外周血循环肿瘤细胞及其趋化因子受体CCR9与非小细胞肺癌的临床相关性

目的循环肿瘤细胞(CTCs)在多种肿瘤的临床应用中具有潜在的应用价值。文中旨在探讨CTCs及其趋化因子受体CCR9在非小细胞肺癌(NSCLC)肿瘤侵袭、转移中的作用。方法收集2018年5月至2019年6月就诊于广西壮族自治区人民医院临床肿瘤中心的NSCLC患者共62例。采用Canpatrol^TM CTC技术检测患者外周血中的CTCs及CTCs上CCR9表达水平,对CTCs及其CCR9表达水平与NSCLC患者临床、病理的关系进行分析。结果62例NSCLC患者中56例(90.3%)检测出CTCs。CTCs计数与NSCLC的TNM分期、淋巴结转移、远处转移有关(P<0.05)。在CTCs亚型与NSCLC临床相关性分析中,上皮型CTCs 计数与NSCLC 的TNM 分期(r=0.296,P<0.05)及肿瘤远处转移相关(r=0.273,P<0.05);混合型CTCs 计数与NSCLC 的肿瘤转移也存在相关性(r=0.253,P=0.047);且混合型CTCs上CCR9阳性率亦与NSCLC 远处转移相关(r=0.353,P=0.038)。结论CTCs计数及分型与NSCLC的TNM分期及转移相关。CTCs上CCR9表达水平有望用作评估NSCLC肿瘤转移风险的生物标志物。

白介素-21趋化因子受体CCR9辅助T细胞亚群选择性影响消化系统的附属器官

澳大利亚科学家的最新研究描述了一种CD4+辅助T细胞亚群,其特征是同时表达白介素-21和内脏寻的趋化因子受体CCR9。CCR9+辅助T细胞虽然在健康的老鼠和人身上也有发现,但在糖尿病老鼠模型发炎的胰腺和唾液腺,以及Sjgren's综合症患者中特别多。CCR9+辅助T细胞表达大量的白介素-21、可诱导的T细胞共刺激分子以及转录因子Bcl6和Maf,同时也支持B细胞的抗体生产,因此类似Tfh细胞。不过,相比于Tfh细胞,CCR9+辅助T细胞只表达有限的CXCR5,而且CCR9+辅助T细胞的目标是CD8+T细胞,后者对白介素-21的响应是糖尿病发展必须的。因此,CCR9+辅助T细胞是一类生产白介素-21的辅助T细胞,影响针对消化系统附属器官的自身免疫疾病的区域特异性。该类细胞因此可能在糖尿病发病中起关键作用。该发现对研究糖尿病的发病机理提供了新的线索。

趋化因子CCL11-糖胺聚糖-趋化因子受体CCR3的相互作用研究

目的 探究趋化因子CCL11与受体CCR3、糖胺聚糖(glycosaminoglycans,GAGs)相互作用过程及机制,为深入阐明CCL11-GAGs-CCR3相互作用关系提供理论参考。方法 利用基因工程技术,构建筛选了CCR3-EGFP单分子表达水平的CHO稳转细胞系,利用全内反射荧光成像(total internal reflection fluorescence,TIRF)与等温滴定量热(isothermal titration calorimetry,ITC)技术研究了不同体外溶液条件下GAGs与CCL11的相互作用,并利用趋化实验及活细胞单分子成像实验考察了GAGs-CCL11对CCR3-EGFP稳转细胞趋化行为的调控及CCR3-EGFP在细胞膜上聚集状态的影响。结果 随着硫酸软骨素链长度的增加,其与CCL11结合放热增多,表明其相互作用力增强,其促进CCL11聚集作用增强。单分子荧光成像技术结合趋化试验研究发现,不同种类及不同比例的GAGs均会影响CCL11与CCR3的相互作用,GAGs的加入,抑制了CCL11对CCR3-EGFP稳转细胞的趋化效应及促CCR3-EGFP聚集的能力,且随着硫酸软骨素分子质量的增加,抑制作用显著增强。结论 GAGs的存在可以显著调控CCL11的聚集状态,进而影响其与受体CCR3的相互作用,本研究为进一步阐明CCL11-GAGs-CCR3相互作用关系提供了一定的实验基础。

