角膜基质透镜联合跨上皮快速角膜胶原交联术治疗重度圆锥角膜

目的:评估角膜基质透镜联合跨上皮快速角膜胶原交联术(SC-A-TE-CXL)治疗重度圆锥角膜的临床疗效。方法:前瞻性自身前后对照研究。收集2019-03/2022-07于南京医科大学附属眼科医院确诊为重度圆锥角膜且最薄点角膜厚度(含上皮)<400μm的患者10例14眼,其中男8例12眼,女2例2眼,予以SC-A-TE-CXL进行治疗。观察并记录术前和术后1、3、6、12 mo的角膜曲率、裸眼视力(UCVA)、最佳矫正视力(BCVA)、角膜最薄点厚度(TCT)、角膜中心厚度(CCT)、非接触式眼压、内皮细胞密度(ECD)和前后表面最薄点高度以及术后1 mo角膜交联深度。结果:患者行SC-A-TE-CXL术后1、3、6、12 mo UCVA和BCVA较术前提高,但总体无差异(F=0.793,P=0.535;F=0.783,P=0.542)。术后各时间点K1、K2、Km和Kmax较术前下降,但总体无差异(F=0.627,P=0.574;F=1.264,P=0.296;F=0.727,P=0.520;F=1.115,P=0.359)。术后各时间点前后表面最薄点高度较术前均下降,但总体无差异(F=1.046,P=0.359;F=1.164,P=0.337)。术后各时间点非接触式眼压较术前提高,但总体无差异(F=0.814,P=0.522)。术后各时间点CCT、TCT和术前相比总体无差异(F=0.931,P=0.453;F=0.782,P=0.542)。术后12 mo ECD与术前相比无差异(t=1.266,P=0.228)。术后1 mo,前节光学相干层析成像术(AS-OCT)显示角膜浅层基质密度增高,前后基质间存在“分界线”,平均深度为124.07±25.13μm。结论:SC-A-TE-CXL能延缓重度圆锥角膜患者的病情进展,安全性高,其远期疗效有待进一步观察,可以作为一种治疗重度圆锥角膜的手术方式。

跨上皮快速角膜胶原交联术治疗进展期圆锥角膜患者的效果

目的探讨跨上皮快速角膜胶原交联术(CXL)治疗进展期圆锥角膜患者的效果。方法选取2017年10月至2021年3月于哈尔滨爱尔眼科医院诊治的60例(65眼)进展期圆锥角膜患者,均行跨上皮快速CXL,比较患者治疗前后裸眼视力(UCVA)、最佳矫正视力(BCVA)、屈光状态、角膜透明及眼压。结果术后3、6个月,患者UCVA均高于术前及术后1、12个月,且术后12个月高于术后1个月,差异有统计学意义(P<0.05)。术后3、6个月,患者BCVA高于术前及术后1、12个月,且术后6个月高于术后3个月,术后12个月高于术后1个月,差异有统计学意义(P<0.05)。术前及术后不同时间点的球镜度比较差异无统计学意义;术后1个月柱镜度低于术前,术后12个月柱镜度高于术后1、3、6个月,差异有统计学意义(P<0.05)。术前及术后1、3、6、12个月,患者眼压比较差异无统计学意义。随访期间,所有患者未出现角膜感染,晶状体保持透明。结论跨上皮快速CXL治疗进展期圆锥角膜效果显著,可有效改善患者视力水平,具有较高应用价值。

