趋化因子CXCL12和可溶性血管细胞黏附因子1对短暂性脑缺血发作后短期缺血性脑卒中发生风险的预测价值研究

目的明确趋化因子CXCL12和可溶性血管细胞黏附因子1(s VCAM-1)对短暂性脑缺血发作(TIA)后早期(7 d内)发生缺血性脑卒中的预测价值。方法选取2015年7月—2017年2月滨州医学院附属医院神经内科TIA患者104例。收集患者一般资料,检测其血浆趋化因子CXCL12及s VCAM-1。根据患者是否发生缺血性脑卒中将其分为缺血性脑卒中组(25例)和非缺血性脑卒中组(79例)。分析ABCD^2评分、趋化因子CXCL12、s VCAM-1单独及趋化因子CXCL12联合s VCAM-1预测TIA后短期发生缺血性脑卒中的价值。结果缺血性脑卒中组同型半胱氨酸(Hcy)、ABCD^2评分、趋化因子CXCL12、s VCAM-1高于非缺血性脑卒中组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,趋化因子CXCL12[OR=1.454,95%CI(1.133,1.866)]、s VCAM-1[OR=1.008,95%CI(1.003,1.014)]是TIA后短期发生缺血性脑卒中的危险因素(P<0.05)。ABCD^2评分中危(4~5分)患者趋化因子CXCL12、s VCAM-1高于ABCD^2评分低危(0~3分)患者(P<0.05);ABCD^2评分高危(6~7分)患者趋化因子CXCL12、s VCAM-1高于ABCD^2评分低、中危患者(P<0.05)。ABCD^2评分单独预测TIA后短期发生缺血性脑卒中的受试者工作特征曲线下面积(AUC)为0.778,95%CI(0.671,0.886),截断值为4.5分,灵敏度为72.0%,特异度为72.2%;趋化因子CXCL12单独预测TIA后短期发生缺血性脑卒中的AUC为0.909,95%CI(0.850,0.968),截断值为9.6μg/L,灵敏度为76.0%,特异度为91.1%;s VCAM-1单独预测TIA后短期发生缺血性脑卒中的AUC为0.875,95%CI(0.781,0.968),截断值为682.7μg/L,灵敏度为84.0%,特异度为87.3%;趋化因子CXCL12联合s VCAM-1预测TIA后短期发生缺血性脑卒中的AUC为0.878,95%CI(0.799,0.956),截断值为9.6μg/L、682.7μg/L,灵敏度为92.0%,特异度为83.5%。结论趋化因子CXCL12和s VCAM-1是TIA后短期缺血性脑卒中的危险因素,且对其具有较好的预测价值,值得临床上推广及应用。

益气活血中药复方对病毒性心肌炎模型大鼠趋化因子CXCL12 SASH1表达的影响

目的:研究益气活血中药复方影响病毒性心肌炎模型大鼠趋化因子CXCL12(CXC chemokine ligand-12)、Sash1(SAM and SH3 domain containing 1 protein)表达的作用机制。方法:通过改良的抑制性消减杂交技术(SSH),克隆了受CVB3攻击的宿主细胞中被中药调控的基因,并通过荧光rt-PCR对上述结果进行验证。结果:趋化因子CXCL12、Sash1在中药组中呈高表达,病毒组中表达减弱或被抑制。结论:益气活血法能够影响受CVB3攻击的宿主细胞趋化因子CXCL12、Sash1表达,阻断心肌肥大进程,防止向心衰进展。

趋化因子CXCL1对肿瘤的作用及其在胃癌中的研究进展

世界范围内,肿瘤是全球的主要疾病负担之一,每年造成大量的健康损害和经济损失.转移是肿瘤的基本特征,也是肿瘤致死的主要原因.大部分肿瘤患者因转移失去根治机会,部分患者术后复发转移导致治疗失败.研究肿瘤的转移机制,寻找阻断肿瘤转移的分子靶点并开发针对性药物,对提高肿瘤的治疗效果具有重要意义.胃癌是我国的主要肿瘤之一,淋巴结转移是胃癌的突出特点,因而是研究肿瘤转移的良好模型.

