足叶乙苷长循环脂质体的制备及血浆中稳定性研究

【目的】研究足叶乙苷长循环脂质体的制备方法并考察其在大鼠血浆中的稳定性。【方法】采用乙醇注入法制备足叶乙苷长循环脂质体,用聚乙二醇2000—二硬脂酰磷脂乙醇胺(PEG2000-DSPE)修饰脂质体膜,反相高效液相色谱(HPLC)法测定脂质体浓度,动态透析法考察其在大鼠血浆中的稳定性。【结果】足叶乙苷长循环脂质体的平均粒径为(180±26)nm,含量为(4.78±0.22)mg/mL,药物包封率为(88.71±8.2)%。在大鼠血浆中,普通脂质体和长循环脂质体24h累积释药率分别为(80.14±1.59)%和(46.72±2.61)%。【结论】乙醇注入法可制得包封率高、粒径小的足叶乙苷脂质体,PEG2000-DSPE修饰脂质体膜可增加脂质体的稳定性。

微波和足叶乙苷体外净化白血病细胞

目的：研究一种较好的微波和足叶乙苷的联合方法，用于白血病细胞的体外净化。方法：将微波和足叶已苷分别单独以及联合使用于正常骨髓细胞，HL60，U937和K562细胞株，通过GM－CFU和tCFU的测定来评价体外净化的效果。结果：微波和足叶乙苷对GM－CFU，TCFu存活率均表现出抑制作用，抑制程度呈现出功率相关性和浓度相关性；在一定范围内，微波和足叶乙苷对3种细胞株tCFU存活率的抑制显著大于GM-CFU（P＜0．05或P＜0．01）；微波和足叶乙苷联合作用对3种细胞株的杀伤作用比单用足叶乙苷有显著性增加（P＜0．05），而不显著增加对GM-CFU的抑制（P＞0．05）。结论：微波和足叶乙苷联合用于白血病细胞的体外净化能产生协同效应，值得进一步研究。

HPLC法测定脂质体中足叶乙苷的含量研究

目的建立足叶乙苷脂质体的含量测定方法。方法采用HPLC法,以Phenomenex Synergi C18柱（4.6 mm×250μm,5μm）为色谱柱;甲醇-0.2%NaAc-HAc缓冲液为流动相;流速：1.0 ml.min-1,检测波长：285 nm,进样量：20μl。结果足叶乙苷线性范围为10.5~210 mg.L-1,加样回收率为99.90%;精密度符合要求。结论HPLC测定法稳定可靠,可用于足叶乙苷脂质体中的药物含量测定方法。

足叶乙苷玻璃体内注射对兔视网膜损伤的研究

目的研究足叶乙苷(etoposide,VP_16)兔眼玻璃体内注射对视网膜的化学性损伤作用。方法28只大白兔,根据足叶乙苷玻璃体内注射的量0μg1、.5μg1、5μg1、50μg3、75μg、750μg1、500μg随机分为7组,每组8眼。注射前1 d,注射后1d3、d7、d、12 d作视网膜电图(electroretinogram,ERG)检查,12 d处死动物,进行病理学光镜及电镜检查。结果玻璃体内注射足叶乙苷量为0μg、1.5μg1、5μg1、50μg的4组,在注射前后,其ERG、光镜和电镜检查均未发现明显异常;注射量为375μg7、50μg1、500μg的3组,其ERG、光镜和透射电镜检查在注射后均发生了显著的异常改变。结论足叶乙苷对兔眼视网膜有一定的化学性损伤作用,并且呈剂量依赖性;兔眼玻璃体内注射的安全剂量至少高达150μg。

足叶乙苷脂质体包封率测定方法研究

目的:建立足叶乙苷脂质体的包封率测定方法。方法:采用乙醇注入法制备足叶乙苷脂质体,以葡聚糖凝胶分离-高效液相色谱法测定含量和包封率。结果:洗脱曲线表明采用蒸馏水(洗脱速度0.5 mL/min)作为洗脱溶剂,柱回收率为99.22%,同一批样品包封率测定结果RSD在2%以内。结论:葡聚糖凝胶分离-高效液相色谱法操作简单、准确、重复性好,可用于足叶乙苷脂质体的包封率的测定。

