足细胞蛋白标志物在原发性足细胞病中的应用进展

原发性足细胞病常见于微小病变型肾病、局灶节段性肾小球硬化及膜性肾病。足细胞损伤是原发性足细胞病进程中的重要环节之一,而足细胞蛋白标志物在其中扮演重要角色。研究表明,足细胞蛋白标志物可作为原发性足细胞病的非侵入性诊断方法之一。本文综述足细胞蛋白标志物在原发性足细胞病中的应用研究进展,以期为原发性足细胞病的预防和诊治提供理论依据。

足细胞蛋白Nephrin、Podocin与肾小球疾病

肾小球疾病是指累及两侧肾小球的一类疾病,多以蛋白尿为主要临床表现,由于发病机理尚不明确,因此疾病早期缺乏准确有效的检测和诊断手段。近来研究发现足细胞蛋白Nephrin和Podocin在多种肾小球疾病发生发展和诊断预测中起重要作用。本文就近几年Nephrin、Podocin与肾小球疾病的相关研究进行综述。

益肾活络法治疗脾肾两虚血瘀型特发性膜性肾病临床疗效及对尿足细胞糖萼蛋白的影响

目的:观察益肾活络法治疗脾肾两虚血瘀型特发性膜性肾病患者的临床疗效及对尿足细胞糖萼蛋白(PCX)水平的影响,为中医药治疗特发性膜性肾病提供新的思路。方法:选择我院2020年03月—2022年02月收治的80例脾肾两虚血瘀型特发性膜性肾病患者作为研究对象,采用分层随机法分为对照组和观察组各40例,对照组予西医常规治疗,观察组在此基础上予益肾活络法治疗。比较两组临床疗效,24 h尿蛋白定量(24 h upro)、血清总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、尿PCX水平、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)以及不良反应率。结果:观察组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组24 h-upro、TP、Alb、尿PCX水平差异无统计学意义(P>0.05);治疗3个月时和治疗后,两组24 h-upro、TP、Alb、尿PCX水平均较治疗前改善,且观察组TP、Alb水平高于对照组,24 h-upro、尿PCX水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组Scr、BUN、UA水平差异无统计学意义(P>0.05);治疗3个月时和治疗后,两组Scr、BUN、UA均较治疗前改善,差异无统计学意义(P>0.05)。两组不良反应率相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:益肾活络法治疗脾肾两虚血瘀型特发性膜性肾病,可降低患者尿PCX水平,升高血浆白蛋白,其疗效优于单纯免疫抑制方案,安全性高,值得临床推广。

足细胞及其标志蛋白在糖尿病肾病诊断价值中的研究进展

糖尿病肾病(DKD)是我国慢性肾衰竭的主要原因之一,发病机制极其复杂,临床诊断常用估算肾小球滤过率(eGFR)、尿微量白蛋白、尿素氮、肌酐等指标,但这些指标的变化较肾损害相对滞后,且影响结果的因素较多,特异度和灵敏度并非理想,因此,探索早期诊断糖尿病肾病的相关生物标志物对其防治具有深远意义。近年来,足细胞及其标志蛋白已成为研究的热点,有望成为糖尿病肾病早期诊断的标志物。

中药保护足细胞治疗蛋白尿的临床研究进展

蛋白尿是肾病内科多种疾病的最常见的临床表现之一,同样也是肾脏疾病进展的独立危险因素,其形成与肾小球滤过屏障密切相关。足细胞作为肾小球滤过的最后屏障,其损伤已经成为目前临床上蛋白尿形成的重要原因之一,对此,西医治疗尚具有局限性,且临床副作用大,而中药以其疗效好,不良反应少等优势,已被广泛应用于肾病内科的临床治疗中。