趋化因子CXCL1及受体CXCR2在骨癌痛小鼠背根神经节中的表达变化

目的:观察骨癌痛小鼠背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中趋化因子CXCL1和受体CXCR2的表达变化。方法:单侧股骨内注射前列腺癌细胞RM-1诱导小鼠产生骨癌,用行为学检测小鼠抬爪次数和缩爪时间自发痛情况,用实时定量PCR和免疫荧光染色技术观察小鼠DRG中CXCL1和CXCR2的表达变化和细胞定位。结果:骨癌组小鼠的抬爪次数和缩爪时间,从术后10 d开始均较对照组明显上升(P<0.05),并持续到21 d以上。骨癌组小鼠同侧L3-5 DRG中CXCL1和CXCR2 mRNA在手术后7 d时表达较正常小鼠明显增加(P<0.05),并能持续到21 d以上。CXCL1和CXCR2表达于DRG神经元内,骨癌组同侧L3-4 DRG中CXCL1和CXCR2阳性神经元在手术后7,14 d和21 d时较正常组明显增多(P<0.05)。结论:骨癌小鼠DRG中CXCL1和CXCR2表达增加,DRG中的CXCL1及其受体CXCR2可能参与骨癌痛的调节。

趋化因子CXCL1在增殖期婴幼儿血管瘤组织中表达研究及外源性CXCL1对血管瘤干细胞的影响

目的探索趋化因子CXCL1在增殖期婴幼儿血管瘤(IH)中的表达情况及外源性CXCL1对血管瘤干细胞(HemSCs)的影响。方法免疫组化法检测CXCL1在增殖期IH标本中的表达情况。通过CD133免疫磁珠将HemSCs原代细胞从增殖期IH组织中分选出。设置5组不同浓度的CXCL1(0、10、20、50、100 ng/ml)与HemSCs进行共培养,通过细胞活率、迁移实验研究外源性CXCL1对HemSCs的影响。结果CXCL1在增殖期IH间质组织中表达,总体表达量低,但在IH瘤内间质组织表达量高于瘤旁间质组织。其中CXCL1阳性面积率瘤内(0.773±0.101)%相比瘤旁(0.268±0.081)%,差异有统计学意义(t=7.843,P<0.001)。外源性CXCL1促进HemSCs增殖,不同浓度CXCL1加入HemSCs中培养24、48、72 h后,差异均有统计学意义(F=14.610,P<0.001;F=14.430,P<0.001;F=5.388,P<0.01)。但加入外源性CXCL1并不影响HemSCs的迁移能力。结论CXCL1在增殖期IH瘤内间质表达高于瘤旁间质,外源性CXCL1可促进HemSCs增殖。

趋化因子CXCL8/CXCR1生物轴与结肠癌转移的关系

目的:探讨肿瘤微环境中趋化因子CXCL8及其受体CXCR1在结肠癌组织的表达及其临床应用价值.方法:选取上海交通大学附属第六人民医院结肠癌患者106例,记录患者年龄、性别、病理分化程度、肿瘤大小、浸润深度、Duke分期等,采用免疫组织化学SP法检测CXCL8及其受体CXCR1在结肠癌及其癌旁组织中表达情况,并分析其表达与临床特征的关系.结果:结肠癌组织中CXCL8染色阳性86例,占71.7%,CXCR1染色阳性78例,占67.0%,而癌旁正常结肠黏膜组织中CXCL8及其受体CXCR1染色阳性率分别为19.8%,16.0%,两组相比差异具有统计学意义(P<0.05);进一步分析其表达与临床应用价值.结果显示,结肠癌组织中CXCL8/CXCR1表达与性别、年龄、肿瘤分化程度均无明显相关性,而与结肠癌肿瘤大小、浸润深度、淋巴转移、Duke分期均呈显著正相关(r=0.271,P=0.005).结论:趋化因子CXCL8/CXCR1生物轴可能在结肠癌侵袭、转移中起一定作用,进一步为结肠癌免疫治疗提供了新的理论依据.

