达格列净促进糖尿病肾脏病足细胞自噬的机制

蛋白尿是糖尿病肾脏病的特征性表现和重要的疾病进展风险因素,会引起肾功能恶化直至肾衰竭,与终末期肾脏病和心血管疾病的风险增加相关。足细胞是肾小球滤过屏障的重要组成部分之一,足细胞损伤是蛋白尿发生的主要原因。自噬作为维持足细胞稳态的重要机制,与体内营养状态密切相关。达格列净是钠-葡萄糖协同转运体2抑制剂,具有肾脏保护作用,有研究表明该药可通过模拟营养剥夺状态、抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白1,并激活腺苷酸活化蛋白激酶、沉默信息调节因子1,从而增强足细胞自噬和减少蛋白尿。本文就达格列净通过营养感应信号通路促进糖尿病肾脏病足细胞自噬从而起到保护肾功能的作用进行系统性综述,为糖尿病肾脏病的预防和治疗提供可行的临床应用和未来的研究建议。

复方青龙衣胶囊对阿霉素肾病模型大鼠尿蛋白及足细胞自噬因子表达影响

目的探究复方青龙衣胶囊对阿霉素肾病模型大鼠尿蛋白及足细胞自噬因子的影响。方法将60只雄性SD大鼠随机分为4组,即空白组(K组)、模型组(M组)、青龙衣组(Q组)、雷公藤多苷组(L组)。除K组注射等体积生理盐水外,其余各组大鼠构建阿霉素肾病模型。造模成功后,Q组给予复方青龙衣胶囊溶液,剂量为378mg/kg/d。L组给予雷公藤多苷片溶液,剂量为7.875mg/kg/d。K组及M组给予等容积蒸馏水灌胃。治疗4周,在第1、2、4周末,收集24 h尿液,测定大鼠24h-UPr。治疗结束后,腹主动脉取血,检测Scr、BUN、TP、ALB、TC、TG。HE染色观察肾脏病理变化,透射电镜观察肾组织超微结构,实时荧光定量PCR检测肾组织Beclin1 mRNA、LC3B mRNA的表达,免疫组化法检测肾组织Beclin1、LC3B及Podocin蛋白平均光密度比。结果M组大鼠24h-UPr、Scr、BUN、TC和TG均升高,TP、ALB均降低(P<0.05);足细胞Beclin1、LC3B mRNA及Podocin蛋白表达均降低(P<0.05);HE染色显示肾小球系膜基质增多,肾小囊腔变窄,炎细胞浸润;电镜观察显示自噬小体减少,足细胞足突融合。与M组相比,Q组及L组大鼠24h-UPr、Scr、BUN和TG均降低,TP、ALB均升高(P<0.05),Q组TC明显降低(P<0.05);足细胞Beclin1、LC3B mRNA及Podocin蛋白表达均升高(P<0.05);HE染色显示肾组织损伤程度减轻;电镜观察显示自噬小体增多,足细胞足突融合程度减轻。结论复方青龙衣胶囊具有降低AN大鼠24h-UPr、Scr、BUN、TC、TG、升高TP、ALB的作用,上调足细胞自噬相关基因Beclin1、LC3B及足细胞标志蛋白Podocin的表达,激活自噬,保护足细胞,减轻肾损伤。

加味参芪地黄汤对糖尿病肾病大鼠足细胞自噬的影响

目的:观察加味参芪地黄汤对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠足细胞自噬的影响。方法:从50只SD大鼠中取10只大鼠作正常对照组,其余采用高糖高脂饲料+STZ诱导DN大鼠模型,造模成功后将DN大鼠分为4组,分别为模型组、阳性对照组(洛丁新,0.90 mg/kg)、加味参芪地黄汤高剂量组(44.10 g/kg)、加味参芪地黄汤低剂量组(11.03 g/kg),每组9只,各组按相应剂量药物灌胃给药,模型组、正常组均予以等体积生理盐水灌胃,每天1次,共8周。HE、Masson染色观察肾脏病理改变;采用免疫组织化学法检测肾组织中自噬蛋白5(Autophagy-related protein 5,Atg5)、微管相关蛋白1轻链3(Microtubule-associated protein 1-light chain 3,LC3)表达情况。结果:肾脏HE染色和MASSON染色结果显示,加味参芪地黄汤可以改善DN大鼠肾小球系膜基质弥漫增生,基底膜增厚、肾小管空泡变性脂肪变性和间质淋巴增生的病理损伤,与阳性对照组相比较有明显差异(P<0.05)。免疫组化结果显示,加味参芪地黄汤可以增强DN大鼠肾脏足细胞自噬蛋白Atg5、LC3的表达,与阳性对照组相比有明显差异(P<0.05)。结论:加味参芪地黄汤能够改善DN大鼠肾组织病理损伤,促进DN大鼠的足细胞自噬。