去上皮与跨上皮快速角膜交联术在圆锥角膜中的疗效对比

目的对比去上皮与跨上皮快速角膜交联术(accelerated corneal collagen crosslinking,ACXL)在圆锥角膜中的临床疗效.方法选取圆锥角膜患者45例(45只眼),按治疗方案不同分为A组和B组,A组(21例21只眼)行去上皮ACXL,B组(24例24只眼)行跨上皮ACXL.比较术前及术后3个月2组的视力[裸眼视力(uncorrected visual acuity,UCVA)和最佳矫正视力(best corrected visual acuity,BCVA)]、角膜最薄点厚度、角膜最大曲率、角膜后表面高度及角膜内皮(角膜内皮细胞密度和六边形角膜内皮细胞比率).结果术后3个月,2组的UCVA、BC-VA、角膜后表面高度、角膜内皮细胞密度、六边形角膜内皮细胞比率与术前比较差异均无统计学意义(P>0.05);术前及术后3个月,2组间UCVA、BCVA、角膜后表面高度、角膜内皮细胞密度和六边形角膜内皮细胞比率比较差异均无统计学意义(P>0.05).术前,2组间角膜最薄点厚度和角膜最大曲率比较差异均无统计学意义(P>0.05);术后3个月,2组的角膜最薄点厚度和角膜最大曲率均较术前小(P<0.001或P<0.05),且B组的角膜最薄点厚度和角膜最大曲率均较A组大(P<0.05).结论去上皮与跨上皮ACXL治疗圆锥角膜均有效,在改善角膜厚度和角膜曲率方面跨上皮ACXL略逊于去上皮ACXL.

快速跨上皮核黄素-紫外光角膜胶原交联治疗圆锥角膜的临床疗效和安全性评价

背景研究证实经典角膜胶原交联法（CXL）可有效控制圆锥角膜的进展及角膜扩张，但由于其需要去上皮，因此引起较多不良反应和并发症。目前跨上皮核黄素-紫外线CXL已开始在临床上使用，但其有效性和安全性评价的研究较少。目的评价快速跨上皮核黄素-紫外线CXL治疗圆锥角膜的安全性及有效性。方法采用前瞻性自身对照系列病例观察研究设计，纳入2014年3—10月在北京同仁医院眼科就诊的圆锥角膜患者28例46眼，采用快速跨上皮核黄素-紫外线CXL治疗，术后随访1年。分别于术前、术后1周及术后1个月、3个月、6个月和12个月测定术眼的视力、屈光度、中央角膜厚度（CCT）、角膜内皮细胞计数、角膜地形图参数、眼前节光学相干断层扫描仪检查结果及角膜生物力学参数，对术眼手术前后的检查指标进行比较，评价快速跨上皮核黄素-紫外线CXL治疗的有效性。对随访期间术眼的刺激症状和不良反应进行观察，评价快速跨上皮核黄素-紫外线CXL治疗的安全性。结果所有手术顺利，未发现术中并发症及术后感染。术眼术后1d出现轻度刺激症状，均于术后3d缓解或消失。术眼术后1个月及以后等效球镜度（SE）较术前降低，但手术前后总体比较差异无统计学意义（F=0．722，P=0．614）；术眼术后12个月术眼柱镜度（CD）明显低于术前，差异有统计学意义（t=3．242，P=0．004）。术眼手术后不同时间点角膜内皮细胞密度、角膜内皮细胞面积的变异系数（CV）及六边形角膜内皮细胞比率值均接近于术前值，总体比较差异均无统计学意义（F=0．246、0．465、0．981，均P〉0．05）。术眼术后3个月和6个月的角膜厚度值分别为（467．86±52．92）和（468．51±52．96）μm，高于术前的（453．91±45．78）μm，但差异均无统计学意义（t=0．236、0．469，均P〉0．05），术眼术后12个月角膜厚度值为（488．67±51．44）μm，明显高于术前值，差异有统计学意义（t=3．681，P=0．002）。术眼术后3、6和12个月角膜曲率最大值（Ks）、角膜曲率最小值（Kf）及角膜平均曲率值（Avek）逐渐下降，但手术前后不同时间点间总体比较差异均无统计学意义（F=0．592、0．897、1．029，均P〉0．05）。术后1个月角膜基质层可见高密度光反射条带者39眼，占84．78％，深度平均为（214．38±31．92）μm。手术前后不同时间点角膜滞后量（CH）及角膜阻力因素（CRF）值的总体比较差异均无统计学意义（F=1．268、0．894，均P〉0．05）。结论快速跨上皮核黄素-紫外线CXL后圆锥角膜的角膜厚度增加，曲率逐渐扁平，角膜应力增强，因此可以有效地阻止圆锥角膜的进展，此外圆锥角膜患者用快速跨上皮核黄素-紫外线CXL治疗后不影响角膜上皮和内皮细胞的形态和功能，治疗后刺激症状轻，安全性较好。