流体剪应力作用下趋化因子CXCL12诱导的白细胞整合素LFA-1的激活

目的探究剪应力下趋化因子诱导的白细胞上整合素LFA-1激活过程。方法采用平行平板流动腔系统在10~30 mPa剪应力下,观察分析可溶性及固定趋化因子CXCL12对Jurkat细胞在ICAM-1上瞬时黏附行为的影响,提取特征参数。结果 CXCL12仅能介导Jurkat细胞的短暂栓缚(0.13~0.20 s)。只有固定的CXCL12才能有效激活Jurkat细胞上LFA-1与ICAM-1键合,从而提高栓缚事件的发生率,并大大延长细胞的栓缚时间(0.8~1.2 s)。激活的LFA-1/ICAM-1解离速率呈现明显双态性:k_1(1.09~1.24 s^(-1)),k_2(0.28~0.7 s^(-1)),剪应力主要通过调节k_2及k_2对整个黏附时间的贡献率β来控制细胞的瞬时黏附行为。结论剪应力通过G蛋白偶联受体与CXCL12的作用可在0.2 s内快速激活整合素LFA-1,进而调控白细胞的黏附过程。研究结果有助于深化趋化因子-力偶联调控整合素激活机制的认识。

趋化因子CXCL1对人宫颈癌细胞活性的影响及分子机制

目的探讨趋化因子CXCL1对人宫颈癌细胞活性的影响及分子机制.方法将体外培养人宫颈癌细胞株C33A细胞分为对照组(常规培养基)、CXCL1组(25、50、100 ng/mL)、pd98060组(100μmol/L pd98060)、CXCL1+pd98060组(100 ng/mL CXCL1+100μmol/L pd98060).应用MTT法检测细胞增殖能力,应用划痕实验和Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力;应用Western blot检测磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)、细胞外信号调节激酶(ERK)、E26转录因子蛋白1(ETS-1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达.结果CXCL1组宫颈癌细胞增殖水平、增殖率、侵袭率明显高于对照组(P<0.01);趋化因子CXCL1呈浓度依赖性地促进宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭;CXCL1+pd98059组宫颈癌细胞增殖水平、增殖率、侵袭率明显低于CXCL1组(100 ng/mL)(P<0.01);pd98060组宫颈癌细胞增殖水平、增殖率、侵袭率明显低于CXCL1+pd98059组,差异具有统计学意义(P<0.01).随着趋化因子CXCL1作用时间的延长,p-ERK蛋白表达水平明显增加(P<0.01).CXCL1组p-ERK表达水平明显高于对照组,CXCL1+pd98059组p-E RK表达水平明显低于CXCL1组,pd98060组p-ERK表达水平明显低于CXCL1+pd98059组(P<0.01).随着趋化因子CXCL1作用时间的延长,ETS-1、MMP-2蛋白表达水平明显增加(P<0.05).CXCL1组ETS-1、MMP-2表达水平明显高于对照组,CXCL1+pd98059组ETS-1、MMP-2表达水平明显低于CXCL1组,pd98060组ETS-1、MMP-2表达水平明显低于CXCL1+pd98059组(P<0.01).结论趋化因子CXCL1可通过ERK信号通路提升ETS-1、MMP-2蛋白表达水平,促进人宫颈癌细胞的增殖、迁移和侵袭.

过敏性疾病患者血清Th1/Th2细胞因子和趋化因子测定及其意义

目的:检测过敏性疾病患者血清Th1细胞因子IFN-γ和Th2细胞因子IL-4、IL-5、IL-13以及趋化因子Eotaxin、RANTES、LTB4的水平,探讨其临床意义。方法:过敏性疾病患者64例,正常对照21例。采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清IL-4、IL-5、IL-13、IFN-γ、LTB4、RANTES和Eotaxin水平。结果:1过敏性疾病患者血清IL-4、IL-5、IL-13和Eotaxin、LTB4水平较对照组明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。2IFN-γ和RANTES在过敏性疾病患者血清中的水平低于对照组,但无统计学差异(P>0.05)。3IL-4、IL-5、IL-13和LTB4彼此之间呈显著正相关(P<0.01)。4Eotaxin、RANTES和IFN-γ彼此之间呈显著正相关(P<0.05)。5LTB4和Eotaxin之间呈显著正相关(P<0.01)。结论:过敏性疾病的发生存在多种细胞因子和趋化因子复杂的相互作用。

