趋化素样因子2 mRNA在心肌肥厚大鼠心肌中的表达

目的 :检测趋化素样因子 2 (chemokine likefactor 2 ,CKLF2 )mRNA在心肌肥厚大鼠心肌中的表达。方法 :实验组以手术缩窄大鼠腹主动脉致心肌肥厚 ,对照为假手术组 ;应用竞争PCR方法检测两组左心室CKLF2mRNA表达差异。结果 :与假手术组相比 ,手术组术后早期 (第 1 7天 )心肌中CKLF2mRNA表达增高 ,第 4 5天时降到假手术组水平。结论

趋化素样因子2(CKLF2)mRNA在不同发育期大鼠心肌中的表达

目的检测趋化素样因子(CKLF2)mRNA在大鼠从胚胎到成年的各个不同时期的表达。方法应用竞争PCR方法,检测CKLF2mRNA在大鼠胚胎12,18d和出生即刻,3,7和21d乳鼠及成年鼠心室肌的表达。结果与成年大鼠相比,胚胎12d大鼠心肌CKLF2mRNA显著高表达,此后下降,出生时降到较低水平,生后有所增高,成年时表达水平最低。结论CKLF2可能参与大鼠胚胎期心肌细胞的增殖过程和出生后心脏发育过程。

人类趋化素样因子超家族2参与小鼠精子形成

目的:探究人类趋化素样因子超家族2(CKLF-like MARVEL transmembrane domain-containing protein 2,CMTM2)在小鼠精子生成过程中的作用。方法:构建CMTM2基因敲除小鼠模型,利用Northern、RT-PCR及Western印迹检测野生型、杂合子及纯合子小鼠的CMTM2表达水平,统计小鼠生育幼崽数量及生育率,采集并分析精子活动度、形态及睾丸组织切片,检验血清睾酮及促卵泡激素(follicle-stimulating hormone,FSH)水平。结果:CMTM2在小鼠生精中呈现准确的调控式高度表达,基因敲除的成年小鼠和野生型成年小鼠在体重上差异没有统计学意义。纯合子的小鼠睾丸体积及重量小于野生型小鼠睾丸,野生型小鼠与CMTM2敲除小鼠的睾丸长径比较,差异有统计学意义[(11.32±1.21)mm vs.(8.29±1.92)mm,P<0.05],睾丸重量比较,差异有统计学意义[(101.63±2.33)mg vs.(85.22±2.84)mg,P<0.05]。与野生型小鼠相比,杂合子精子数量明显减少,纯合子小鼠精子发生停滞。在精子形态学方面,与野生型小鼠相比,杂合子小鼠有更多圆形精子,而纯合子则因精子发育停滞,多为圆形精子细胞。睾酮和FSH在3组间差异无统计学意义。纯合子雄性小鼠由于精子发生停滞而不育,纯合子小鼠缺失生精上皮层。结论:CMTM2在生精过程中发挥着不可或缺的作用,其参与精子发生的潜在机制有待于进一步实验研究以证实。

生长相关癌基因α与趋化素样因子超家族2在胃癌组织的表达

研究表明，趋化因子及其受体可能在肿瘤生长、浸润和转移等生物学行为中起着重要的作用旧。趋化因子生长相关癌基因（growth-related oncogene,GRO）和趋化素样因子超家族（chemokine-like factor superfamily member, CKLFSF）可能参与了肿瘤的生物学行为，但与胃癌的关系目前尚不清楚。本研究通过检测胃癌组织GROcL和CKLFSF2表达，探讨其与胃癌的发病机制的关系。

人类新细胞因子CKLFSF2羧基端蛋白在大肠杆菌中的表达纯化、抗体制备与鉴定

哺乳动物细胞表达的人类新细胞因子——趋化素样因子超家族成员-2(CKLFSF2)存在分泌形式,位于CKLFSF2分子的羧基端,具有细胞趋化作用.为进一步研究CKLFSF2羧基端蛋白的结构和生物学功能及抗体制备,构建了GST-CKLFSF2C51原核表达质粒,经原核表达、亲和层析、凝胶过滤,获得GST-CKLFSF2C51融合蛋白和CKLFSF2羧基端蛋白(CKLFSF2C51),纯度可达到95%以上.GST-CKLFSF2C51融合蛋白用于制备多克隆抗体,ELISA方法检测抗体效价阳性,蛋白质印迹检测CKLFSF2哺乳动物细胞超表达细胞裂解液,获得特异性条带与预期大小一致.CKLFSF2C51经N端测序,质谱鉴定与预期结果一致,该蛋白质具有对PC-3细胞趋化的活性,并且该活性可被制备的多克隆抗体中和.上述结果表明,原核CKLFSF2羧基端蛋白具有与CKLFSF2真核表达蛋白类似的细胞趋化活性,原核CKLFSF2羧基端蛋白制备的多克隆抗体可用于免疫组织化学、蛋白质印迹检测,并能中和CKLFSF2蛋白的趋化活性作用.

cklfsf 2a在小鼠睾丸发育中的基因表达和蛋白定位

目的研究趋化素样因子2a(cklfsf2a)在小鼠睾丸中的基因调控和蛋白定位。方法采用RT-PCR方法检测cklfsf2a基因在不同周龄小鼠睾丸组织中的表达情况,制备cklfsf2a多克隆抗体,分别采用免疫组织化学和原位杂交方法检测cklfsf2a蛋白和mRNA在小鼠睾丸组织中的定位。结果cklfsf 2a mRNA在出生后14d内出现,表达量逐渐增加,在成年前达到高峰并持续表达。cklfsf2a蛋白和mRNA均特异性的表达于睾丸初级精母细胞。结论cklfsf2a基因存在发育的表达调控,随着睾丸发育的日趋成熟,表达量逐渐增加,其作用可能和精母细胞的发育有关。