囊性纤维化跨膜转运调节体氯离子通道——跨上皮离子转运的多功能引擎(英文)

囊性纤维化跨膜转运调节体(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)是ATP结合转运体超家族(ATP- binding cassette transporter superfamily)的一名特殊成员,因为它是一个具有相当复杂调控机制的氯离子通道。CFTR由五个结构域(domain)组成:两个跨膜结构域(membrane-spanning domains,MSDs),两个核苷酸结合域(nucleotide-binding domains,NBDs)和一个特殊的调控域(regulatory domain,RD)。MSDs构成一个低电导(6～12 pS)的阴离子选择性孔道(pore),其形状如同不对称的沙漏,胞外小胞内大,狭窄部分为离子筛。两个NBDs组成头尾相对的二聚体,在二聚体之间的接触面上有两个能和ATP结合的位点(位点1和位点2)。CFTR的门控机制是:ATP分子与位点1和2相互作用促使NBD二聚体的结合与解离,从而引起MSDs的构象发生变化进而使通道孔打开和关闭。RD具有多样化的结构,它含有多个磷酸化共有位点(consensus phosphorylation sites)。RD的磷酸化促进NBDs与ATP的结合,从而使CFTR得以激活。CFTR通过支架蛋白与其它膜受体以及蛋白激酶、磷酸酶形成大分子信号复合体。在复杂的细胞信号系统参与下,CFTR的功能活动在时间和空间上得到精确的调控。此外,CFTR的活动与细胞代谢有紧密联系:CFTR与代谢酶形成大分子复合体,当细胞能量需求增加时,CFTR活动会受到抑制而使细胞能量得以保存。CFTR广泛分布于机体上皮组织,它通过促进水盐转运而控制上皮细胞分泌物的量与组成。值得注意的足,在呼吸道,CFTR还对机体的防御机制起重要作用。CFTR功能失常严重影响跨上皮离子转运,进而引起或加重某些疾病。

跨上皮快速角膜胶原交联术治疗进展期圆锥角膜

目的:研究跨上皮快速角膜胶原交联术(CXL)治疗进展期圆锥角膜的临床效果和安全性。方法:前瞻性自身前后对照研究。收集自2016-08/2019-11在我院进行跨上皮快速CXL的进展期圆锥角膜患者37例47眼,分析患者术前,术后1、3、6、12mo的裸眼视力(UCVA)和最佳矫正视力(BCVA)、屈光状态、角膜透明度、角膜前表面最大K值(Kmax)、角膜最薄点厚度、角膜内皮细胞计数、眼压。结果:术后1、3、6、12mo患者UCVA较术前提高,但总体比较无差异(F=1.372,P=0.261)。患者术后1、3、6、12mo的BCVA均较术前提高,总体比较有差异(F=3.308,P=0.019),进一步比较发现术后3、6、12mo的BCVA与术前比较有差异(P=0.04、0.01、0.007)。患者术后1、3、6、12mo的球镜度数、柱镜度数、Kmax、角膜最薄点厚度与术前总体比较无差异(F=0.293、1.378、2.448、1.970,P=0.881、0.258、0.061、0.116)。术后1mo患者角膜内皮细胞计数与术前比较无差异(t=1.156,P=0.25)。患者术后各时间点眼压与术前比较无差异(F=1.221,P=0.321)。术后7眼出现角膜Haze(1级~2级),术后3~6mo有5眼Haze消退,角膜恢复透明,1眼遗留角膜云翳,1眼角膜中央基质线状混浊,但均未对视力造成影响。结论:跨上皮快速CXL可以显著提高圆锥角膜患者BCVA,稳定患者屈光状态、角膜形态和厚度,阻止或延缓圆锥角膜进展,使患者获得更好的视功能,同时手术时间短,术后并发症少,具有较好的安全性。

