拮抗CC趋化因子受体5信号诱导肿瘤细胞凋亡并调节肿瘤微环境抑制肿瘤生长

目的探索拮抗CC趋化因子受体5(CCR5)信号通路对肿瘤生长和肿瘤微环境的影响。方法采用CCK8细胞毒试验研究CCR5选择性拮抗剂Maraviroc体外对小鼠Lewis肺腺癌细胞增殖的影响,并运用流式细胞术和RT-PCR检测肿瘤细胞凋亡和Caspase 8基因的表达。然后采用免疫荧光组织化学染色法研究了Maraviroc对小鼠体内肿瘤生长和肿瘤微环境中CD4^(+)和CD8^(+)以及Foxp3^(+)细胞比例的影响。结果拮抗CCR5信号在体内外均能够抑制癌细胞的生长。体外研究发现:CCR5拮抗剂可通过增强凋亡基因Caspase 8表达而诱导肿瘤细胞凋亡。在小鼠体内,CCR5拮抗剂可明显增加肿瘤微环境中CD4^(+)和CD8^(+)细胞的浸润而减少Foxp3^(+)细胞的浸润。结论拮抗CCR5信号可能通过诱导肿瘤细胞凋亡,逆转免疫抑制性肿瘤微环境而抑制肿瘤生长。

趋化因子受体CCR3、CCR5和CXCR3与自然流产的相关性

目的探讨外周血、脾脏、胸腺趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3与自然流产的关系。方法用双标记流式细胞分析技术检测自然流产模型组小鼠(CBA/J×DBA/2,n=14)、正常妊娠模型组小鼠(CBA/J×BALB/c,n=13)和正常非孕组小鼠(CBA/J,n=11)外周血、脾脏以及胸腺中CD4+T细胞CCR3、CCR5和CXCR3这三类趋化因子受体的表达。结果自然流产模型组外周血CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.01),CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组(P<0.05,P<0.01);但三个指标与正常非孕组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。自然流产模型组脾脏CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.01),高于正常非孕组(P<0.05);而CCR5和CXCR3高于正常妊娠模型组(P<0.05),但与正常非孕组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。自然流产模型组胸腺CD4+T细胞CCR3的表达率低于正常妊娠模型组(P<0.05),高于正常非孕组(P<0.01);而CXCR3的表达率高于正常妊娠模型组(P<0.05),但与正常非孕组相比,差异无统计学意义(P>0.05);CCR5与其他两组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论CD4+T细胞上CCR3、CCR5和CXCR3的表达异常可能在自然流产的发病中起作用。

IV-1协同受体CXCR4、CCR5及相关趋化因子SDF-1在胎盘的表达

目的 :研究HIV 1协同受体CXCR4、CCR5及CXCR4的特异性配体SDF 1在人胎盘组织的表达 ,探索HIV 1子宫内垂直传播的分子机制。方法 :半定量RT PCR检测早、中、晚孕期胎盘及早孕滋养细胞CXCR4、CCR5mRNA水平 ;免疫组化和免疫细胞化学检测早孕胎盘及原代培养滋养细胞CXCR4、CCR5蛋白表达 ;原位杂交及免疫组化分析SDF 1在早孕胎盘的表达 ;ELISA测定滋养细胞SDF 1的动态分泌水平。结果 :各孕期胎盘表达CXCR4及CCR5mRNA ;CXCR4蛋白定位于滋养细胞 ,而CCR5蛋白定位于绒毛基质中。滋养细胞可转录并翻译SDF 1,且能分泌可溶性SDF 1。结论 :滋养细胞同时表达CXCR4及SDF 1,SDF 1可能通过降调CXCR4而拮抗X4 HIV 1感染胎儿细胞 ;R5 HIV 1或许能通过滋养层裂隙感染CCR5 + 基质细胞和 或Hofbauer细胞 ,从而发生子宫内垂直传播。

糖皮质激素治疗对ITP患者外周血趋化因子受体CCR3、CCR5、CXCR3表达的影响

原发免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)是临床最常见的自身免疫性出血性疾病[1-2]。研究证明,慢性ITP是一种以Th1细胞异常聚集为特征的Th1优势性自身免疫性疾病[3-4]。Th1和Th2细胞分别表达不同的趋化因子受体,并与不同的趋化因子结合,其中Th1细胞优势性表达CXCR3、CCR5,Th2细胞优势性表达CCR3,从而调控Th1和Th2细胞活化与极化[5]。在CD4+T淋巴细胞表面,以上趋化因子受体可作为区分Th1和Th2细胞的标志物[6]。尽管目前ITP发病机制的研究较多,但多数是基于混合淋巴细胞培养的研究,本文旨在研究CCR3、CCR5、CXCR3在ITP患者CD4+T淋巴细胞表面的表达情况及其临床意义。