CXCL1促进乳腺癌干细胞样特性的表达

目的探究内源性和外源性趋化因子CXC基序配体1(CXCL1)对乳腺癌细胞干细胞样特性表达的影响。方法外源性实验将MDA-MB-231和MCF-7乳腺癌细胞分为4组:0 nmol/L CXCL1组,1 nmol/L CXCL1组,10 nmol/L CXCL1组,anti-CXCR2组(先用CXCL1的受体CXCR2阻断剂处理后再加入10 nmol/L外源性CXCL1)。内源性实验将MDA-MB-231细胞分为3组:control组(仅加入等量PBS溶液),siNC组(加入空白转染试剂),siCXCL1组(转染CXCL1特异性小干扰RNA)。平板克隆形成实验检测乳腺癌细胞增殖能力;微球形成实验通过细胞球的形成能力评价乳腺癌干细胞的自我更新能力;流式细胞术检测干细胞比例(表达CD133^(+)的MDA-MB-231细胞比例和表达CD44^(+)/CD24^(-/low)的MCF-7细胞比例)及表达干细胞标志物乙醛脱氢酶1(ALDH1)阳性的细胞比例;Western blot法检测各组ALDH1和Oct3/4表达的变化。为进一步探索PI3K通路在其中的作用,本实验用PI3K特异性抑制剂Ly294002对MDA-MB-231和MCF-7细胞进行预处理后,再加入10 nmol/L外源性CXCL1,检测ALDH1和Oct3/4的表达。结果与0 nmol/L组相比,1,10 nmol/L CXCL1组克隆形成数均明显增多(P<0.001),乳腺癌细胞形成的微球数量更多(P<0.001)、直径更大(P<0.05),表达CD133^(+)的MDA-MB-231细胞数量增多(P<0.001),表达CD44^(+)/CD24^(-/low)的MCF-7细胞增多(P<0.05),表达ALDH1+的MDA-MB-231和MCF-7细胞数均增多(P<0.05,P<0.01);Western blot结果提示MDA-MB-231和MCF-7两种乳腺癌细胞中干细胞标志物ALDH1和Oct3/4的表达均随CXCL1的浓度增加明显增多。与10 nmol/L CXCL1组相比,anti-CXCR2组克隆形成数、干细胞比例及ALDH1的表达均有所减少(P<0.05)。与control组和siNC组相比,siCXCL1组微球培养后形成的细胞球直径减小(P<0.001),细胞球数量减少(P<0.01);表达CD133^(+)的MDA-MB-231乳腺癌细胞比例下降(P<0.001);ALDH1和Oct3/4蛋白表达量均明显减少(P<0.001)。Ly294002组MDA-MB-231和MCF-7细胞中ALDH1和Oct3/4表达较CXCL1组减少。结论内、外源性CXCL1均可促进乳腺癌细胞向乳腺癌干细胞的转化,促进其干细胞样特性的表达,其机制可能与调控PI3K/Akt通路有关。