糖肾煎对糖尿病肾病大鼠足细胞自噬及mTOR/P70S6K通路的影响研究

目的:研究糖肾煎对糖尿病肾病大鼠足细胞自噬及mTOR/P70S6K通路的影响。方法:大鼠按照随机数字表法分为空白对照组(6只)及造模组(35只),采用高糖高脂饲料喂养联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法建立糖尿病肾病大鼠模型,将造模成功大鼠随机分为模型组,糖肾煎低、中、高剂量组及二甲双胍组。糖肾煎低、中、高剂量组分别按照5 g/kg、10 g/kg、20 g/kg的剂量灌胃给予大鼠糖肾煎,二甲双胍组按照100 mg/kg灌胃给予大鼠二甲双胍,空白对照组及模型组灌胃给予等剂量生理盐水,所有组别给药1次/d,连续给药16周。使用尿蛋白检测试剂盒测定各组大鼠24 h尿蛋白量;使用全自动生化分析仪测定大鼠空腹血糖及糖化血红蛋白水平;使用酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒测定血清肌酐、血清尿素氮水平及肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)水平;苏木精—伊红(HE)染色法检查肾组织病理学变化;免疫荧光法测定足细胞Synaptopodin及LC3水平;免疫印记法(western blotting)检测肾组织p-mTOR、mTOR、p-P70S6K、P70S6K蛋白水平。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠空腹血糖、糖化血红蛋白、24 h尿蛋白量、血清肌酐、血清尿素氮、肾组织MDA水平、肾组织pmTOR/mTOR及p-P70S6K/P70S6K水平显著升高(P<0.05),肾组织SOD及T-AOC水平、足细胞Synaptopodin及LC3荧光强度显著降低(P<0.05);与模型组比较,糖肾煎各剂量组大鼠空腹血糖、糖化血红蛋白、24 h尿蛋白量、血清肌酐、血清尿素氮、肾组织MDA水平、肾组织p-mTOR/mTOR及p-P70S6K/P70S6K水平显著降低(P<0.05),肾组织SOD及T-AOC水平、足细胞Synaptopodin及LC3荧光强度显著升高,并呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:糖肾煎能够显著改善糖尿病肾病大鼠肾功能,修复足细胞损伤,调节足细胞自噬水平,其机制可能与调节mTOR/P70S6K通路有关。

足细胞自噬在足细胞病中的研究进展

对近年来足细胞自噬在足细胞病中的作用及其机制的研究进行了概述,阐述了哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(m TOR)信号通路在足细胞自噬中扮演的角色。足细胞自噬活性的改变与足细胞病的进程密切相关,m TOR信号通路介导的自噬途径是足细胞保持自身稳定的重要调节器,以调控足细胞自噬平衡体系为干预靶点可能成为足细胞病防治的新靶点。

糖尿病肾脏病中足细胞自噬调控机制的研究进展

糖尿病肾脏病(DKD)是糖尿病累积微血管受损的主要病变之一,其主要特征为持续蛋白尿及肾小球滤过率下降,已成为终末期肾病的常见病因。足细胞是一种高度分化的上皮细胞,与足突交错排列在肾小球基膜的外侧,以维持肾小球基膜的通透性。自噬作为一种高度保守的溶酶体降解途径,在细胞内循环再利用以维持细胞内稳态。而高糖状态会诱导足细胞自噬功能异常,使得肾小球滤过屏障结构改变,导致蛋白尿。未来,应进一步研究DKD中足细胞自噬的调控机制,以期为治疗DKD提供新思路。

miR-101靶向mTOR信号通路调控足细胞自噬在小鼠糖尿病肾病发病中的作用研究

目的:探讨miR-101靶向雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路调控足细胞自噬在小鼠糖尿病肾病发病中的作用。方法:将成年雄性C57BL/6小鼠分为对照组、模型组和雷帕霉素组,每组10只。模型组和雷帕霉素组小鼠连续腹腔注射链脲佐菌素(55 mg·kg^(-1))5 d,对照组腹腔注射等量生理盐水。腹腔注射链脲佐菌素后1周,雷帕霉素组小鼠腹腔注射雷帕霉素(2 mg·kg^(-1)),对照组和模型组小鼠腹腔注射等量生理盐水,隔天1次,连续12周后对小鼠肾脏组织行PAS染色,用透射电镜观察足细胞损伤及自噬情况,同时检测肾组织中miR-101、Nephrin、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、mTOR和AMPK mRNA的表达。结果:对照组小鼠肾脏和足细胞足突正常,模型组小鼠肾脏局部可见球囊融合;与对照组相比模型组小鼠肾脏系膜基质明显增多,基底膜明显增厚,足突明显增宽、融合,自噬体明显减少;与模型组相比,雷帕霉素组小鼠肾脏系膜基质明显减少,基底膜增厚和足突融合明显减轻,自噬体明显增加。与对照组相比,模型组和雷帕霉素组小鼠肾脏系膜基质面积增大、mTOR mRNA表达水平明显升高,Nephrin、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、miR-101和AMPK mRNA表达水平明显降低(P<0.05);与模型组相比,雷帕霉素组小鼠mTOR mRNA表达水平明显降低,Nephrin、LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、miR-101和AMPK mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。结论:miR-101通过靶向调控mTOR信号通路促进糖尿病肾病小鼠足细胞自噬,为糖尿病肾病的治疗提供了新方向。