趋化因子CXCL13及其受体CXCR5在肿瘤中的作用

趋化因子是一类趋化粒细胞、单核细胞和巨噬细胞等炎症细胞定向迁移的细胞因子,它的功能由相应受体介导,两者不仅在炎症反应和过敏反应中发挥重要作用,亦参与肿瘤的生长、转移。研究显示,趋化因子可调节白细胞的肿瘤浸润、肿瘤相关的血管生成、激活宿主对肿瘤的特异性免疫应答、通过自分泌或旁分泌方式刺激肿瘤细胞增殖和控制肿瘤细胞运动等,其中趋化因子CXCL13及其受体CXCR5在多种肿瘤中异常表达且与肿瘤进展密切相关,探究其作用机制可为肿瘤免疫治疗提供新策略。

维持性血液透析患者外周血γδT细胞CC趋化因子受体5 mRNA表达与预后的相关性

目的探讨维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者外周血γδT细胞中CC趋化因子受体5(CC chemokine receptor 5,CCR5)信使核RNA(messenger ribonucleic acid,mRNA)表达与预后的关系。方法选取2018年1月─2020年12月在南京医科大学附属江宁医院接受MHD治疗的191例患者(MHD组)、体检健康者109例(对照组)。检测受试者实验室指标和外周血γδT细胞CCR5 mRNA表达。随访3年将MHD患者分为生存组160例和死亡组31例。分析CCR5 mRNA与年龄、透析龄、血红蛋白(Hb)、白蛋白(ALB)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子(TNF)-α的相关性,影响MHD患者3年内生存的因素,CCR5 mRNA对MHD患者3年内生存的预测价值。结果MHD组Hb、ALB、血钙低于对照组(t=10.172、4.702、7.702,P均<0.001),血磷、血肌酐、血尿素氮、全段甲状旁腺激素、hs-CRP、TNF-α、CCR5 mRNA高于对照组(t=20.196、77.626、52.291、80.126、42.637、46.766、57.854,P均<0.001);与生存组比较,死亡组年龄、透析龄、hs-CRP、TNF-α、CCR5 mRNA升高(t=4.525、13.841、14.991、20.662、54.229,均P<0.001),Hb、ALB降低(t=8.783、15.190,均P<0.001);MHD患者CCR5 mRNA与年龄、透析龄、hs-CRP、TNF-α呈正相关(r=0.448、0.463、0.567、0.405,均P<0.001),与Hb、ALB呈负相关(r=-0.502、-0.491,均P<0.001);年龄(HR=2.250,95%CI:1.228~4.123,P=0.009)、透析龄(HR=3.196,95%CI:1.454~7.028,P=0.004)、hs-CRP(HR=3.717,95%CI:1.876~7.367,P<0.001)、TNF-α(HR=2.497,95%CI:1.193~5.227,P=0.015)、CCR5 mRNA(HR=2.358,95%CI:1.439~3.865,P=0.001)是MHD患者3年内生存的独立危险因素,Hb(HR=0.401,95%CI:0.204~0.787,P=0.008)、ALB(HR=0.456,95%CI:0.241~0.862,P=0.016)是独立保护因素;CCR5 mRNA预测MHD患者3年内生存的AUC为0.927,敏感度85.71%,特异度93.96%。结论MHD患者外周血γδT细胞CCR5 mRNA呈高表达,CCR5 mRNA对MHD患者3年内生存有一定预测效能。