miR-155在高糖诱导足细胞损伤的表达及其与足细胞损伤相关蛋白表达的相关性

目的探讨高糖(HG)诱导足细胞损伤中miR-155的表达变化及miR-155与足细胞损伤相关蛋白表达的关系。方法体外培养人肾小球足细胞(AB8/13),用30 mmol/L的D-葡萄糖溶液刺激AB8/1348 h作为HG组,同时以终浓度为5 mmol/L的D-葡萄糖溶液处理细胞48 h作为正常对照(NC)组。用CCK8法检测细胞增殖活性。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测nephrin、F-actin、synaptopodin、p-cadherin的mRNA和miR-155的表达。Western blot法检测nephrin、F-actin、synaptopodin、p-cadherin蛋白的表达。鬼笔环肽染色观察细胞骨架变化。细胞免疫荧光检测蛋白nephrin、synaptopodin。结果HG可抑制足细胞增殖,降低细胞存活率(P<0.01)。HG作用的Ab8/13中的miR-155表达水平升高,nephrin、F-actin、synaptopodin、p-cadherin的mRNA与蛋白表达水平降低(P<0.05)。HG会导致足细胞骨架紊乱。结论HG作用的人足细胞中miR-155表达升高,miR-155表达与HG诱导的足细胞损伤有关,可作为足细胞损伤诊断和治疗的靶点。

2型糖尿病肾病患者尿微量白蛋白排泄率与游离脂肪酸、尿足细胞标志蛋白、白细胞介素-2、白细胞介素-8的相关性分析

目的探究2型糖尿病肾病患者尿微量白蛋白排泄率(UAER)与游离脂肪酸(FFA)、尿足细胞标志蛋白(PCX)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-8(IL-8)水平的相关性,为临床早期评估2型糖尿病肾病提供参考。方法选取2020年7月至2021年12月五莲县中医医院收治的80例单纯2型糖尿病患者设为2型糖尿病组,80例2型糖尿病肾病患者设为2型糖尿病肾病组,另选取同期于五莲县中医医院体检的80名健康者设为正常组进行回顾性分析,检测并比较所有研究对象血清FFA、PCX、IL-2、IL-8水平及血糖(FPG)、肾功能[血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)]、血压指标水平,并按UAER对2型糖尿病肾病患者进行分组,UAER 30~300 mg/24 h为MA组(50例)及UAER>300 mg/24 h为CN组(30例),分析血清FFA、PCX、IL-2、IL-8水平与2型糖尿病肾病患者UAER的相关性。结果3组研究对象收缩压、舒张压比较,差异无统计学意义(P>0.05),2型糖尿病肾病组患者FPG、BUN、SCr、FFA、PCX、IL-2、IL-8水平高于2型糖尿病组、正常组,2型糖尿病组高于正常组(P<0.05);CN组患者FFA、PCX、IL-2、IL-8水平均高于MA组(P<0.05);Spearman相关性分析显示,FFA、PCX、IL-2、IL-8水平与2型糖尿病肾病患者UAER呈正相关性(P<0.05)。结论FFA、PCX、IL-2、IL-8与2型糖尿病肾病发展密切相关,且与2型糖尿病肾病患者UAER呈正相关,临床应加以重视。

尿足细胞特异性标记蛋白、血清胱抑素C与血清脂蛋白a检测在糖尿病肾病中的诊断价值

目的:分析尿足细胞特异性标记蛋白(PCX)、血清胱抑素C(Cys-c)与血清脂蛋白a[Lp(a)]检测在糖尿病肾病(DKD)中的诊断价值。方法:选取2020年9月—2022年9月北京市昌平区马池口社区卫生服务中心收治的188例DKD患者作为研究对象,根据尿白蛋白/尿肌酐(ACR)水平分为无蛋白尿组(n=52)、微量蛋白尿组(n=75)、临床蛋白尿组(n=61),选取同期收治的90例无肾病的糖尿病患者作为对照组。检测患者尿PCX、血清Cys-c、血清Lp(a)水平,采用Pearson相关系数分析尿PCX、血清Cys-c与血清Lp(a)和ACR的相关性。采用Logistic回归分析DKD的独立危险因素,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标单独或联合检测在DKD中的诊断价值。结果:对照组尿PCX、血清Cys-c、血清Lp(a)水平<无蛋白尿组<微量蛋白尿组<临床蛋白尿组,差异有统计学意义(P<0.05)。ACR与尿PCX、血清Cys-c、血清Lp(a)水平呈正相关(P<0.05)。尿PCX、血清Cys-c、血清Lp(a)水平是糖尿病患者并发DKD的独立影响因素(P<0.05)。尿PCX、血清Cys-c、血清Lp(a)对DKD均有较好的诊断价值(P<0.05),三者联合检测的曲线下面积为0.901(95%CI 0.863~0.939)。结论:尿PCX、血清Cys-c、血清Lp(a)与DKD严重程度呈正相关,是糖尿病患者并发DKD的独立影响因素,三项指标联合检测对诊断DKD具有较高价值。