趋化因子受体9/趋化因子配体25在相关疾病中的研究进展

趋化因子是一类分子量相对较小的结构相关蛋白,能定向诱导免疫细胞趋化,促进炎症反应。趋化因子受体9(CCR9)和趋化因子配体25(CCL25)参与调节多种疾病的发生及发展。早期研究表明,CCR9参与炎症细胞的迁移及成熟等生理过程,后来的研究证实,CCR9/CCL25在各种炎症及非炎症疾病中如炎症性肠病、类风湿性关节炎及心血管疾病、肿瘤等疾病的病理过程中发挥重要作用。因此,本综述概述了CCR9/CCL25在各类疾病中的最新进展,有利于对CCR9/CCL25深入研究,CCR9/CCL25有望成为药物治疗的潜在靶点。

大菱鲆趋化因子受体CCR3和CCR9基因的克隆及组织表达

本实验克隆了大菱鲆趋化因子受体基因CCR3和CCR9的全长cDNA,并进行了鉴定。其中,全长cDNA的克隆采用了5′和3′-RACE。CCR3 cDNA全长1 451 bp,包括92 bp的5′非编码区,276 bp的3′非编码区以及编码360个氨基酸的1 083 bp的开放阅读框。CCR9 cDNA全长1 441 bp,包括59 bp的5′非编码区,278 bp的3′非编码区,以及编码367个氨基酸的1 104 bp的开放阅读框。两种受体均具有7次跨膜结构,符合G蛋白偶联受体的序列特征。系统进化分析表明,大菱鲆CCR3与其他鱼类CCR3聚为一支,大菱鲆CCR9也与其他鱼类的CCR9聚为一支;系统进化树显示的亲缘关系符合各物种的进化地位。实时定量PCR(qRT-PCR)表明这两个基因在大菱鲆正常组织中均有一定量的表达,尤其是它们在头肾、脾及心脏中均有高水平的表达。在脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导之后,CCR3在脾和肝中的表达水平与对照组有显著性差异(P<0.05),而CCR9的表达水平仅在肝中与对照组有显著性差异(P<0.05)。两个基因在免疫相关组织中表达水平较高,并且能够对LPS产生免疫应答,说明它们在大菱鲆免疫系统中发挥了重要功能。

趋化因子受体CXCR2在腹主动脉瘤中的表达及其临床意义

目的探讨CXC趋化因子受体2(CXCR2)在腹主动脉瘤(AAA)中的表达及其临床意义。方法选择2019年7月—2022年7月我院80例AAA作为观察组,同时期行腹主动脉-股动脉移植术者40例作为对照组,分别取观察组AAA前壁组织与对照组腹前动脉血管吻合处正常动脉壁组织,比较2组CXCR2、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白及mRNA表达水平,比较不同临床病理特征AAA患者CXCR2蛋白表达情况,采用Pearson相关性分析CXCR2与MMP-9蛋白表达量的相关性。结果观察组CXCR2、MMP-9蛋白表达阳性率、蛋白表达量及mRNA相对表达量均高于对照组(P<0.01)。瘤体直径≥5 cm、有心脑血管意外史AAA患者CXCR2蛋白表达阳性率分别高于瘤体直径<5 cm、无心脑血管意外史患者(P<0.01,P<0.05)。CXCR2与MMP-9蛋白表达量呈正相关(P<0.01)。结论CXCR2在AAA患者主动脉瘤组织中表达升高,可能与MMP-9具有协同作用,参与AAA的发生与发展。