足细胞自噬机制和靶向信号通路相关研究进展

足细胞作为一种高分化细胞,具有高度自噬活性。维持细胞内动态平衡降解,可减缓慢性肾脏疾病进展,保护受损的足细胞免受不可逆转的损伤。足细胞自噬水平高于其他类型的肾脏细胞,足细胞自噬的激活与雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和腺苷5’-单磷酸活化蛋白激酶(AMPK)、sirtuins、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)等相关通路有关,这些通路在足细胞功能的各种关键途径中具有至关重要作用。目前发现,足细胞自噬已成为改善足细胞损伤的有力治疗靶点。该文阐述了自噬在足细胞损伤中的功能作用,以及在基础实验和临床肾小球疾病调节方面的最新数据,以期为临床提供科学指导。

基于“阴阳自和”理论探讨足细胞自噬在糖尿病肾脏疾病中的作用

自噬是一种双向调节机制,指降解代谢产物,自我更新,生成能量的过程。在糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)发生发展过程中,足细胞构成肾小球滤过屏障,其自噬功能缺陷,可破坏滤过屏障,导致蛋白尿的产生以及肾小球硬化。从中医角度分析,这一过程蕴含了中医“阴阳自和”的理论内涵。DKD异常为本虚标实之证,以脾肾阴阳自和能力下降为本,气血阴阳失调日久,痰瘀毒胶结为标。适量的足细胞自噬能够降解废物——“阴”,生成能量——“阳”,保证机体微环境的阴阳自和,与阴阳消长、阴阳自和维持阴平阳秘的中医平衡过程不谋而同。故文章从“阴阳自和”角度探讨足细胞自噬在DKD过程中的作用,拟为防治DKD提供一些新思路。

糖尿病肾病中足细胞自噬的调控机制

糖尿病肾病(diabetic nephyopathy,DN)是糖尿病中最常见的慢性微血管并发症之一。随着糖尿病发病率的增高,DN患者数量呈逐年增长趋势,DN是全球范围内造成终末期肾脏疾病的首要病因,其病因及发病机制错综复杂,目前其确切发病机制尚未完全明确,因此明确糖尿病肾病的发病机制并以此作为预防及治疗糖尿病肾病的新靶点成为一个备受关注的问题。

基于SIRT1/FOXO3A/BNIP3通路探讨益气化瘀清热方对小鼠足细胞损伤的影响

目的:探讨益气化瘀清热方对阿霉素(ADR)诱导损伤小鼠足细胞沉默调节蛋白1(SIRT1)、FOXO3A、BNIP3相关蛋白表达的影响。方法:取分化成熟足细胞,采用ADR诱导造模,并采用siRNA和过表达质粒构建足细胞SIRT1沉默和SIRT1过表达模型,实验分为空白组、模型组(ADR组)、空白血清组(ADR+K组)、含药血清组(ADR+Z组)、SIRT1沉默组和SIRT1过表达组。采用RT-qPCR和Western Blot检测SIRT1、FOXO3A、BNIP3 mRNA和蛋白表达,流式细胞仪检测足细胞凋亡水平。结果:与空白组比较,ADR组与SIRT1沉默组SIRT1、FOXO3A、BNIP3 mRNA及蛋白表达均显著降低(P<0.05,P<0.01),SIRT1过表达组上述指标显著升高(P<0.05,P<0.01),ADR组、SIRT1沉默组和SIRT1过表达组足细胞凋亡率均显著升高(P<0.01);与ADR组比较,ADR+Z组SIRT1、FOXO3A、BNIP3 mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05,P<0.01),ADR+Z组足细胞凋亡率显著降低(P<0.01)。结论:益气化瘀清热方通过激活SIRT1/FOXO3A/BNIP3通路,增强足细胞自噬活性,减轻ADR诱导的足细胞损伤。