甲状腺乳头状癌组织趋化因子受体CXCR7和CCR5表达

目的研究趋化因子受体7（CXCR7）和趋化因子受体5（CCR5）在甲状腺乳头状癌（PTC）组织表达及其与PTC不同病理特征的关系。方法应用免疫组化的方法,检测70例PTC、25例甲状腺滤泡腺瘤及11例癌旁（距肿瘤2cm以上）组织中CXCR7及CCR5的表达情况。结果 PTC组织CXCR7和CCR5表达阳性率高于甲状腺滤泡腺瘤及癌旁组织,差异有显著性（χ~2=23.94、26.48,P〈0.05）;甲状腺滤泡腺瘤和癌旁组织中CXCR7和CCR5表达阳性率比较差异无显著性（P〉0.05）。Spearman相关分析显示,PTC组织中CXCR7和CCR5表达呈正相关（r=0.73,P〈0.05）。PTC组织中CXCR7和CCR5阳性表达与年龄、性别、TNM分期均无关（P〉0.05）,仅与淋巴结转移情况有关（χ~2=22.493、21.476,P〈0.05）。结论 CXCR7及CCR5可能对PTC的发展及转移起一定的促进作用。

趋化因子受体CXCR5在肺癌中的表达及其意义

目的:探讨肺癌原发灶中趋化因子受体CXCR5的表达特点及与其临床病理的关系。方法:对79例肺癌手术切除标本组织采用免疫组化法检测CXCR5表达。结果:CXCR5在肺腺癌组织100%(46/46)中呈阳性表达,33例肺鳞癌中仅1例表达(3.0%)。CXCR5的表达与肺癌患者的性别、年龄、肿瘤大小无关(P>0.05),而与肺癌患者的组织学类型密切相关(P<0.01)。结论:CXCR5表达与组织学类型密切相关。CX-CR5在肺腺癌选择性的表达值得进一步进行相关研究。

趋化因子受体CXCR4在鼻咽癌细胞中的表达

背景与目的:研究表明,趋化因子受体CXCR4及其配体SDF-1(stromalcell-derivedfactor1)与肿瘤的增殖、分化和转移等恶性表现密切相关。本研究通过观察分化程度和增殖能力不同的鼻咽癌细胞中CXCR4的表达,初步了解CXCR4与鼻咽癌细胞恶性表现的关系。方法:分别以全反式维甲酸(all-trans-retinoicacid,RA)和端粒酶反义核酸处理鼻咽癌CNE1(高分化)和CNE2Z(低分化)细胞,原位杂交技术检测CXCR4mRNA表达,免疫组化法检测CXCR4蛋白表达,流式细胞仪检测细胞周期分布,MTT法检测细胞增殖能力。结果:CXCR4mRNA和CXCR4蛋白在鼻咽癌CNE1和CNE2Z细胞均呈强阳性表达,且CNE2Z细胞表达强度显著高于CNE1细胞。经1×10-5mol/L和1×10-4mol/LRA作用后,与对照组比较,CNE1细胞G1期细胞明显增多,CNE2Z细胞S期细胞明显增多,同时两者的CXCR4mRNA表达水平均显著低于对照组(P<0.01),其中1×10-4mol/LRA作用较1×10-5mol/LRA作用强(P<0.01)。经端粒酶反义核酸作用后,CNE1和CNE2Z细胞增殖均明显受抑制,CXCR4蛋白表达水平均显著低于对照组(P<0.01)。结论:CXCR4在鼻咽癌细胞高表达,其表达水平与鼻咽癌细胞的分化程度和增殖能力有关。

趋化因子受体CXCR4在人肺癌高转移细胞株的表达和意义

目的 :以人肺癌高、低转移细胞株 95D、95C为研究对象 ,研究趋化因子受体CXCR4的表达及其在肿瘤细胞体外转移潜能中的作用和意义。方法 :采用RT PCR检测 95D、95C细胞CXCR4mRNA的表达情况 ;以PMA活化肿瘤细胞 ,研究CXCR4mRNA表达水平与细胞活性状态的关系 ;应用钙离子内流实验验证其表达是否具有功能 ;通过趋化实验观察CXCR4特异性配件SDF 1α和裸鼠组织匀浆液对 95D细胞的趋化迁移作用 ;通过MTT法测定 95D细胞对SDF 1α作用的增殖反应。结果 :95D细胞功能性地高表达趋化因子受体CXCR4 ,且其表达水平与细胞活性状态有关 ;CXCR4特异性配件SDF 1α和裸鼠肺、淋巴结组织匀浆均可在体外趋化 95D细胞的迁移 ,SDF 1α还可促进 95D细胞的增殖。结论 :95D细胞功能性高表达趋化因子受体CXCR4可能与人肺癌细胞株