圆锥角膜快速跨上皮交联手术前后Corvis ST参数的重复性及差异性

目的:评估圆锥角膜快速跨上皮交联手术前以及术后1mo Corvis ST参数的重复性及差异性。方法:研究纳入了30例30眼圆锥角膜患者进行分析。圆锥角膜患者术前和术后1mo分别进行三次Corvis ST重复测量。采用组内相关系数(ICC)、克伦巴赫alpha系数(Cronbach'α)、可重复性系数(RC)和变异系数(CV)评估Corvis ST参数的可重复性。采用配对t检验或Wilcoxon秩和检验评估术前与术后Corvis ST参数的差异。结果:术前39个Corvis ST参数中,26个(66.67%)参数重复性较好,6个(15.38%)参数重复性中等,7个(17.95%)参数的重复性较差。交联术后1mo,34个(87.18%)参数的重复性较好,3个(7.69%)参数重复性中等,2个(5.13%)参数的重复性较差。与术前相比,交联术后1mo圆锥角膜患者的眼压、生物力学校正眼压、第一次压平时间、曲率半径、第一次压平时的形变幅度、最大压陷偏离长度、角膜硬度参数值增加;而陡峭曲率、平坦曲率、平均曲率、第二次压平时间、2 mm最大形变幅度比值和综合半径值降低(均P<0.05)。结论:交联手术前和术后1mo Corvis ST参数均具有较好的可重复性,术后1mo圆锥角膜患者的角膜硬度较术前增加。

跨上皮快速角膜交联术治疗圆锥角膜的1年期疗效观察

目的评估跨上皮快速角膜胶原交联术(ATE-CXL)治疗圆锥角膜的1年期有效性和安全性。方法选取22例(29只眼)术前处于进展状态的圆锥角膜行跨上皮快速角膜胶原交联术,术后随访平均时长为13.2个月;对比分析术前、术后SimK1、SimK2、Kmax、角膜内皮细胞计数和形态、裸眼视力(UCVA)、最佳镜片矫正视力(BSCVA)、角膜及晶状体情况、主觉验光及角膜最薄处厚度等指标的变化。结果所有患者均顺利完成手术,未见术中并发症,术后1~2d术眼有刺激症状。术后1个月、3个月和6个月的散光较术前减少,所有随访节点的球镜度、等效球镜度以及术后1年的散光度数较术前的减少均无统计学意义。UCVA从术前的(1.07±0.43)LogMAR提高到术后6个月的(0.86±0.40)LogMAR,以及术后1年的(0.75±0.41)LogMAR,而BSCVA从术前的(0.38±0.43)LogMAR提高到术后1年的(0.22±0.17)LogMAR。SimK1、SimK2、Kmax、角膜散光、角膜内皮细胞计数和形态及角膜最薄处厚度是稳定的。结论跨上皮快速角膜胶原交联术治疗圆锥角膜是有效、安全的。

跨上皮电位差对蛙直肠上皮顶膜氯通道的作用

氯离子跨紧密上皮转运主要采取细胞通路，其转运调控的关键部位是上皮细胞顶膜氯通道。应用上皮电压钳技术、高钾除极化技术和Ｕｓｓｉｎｇ上皮组织灌流系统结合测定氯离子通量，观察跨上皮电位差对氯离子跨蛙直肠上皮转运的影响。实验结果表明跨上皮电位差对氯离子跨蛙直肠上皮吸收是必不可少的。跨上皮电位差作为转运驱动力外，还能激活蛙直肠上皮细胞顶膜的氯通道。