2型糖尿病肾病患者尿足细胞标志蛋白和血管内皮生长因子水平与氧化应激的相关性

目的探讨2型糖尿病(T2DM)并发不同程度肾病患者尿足细胞标志蛋白(PCX)和血管内皮生长因子(VEGF)水平变化,及其与氧化应激的关系。方法 186例T2DM患者按照24h尿清蛋白排泄率(UAER)分为单纯T2DM组(SDM组,62例)、微量组(NA组,60例)、大量组(MA组,64例),另取24hUAER正常者作对照(NC组,60例)。分别检测PCX、VEGF、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)和丙二醛(MDA)水平。结果与其他3组比较,MA组VEGF、PCX及MDA水平最高(P<0.01),SOD和GSH-px水平最低(P<0.01,P<0.05)。VEGF、UAER、HbA1c是尿PCX的独立危险因素。结论糖尿病肾病患者尿PCX及血VEGF与氧化应激相关,氧化应激与足细胞的损伤密切相关。

尿足细胞及其标志蛋白podocalyxin测定对2型糖尿病肾病的诊断价值

目的探讨尿足细胞及其标志蛋白(podocalyxin,PCX)测定对2型糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的诊断价值。方法选取160例临床确诊为2型糖尿病的患者,依据尿清蛋白(Alb)/肌酐(Cr)比值(UACR)将患者分为正常清蛋白尿组(NA)、微量清蛋白尿组(MA)和大量清蛋白尿组(LA);选取同期体检健康者50人作为对照组。用流式细胞术检测尿中足细胞,ELISA法检测尿中PCX含量,两者之间相关性采用pearson相关分析。结果 NA组、MA组、LA组以及健康人对照组尿足细胞检测结果分别为(0.96±0.36)、(3.09±0.86)、(5.53±1.44)和(0.65±0.31)units/μL,尿PCX检测结果分别为(0.62±0.13)、(1.49±0.47)、(2.19±0.47)和(0.46±0.08)ng/μmol Cr,糖尿病患者尿足细胞及PCX显著高于健康人对照组,差异有统计学意义(P<0.05),且随着病程进展而升高。Pearson相关分析结果表明,尿足细胞和PCX呈正相关(r=0.86,P<0.01)。在NA患者中,足细胞及PCX阳性率分别为51.9%、73.1%,差异有统计学意义(P<0.05);两者联合检测阳性率为76.9%。结论糖尿病患者肾损伤时尿足细胞和PCX明显增加,两者联合检测对于2型糖尿病肾病早期诊断具有重要价值。

