达。CX3CL1过表达可明显逆转miR⁃143⁃3p过表达对LPS诱导的A549细胞损伤的影响和对CX3CR1 mRNA和蛋白表达的抑制作用(P<0.05)。结论miR⁃143⁃3p通过抑制CX3CL1/CX3CR1信号通路,减轻LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤。

带状疱疹患者血清CX3CR1、CCR2表达与带状疱疹后遗神经痛的相关性

目的 分析带状疱疹(HZ)患者血清CX3C趋化因子受体1(CX3CR1)、CC趋化因子受体2(CCR2)水平与带状疱疹后遗神经痛(PHN)的关系。方法 选取2020年7月—2022年2月邢台市人民医院内分泌科和疼痛科诊治HZ患者93例为HZ组,治疗后随访3个月,以是否出现PHN将患者分为PHN亚组(n=32)和非PHN亚组(n=61)。选择同期医院健康体检者40例为健康对照组。比较受试者临床资料、视觉模拟评分(VAS)及血清CX3CR1、CCR2水平;Pearson法分析HZ患者血清CX3CR1与CCR2的相关性;受试者工作特征曲线(ROC)评价血清CX3CR1、CCR2预测HZ患者发生PHN的临床价值;Logistic回归分析HZ患者发生PHN的独立危险因素。结果 PHN亚组患者年龄≥50岁比例、病程、发热比例、HZ分型出血型或坏疽型比例高于非PHN亚组,应用糖皮质激素治疗比例低于非PHN亚组[χ^(2)(t)/P=6.077/0.014、14.888/<0.001、6.129/0.013、13.391/0.001、12.560/<0.001];PHN亚组VAS评分显著高于非PHN亚组(t/P=6.001/<0.001);HZ组血清CX3CR1、CCR2水平均显著高于健康对照组(t/P=20.566/<0.001、18.263/<0.001);PHN亚组血清CX3CR1、CCR2水平均高于非PHN亚组(t/P=11.624/<0.001、13.519/<0.001);HZ患者血清CX3CR1与CCR2呈正相关(r/P=0.442/<0.001);ROC曲线结果显示,血清CX3CR1、CCR2及二者联合预测HZ患者发生PHN的曲线下面积(AUC)分别为0.859、0.863、0.908,但二者联合预测与单项预测AUC比较差异无统计学意义(Z/P=1.117/0.264、0.974/0.330);Logistic回归分析显示,VAS评分高、血清CX3CR1水平高、CCR2水平高均是影响HZ患者发生PHN的独立危险因素[OR(95%CI)=4.301(1.540~12.012)、5.316(2.284~12.373)、7.245(2.175~24.137)]。结论 HZ患者血清CX3CR1、CCR2异常升高,并对患者发生PHN有一定的预测作用。

沉默CX3CR1对炎性痛小鼠痛阈的影响

目的探讨沉默CX3CR1后炎性痛小鼠的痛阈变化。方法雄性C57BL6小鼠20只,体重30～40g,采用随机数字表法,将其随机均分为两组:沉默CX3CR1组(S组)和阴性对照组(C组)。两组均采用右侧跖底皮下注射完全氟氏佐剂50μl的方法制备小鼠炎性痛模型。S组于造模后12h鞘内注射PEI/CX3CR1-siRNA,C组鞘内注射PEI/NC-siRNA。分别于造模前(基础值)、造模后1、3、5和7d时测定右侧机械缩足阈值(MWT)、热刺激缩足潜伏期(TWL)和跖底厚度;造模后7d处死小鼠观察脊髓fractalkine及其CX3CR1的表达以及炎性介质白细胞介素(IL)-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的释放情况。结果与C组比较,S组在造模后1d起右侧MWT、TWL升高,右侧跖底厚度降低,造模后7dCX3CR1的表达降低,IL-1β、TNF-α含量减少(P<0.05)。结论 fractalkine/CX3CR1和炎性疼痛关系密切,沉默CX3CR1基因可以有效缓解炎性痛小鼠的热痛敏和机械痛敏状态。