微波和足叶乙苷体外诱导K562细胞凋亡的研究

探讨微波和足叶乙苷体外诱导Ｋ５６２ 细胞凋亡的可能性及其机制． 将微波和足叶乙苷分别单独以及联合作用于正常骨髓细胞和Ｋ５６２ 细胞株， 通过细胞凋亡率和ｂｃｌ２ 蛋白阳性率的测定来评价细胞凋亡的程度并研究其机制． 微波和足叶乙苷各自都能诱导正常骨髓细胞和Ｋ５６２ 细胞的少量凋亡， 两者联合作用所诱导的细胞凋亡率较之于足叶乙苷有显著性增加（Ｐ＜ ０ ．０５） ， 其中Ｋ５６２ 的细胞凋亡率的增加幅度远大于正常骨髓细胞； 细胞凋亡率的增加和ｂｃｌ－ ２ 蛋白阳性率的降低是同步的． 微波和足叶乙苷共同作用于Ｋ５６２ 细胞来诱导凋亡能够产生一定程度的协同效应， 这种凋亡的诱导作用与ｂｃｌ－ ２

足叶乙苷胶囊单药口服二线治疗老年复发小细胞肺癌患者的临床疗效

目的观察足叶乙苷胶囊（VP16）单药口服二线治疗老年复发小细胞肺癌的临床疗效及安全性。方法本文回顾性分析2012年1月-2014年1月天津市第五中心医院收治的老年（≥65岁）复发小细胞癌症患者39例,均为一线治疗结束至少3个月后复发的二线患者。均给予口服足叶乙苷胶囊100 mg,1次/天,连续用药7 d后停药14 d,21 d为1个治疗周期。患者出现疾病进展或药物不可耐受的不良反应时停止给药。分析患者无进展生存期（progression free surviva,PFS）、总生存期（overall survival,OS）,观察临床获益率（benefit clinical rate,DCR）、总反应率（overall response rate,ORR）及安全性。结果治疗后,患者临床获益率（DCR）为61.5%,总反应率（ORR）为30.77%,总生存期（OS）为7.3个月,无进展生存期（PFS）为2.8个月。中性粒细胞减少是最常见的不良反应,Ⅲ度或Ⅳ度占7.7%;无Ⅲ度或Ⅳ度血小板减少;无Ⅲ度或Ⅳ度非血液学毒性。结论足叶乙苷胶囊单药口服治疗二线老年复发小细胞肺癌患者效果显著,患者总生存期延长,临床获益率高。

足叶乙苷为基础的方案在中国复发性肾母细胞瘤极高危组患儿中的应用经验及文献复习

目的观察足叶乙苷为基础的方案治疗复发性肾母细胞瘤极高危组患儿的疗效及不良反应。方法回顾分析3例治疗案例并结合相关文献进行讨论。结果 3例患儿均不同程度从中获益,且未经历Ⅲ/Ⅳ级不良反应。结论应用足叶乙苷为基础的化疗方案治疗复发性肾母细胞瘤极高危组患儿的疗效值得进一步研究及探讨。

足叶乙苷治疗噬血细胞综合征的护理

目的探讨足叶乙苷治疗噬血细胞综合征的护理特点及对策。方法对32例噬血细胞综合征患儿的治疗过程进行护理,分别在饮食、空气、静脉穿刺、骨髓抑制期保护等进行整体化护理,并与既往收治并进行普通护理的32例患儿进行对照,观察护理效果。结果观察组32例噬血细胞综合征患儿中有2例出现发热、出血情况,经及时治疗后均得以恢复。对照组32例患儿中3例出现发热,2例发生出血,经积极治疗后均康复。结论对使用足叶乙苷治疗的噬血细胞综合征患儿采用整体化护理,可避免发生严重并发症。