健脾益智法调控CXCL1/CXCR2通路介导中性粒细胞局部浸润促进MCAO大鼠轴突再生机制研究

目的:研究健脾益智法对MCAO大鼠大脑皮质层和海马区中性粒细胞浸润情况、脑组织中CXCL1、CXCR2表达水平及轴突再生情况,探讨脾脑相关理论的微观机制。方法:将20只SD大鼠按照随机数字表法分为正常组、模型组、中药组,除正常组外,其余两组参照国外学者Zea Longa的线栓法建立MCAO大鼠模型,造模成功后中药组给予健脾益智汤连续灌胃,各组分别于术后7 d、14 d采用醋酸AS-D萘酚酯酶组织化学染色检测大鼠大脑皮质及海马中性粒细胞浸润情况,免疫荧光进行脑组织中CXCL1、CXCR2表达水平及轴突再生情况检测。结果:中药组术后7d、术后14d大鼠大脑皮质层和海马区中性粒细胞数量与同期模型组、正常组比较显著减少,中药组术后7 d、14 d CXCL1和CXCR2表达量均较模型组明显增高。与模型组比较,中药组术后7 d、14 d轴突再生明显,术后14 d尤甚。结论:健脾益智法可能激活CXCL1/CXCR2通路,促进轴突再生,从而修复受损的神经。

缺血性脑卒中与趋化因子的研究进展

随着“脑卒中高危人群筛查和干预项目”的实施,脑卒中发病率已由2005年222/10万下降至2019年201/10万,但脑卒中仍是我国成人致死、致残的首位病因,具有高发病率、高致残率、高病死率、高复发率、高经济负担五大特点,其中缺血性脑卒中(ischemic stroke, IS)的发病率最高[1]。越来越多的证据表明,炎性反应是脑卒中的重要诱发因素之一,过度的炎性反应会导致组织损伤。

基质细胞衍生因子1在软骨和软骨下骨稳态中的作用

背景:骨性关节炎是一种以软骨退变和软骨下骨异常骨重塑为特征的退行性病变。近年来,许多研究表明基质细胞衍生因子1在骨性关节炎的病理进展中发挥关键作用,靶向调控基质细胞衍生因子1及其CXC趋化因子受体4型和CXC趋化因子受体7型组成的信号通路是预防和治疗骨性关节炎的新方法。目的:综述基质细胞衍生因子1参与调控软骨细胞、骨髓间充质干细胞、成骨细胞及破骨细胞增殖、分化及凋亡的作用,以及这些细胞相互作用,探究导致软骨退变、软骨下骨异常骨重塑而加速骨性关节炎病理进展的机制,以期为骨性关节炎的防治提供新的思路。方法:以“基质细胞衍生因子1,软骨,软骨细胞,软骨下骨,骨髓间充质干细胞,成骨细胞,破骨细胞,CXC趋化因子受体4型,CXC趋化因子受体7型”为中文检索词检索中国知网、万方和维普数据库,以“Stromal cell-derived factor 1,SDF-1,CXCL12,cartilage,chondrocyte,subchondral bone,mesenchymal stem cells,osteoblasts,osteoclasts,CXCR4,CXCR7”为英文检索词检索PubMed、Medline和Embase数据库,检索各数据库建库至2024年1月的相关文献,根据纳入和排除标准,最终纳入77篇文献进行归纳总结。结果与结论:①基质细胞衍生因子1调控软骨细胞、骨髓间充质干细胞、成骨细胞和破骨细胞迁移、增殖、分化和死亡,在维持软骨和软骨下骨稳态以及促进或抑制骨性关节炎软骨退变、软骨下骨异常骨重塑等病理过程中均发挥至关重要的作用,靶向调控基质细胞衍生因子1/CXC趋化因子受体4型/CXC趋化因子受体7型信号通路有望成为今后防治骨性关节炎研究的重点。②由于基质细胞衍生因子1亚型在组织之间表达量的差异,目前以基质细胞衍生因子1α研究最为广泛,基质细胞衍生因子1β和基质细胞衍生因子1γ的相关研究多集中在探索影响干细胞生物学行为、在调控软骨和软骨下骨稳态中的作用,与骨性关节炎的相关性尚不清楚。③基质细胞衍生因子1能够有效促进干细胞归巢至软骨损伤部位,并诱导其增殖、存活及成软骨分化和应用负载基质细胞衍生因子1的生物支架来改善软骨修复质量已成为软骨组织工程研究的热点;然而,已有研究表明基质细胞衍生因子1可促进骨髓间充质干细胞向肥大型软骨细胞分化,而新生软骨细胞肥大表型会造成软骨内骨形成,软骨细胞凋亡,整个组织发生血管化和骨化,影响最终软骨修复的质量;另外,不同支架与基质细胞衍生因子1组合在修复部分软骨损伤和全层软骨损伤时,再生组织不都是理想的透明软骨组织。因而,未来深入探寻基质细胞衍生因子1在干细胞生物学效应中的潜在机制以及基质细胞衍生因子1与支架组合在修复不同软骨缺损的最佳组合方式将有助于提升软骨修复质量。④目前有关CXC趋化因子受体4型拮抗剂的研究主要集中在AMD3100,T140和TN14003,且绝大部分处于基础实验阶段,有待临床转化。针对基质细胞衍生因子1/CXC趋化因子受体4型/CXC趋化因子受体7型信号通路开发的治疗药物、方法的安全性、有效性仍需大量的生物学和临床试验加以佐证。