跨上皮角膜交联术治疗角膜屈光术后继发性圆锥角膜的疗效

目的:评价高能量快速跨上皮角膜交联术治疗角膜屈光手术后继发性圆锥角膜的有效性和安全性。方法:前瞻性临床研究。连续募集厦门大学附属厦门眼科中心2019年12月至2021年4月收治的角膜屈光手术后继发进展性圆锥角膜患者36例(62眼),予行高能量快速跨上皮角膜交联术。术后1 d、1周、2周及3、6、12、24个月进行随访。分别在术前,术后3、6、12、24个月时进行视力、验光、眼压、裂隙灯显微镜照相、角膜地形图、活体角膜共聚焦显微镜、眼前节光学相干断层扫描及角膜内皮细胞计数等检查。分析术前及术后各时间点的裸眼视力、最佳矫正视力、球镜度、柱镜度、K1、K2、最大角膜曲率(前表面)、角膜最薄处厚度、角膜内皮细胞密度、角膜神经纤维密度和眼压等的差异。数据分析采用单因素方差分析,进一步两两比较采用Bonferroni检验。结果:最终纳入患者31例(54眼),年龄(28.1±1.2)岁。在角膜交联术前以及术后3、6、12、24个月,术眼的裸眼视力、最佳矫正视力、球镜度、柱镜度、K1、K2、最大角膜曲率、角膜最薄处厚度、眼压等的差异均无统计学意义(均P>0.05)。术后1 d时11眼(11/54,20%)可见角膜上皮缺损,均在术后1周内修复;术后2周时8眼(8/54,15%)可见浅层基质交联分界线,深度约200μm。活体角膜共聚焦显微镜下见术后1 d时角膜上皮下神经纤维密度较术前下降(P<0.001),浅层基质细胞水肿、交错呈网格状;术后3个月时神经纤维密度仍低于术前(P=0.001),浅层基质纤维可见网格状的强反射交联结构;术后6、12、24个月时神经纤维恢复至术前水平(P>0.05),但术后12、24个时浅层基质高反射网状结构较前明显减少。各随访时间点角膜内皮细胞密度无明显变化(F=0.39,P=0.642)。结论:角膜屈光术后继发性圆锥角膜患者在接受高能量快速跨上皮角膜交联术后2年内屈光状态及角膜地形图参数均保持稳定,且无明显并发症。

跨上皮角膜胶原交联术治疗进展期圆锥角膜

目的 观察跨上皮紫外线核黄素角膜胶原交联治疗进展期圆锥角膜的临床效果.方法 前瞻性病例研究.对36例（54眼）的进展期圆锥角膜患者行跨上皮角膜胶原交联手术治疗.表面麻醉下采用意大利SOOFT跨上皮角膜胶原交联仪将0.25％的核黄素导入角膜10 min（电流1.0 mA）,370 nm的紫外线照射9 min（能量10 mW/cm2）.平均随诊（14.1±2.3）个月.术后1d观察角膜上皮愈合情况,术后1、3、6、12个月复诊.检查指标包括UCVA、BCVA、眼压、角膜曲率、角膜厚度、角膜地形图、角膜内皮细胞计数、角膜生物力学、角膜活体激光共聚焦显微镜检查.对手术前后的各项指标行配对t检验.结果 术后1d裂隙灯显微镜下发现角膜上皮点状混浊、水肿,次日好转.未出现角膜溃疡、角膜溶解、haze、剧烈眼痛等并发症.术后12个月,患者UCVA从4.27±0.23提高到4.41±0.20（t=3.962,P＜0.01）,BCVA从4.69±0.23提高到4.82±0.14（t=3.507,P＜0.01）;Kmax下降（1.25±0.68）D（t=9.351,P＜0.01）;散光值下降（0.30±0.21）D（t=7.227,P＜0.01）.角膜最大压陷深度从（1.21±0.11）mm下降为（1.16±0.12）mm（t=4.131,P＜0.01）.眼压、角膜内皮细胞密度、角膜厚度治疗前后差异无统计学意义.结论 跨上皮角膜胶原交联法可以有效控制进展期圆锥角膜的发展且未出现类似传统去上皮法导致的多种并发症.跨上皮角膜胶原交联方法是安全、有效的,有望取代去上皮法成为进展期圆锥角膜首选的治疗方式.