血清游离脂肪酸和尿足细胞标志蛋白检测在2型糖尿病肾病中的诊断价值

目的探讨血清游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)及尿足细胞标志蛋白(podocalyxin,PCX)在2型糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)中的诊断价值。方法选取120例2型糖尿病患者,依据尿清蛋白/尿肌酐比值(urinary albumin-creatinine ratio,UACR)将患者分为正常清蛋白尿组(NA)、微量清蛋白尿组(MA)和大量清蛋白尿(LA)3组;选取同期体检健康者40例作为对照组。检测各组血清FFA和尿PCX水平并进行相关性分析,采用ROC曲线评估其对DN的诊断价值。结果 NA组、MA组、LA组以及健康人对照组血清FFA检测结果分别为(0.61±0.14)、(0.81±0.13)、(0.95±0.18)和(0.49±0.11)mmol/L,尿PCX检测结果分别为(1.86±0.45)、(4.47±1.48)、(6.72±1.40)和(1.38±0.24)ng/m L,糖尿病患者血清FFA和尿PCX均高于健康人对照组,差异有统计学意义(P均<0.05),并随着疾病进展而升高。Pearson相关分析显示,血清FFA与尿PCX呈正相关(r=0.73,P<0.05)。血清FFA和尿PCX单独检测诊断DN的敏感性分别为74.1%和80.6%,联合检测的敏感性为89.5%(P<0.05)。结论 2型糖尿病患者肾损伤时血清FFA和PCX明显升高,两者对于DN诊断具有重要的临床价值。

芪葵方对糖尿病肾病患者血糖、血脂、肾功能以及尿足细胞相关蛋白的影响研究

目的：观察芪葵方对糖尿病肾病患者血糖、血脂、肾功能以及尿足细胞相关蛋白的影响。方法：2014年1月～2015年12月在南京中医药大学附属医院/江苏省中医院内分泌科就诊的128例糖尿病肾病患者按随机数字表分为观察组和对照组,对照组患者均接受常规治疗,观察组患者在接受常规治疗的同时口服芪葵方（1剂/天,分2次服用）,两组患者的疗程均为8周。治疗前及治疗8周时检测两组患者血糖指标、血脂指标、肾功能指标和尿足细胞相关蛋白PCX、Nephrin水平。结果：（1）观察组患者FBG、2h BG、Hb A1C水平均较对照组显著降低（P〈0.01）;（2）观察组患者TG、TC、LDL-C水平均较对照组显著降低（P〈0.01）,HDL-C水平显著高于对照组（P〈0.01）;（3）观察组患者Scr、Umalb、ACR均较对照组显著降低（P〈0.01）,GFR显著高于对照组（P〈0.01）;（4）观察组患者PCX/Ucr和Nephrin/Ucr较对照组显著降低（P〈0.01）;（5）观察组总有效率显著高于对照组（P〈0.01）。结论：芪葵方对糖尿病肾病患者具有良好的治疗作用,可降低血糖,调节血脂紊乱,改善肾功能,并能显著降低患者尿足细胞相关蛋白PCX和Nephrin水平。

瑞舒伐他汀联合羟苯磺酸钙治疗老年糖尿病肾病的效果及对尿亮氨酸氨基肽酶、足细胞标志蛋白水平的影响

目的探讨瑞舒伐他汀联合羟苯磺酸钙对老年糖尿病肾病的效果及对尿亮氨酸氨基肽酶(LAP)、足细胞标志蛋白(PCX)水平的影响。方法选取82例糖尿病肾病患者,根据随机数字法分为观察组和对照组,每组41例。对照组使用常规方案联合瑞舒伐他汀治疗,观察组在此基础上联合羟苯磺酸钙治疗。比较两组临床疗效、尿LAP、PCX、血糖、肾功能指标、尿蛋白指标及负面情绪生活质量的变化。结果治疗后,观察组临床总有效率显著高于对照组(P<0. 05)。观察组的尿LAP、PCX及糖化血红蛋白(HbA1c)、餐后2 h血糖(2 h BG)、空腹血糖(FPG)水平显著低于对照组(P<0. 05)。观察组的肾小球滤过率(GFR)水平显著高于对照组(P<0. 05),尿微量白蛋白(Umalb)、血肌酐(Scr)水平显著低于对照组(P<0. 05)。观察组的焦虑评分、抑郁评分显著低于对照组(P<0. 05),生活质量评分显著高于对照组(P<0. 05)。结论瑞舒伐他汀联合羟苯磺酸钙能有效降低老年糖尿病肾病患者尿LAP、PCX水平,临床疗效良好。