肝细胞肝癌中HBX趋化因子受体CXCR4及配体CCR7与MMP9的相关性分析

目的：观察趋化因子受体CXCR4及配体CCR7与基质金属蛋白酶9（matrixmetalloproteinase，MMPs）在肝细胞肝癌（Hepatocellularcarcinoma，HCC）中的表达和临床病理学意义。方法：用免疫组织化学法检测HCC组织40例中CXCR、CCR7和MMP9表达，并将上述检测结果结合临床资料进行相关性分析。结果：40例癌组织中20例呈CXCR4高表达，19例呈CCR7高表达，23例MMP9高表达，CXCR、CCR7和MMP9在HCC中，均与HCC病理分级和门静脉癌栓以及复发转移有明显正相关；CXCR、CCR7均与MMP9呈明显正相关。结论：CXCR、CCR7联合MMP9可以作为评估HCC恶性程度和复发转移的肿瘤标志物。

趋化因子受体CCR3、CCR5和CXCR3与自然流产的相关性

目的探讨外周血、脾脏、胸腺趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3与自然流产的关系。方法用双标记流式细胞分析技术检测自然流产模型组小鼠(CBA/J×DBA/2,n=14)、正常妊娠模型组小鼠(CBA/J×BALB/c,n=13)和正常非孕组小鼠(CBA/J,n=11)外周血、脾脏以及胸腺中CD4+T细胞CCR3、CCR5和CXCR3这三类趋化因子受体的表达。结果自然流产模型组外周血CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.01),CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组(P<0.05,P<0.01);但三个指标与正常非孕组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。自然流产模型组脾脏CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.01),高于正常非孕组(P<0.05);而CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组(P<0.05),但与正常非孕组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。自然流产模型组胸腺CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.05),高于正常非孕组(P<0.01);而CXCR3的表达率高于正常妊娠模型组(P<0.05),但与正常非孕组相比,差异无统计学意义(P>0.05);CCR5与其他两组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论CD4+T细胞上CCR3、CCR5和CXCR3的表达异常可能在自然流产的发病中起作用。

趋化因子受体CCR7促进乳腺癌细胞的趋化与侵袭

目的 :研究趋化因子受体CCR7的表达对乳腺癌细胞趋化活性与侵袭活性的促进作用 .方法 :RT PCR法测定 3株乳腺癌细胞MCF 7,MDA MB 2 31,MDA MB 36 1中CCR7的表达 ;在CCR7的配体SLC作用下 ,通过趋化小室法检测不同乳腺癌细胞的趋化活性与侵袭活性 ;检测CCR7的封闭对乳腺癌细胞趋化活性和侵袭活性的影响 .结果 :3株乳腺癌细胞中均存在不同程度CCR7的表达 ,其配体SLC对 3种乳腺癌细胞均存在不同程度的趋化活性和侵袭活性 ,CCR7的封闭也能够在不同程度上抑制乳腺癌细胞的这种趋化活性和侵袭活性 .结论 :趋化因子受体CCR7的表达能够促进乳腺癌细胞的趋化与侵袭 ,从而可能在乳腺癌细胞向淋巴结转移中发挥重要作用 .

趋化因子受体CCR5的研究进展

CCR5为趋化因子CC受体家族成员,属7次跨膜G蛋白耦联受体,配体为CCL3(MIP-1α)、CCL4(MIP-1β)、CCL5(RANTES)。CCR5主要表达于单核/巨噬细胞和淋巴细胞,与其配体介导CCR5+免疫细胞的趋化、募集过程。因此,多种免疫性疾病的发生和发展过程均有CCR5参与。CCR5是人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)入侵时的重要辅助受体,而在肿瘤细胞和各类肿瘤相关间质细胞的表面也可见其表达,并介导肿瘤增殖、浸润等多种生物学过程。随着相关研究技术的发展,进一步加深了对CCR5的结构、功能、信号通路及其在相关疾病中的作用的认识。

趋化因子受体CCR5亲合短肽的筛选

趋化因子受体5(CCR5)是HIV-1与宿主细胞结合的辅助因子之一,其功能缺失或被CCR5拮抗剂封闭则会阻止HIV-1感染细胞.为得到与CCR5特异结合的肽类拮抗剂,采用噬菌体展示技术,以稳定表达CCR5的CHO细胞(CHO/CCR5)作为靶标,通过噬菌体随机12肽库筛选与CCR5特异结合的多肽;经过四轮筛选后,挑选20个阳性噬菌体克隆进行测序,从中得到11个含有AFDWTFVPSLIL序列的小分子肽.含该序列的噬菌体能与抗人CCR5单抗(2D7)竞争性结合CCR5,且合成肽AFDWTFVPSLIL对趋化因子RANTES与CHO/CCR5的结合具有明显的抑制作用,初步证明该小肽与CCR5具有特异性结合作用.