促渗剂在去上皮角膜胶原交联术和跨上皮角膜胶原交联术中应用的研究进展

角膜胶原交联(CXL)是利用光敏剂的光化学反应增加角膜胶原纤维间和内部化学键对酶解的抵抗力,增强角膜的生物力学强度,减缓圆锥角膜和角膜扩张等病变进展的一种技术。目前,CXL主要使用紫外线(或)黄素单核苷酸交联。经典的角膜胶原交联手术(S-CXL)是通过去除角膜上皮以辅助光敏剂药物渗透至角膜基质,该方法对患者的不适感强且术后并发症多。在S-CXL基础上,向光敏剂药物中添加促渗剂,即为跨上皮角膜胶原交联术(TE-CXL)。TE-CXL则具有舒适度佳、安全性高且应用范围广等优点。本文中笔者就TE-CXL促渗剂种类、特点及作用机制的研究进展进行综述,以期为促渗剂的选择和TE-CXL递药系统设计提供新思路。

25羟维生素D_3对正常气道上皮细胞通透性的影响及可能机制

目的探讨25羟维生素D3对人正常气道上皮细胞通透性及ZO-1表达的影响。方法选取正常人支气管上皮细胞系16HBE为研究对象,MTT法分别检测不同浓度25羟维生素D3对细胞活力的影响;实验分组为:对照组,不同浓度25羟维生素D3处理组。各处理因素作用细胞总时间为24h。跨上皮电阻测量仪测量标准化单细胞层跨上皮电阻(TER),比较各组TER差别。进一步用实时定量PCR观测各处理组紧密连接蛋白ZO-1mRNA表达的变化。结果与对照组相比,25羟维生素D3处理组TER(P<0.05)显著增高,但各浓度的25羟维生素D3对ZO-1表达无明显影响(P>0.05)。结论 25羟维生素D3可以使气道上皮通透性减低,但这种效应并非通过上调气道上皮ZO-1表达实现的。

PAF对肠上皮细胞紧密连接的影响及ITF的保护作用

目的:探讨血小板活化因子(PAF)是否会引起肠黏膜屏障的破坏以及这种破坏机制是否与紧密连接相关,并观察肠三叶因子(ITF)的保护作用.方法:培养人结肠腺癌细胞株Caco-2,分别设正常对照组:不加刺激物及干预因素;实验组:加入PAF,终浓度分别为50 ng/L、100 ng/L和200 ng/L;ITF预防组:先加入ITF0.3 g/L,30 min后加入PAF 100 ng/L;ITF治疗组:先加入PAF 100 ng/L,30 min后加入ITF0.3 g/L,24 h后进行实验.MTT比色法检测细胞活力;测定跨上皮电阻TER和荧光黄的透过量反映肠上皮细胞单层通透性;RT-PCR法检测紧密连接蛋白ZO-1和Occludin mRNA表达的变化;免疫荧光染色观察紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的形态学.结果:PAF未影响到细胞的增殖和细胞活力.各浓度PAF作用24 h后,细胞单层通透性增加,跨上皮电阻(TER)下降,荧光黄透过增加.ITF治疗组及预防组TER下降值较模型组明显降低(122.2±14.7,100.3±10.9 vs 210.3±26.4,P<0.05),荧光黄透过量减少(10226.1±556.2,9711.2±364.9 vs 11601.2±693.5,P<0.05),预防组作用更明显.PAF作用后,ZO-1和Occludin mRNA表达均有下降,以100 ng/L组改变最为明显,ITF预防组较之表达增加(1.28±0.06 vs 1.07±0.05,1.13±0.07 vs 0.81±0.06,P<0.05),ITF治疗组改变不明显.免疫荧光染色发现ZO-1和Occludin主要分布在细胞内近胞膜处.PAF作用后,ZO-1及Occludin形态学改变,预防性给予ITF后,可明显减轻这种改变.结论:PAF可引起肠黏膜屏障破坏,其机制可能和紧密连接蛋白的破坏相关;ITF可以通过改变紧密连接蛋白的表达而部分恢复肠黏膜正常通透性,起到保护作用.

