人单核细胞趋化蛋白受体5的基因克隆及该基因超家族成员氨基酸结构分析(英文)

目的 :获取有重要生物功能的人单核细胞趋化蛋白受体 5 (hum an m onocyte chemotactic receptor5 ,hu CCR5 )。方法 :从人 PBMC中提取总 RNA和 poly(A) + RNA,而后经反转录合成 c DNA第一链 ,再以 PCR扩增出 hu CCR5 c DNA并插入融合表达载体 pc DNA3.0的 Bam H 和 Hind 位点 ,转化大肠杆菌 TG- 1,挑取克隆 ,酶切鉴定 ,序列分析。结果 :克隆出长度为 10 5 6 bp,编码 35 2个氨基酸的 hu CCR5 c DNA。并分析证明与该基因超家族氨基酸有 80 %同源性 ,与国外发表资料比较有3个碱基突变。 结论 :克隆出人单核细胞趋化蛋白 5受体 ,为今后基础研究提供了较有用的材料。

抗体封闭趋化蛋白受体5对1型糖尿病发病的影响

目的 :研究体内封闭趋化蛋白受体 5 (CCR5 )分子对严重联合免疫缺陷小鼠 (severe combined im munodeficientNOD,NOD.Scid) 1型糖尿病发病的影响。 方法 :将发病非肥胖性糖尿病小鼠 (1只 )的脾细胞腹腔注射至 NOD.Scid小鼠体内 ,将这些小鼠随机分成 2组 (每组 8只 ) :抗 CCR5组小鼠腹腔注射抗 CCR5膜外第一襻的多克隆抗体 ,1周 3次 ,共计 12次 ;对照组相同方法注射 PBS,同时测定其血糖和体重。脾细胞注射后 70 d或当小鼠出现重度糖尿病临床表现时处死 ,进行组织学观察和脾细胞分泌细胞因子的 EL ISA测定。 结果 :脾细胞射后 70 d内 ,抗 CCR5组小鼠糖尿病发病率为 37.5 % (3/ 8) ,对照组为 10 0 % (8/ 8) ;胰腺炎积分抗 CCR5组较对照组差异显著 (P<0 .0 5 ) ;抗 CCR5组 IL- 2、IL- 10、IFN- γ水平分别为 2 5 .2、2 7.3pg/ ml和 0 .2 38ng/ ml,对照组为 5 7.7、31.6 pg/ ml和 18.0 3ng/ ml,前者的 IL- 2和 IFN- γ水平显著低于后者 (P<0 .0 5 )。结论 :在 NOD.Scid小鼠体内注射抗体封闭 CCR5可以部分抑制 1型糖尿病的发生。