血管内皮生长因子通过CXCR4增强间充质干细胞的趋化能力

目的探索血管内皮生长因子能否通过促进间充质干细胞高表达CXCR4而增加其趋化能力。方法体外培养间充质干细胞铺满约90%时,给与血管内皮生长因子刺激,然后在不同的时间点,用流式细胞术检测间充质干细胞胞内表达CXCR4的变化。CM-DiI标记预先经过及未经过血管内皮生长因子处理的间充质干细胞,通过尾静脉注射到肝损伤小鼠体内,并通过CM-DiI的荧光强度比较来明确趋化到肝脏的间充质干细胞数量的差异。结果经过血管内皮生长因子刺激后,原来低表达CXCR4的间充质干细胞高表达CXCR4。而且在6小时的时间点,CXCR4表达量最高。经刺激后高表达CXCR4的间充质干细胞趋化能力得到提高。结论血管内皮生长因子上调CXCR4的表达,增强间充质干细胞的归巢及趋化能力。

山茱萸总苷对关节炎大鼠原代滑膜细胞培养上清趋化能力的影响

探讨山茱萸总苷抗类风湿关节炎的作用机理。采用改良的Boyden小室前导法检测CⅡ诱导的关节炎大鼠山茱萸总苷治疗组和模型组的原代滑膜细胞培养上清对关节浸润炎性细胞如中性粒细胞、骨髓巨噬细胞和淋巴细胞趋化能力,结果以实验组穿膜细胞数减去对照组穿膜细胞数表示。结果发现:山茱萸总苷治疗组的原代滑膜细胞培养上清对上述三种炎性细胞的趋化能力（穿膜细胞数）均显著低于模型组（P<0.01）。说明山茱萸总苷抑制关节滑膜细胞对炎性细胞的趋化,减少炎性细胞向关节滑膜的浸润是其抗关节炎作用的机理之一。

脂质过氧化炎症损伤模型中参莲提取物对巨噬细胞功能的药效与机制探讨

目的:研究参莲(SL)提取物在脂质过氧化炎症损伤模型中,对巨噬细胞功能的作用和促进炎症消散的药效和药理机制。方法:利用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)体外诱导小鼠巨噬细胞RAW264. 7细胞和人单核细胞THP-1造成脂质过氧化损伤模型,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测不同质量浓度的SL提取物(2. 5,5. 0,10. 0,20. 0 mg·L^(-1))对巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的含量;流式细胞术检测巨噬细胞泡沫化形成;transwell实验检测SL提取物对THP-1趋化功能的影响;以及用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测诱导型一氧化氮合酶(i NOS),炎症消散因子5脂氧合酶(ALOX5)以及对核转录因子-κB(NF-κB)信号通路中的磷酸化p65(p-p65)和磷酸化IκK(p-IκK)蛋白表达情况。结果:与正常组比较,ox-LDL提高M1型巨噬细胞标志物TNF-α,IL-1β,i NOS的表达(P <0. 01),抑制M2型标志物IL-10的表达,促进泡沫细胞形成(P <0. 01),诱导THP-1向ox-LDL趋化,提高MCP-1分泌量(P <0. 01),抑制ALOX5的表达。与模型组比较,SL提取物可以降低TNF-α,IL-1β,i NOS的表达(P <0. 01),提高IL-10的表达(P <0. 05);能显著降低巨噬细胞吞噬脂质后泡沫化的形成(P <0. 01);能降低THP-1细胞MCP-1的分泌(P <0. 01),减少趋化的细胞数目(P <0. 01);促进炎症消散因子ALOX5的升高(P <0. 05),同时抑制p65和IκK磷酸化表达(P <0. 01)。结论:在脂质过氧化炎症损伤模型中,SL提取物具有诱导巨噬细胞M2极化,抑制巨噬细胞对ox-LDL的趋化和泡沫化的形成,提高ALOX5表达,促进炎症消散,从而改善脂质过氧化炎症损伤状态,上述功能与抑制NF-κB信号通路中p65和IκK磷酸化水平有关。

骨髓间充质干细胞与前列腺癌相互作用的研究进展

骨髓间充质干细胞（MSCs）作为一种成体干细胞，具有肿瘤组织定向趋化能力，参与肿瘤间质形成，又具有恶性转化及潜在移植后致瘤性，使其与肿瘤的关系密不可分。骨骼是前列腺癌转移最常见的靶器官，超过70％的晚期前列腺癌患者发生以脊柱病变为表现的骨转移，其发生机制尚未完全明确。鉴于MSCs独特的生物学特性及前列腺癌特殊的生长环境与转移途径，

乌司他丁对脂多糖介导的小鼠肾脏固有树突状细胞成熟的抑制作用

目的研究乌司他丁对脂多糖介导的小鼠肾脏固有树突状细胞（rDC）成熟的影响。方法取C57BL／6J小鼠肾脏，制备单细胞悬液，使用免疫磁珠法分选CDllc＋的rDC，流式细胞仪鉴定rDC纯度。脂多糖刺激24h，促使rDC成熟，给予不同浓度（50、100和200U／L）乌司他丁处理，酶联免疫吸附试验检测上清液中白细胞介素12（IL-12）的分泌水平。100U／L的乌司他丁处理后，流式细胞仪检测rDC表面主要组织相容性复合物（MHC）lI类分子及CD80和CD86分子，以观察乌司他丁对rDC表型及功能的影响。检测趋化因子受体7（CCR7）的表达，计数受巨噬细胞炎症蛋白3G（MIP-38）趋化进入细胞培养小室下层的CDllC＋细胞的数目，分析乌司他丁对rDC趋化能力的影响。结果脂多糖刺激促使rDC成熟，高表达MHCⅡ、CD80、CD86分子，并分泌大量IL-12，而乌司他丁能够抑制脂多糖介导的rDC表型和功能成熟。经乌司他丁处理，CCR7分子的表达由69．2％下降至37％，并且受趋化的CDllc＋细胞数目下降为脂多糖处理者的45．3％。结论乌司他丁能够抑制脂多糖介导的小鼠rDC的成熟和趋化能力上调。