血清NT-proBNP、Galectin-3、CX3CR1及MIF与冠心病严重程度及预后的相关性分析

目的分析血清N末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)、半乳糖凝集素-3(Galectin-3)、CX3C趋化因子受体-1(CX3CR1)及巨噬细胞游走抑制因子(MIF)与冠心病严重程度及预后的相关性。方法回顾性分析100例接受冠状动脉造影检查患者的病例资料根据造影结果分为冠心病组(n=73)和非冠心病组(n=27)冠心病组分为单支病变、双支病变和多支病变。比较各组血清NT-proBNP、Galectin-3、CX3CR1、MIF及血清炎性因子含量。结果非冠心病患者血清NT-proBNP、Galectin-3、CX3CR1及MIF含量均低于冠心病组(均P<0.05),血清C反应蛋白、TNF-α、IL-6、IL-8、IL-17和IL-23含量均低于冠心病组(均<0.05)。血清NT-proBNP、Galectin-3和MIF含量与冠心病病情严重程度均呈正相关(r≥0.682,均P<0.05),与冠心病患者预后均呈负相关(r≤-0.711,均P<0.05)。结论血清NT-proBNP、Galectin-3及MIF与冠心病严重程度及预后有关具有一定的临床应用价值。

阿尔茨海默病小胶质细胞CX3CR1产物增加并受去甲肾上腺素的调节

去甲肾上腺素能神经元的丧失及其引起的脑去甲肾上腺素(NA)水平的降低与阿尔茨海默病(AD)的进展有关。这似乎主要是由于NA减少小胶质细胞活化的能力。我们以前观察到NA诱导神经元产生趋化因子Fractalkine/CX3CL1。小胶质细胞CX3CR1(CX3CL1的唯一受体)的激活会减少小胶质细胞的活化,已知这在很大程度上引起AD特征性的神经元损伤。因此,操控小胶质细胞中CX3CR1的产物可能转化为对CX3CL1抗炎作用的增强或抑制。为了确定小胶质细胞CX3CR1产物在AD中是否发生改变,以及NA是否可以控制这种改变,我们在5xFAD小鼠和人类AD脑样本中分析了CX3CR1的表达和合成。此外,我们分别在小胶质细胞培养物和小鼠中分析了NA及NA再摄取抑制剂瑞波西汀的作用。我们的结果表明,CX3CR1在AD大脑皮质中的产量增加,而给予瑞波西汀进一步增加了它的含量,并增强了小胶质对淀粉样β斑的反应性。然而,直接向原代大鼠小胶质细胞或人类HMC3细胞给予NA会抑制CX3CR1的产生,这表明小胶质细胞对NA的反应可能会在不存在产生CX3CL1的神经元或其他非小胶质外在因素的作用下发生改变。

米诺环素调控CX3CL1/CX3CR1信号通路对小鼠蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛的影响

目的探讨米诺环素(Min)调控CX3C趋化因子配体1(CX3CL1)/趋化因子CX3C受体1(CX3CR1)信号通路对小鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后迟发性脑血管痉挛的影响。方法将84只小鼠随机分为对照组、SAH组、Min低剂量组、Min高剂量组、尼莫地平组、CX3CL1中和抗体(CX3CL1抑制剂)组、Min高剂量+CX3CL1中和抗体组(每组n=12)。除对照组外,其他组小鼠均按照血管内穿线法构建SAH小鼠模型。所有小鼠均在建模前30 min和建模后1 d、2 d、3 d进行给药处理(×4次)。用改良Garcia评分法评估神经功能;ELISA法检测脑脊液中IL-1β、TNF-α水平;苏木精-伊红染色检测小鼠基底动脉病理变化;TUNEL染色检测小鼠基底动脉中内皮细胞凋亡;Western blot检测基底动脉中裂解的cleved-caspase-3、CX3CL1、CX3CR1蛋白表达。结果与对照组比较,SAH组小鼠神经功能评分及CX3CL1、CX3CR1蛋白水平降低,IL-1β、TNF-α水平、内皮细胞凋亡率及cleved-caspase-3蛋白水平升高,基底动脉管腔横截面积缩小、管壁厚度增加(均P<0.05)。与SAH组比较,Min低剂量组、Min高剂量组和尼莫地平组小鼠神经功能评分及CX3CL1、CX3CR1蛋白水平升高,IL-1β、TNF-α、cleved-caspase-3蛋白水平及内皮细胞凋亡率降低,基底动脉管腔横截面积变大、管壁厚度变小;CX3CL1中和抗体组对应指标变化趋势与上述相反(均P<0.05)。与Min高剂量组比较,Min高剂量+CX3CL1中和抗体组小鼠神经功能评分及CX3CL1、CX3CR1蛋白水平降低,IL-1β、TNF-α、cleved-caspase-3蛋白表达水平及内皮细胞凋亡率升高,基底动脉管腔横截面积缩小、管壁厚度增加(均P<0.05)。结论Min可能通过激活CX3CL1/CX3CR1信号通路改善小鼠SAH后脑血管痉挛。