CXC趋化因子配体12与肝病关系的研究进展

各种原因引起的慢性肝病是影响我国民众健康的主要病因，其中包括各种病因导致的慢性肝炎、肝炎后肝硬化、原发性肝癌、自身免疫性肝病等。我国属乙型肝炎病毒（HBV）感染高流行区，一般人群的乙型肝炎表面抗原（HBsAg）阳性率为718％，青少年和成人期感染 HBV 者中5％～10％发展成慢性［1，2］。而这些慢性肝病当中，危害性最大的是原发性肝癌，其病死率位居我国各类肿瘤病死率的第2位［3］，且近年仍呈现不断上升趋势。CXC 趋化因子配体12（CXC chemokine lig-and-12，CXCL12），又称基质细胞衍生因子-1（stromal cell derived factor1，SDF-1）是α趋化因子家族的重要成员，属于趋化因子 CXC 亚家族。CXCL12主要参与 B 细胞的调节，造血干细胞的动员以及白细胞的迁徙［4］，同时在抗炎症和抗肿瘤过程中也发挥着重要影响。近年来研究发现，CX-CL12及其相关分子参与了多种肝脏疾病的过程，并与疾病的发生、发展、治疗和预后密切相关。本文就 CXCL12在肝病过程中的作用作如下综述。

外源性趋化因子CXC配体1促进肝癌细胞恶性行为的作用机制

目的探讨外源性趋化因子CXC配体(CXCL)1对肝癌细胞恶性行为的影响及作用机制。方法利用细胞计数试剂(CCK)-8和细胞迁移(Transwell)实验分别研究不同浓度外源性CXCL1对BEL-7402肝癌细胞增殖和迁移的影响,利用Western印迹研究外源性CXCL1对BEL-7402肺癌细胞B细胞淋巴瘤/白血病(Bcl)-2和蛋白激酶B(AKT)蛋白表达的影响。结果与0 ng/ml外源性CXCL1比较,5、10 ng/ml外源性CXCL1显著促进BEL-7402肝癌细胞的增殖,10 ng/ml外源性CXCL1显著促进BEL-7402肺癌细胞迁移,10 ng/ml外源性CXCL1显著上调BEL-7402肺癌细胞Bcl-2和AKT蛋白表达。结论外源性CXCL1可经BCL-2/AKT途径促进肝癌细胞恶性表型。

趋化因子CXC配体1影响人口腔鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的作用机制

目的探讨CXCL1对KB人口腔鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响及其可能的作用机制。方法将处于对数生长期的KB细胞随机分为对照组(无CXCL1处理组)和不同浓度CXCL1处理组,分别采用细胞计数试剂(CCK)-8实验及细胞迁移实验来研究各组细胞增殖和迁移情况,并应用Western印迹实验检测各组细胞中蛋白激酶B(AKT)蛋白表达。结果与对照组比较,5、10、20和30 ng/ml CXCL1处理组KB细胞增殖能力显著增强;与对照组比较,5、10、20和30 ng/ml CXCL1处理组KB细胞迁移能力显著增强;与对照组比较,20和30 ng/ml CXCL1处理组KB细胞AKT表达水平显著上调(均P<0.05)。结论CXCL1可通过活化磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/AKT信号通路来促进人口腔鳞状细胞癌的增殖和迁移能力。