趋化因子CCL20及其受体CCR6在肺腺癌组织中的表达及与复发转移的关系研究

目的通过观察复发和非复发肺腺癌患者癌组织中CCL20和CCR6的表达情况,探讨CCL20和CCR6在肺腺癌发生发展中的作用。方法选取2009年2月—2011年12月河北省人民医院收治的肺腺癌患者162例,根据随访期间的复发转移情况分为复发组(n=50)和非复发组(n=112)。采用免疫组织化学染色检测CCL20和CCR6的表达;采用实时荧光定量PCR检测CCL20、CCR6 mRNA的表达,采用蛋白质印迹(Western blot)法检测CCL20、CCR6蛋白的表达。结果 CCL20在肺腺癌组织中主要表达于细胞膜和细胞质,CCR6在肺腺癌组织中主要表达于细胞质,二者在肺腺癌癌旁组织中均无明显表达。复发组CCL20、CCR6高表达率〔CCL20:38(76.0%)比9(8.0%);CCR6:33(66.0%)比7(6.3%)〕和染色指数〔CCL20:(150.4±10.2)比(62.5±8.5);CCR6:(134.4±11.3)比(58.0±9.5)〕均高于非复发组,差异有统计学意义(P<0.05)。复发组CCL20、CCR6 mRNA表达较非复发组分别增加82.3%、56.4%,CCL20、CCR6蛋白表达较非复发组分别增加292.0%、188.0%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 CCL20和CCR6在肺腺癌组织中呈高表达,且与肺腺癌的发生发展相关。

乳腺癌组织中趋化因子受体CCR7的表达及其意义

目的:检测乳腺癌中趋化因子受体CCR7的表达及其临床意义。方法:收集65例根治性切除的乳腺癌标本,用免疫组织化学法检测CCR7的表达,分析CCR7的表达与乳腺癌患者临床病理特征之间的相关性。结果:65例标本中,42例存在CCR7的高表达(64.6%),CCR7的表达与乳腺癌患者的淋巴结转移、TNM分期和肿瘤组织中淋巴细胞的浸润程度密切相关,但与淋巴结转移的数目无关。结论:趋化因子受体CCR7与乳腺癌淋巴结转移密切相关,其在乳腺癌的临床诊治中有参考价值。

糖皮质激素治疗对ITP患者外周血趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3表达的影响

原发免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)是临床最常见的自身免疫性出血性疾病[1-2]。研究证明,慢性ITP是一种以Th1细胞异常聚集为特征的Th1优势性自身免疫性疾病[3-4]。Th1和Th2细胞分别表达不同的趋化因子受体,并与不同的趋化因子结合,其中Th1细胞优势性表达CXCR3、CCR5,Th2细胞优势性表达CCR3,从而调控Th1和Th2细胞活化与极化[5]。在CD4+T淋巴细胞表面,以上趋化因子受体可作为区分Th1和Th2细胞的标志物[6]。尽管目前ITP发病机制的研究较多,但多数是基于混合淋巴细胞培养的研究,本文旨在研究CCR3、CCR5、CXCR3在ITP患者CD4+T淋巴细胞表面的表达情况及其临床意义。