趋化因子受体CXCR4在乳腺癌组织中的表达及其意义

目的:探讨趋化因子受体CXCR4在乳腺癌中的表达及其与临床病理学参数的关系。方法:采用半定量RT-PCR和免疫组织化学法分别检测121例乳腺癌新鲜组织及对应75例石蜡组织中CXCR4 mRNA及蛋白的表达。结果:乳腺癌中CXCR4m RNA及蛋白的表达阳性率分别为30.58%、68%;CXCR4 mRNA表达与蛋白表达呈显著正相关(χ2=5.049,P<0.05),且均与淋巴结转移关系密切,淋巴结转移阳性组CXCR4表达明显高于阴性组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:CXCR4表达可能在促进乳腺癌淋巴结转移过程中起重要作用,其表达可作为判断乳腺癌恶性生物学行为并预测转移风险的一个指标,抑制CXCR4表达及其活性可为临床阻断癌细胞转移提供新的抗趋化治疗途径。

趋化因子受体CXCR3在胃癌中的表达

背景近年来,趋化因子及其受体在肿瘤转移中的作用引起了重视,但有关趋化因子受体CXCR3在胃癌中的表达尚无报道。目的检测胃癌组织和细胞系中CXCR3在mRNA和蛋白水平的表达,为进一步研究其在胃癌转移中的作用奠定基础。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT鄄PCR)检测胃癌细胞系CXCR3mRNA的表达,蛋白质印迹法(Westernblotting)检测胃癌组织和细胞系CXCR3蛋白的表达,流式细胞仪检测胃癌细胞系表面CXCR3的表达。结果在所检测的胃癌组织中,CXCR3蛋白的表达量明显高于相应癌旁组织。所检测的胃癌细胞系均有CXCR3mRNA和CXCR3蛋白表达,但仅KATOⅢ细胞表面CXCR3的表达较明显。永生化胃上皮细胞系GES鄄1的CXCR3蛋白表达量明显低于胃癌细胞系。结论胃癌细胞系有CXCR3表达,胃癌组织中CXCR3的表达高于癌旁组织。

趋化因子受体CXCR4在甲状腺癌中的表达

目的探讨趋化因子受体CXCR4在甲状腺癌中的表达及临床意义,为临床治疗甲状腺癌寻求新的治疗靶点提供依据。方法采用免疫组化SP染色法检测甲状腺癌、结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤及正常甲状腺组织中CXCR4表达差异,以及CXCR4在甲状腺癌中的表达与患者肿瘤病理类型、淋巴结转移状态、年龄及性别的关系。结果CXCR4在甲状腺癌组织中高表达,与结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤及正常甲状腺组织中表达差异有统计学意义,而且与患者淋巴结转移状态、病理类型密切相关,与患者年龄、性别无关。结论CXCR4在甲状腺癌的发生发展中可能起到重要作用,CXCR4在甲状腺癌中高表达,与患者淋巴结转移状态、病理类型密切相关,可作为甲状腺癌患者预后的指标,本研究为临床寻找新的甲状腺癌治疗靶点提供了重要依据。

趋化因子受体7(CXCR7)在食管鳞形细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨趋化因子受体7(chemokine receptor 7,CXCR7)在食管鳞癌组织中的表达情况,分析其与患者临床病理特征及预后的关系。方法选择2006年在复旦大学附属中山医院胸外科行胸段食管鳞癌根治术患者的手术切除标本共154例,同时选取49例正常食管鳞形上皮组织标本做对照。利用免疫组织化学染色方法检测肿瘤组织及正常食管鳞形上皮组织中CXCR7蛋白的表达情况,分析CXCR7表达水平与患者临床病理特征及预后的关系。结果正常食管鳞形上皮组织中的CXCR7蛋白阳性表达率为6.1%(4/49),肿瘤组织中的CXCR7阳性表达率为76.0%(116/154);CXCR7表达水平与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及pTNM分期密切相关,差异有显著统计学意义(P<0.01)。单因素分析结果显示,患者性别、年龄、肿瘤浸润深度、淋巴结转移、pTNM分期及CXCR7表达水平与患者预后密切相关,差异有统计学意义(P<0.05);多因素分析结果显示pTNM分期和CXCR7表达水平是患者独立不良预后因素。结论 CXCR7表达水平与食管鳞癌患者复发、转移及预后密切相关,推测CXCR7在食管鳞癌发生及发展过程中起非常重要的作用。