SIRT1在TNF-α介导的肠上皮屏障破坏中的作用及机制研究

目的观察沉默信息调节因子1(SIRT1)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)介导的肠上皮Caco-2细胞屏障功能破坏的影响并探讨其分子机制。方法将Caco-2细胞分3组处理:对照组、TNF-α100ng/mL 24h处理组(TNF-α组)及TNF-α100ng/mL24h处理+白芦藜醇(Resveratrol)40μm预处理12h组(TNF-α+Res组)。分别检测跨上皮电阻(TER)、SIRT1及紧密连接蛋白:ZO-1、occludin的蛋白表达。结果对照组、TNF-α组、TNF-α+Res组的SIRT1蛋白相对表达量分别为0.81±0.02、0.43±0.04、0.60±0.03。3组的TER分别为(154.00±5.00)、(97.00±4.00)、(128.00±6.00)Ohm/cm2。TNF-α组SIRT1的蛋白表达较对照组下降47.00%,TER降低37.00%,经白芦藜醇预处理使TER较TNF-α组升高32.00%。对照组、TNF-α组、TNF-α+Res组的ZO-1和occludin蛋白相对表达量分别为0.62±0.06和0.57±0.03、0.23±0.05和0.33±0.04、0.41±0.03和0.50±0.02。TNF-α处理后紧密连接蛋白ZO-1、occludin表达显著降低(P<0.05),而白芦藜醇预处理可缓解该现象,蛋白表达较TNF-α组分别升高78.00%、51.00%(P<0.05)。结论 TNF-α处理条件下SIRT1水平降低,而升高SIRT1水平可增加肠道紧密连接蛋白ZO-1、occludin蛋白水平的表达,从而减轻TNF-α对Caco-2细胞构成的上皮屏障功能的损伤。

Peyer’s结淋巴细胞对上皮屏障功能的影响

目的 :体外建立稳定的上皮细胞与Peyer’s结淋巴细胞 (PPL)共培养体系 ,进一步研究该体系中的上皮细胞生理学特性。方法 :采用短路电流检测单层上皮细胞跨上皮电阻 (TER)的变化、半定量RT PCR方法检测上皮细胞间的紧密连接相关蛋白ZO 1和ZO 2mRNA的表达。结果 :①Caco 2细胞单层与PPL共培养的第 2天 ,无论是混合共培养还是上下共培养组的TER均与对照有统计学差异 (P <0 0 5 ) ;②同时上下共培养或混合共培养组在第 8天TER仍保持较高水平 ,与对照有统计学差异 (P <0 0 5 ) ;③在上下共培养和混合共培养组中 ,半定量RT PCR检测ZO 1mRNA的表达也均明显高于对照。结论 :Peyer’s结淋巴细胞 (PPL)可以较好地维持上皮屏障功能。

Peyer’s结淋巴细胞对结肠上皮细胞屏障功能的影响

为探讨粘膜上皮细胞与淋巴细胞相互作用的机制,利用Caco-2上皮细胞(系)与新鲜分离的小鼠Peyer’s结淋巴细胞共培养模型,采用短路电流检测单层上皮细胞跨上皮电阻(TER)的变化,半定量RT-PCR方法检测上皮细胞间的紧密连接相关蛋白ZO-1和ZO-2mRNA的表达以及ELISA方法测定相关细胞因子mIL-6和hIL-8的变化。结果表明,Peyer’s结淋巴细胞可以较好地维持上皮的屏障功能,但当痢疾杆菌F2a-12脂多糖(LPS)作用后,却使跨上皮电阻明显降低。细胞因子mIL-6和hIL-8在不同共培养情况下的差异表达,揭示淋巴细胞与上皮细胞间的“对话”包括细胞间的直接接触作用。

