趋化因子CCL5在肾透明细胞癌发生发展中的作用

目的 探讨趋化因子CCL5 (C-C chemokine ligand 5)在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)发生发展中的作用。方法 使用生物信息挖掘技术对GSE36895、GSE46699、GSE53757基因表达谱芯片数据集进行分析后取交集得到差异表达基因(differential expressed genes,DEGs),使用STRING数据库及Cytoscape的cytoHubba应用程序得到蛋白质互作网络(protein-protein interaction networks,PPI)及关键基因并进行排序,最后将所得关键基因在癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)及基因型-组织表达(genotype-tissue expression,GTEx)数据库中进行验证。随后使用细胞及动物实验验证CCL5对透明细胞癌细胞增殖的影响。结果 通过对GEO (Gene Expression Omnibus)数据库ccRCC的三个数据集使用R软件等工具进行分析,共得到934个DEGs,其中上调504个,下调430个。构建DEGs的PPI互作网络并通过cytoHubba筛选出最重要的10个基因并与TCGA及GTEx数据库数据进行对比,研究发现了趋化因子家族相关基因在ccRCC发生发展中起重要作用。与空白对照组比较,EdU检测提示CCL5沉默组786-o细胞的增殖显著减少(P<0.05),CCK8检测提示CCL5沉默组786-o细胞的增殖显著亦减少(P<0.001)。通过小鼠异种移植肿瘤模型实验发现,相较空白对照组,在第50天,CCL5沉默组的肿瘤体积明显低于对照组(P<0.001)。结论 趋化因子CCL5在ccRCC发生发展中起到了重要作用。

乳腺癌组织CCL5和S100A4蛋白的表达及临床意义

目的探讨CC类趋化因子5(CC chemokine ligand 5,CCL5)和S100钙结合蛋白A4(S100 calcium binding protein A4,S100A4)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测122例浸润性乳腺癌组织和30例癌旁乳腺组织中CCL5和S100A4的表达情况及分析其对预后的影响。结果正常乳腺组织中CCL5与S100A4均不表达,浸润性乳腺癌组织中阳性表达率为45.9%和59.0%,两组间差异均有统计学意义(均P<0.01)。乳腺癌组织中CCL5表达与临床分期、淋巴结转移、人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)和病理类型有关(均P<0.05),与年龄、肿瘤最大径、病理分级、雌激素受体(estrogen receptor,ER)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)和Ki-67表达无关(均P>0.05);乳腺癌组织中S100A4表达与临床分期、淋巴结转移有关(均P<0.05),与年龄、肿瘤最大径、病理分级、病理类型、ER、PR、HER2和Ki-67表达无关(均P>0.05)。CCL5和S100A4在乳腺癌组织中的表达呈正相关(r=0.299,P<0.05)。CCL5与乳腺癌复发呈正相关(OR=5.980,P<0.01),S100A4与乳腺癌复发无相关性(OR=1.220,P=0.687)。生存分析表明,CCL5阴性组及S100A4阴性组无瘤生存时间均大于其对应阳性组(均P<0.05);联合检测显示,CCL5(+)S100A4(+)组无瘤生存时间小于CCL5(+)/S100A4(+)组与CCL5(-)S100A4(-)组(均P<0.05)。结论 CCL5、S100A4在乳腺癌浸润、转移中起一定促进作用,两者可作为判定乳腺癌临床病理特征和预后的重要指标之一,联合检测可鉴别乳腺癌预后较差亚组。