趋化因子受体CXCR3 mRNA在银屑病患者皮损部位的表达

目的:了解CXCR3 mRNA在银屑病皮损部位的表达水平及其与银屑病区域严重性指数(PASI)的关系。方法:应用RT-PCR法检测了33例银屑病患者皮肤中CXCR3 mRNA的表达水平,设30例健康对照;将检测结果与PASI进行了相关性分析。结果:银屑病皮损部位真皮CXCR3 mRNA表达水平为1.44±0.67,明显高于对照(0.59±0.29,P<0.01)及非皮损部位皮肤(1.00±0.75,P<0.01),但与PASI之间无相关性;银屑病非皮损部位真皮该受体的表达水平也显著高于对照组(P<0.05)。结论:CXCR3参与了银屑病真皮的病理变化。

肺岩宁方对Lewis肺癌小鼠趋化因子CXCL12及其受体CXCR4表达的影响

目的:观察肺岩宁(Feiyanning,FYN)方对C57小鼠Lewis肺癌肿瘤组织中趋化因子CXCL12及其受体(CXC chemokine receptor 4,CXCR4)mRNA及蛋白表达的影响。方法:建立C57小鼠Lewis肺癌模型,随机分为模型组、化疗组、肺岩宁组和综合组(肺岩宁加化疗组)。给予相应干预21d后观察肺转移情况,采用逆转录聚合酶链反应法和免疫组化SP法分别检测C57小鼠Lewis肺癌中CXCL12和CXCR4 mRNA及蛋白表达水平。结果:肺岩宁组与综合组小鼠的肺转移率低于模型组。C57小鼠Lewis肺癌组织中表达CXCL12和CXCR4,肺岩宁组与综合组小鼠肺癌中CXCR4 mRNA及蛋白的表达水平均明显低于模型组与化疗组(P<0.05),而4组小鼠Lewis肺癌组织中CXCL12 mRNA及蛋白的表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肺岩宁抑制C57小鼠Lewis肿瘤转移的机制可能与下调趋化因子受体CXCR4的表达,影响CXCL12-CXCR4生物轴的作用有关。

乳腺癌组织趋化因子受体CXCR4的表达与意义

目的探讨趋化因子受体CXCR4在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法用免疫组织化学方法检测45例乳腺癌及10例乳腺纤维腺瘤组织中趋化因子受体CXCR4的表达，并对原位癌与发生转移的癌组织中的CXCR4的表达率进行比较。结果在乳腺癌组织上检测到趋化因子受体CXCR4的表达（表达率为62．2％），其中癌组织发生转移的CXCR4的表达率为69．4％，未发生转移的表达率为33．3％，而乳腺纤维腺瘤组织中未发现CXCR4的表达。结论乳腺癌组织上有趋化因子受体CXCR4的表达，其表达可能在乳腺癌的发生、发展和转移中起重要作用。

趋化因子受体CCR5的研究进展

CCR5为趋化因子CC受体家族成员,属7次跨膜G蛋白耦联受体,配体为CCL3(MIP-1α)、CCL4(MIP-1β)、CCL5(RANTES)。CCR5主要表达于单核/巨噬细胞和淋巴细胞,与其配体介导CCR5+免疫细胞的趋化、募集过程。因此,多种免疫性疾病的发生和发展过程均有CCR5参与。CCR5是人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)入侵时的重要辅助受体,而在肿瘤细胞和各类肿瘤相关间质细胞的表面也可见其表达,并介导肿瘤增殖、浸润等多种生物学过程。随着相关研究技术的发展,进一步加深了对CCR5的结构、功能、信号通路及其在相关疾病中的作用的认识。

趋化因子受体CCR5亲合短肽的筛选

趋化因子受体5(CCR5)是HIV-1与宿主细胞结合的辅助因子之一,其功能缺失或被CCR5拮抗剂封闭则会阻止HIV-1感染细胞.为得到与CCR5特异结合的肽类拮抗剂,采用噬菌体展示技术,以稳定表达CCR5的CHO细胞(CHO/CCR5)作为靶标,通过噬菌体随机12肽库筛选与CCR5特异结合的多肽;经过四轮筛选后,挑选20个阳性噬菌体克隆进行测序,从中得到11个含有AFDWTFVPSLIL序列的小分子肽.含该序列的噬菌体能与抗人CCR5单抗(2D7)竞争性结合CCR5,且合成肽AFDWTFVPSLIL对趋化因子RANTES与CHO/CCR5的结合具有明显的抑制作用,初步证明该小肽与CCR5具有特异性结合作用.