黄芪联合缬沙坦治疗糖尿病肾病及对尿亮氨酸氨基肽酶、足细胞标志蛋白水平的影响

目的 探讨黄芪联合缬沙坦治疗糖尿病肾病（DN）的临床疗效及对尿亮氨酸氨基肽酶（LAP）和足细胞标志蛋白（PCX）水平的影响。方法 选取2014年5月-2015年5月该院收治的74例DN患者为研究对象,随机分为对照组37例和黄芪治疗组37例,对照组接受糖尿病的常规治疗,并口服缬沙坦,黄芪治疗组在对照组的基础上应用中药黄芪注射液,比较两组的临床治疗效果及尿LAP、PCX水平。结果 黄芪治疗组的总有效率为86.5%,高于对照组的总有效率64.9%（χ~2=4.702,P0.05）;黄芪治疗组患者接受黄芪注射液与缬沙坦联合治疗后LAP和PCX水平较治疗前均下降（t=7.694和9.312,P〈0.01）。接受不同治疗后两组患者LAP和PCX水平比较,差异有统计学意义（t=7.803和5.693,P〈0.01）。结论 黄芪联合缬沙坦治疗糖尿病肾病效果较好,可有效降低患者尿LAP和PCX水平,明显改善患者临床症状,值得临床推广应用。

原发性高血压患者尿液足细胞标志蛋白PCX水平测定及分析

目的探讨足细胞标志蛋白Podocalyxin(PCX)检测对原发性高血压患者早期肾损伤的诊断价值。方法选择92例原发性高血压患者(高血压组)和30例体检健康者(对照组),均收集清晨首次清洁中段尿10 mL,2 500 r/min离心10 min后取上清,一部分用免疫比浊法测定微量白蛋白(mALB),另一部分采用ELISA法检测PCX。结果高血压组和对照组尿液PCX分别为(4.816±1.769)、(2.032±0.652)ng/mL,mALB分别为(46.6±10.3)、(11.2±5.9)mg/L,组间比较P均<0.01;高血压组和对照组尿液PCX阳性率分别为45.6%(42/92)、0,mALB阳性率分别为28.3%(26/92)、0,组间比较P分别<0.01、0.05;高血压组PCX阳性率显著高于mALB阳性率(P<0.05);高血压组尿液中PCX水平与mALB水平呈显著正相关,P<0.05(r=0.749)。结论尿液中PCX检测对原发性高血压患者肾损伤的早期诊断有重要临床意义。

益气活血法对糖尿病肾病患者尿液足细胞标记蛋白的影响

目的观察益气活血法对气虚血瘀型糖尿病肾病早中期患者尿液足细胞标记蛋白的影响。方法选取60例中医辨证属于气虚血瘀型的糖尿病肾病早中期患者,随机分为治疗组和对照组,各30例,对照组采用常规糖尿病健康教育、控制血压血糖以及对症支持治疗,治疗组在对照组治疗的基础上加用当归补血汤,治疗3个月后观察2组患者临床症状以及尿液足细胞标记蛋白的变化。结果在改善临床症状和体征,降低尿液足细胞标记蛋白等方面,治疗组作用比对照组更为明显,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论益气活血法能有效改善早中期糖尿病肾病气虚血瘀型患者的临床症状,保护肾功能,延缓病情进展。