趋化因子受体CCR7在不同类型肺癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨趋化因子受体CCR7在不同类型肺癌组织中的表达及其临床意义.方法:采用免疫组织化学方法检测110(鳞癌40,腺癌40,小细胞癌30)例肺癌和30例癌旁正常肺组织中CCR7的表达.结果:在110例肺癌组织中有77例CCR7表达阳性(70.0%),30例癌旁正常肺组织中仅5例表达阳性(16.7%,P<0.05).鳞癌、腺癌及小细胞癌CCR7阳性率分别为60.0%,92.5%,53.3%(P<0.01);腺癌CCR7阳性率明显高于鳞癌和小细胞癌(分别P<0.01,P<0.01).68例伴淋巴结转移的病例CCR7阳性率83.3%,42例不伴淋巴结转移的病例CCR7阳性率47.6%(P<0.01).Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期肺癌病例CCR7阳性率分别为59.5%,76.2%,69.2%,100.0%(P<0.05).不同性别患者肺癌组织中CCR7阳性率分别为男66.7%,女80.8%(P>0.05).小于等于60岁和大于60岁年龄组肺癌组织中CCR7阳性率分别为70.3%,69.6%(P>0.05).结论:CCR7上调表达是肺鳞癌、腺癌及小细胞癌的一个普遍特征,高水平的CCR7表达与肺癌的淋巴结转移和高TNM分期有关,而与年龄、性别无关.

IV-1协同受体CXCR4、CCR5及相关趋化因子SDF-1在胎盘的表达

目的 :研究HIV 1协同受体CXCR4、CCR5及CXCR4的特异性配体SDF 1在人胎盘组织的表达 ,探索HIV 1子宫内垂直传播的分子机制。方法 :半定量RT PCR检测早、中、晚孕期胎盘及早孕滋养细胞CXCR4、CCR5mRNA水平 ;免疫组化和免疫细胞化学检测早孕胎盘及原代培养滋养细胞CXCR4、CCR5蛋白表达 ;原位杂交及免疫组化分析SDF 1在早孕胎盘的表达 ;ELISA测定滋养细胞SDF 1的动态分泌水平。结果 :各孕期胎盘表达CXCR4及CCR5mRNA ;CXCR4蛋白定位于滋养细胞 ,而CCR5蛋白定位于绒毛基质中。滋养细胞可转录并翻译SDF 1,且能分泌可溶性SDF 1。结论 :滋养细胞同时表达CXCR4及SDF 1,SDF 1可能通过降调CXCR4而拮抗X4 HIV 1感染胎儿细胞 ;R5 HIV 1或许能通过滋养层裂隙感染CCR5 + 基质细胞和 或Hofbauer细胞 ,从而发生子宫内垂直传播。

窄谱中波紫外线对寻常性银屑病患者趋化因子受体CCR6 mRNA水平的影响

目的:探讨窄谱中波紫外线(NB-UVB)对银屑病患者趋化因子受体CCR6 mRNA水平的影响。方法:分别记录30例寻常性银屑病患者NB-UVB照射治疗前后患者皮损面积和严重程度指数(PASI)评分。应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测其前后外周血单一核细胞CCR6 mRNA的表达水平,并与30例正常对照比较。结果:30例寻常性银屑病患者光疗1 5次后PASI分值显著降低(P<0.01)。银屑病患者CCR6 mRNA的表达水平显著高于正常对照(P<0.01),而光疗后CCR6 mRNA的表达水平显著降低(P<0.01)。结论:降低CCR6水平可能是NB-UVB治疗银屑病的机制之一。

趋化因子受体CCR7在结直肠癌中的异常表达

目的:检测趋化因子受体CCR7在结直肠癌中的表达状态,探讨CCR7在结直肠癌发病中的作用.方法:采用免疫组化检测标本中CCR7蛋白表达,逆转录PCR(RT-PCR)检测CCR7mRNA表达,Westernblotting检测结肠癌细胞CCR7蛋白表达.结果:45例结直肠癌组织标本检出CCR7mRNA表达,而其相应的癌旁组织中12例检出(χ2=34.44,P<0.01).34例结直肠癌组织标本检出CCR7蛋白表达,其相应的癌旁组织中,则有6例检出(χ2=28.51,P<0.01).结肠癌细胞SW-480中CCR7mRNA和蛋白表达显著,而在HT-29中表达较弱.结论:CCR7参与结直肠癌的发病过程,其表达与结直肠癌转移有关.