菊花总黄酮对转染RSV的A549细胞RANTES及MCP-1表达的影响

【目的】探讨菊花总黄酮对呼吸道合胞病毒（Respiratory Syncytial Virus，RSV）转染A549细胞诱导激活正常T细胞表达和分泌因子（regulated upon activation，normal T cell expressed and secreted，RANTES）及单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemotactic protein1，MCP-1）释放作用影响。【方法】实验分为正常对照组，病毒对照组，菊花总黄酮组和巴韦林组。在人喉癌上皮细胞（Hep-2细胞）和气道上皮细胞（A549）分别加入菊花总黄酮和巴韦林的含药维持液，测定上述两种药物的最大无毒浓度；RSV转染Hep-2细胞，观察药物对RSV的病毒抑制作用；RSV转染A549细胞，ELISA法测细胞趋化因子RANTES及MCP-1含量。【结果】菊花总黄酮组50％有效率优于巴韦林组，差异有统计学意义（P〈0．05）；菊花总黄酮组RANTES、MCP-1明显降低，但高于正常细胞组，优于巴韦林组，差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】菊花总黄酮能够抑制RSV活性，明显降低A549细胞释放RANTES、MCP-1，缓解患儿的呼吸道症状。

慢病毒介导CCL5-siRNA对乳腺癌细胞生物学行为的影响

目的探讨CCL5、siRNA对高转移性人乳腺癌细胞生物学行为的影响。方法合成特异性CCL5－siRNA并克隆入慢病毒表达载体pGCSIL—GFP，将重组CCL5－siRNA慢病毒感染高转移性人乳腺癌细胞系MDA—MB-231设为KD组，另设阴性对照组和未感染组；分别采用实时定量聚合酶链反应和Western blot方法检测CCL5－siRNA对CCL5表达的作用；用噻唑蓝比色法、流式细胞术、克隆形成试验和Boyden小室穿透试验观察细胞的增殖、周期、体外聚集和侵袭力的改变。结果CCL5－siRNA慢病毒可显著降低MDA—MB-231细胞CCL5的表达，改变细胞形成克隆和运动侵袭的能力，但对细胞增殖的影响不明显。与阴性对照组（1．00±0．07）和未感染组（0．88±0．15）比较，KD组细胞CCL5mRNA的表达下降为（0．18±0．03），P〈0．01。在上样量相同的条件下，与阴性对照组（1．82±0．18）比较，KD组CCL5蛋白表达降低为（0．33±0．13），P〈0．01。细胞克隆计数：与阴性对照组（0．97±0．09）和未感染组（1．04±0．07）比较，KD组细胞的克隆数降为（0．33±0．10），P〈0．05；穿膜细胞计数：KD组（38±15）明显少于阴性对照组（77±11）和未感染组（69±9），P〈0．05。噻唑蓝比色实验和流式细胞分析提示：KD组细胞的增殖情况与阴性对照组、未感染组相比无明显差别。三组PI值分别为0．48±0．02、0．44±0．05及0．47±0．02（P〉0．05）。结论慢病毒介导的CCL5－siRNA可显著抑制高转移性人乳腺癌细胞的克隆形成和运动侵袭能力，但对其增殖活性无明显影响。

冠心病患者经皮冠状动脉介入术治疗后血浆IL-12、MCP-1的水平变化

【目的】探讨冠心病（CHD）患者经皮冠状动脉介入术（PCI）治疗后血浆IL-12、MCP-1水平变化及其与患者短期预后的相关性。【方法】选择2013年1月至2015年12月本院收治的268例CHD患者的临床资料将其分为观察组，另外选取同时期在本院行冠状动脉造影术显示冠脉正常的健康志愿者50例作为对照组，比较两组的血浆IL－12、MCP－1水平，观察CHD患者不良心血管事件的发生情况，并分析IL-12、MCP-1水平与不良心血管事件的相关性。【结果】术前，观察组血浆IL-12、MCP-1显著高于对照组，两组比较差异均具有统计学意义（均P〈0．05）；行PCI术后，观察组血浆IL-12、MCP-1水平显著低于术前，差异均具有统计学意义（均P〈0．05），而对照组在造影术前后血浆IL-12、MCP-1水平比较，差异均无统计学意义（均P〉0．05）。血浆IL-12、MCP-1水平与主要不良心血管事件发生具有显著正相关性（均P〈0．05）。【结论】CHD患者经PCI术治疗后血浆IL-12、MCP-1水平显著降低，其与CHD患者的短期不良预后具有一定的相关性。