粒细胞刺激因子对白血病细胞趋化因子受体4表达及趋化能力和骨髓微环境的影响

背景:骨髓微环境可通过细胞黏附分子介导白血病细胞耐药和免疫逃逸。这些黏附分子可作为新的作用靶点,通过降低其表达水平和功能,有望打破白血病耐药机制。目的:观察重组人粒细胞集落刺激因子(recombinanthumangranulocytecolonystimulatingfactor,rh G-CSF)对急性白血病WEHI-3细胞趋化因子受体4表达水平和趋化性的影响,以及在小鼠体内对骨髓基质细胞衍生因子1和外周血Treg细胞的作用。方法:(1)将急性白血病细胞株WEHI-3与rhG-CSF共同孵育6,12,18,24 h后,用流式细胞术检测趋化因子受体4表达水平,微孔细胞转移实验检测其迁移能力;(2)健康Balb/C小鼠给予rhG-CSF皮下注射,ELISA法检测骨髓及外周血中基质细胞衍生因子1水平,流式细胞术检测脾脏及外周血Treg细胞比例。结果与结论:(1)rhG-CSF作用后WEHI-3细胞表面趋化因子受体4的表达水平明显下降(P <0.05),细胞对基质细胞衍生因子1的趋化性显著降低(P<0.05);(2)健康小鼠应用rhG-CSF处理后,骨髓中基质细胞衍生因子1水平较生理盐水组明显降低(P <0.05),外周血及骨髓Treg细胞比例显著升高(P <0.05);(3)结果表明,rhG-CSF可以下调白血病细胞表面趋化因子受体4的表达,降低骨髓中基质细胞衍生因子1水平,并可动员Treg细胞进入外周血,从而打破骨髓微环境介导的免疫逃逸和耐药,改善白血病的免疫治疗效果。

N-乙酰半胱氨酸对支气管哮喘大鼠CXCL8-CXCR1/2及TRPV1神经元敏感性的影响

目的探究N-乙酰半胱氨酸对支气管哮喘大鼠CXC趋化因子配体(CXCL)8-CXC趋化因子受体(CXCR)1/2及瞬时受体电位通道蛋白(TRP)V1神经元敏感性的影响。方法选取80只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(NO)组、模型(MO)组、N-乙酰半胱氨酸(NAC)组、急支糖浆(ES)组,每组20只,对MO组、NAC组、ES组进行支气管哮喘建模,建模成功后,NAC组、ES组每天分别于腹腔内注射2 ml N-乙酰半胱氨酸注射液、急支糖浆灌胃10 g/kg剂量,NO组、MO组同期灌胃同体积生理盐水,通过苏木素-伊红(HE)染色法检测肺组织病理形态、酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹检测血清及肺组织中CXCL8、CXCR1、CXCR2、TRPV1含量、mRNA及蛋白表达,并分析N-乙酰半胱氨酸对支气管哮喘大鼠CXCL8-CXCR1/2及TRPV1神经元敏感性。结果与NO组相比,MO组咳嗽次数明显增加(P<0.05),而NAC组、ES组与MO组相比,其咳嗽次数明显降低(P<0.05),且NAC组比ES组降低明显(P<0.05);与NO组相比,MO组细支气管管腔、肺泡腔内可见渗出液、脱落的上皮细胞等,远端肺泡可见局部肺不张及周围肺大泡,且肺间质明显增厚,炎性细胞浸润明显,而与MO组比较,ES组、NAC组症状明显减少,部分肺间质的组织结构趋向正常,部分肺泡轻度扩张,且NAC组比ES组明显降低(P<0.05);与NO组对比,MO组CXCL8、CXCR1、CXCR2、TRPV1含量、mRNA及蛋白表达均明显升高(P<0.05),NAC组、ES组与MO组相比均显著降低(P<0.05),且NAC组比ES组明显降低(P<0.05)。结论N-乙酰半胱氨酸可以显著降低咳嗽次数,减少支气管哮喘症状,可使CXCL8-CXCR1/2及TRPV1神经元敏感性显著降低。