原发性高血压患者尿足细胞标志蛋白podocalyxin的临床研究

目的探讨原发性高血压（EH）患者不同年龄、不同高血压分级尿蛋白定量、微量清蛋白（mALB）、足细胞标志蛋白podocalyxin（PCX）的分布情况，指导高血压肾损害的早期诊断。方法选取该院门诊、住院EH患者182例为高血压组，另在体检中心的健康体检者30例为对照组。收集两组清晨首次清洁中段尿测定mALB、PCX和24h尿做尿蛋白定量。结果与对照组比较，高血压组mALB、PCX显著升高（P〈0．01），尿蛋白定量差异无统计学意义（P〉0．05）。与小于60岁组mALB、PCX比较，其余两组显著升高（P〈0．05）；小于60岁组尿蛋白定量与其余两组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。与不同年龄组尿蛋白定量阳性率比较，mALB、PCX阳性率显著增加（P〈0．01）；与不同年龄组mALB阳性率比较，PCX阳性率显著增加（P〈0．05）；70～80岁组尿蛋白定量、mALB、PCX阳性率与小于60岁组比较，显著升高（P〈0．01）。与对照组尿蛋白定量、mALB、PCx比较，EH各分级组显著升高（P〈0．05）；EH1级组尿蛋白定量与EH3级组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；与EH1级组mALB、PCX比较，EH3级组均显著升高（P〈0．01）。结论mALB、PCX可以作为高血压患者肾损害的早期指标；年龄、血压级别可以作为高血压痛肾损害的独立危险因素；PCX较尿蛋白反映肾小球损伤更敏感。

狼疮肾炎患者尿足细胞标志蛋白水平检测及临床应用

目的:了解免疫透射比浊法测定尿足细胞标志蛋白(podocalyxin,PCX)水平对于狼疮肾炎(lupus nephritis,LN)肾损害的诊断及疗效观察的应用。方法:对45例LN患者治疗前后和52例健康对照组采用免疫透射比浊法测定尿PCX水平和24h尿蛋白,并对检测结果进行统计学分析。结果:LN患者尿PCX水平为(50.2±10.2)μg/24h,明显高于健康对照组的(3.95±1.17)μg/24h(P<0.01),与24h尿蛋白定量存在相关性;LN患者治疗前尿PCX水平为(50.2±10.2)μg/24h,与治疗后尿PCX水平(17.9±4.5)μg/24h比较有显著差异(P<0.01)。结论:采用免疫透射比浊法测定尿PCX水平有助于LN肾损害的诊断和疗效观察。

未分化和分化足细胞生物学性状及相关结构蛋白表达的变化

体外33℃许可条件下培养由H-2Kb-tsA58转基因小鼠所建立的未分化足细胞系,并在37℃非许可条件下诱导其分化。观察足细胞分化后形态学改变;MTT法测定细胞的生长曲线;红色荧光染料PKH-26标记足细胞,追踪其在子代细胞中的分布,检测细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞周期的改变;Western印迹检测足细胞相关蛋白CD2AP、α-actinin和足细胞分化相关蛋白nephrin的表达;免疫荧光结合激光共聚焦方法检测CD2AP、nephrin、α-actinin、F-肌动蛋白和微管蛋白的表达变化。结果显示:与未分化足细胞相比,分化足细胞形态发生改变,生长速度减慢,增殖能力下降;细胞周期表现为G0/G1期细胞比例的增多和S期及G2/M期的细胞比例下降;CD2AP、nephrin和α-actinin的表达明显增高;CD2AP、nephrin、α-actinin、F-肌动蛋白和微管蛋白在表达分布上均发生明显的改变。以上结果表明,足细胞分化后生物学性状明显发生改变,细胞骨架重新分布;CD2AP、nephrin、α-actinin、F-肌动蛋白和微管蛋白均在足细胞的分化过程中发挥重要作用。

尿液足细胞标记蛋白在2型糖尿病肾病早期诊断中的价值

目的探讨尿液足细胞标记蛋白(PCX)在2型糖尿病肾病(DN)早期诊断中的价值。方法采用免疫比浊法测定62例2型糖尿病患者尿液PCX水平,并与64例体检正常者比较。结果糖尿病患者尿微量白蛋白(mAlb)正常者PCX水平无明显增高;随病情加重,尿PCX水平随尿mAlb水平升高而不断升高,但血肌酐(SCr)水平>135μmol/L时,PCX水平降低。相关分析示尿mAlb和PCX无相关性。在DN早期患者空腹血糖水平越高,尿PCX水平越高。结论尿液PCX在DN肾损伤监测中有重要意义;血糖水平与PCX水平存在相关性。