卡铂与足叶乙苷联用治疗肺癌133例

目的:观察卡铂与足叶乙苷(CE)联用方案对肺癌的临床疗效及毒副反应。方法:对133例肺癌患者采用CE方案治疗2个或3个周期,观察疗效和毒副反应。结果:总有效率为47.0%,其中小细胞癌(37例)有效率为83.8%,腺癌(62例)有效率为33.9%,鳞癌(34例)有效率为30.3%。毒副反应主要是骨髓抑制,消化道及肝肾毒性较轻。结论:CE方案治疗小细胞肺癌可获得较高疗效,对非小细胞肺癌的疗效与其他常用方案相近,毒副反应较轻。

足叶乙苷联合顺铂一线治疗晚期小细胞肺癌对患者多种血清肿瘤标志物的影响

目的观察足叶乙苷联合顺铂一线治疗晚期小细胞肺癌对患者多种血清肿瘤标志物的影响。方法选取医院收治的晚期小细胞肺癌患者106例进行观察,对所选患者均采用足叶乙苷联合顺铂方案进行一线治疗,回顾性分析患者的临床资料,分别于治疗前及治疗2个疗程后检测患者的神经烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、糖类抗原199(CA199)的水平。结果经化疗2个疗程后,完全缓解(CR)占0.00%,部分缓解(PR)占45.28%,稳定(SD)占31.13%,进展(PD)占23.59%,客观有效率为45.28%。化疗后,CR+PR患者的NSE、CYFRA21-1指标水平明显低于化疗前(P<0.01),CA199指标水平与化疗前无明显差异(P>0.05)。化疗后,SD+PD患者的NSE、CYFRA21-1、CA199指标水平与化疗前无明显差异(P>0.05)。化疗后,CR+PR患者的NSE、CYFRA21-1指标水平明显低于SD+PD患者(P<0.01),CA199指标水平与SD+PD患者无明显差异(P>0.05)。结论血清NSE可以作为晚期小细胞肺癌患者化疗疗效的评价指标,但对化疗无效患者的检测无明显意义。

足叶乙苷长循环脂质体的抑瘤性作用

目的:进行足叶乙苷长循环脂质体的抑瘤性研究。方法:通过C57BL/6 J小鼠接种Lewis肺癌,建立肿瘤模型后给药,以16 d的小鼠肿瘤重量为指标,进行抑瘤率考察,同时进行病理切片观察。结果:足叶乙苷长循环脂质体组的抑瘤率为64.15%,明显高于足叶乙苷注射液组的47.92%、普通脂质体组的58.49%。肿瘤组织病理切片的结果显示,足叶乙苷长循环脂质体组的肿瘤组织出现明显的核凝固坏死现象。结论:足叶乙苷长循环脂质体具有一定的抑瘤性能。

足叶乙苷长循环脂质体的小鼠代谢动力学研究

目的研究足叶乙苷长循环脂质体的小鼠体内代谢动力学。方法采用HPLC测定血药浓度,考察脂质体在小鼠体内的代谢动力学行为。结果足叶乙苷线性范围为10.5～210μg.mL-1,回收率在90%以上,精密度符合要求。长循环脂质体的消除半衰期t1/2和AUC分别是注射剂的17和3.5倍。结论足叶乙苷长循环脂质体在小鼠体内的消除半衰期较长,能达到长循环目的。

bcl-2反义寡核苷酸增强足叶乙苷诱导原代白血病细胞凋亡的研究

目的 :研究 bcl- 2的反义寡核苷酸对足叶乙苷 (VP1 6 )诱导原代培养的急性白血病(AL)细胞凋亡的影响。方法 :用细胞计数法观察细胞的生存情况 ;用免疫荧光标记法通过流式细胞仪观测细胞 bcl- 2蛋白水平 ;用形态学观察及流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 :靶向 bcl- 2 m RNA翻译起始区与靶向蛋白编码区的两个反义寡核苷酸分别与 VP1 6 联合作用 AL 细胞 4 8h,细胞的生存受到明显的抑制 ,分别同无关寡核苷酸 (NS- ODN)联合 VP1 6 组、单用 VP1 6 组进行比较 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 )。这两个不同靶点的反义寡核苷酸分别与 VP1 6 联用 ,均能明显下调 AL 细胞 bcl- 2蛋白的表达 ,并且联合作用 AL 细胞 4 8h的凋亡细胞百分率分别与 NS- ODN联合 VP1 6 组、单用 VP1 6 组进行比较 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 )。结论 :针对 bcl- 2 m RNA翻译起始区和蛋白编码区两个靶点的反义寡核苷酸能增强 VP1 6 诱导急性白血病细胞的凋亡。