CXC趋化因子配体8促进结直肠癌微环境中M2型巨噬细胞趋化及浸润

CXC趋化因子配体8(CXC chemokine ligand 8,CXCL8)在结直肠癌等多种肿瘤中高表达,并促进肿瘤恶性进展。研究发现,结直肠癌微环境中有大量M2型巨噬细胞浸润,但CXCL8是否影响M2型巨噬细胞的浸润及其潜在机制尚未可知。本文旨在探讨CXCL8对结直肠癌中M2型巨噬细胞浸润及趋化作用的影响。本研究首先分析了TCGA数据库结直肠癌样本中CXCL8表达水平及免疫细胞浸润情况,并在临床组织中进行验证。随后Western印迹及qRT-PCR检测5种结直肠癌细胞株CXCL8的表达情况。佛波酯(PMA)及IL-4诱导THP-1至M2型巨噬细胞后,与HCT116、SW480细胞及过表达CXCL8的HCT116(CXCL8/HCT116)、SW480(CXCL8/SW480)共培养,检测M2型巨噬细胞趋化情况。白细胞介素1β(IL-1β)处理HCT116、SW480细胞,检测CXCL8表达情况,与M2型巨噬细胞共培养,分析趋化结果。结果显示,患者癌组织CXCL8表达高于癌旁组织,CXCL8高表达癌组织中存在更多M2型巨噬细胞浸润;IL-1β作用于HCT116或SW480后,CXCL8的mRNA及蛋白质表达水平升高(P<0.05)。Transwell实验证实,CXCL8趋化M2型巨噬细胞(P<0.05)。综上所述,结直肠癌细胞中CXCL8可由IL-1β诱导产生,CXCL8表达增加能够促进M2型巨噬细胞的趋化,结直肠癌微环境中M2型巨噬细胞大量浸润可能与CXCL8表达升高有关。

CXCL1通过促进蛋白激酶B磷酸化导致bEND.3小鼠脑微血管内皮细胞骨架收缩和通透性增加

目的探讨脓毒症脑病炎症中CXC趋化因子配体1(CXCL1)及其受体CXC趋化因子受体2(CXCR2)对脑内皮细胞骨架重排和通透性的影响及其相关机制。方法野生型小鼠腹腔注射脂多糖(LPS)(10 mg/kg)建立脓毒症脑病模型,ELISA检测全脑组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)和CXCL1含量。使用500 ng/mL LPS和200 ng/mL TNF-α刺激bEND.3脑微血管内皮细胞后,Western blot法检测细胞CXCR2的表达。以150 ng/mL CXCL1刺激bEND.3细胞,免疫荧光染色观察脑内皮细胞骨架纤维型肌动蛋白(F-actin)重排的变化。脑内皮细胞通透性实验中,将bEND.3细胞随机分为PBS对照组、CXCL1组、CXCL1联合选择性CXCR2拮抗剂SB225002组,Transwell^(TM)小室检测各组通透性变化情况。CXCL1刺激bEND.3细胞后,Western blot法检测细胞中蛋白激酶B(AKT)和磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达。结果腹腔注射LPS导致小鼠全脑组织中TNF-α和CXCL1水平显著升高;LPS和TNF-α刺激可增高bEND.3细胞CXCR2蛋白的表达。CXCL1刺激bEND.3细胞使其细胞骨架收缩,细胞间隙形成增加,且细胞渗透性增加,而CXCR2拮抗剂SB225002预处理可显著抑制CXCL1引起的脑内皮细胞肌动蛋白应力纤维和细胞间隙的形成、以及通透性的增高,同时CXCL1(150 ng/mL)刺激使得脑内皮细胞AKT的磷酸化水平明显升高。结论CXCL1通过AKT磷酸化激活引起脑内皮细胞骨架收缩、细胞通透性增加,CXCR2拮抗剂SB225002可有效抑制CXCL1诱导的细胞骨架收缩和通透性升高。