C-8神经酰胺对肺泡Ⅱ型上皮细胞通透性及紧密连接蛋白的影响

目的研究外源性C-8神经酰胺对肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)单层通透性的影响,探讨其作用机制。方法将体外分离培养的AECⅡ通过差速贴壁法纯化,在Transwell上构建单层,待细胞融合后给予不同浓度的C-8神经酰胺(0、25、50、100μmol/L)继续培养24 h,应用伏欧计测定跨上皮电阻值(TEER)及辣根过氧化物酶(HRP)标记法检测吸光度(OD)值;分别提取细胞总蛋白及总RNA,采用Western blot和实时定量聚合酶链式反应方法检测不同浓度的C-8神经酰胺对AECⅡ紧密连接蛋白ZO-1和Occludin蛋白水平和mRNA水平表达的影响。结果不同浓度的C-8神经酰胺刺激融合的AECⅡ单层24 h后,各组间TEER值、OD值差异均有统计学意义(F=38.780、19.780,P<0.001)。C-8神经酰胺作用后,ZO-1、Occludin蛋白(F=71.150,P<0.01;F=7.703,P=0.002)及mRNA(F=4.887,P=0.014;F=3.637,P=0.048)表达量明显降低。结论 C-8神经酰胺可能通过下调紧密连接蛋白的表达增加肺泡Ⅱ型上皮细胞通透性。

快速角膜胶原交联治疗进展期圆锥角膜的临床研究

目的:探讨紫外光照射仪快速跨上皮胶原交联治疗进展期圆锥角膜的临床效果。方法:收集2014-12/2017-02在我院确诊为进展期圆锥角膜患者52例102眼的临床资料(角膜最大曲率值Kmax<60.0D,角膜厚度≥400μm),进行回顾性分析和随访,所有患者手术前后常规行裸眼和最佳矫正视力、眼压、裂隙灯显微镜、角膜地形图、光学相干断层扫描(optical coherence tomography,OCT)、角膜内皮镜、眼前节彩照等检查。结果:原发性圆锥角膜患者52例102眼中,男36例70眼,女16例32眼,平均年龄19.5±4.6岁。所有患者术前最佳矫正视力(LogM AR视力表)平均为0.84±0.89,术后最佳矫正视力平均为0.69±0.72,两者比较差异无统计学意义(P=0.398)。所有患者术前裸眼视力(LogM AR视力表)平均为1.02±0.62,术后裸眼视力平均为0.85±0.59,两者比较差异无统计学意义(P=0.154)。所有患者术前眼压平均为12.95±4.40mmH g,术后眼压平均为11.92±3.66mmH g,两者比较差异无统计学意义(P=0.272)。角膜内皮镜检查结果提示,手术前后内皮细胞密度和形态无改变(P=0.552)。角膜地形图检查结果提示,所有患者术后Kmax平均值为50.83±3.48D,较术前Kmax(平均值为52.05±3.63D)降低,且两者比较差异有统计学意义(P=0.017),所有患者术后角膜平均曲率值(AveK)为47.74±2.51D,较术前AveK平均值(48.73±4.33D)降低,且两者比较差异有统计学意义(P=0.041)。术后所有患者采用前节OCT随访角膜胶原交联深度,平均交联深度位于192±23.6μm。角膜厚度值术后与术前比较,差异无统计学意义(P=0.816),无1例患者术后出现严重的手术相关并发症。结论:快速角膜胶原交联治疗进展期圆锥角膜患者术后角膜K值有下降的趋势,且随访期间情况稳定。同时对角膜内皮和眼内结构没有损伤,无严重手术相关并发症,该治疗方法是一种性价比较高的治疗方式。