中效原理在顺铂、足叶乙甙对人肺癌细胞株(PAa)相互作用中的应用

目的 :利用中效原理观察顺铂、足叶乙甙配伍在体外对人肺癌细胞株 (PAa)的相互作用 ,判断联合用药的效果。方法 :采用MTT法利用中效原理判断联合用药的效果。结果 :两种药物单独应用时随药物剂量增加 ,其效应也增加 ,两种药物合用时产生协同作用 ,两种药物合用时的浓度比例及给药时间次序不同均会影响效应大小。结论 :上述两种药物合用产生协同作用 。

survivin基因在化疗药物诱导的肺癌细胞凋亡中的作用

目的 探讨survivin基因在化疗药物顺铂 (DDP)和足叶乙苷 (VP16 )诱导的肺癌细胞凋亡中的作用。方法 用肺腺癌A5 4 9细胞株进行培养传代 ,MTT试验检测DDP和VP16不同药物浓度对肺癌细胞生长的抑制作用 ,实验分为 :DDP、VP16和对照组。DDP和VP16组的肺癌细胞又分为高浓度和低浓度化疗药物处理组。用逆转率PCR检测sur vivin基因的表达。同时利用流式细胞术定量检测细胞凋亡。结果 不同浓度VP16和DDP对肺癌细胞生长均有明显的抑制作用 ,并有浓度和时间的依赖性。化疗药物组细胞凋亡率和survivin基因表达抑制率高于对照组 ,也有时间依赖性。

三氧化二砷单用或联用化疗药物对多药耐药白血病细胞的毒性研究

目的 :探讨三氧化二砷 (As2 O3)单用或与化疗药物合用对敏感白血病细胞 (K5 6 2 )或多药耐药 (MDR)白血病细胞 (K5 6 2 /A0 2 )的毒性作用。方法 :细胞毒实验采用MTT法 ,细胞表面P 糖蛋白 (P gp)和细胞内柔红霉素 (DNR)浓度采用流式细胞术测定。结果 :As2 O3 对K5 6 2和K5 6 2 /A0 2的IC50 分别为 ( 2 .1± 0 .2 ) μmol·L-1和( 1.5± 0 .3) μmol·L-1,二者比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。As2 O3 分别与DNR、足叶乙苷 (VP16 )和三尖杉酯碱(H)联合应用时 ,对K5 6 2和K5 6 2 /A0 2的联合指数均大于 1。加入As2 O3 前后K5 6 2 /A0 2细胞表面P gp和细胞内DNR荧光强度均无明显改变。结论 :As2 O3 对敏感和MDR白血病细胞的细胞毒性作用相似 ;它分别与DNR ,VP16和H联合应用时 ,对敏感或MDR白血病细胞的毒性均为拮抗作用 ;它不影响MDR细胞P

视网膜母细胞瘤眼内化学疗法的研究

目的探讨视网膜母细胞瘤(Rb)眼内化学疗法的效果。方法88只荷瘤兔眼,按兔眼前房内Rb肿物大小及眼内化学疗法剂量和途径随机分为11组(包括对照、前房注射、结膜下注射及全身注射组),每组8只眼,眼内化学疗法后每天观察兔眼局部及全身情况,30d处死动物,做常规病理学检查,并分析前房内肿物治愈率或控制率及治愈时间等。结果眼内化学疗法组兔眼前房内肿物治愈率均为100%。前房内肿物消失时间、肿物高度相同而化学疗法剂量不同的各组之间,以及化学疗法剂量相同而肿物高度不同的各组之间的差异具有统计学意义(P<0.05)。结膜下注射组及全身注射组兔眼前房内肿物治愈率均为0%,只有不同程度的前房内肿物控制。结论眼内化学疗法与结膜下注射及静脉注射化学疗法相比治愈率较高;眼内化学疗法的效果与肿物的大小及化学疗法时所采用的药物质量浓度有关。