稳定表达跨膜丝氨酸蛋白酶2基因的MDCK细胞系的建立

为建立稳定表达跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)基因的MDCK细胞系,本研究采用RT-PCR扩增TMPRSS2基因,克隆于逆转录病毒载体pLXSN中,构建重组质粒pLXSN-TMPRSS2。采用脂质体转染的方式将重组质粒pLXSN-TMPRSS2、pGP和pE-ampho共转染293T细胞,获得逆转录病毒样颗粒。将逆转录病毒样颗粒感染MDCK细胞,经G418加压筛选和有限稀释法克隆及RT-PCR和间接免疫荧光(IFA)等试验的鉴定,建立了稳定表达TMPRSS2基因的MDCK细胞系。此外,红细胞凝集试验和IFA结果还显示,流感病毒可以在无外源胰酶存在的条件下在该细胞系中增殖,从而为流感细胞培养型病毒株的大规模生产奠定了基础。

跨膜丝氨酸蛋白酶2与肺腺癌和肺鳞癌预后的关系

目的探讨跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)在肺腺癌和肺鳞状细胞癌中的表达及其与预后的关系。方法使用Oncomine、GEPIA和UALCAN数据库分析TMPRSS2在肺腺癌和肺鳞状细胞癌中的表达水平和启动子的甲基化水平,并使用Kaplan-Meier plotter数据库分析TMPRSS2表达水平对该类患者预后的影响。基于TIMER数据库分析TMPRSS2表达与免疫细胞浸润的关系及免疫浸润对预后的影响。结果在肺腺癌和肺鳞状细胞癌中,相比正常肺组织TMPRSS2的表达量均显著降低(P<0.05),其启动子甲基化水平均出现显著增高(P<0.05)。肺腺癌中TMPRSS2的高表达有较好的预后(HR=0.49,95%CI 0.39~0.63;P=3.9×10-9),而在肺鳞状细胞癌中无相关性(HR=1.15,95%CI 0.89~1.48;P=0.28)。肺腺癌和肺鳞状细胞癌中TMPRSS2表达与多种免疫细胞浸润有关(P<0.05),B细胞和CD4+T细胞浸润水平与肺腺癌患者的预后相关(P<0.05)。结论TMPRSS2在肺腺癌和肺鳞状细胞癌组织中表达均显著下降,TMPRSS2的表达水平可能通过免疫细胞浸润影响肺腺癌患者的预后。

跨膜丝氨酸蛋白酶2-成红细胞特异性转化基因相关基因、成红细胞特异性转化基因变异体1及成红细胞特异性转化基因变异体4在前列腺癌中的表达及临床意义

目的分析跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)-成红细胞特异性转化基因相关基因(ERG)、TMPRSS2-成红细胞特异性转化基因变异体1(ETV1)、TMPRSS2-成红细胞特异性转化基因变异体4(ETV4)在前列腺癌中的表达及临床意义。方法2018年4月至2020年9月我院收治的82例前列腺癌患者,采用免疫组化法检测癌组织及癌旁正常组织中TMPRSS2-ERG、TMPRSS2-ETV1、TMPRSS2-ETV4表达。分析上述因子表达与前列腺癌临床病理特征的关系及诊断前列腺癌的价值。结果前列腺癌组织中TMPRSS2-ERG、TMPRSS2-ETV1、TMPRSS2-ETV4阳性表达率均高于癌旁正常组织(P<0.05)。临床分期C+D、Gleason评分≥5分者TMPRSS2-ERG、TMPRSS2-ETV1、TMPRSS2-ETV4阳性表达率高于临床分期A+B、Gleason评分<5分(P<0.05)。RTMPRSS2-ERG、TMPRSS2-ETV1、TMPRSS2-ETV4联合检测曲线下面积(AUC)、敏感度、特异度分别为0.814、0.925、0.865,均高于各项指标单独检测(P<0.05)。结论TMPRSS2-ERG、TMPRSS2-ETV1、TMPRSS2-ETV4在前列腺癌患者中呈过度表达,通过联合检测上述因子对前列腺癌的诊断与鉴别诊断有良好的应用价值。

雄激素受体通过let-7c-5p/跨膜丝氨酸蛋白酶2通路促进非小细胞肺癌侵袭的机制

目的探讨雄激素受体(AR)在非小细胞肺癌(NSCLC)中促进肺癌细胞A549及H1533细胞侵袭的具体机制。方法通过在A549及H1533细胞中过表达或敲低AR,采用Transwell方法观察AR对A549及H1533细胞侵袭的影响;筛查NSCLC中与侵袭密切相关的基因,寻找可以被AR调控的下游基因,采用定量聚合酶链反应(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)来验证该靶基因与AR的调控关系,采用Transwell方法来验证其对细胞侵袭的影响;通过生信分析寻找靶基因跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)的调控微小RNA(miRNA),采用qPCR和Western blot方法来验证该miRNA与TMPRSS2的调控关系,采用Transwell方法来验证其对细胞侵袭的影响;最后通过裸鼠在体成瘤实验观察上述基因对肿瘤细胞侵袭的影响,并采用t检验比较各组间差异。结果过表达AR增加了肺癌细胞(H1355-oeAR和A549-oeAR)的侵袭(0.75±0.08比1.84±0.25、0.54±0.04比1.39±0.30,t=36.360、5.362,P<0.05),敲低AR降低了肺癌细胞的侵袭(A549-shAR)(0.83±0.08比0.22±0.03、0.61±0.07比1.90±0.29,t=45.178,P<0.01)。采用生信分析预测及qPCR验证发现TMPRSS2表达受AR调控(0.55±0.04比1.67±0.37、0.46±0.04比1.67±0.29,t=23.152、43.228,P<0.01)。H1355-oeAR和A549-oeAR组TMPRSS2的表达(0.29±0.04比1.28±0.18、0.32±0.03比1.16±0.15,t=7.152、4.298,P<0.05)显著高于对照组。敲低TMPRSS2部分降低H1355-oeAR和A549-oeAR组细胞侵袭(0.78±0.05比0.25±0.01、0.82±0.06比0.36±0.01,t=6.358、14.298,P<0.05),敲低TMPRSS2还可部分降低H1355-oeAR和A549-oeAR中AR水平(2.25±0.44比1.10±0.14、2.32±0.53比1.15±0.23,t=8.258、12.538,P<0.05);通过生信分析及验证实验发现let-7c-5p可以抑制TMPRSS2表达(1.27±0.11比0.48±0.08、1.35±0.33比0.56±0.08,t=47.110,P<0.01),过表达let-7c-5p可以部分逆转过表达AR所致的H1355和A549细胞的侵袭(1.77±0.34比0.94±0.10、2.35±0.33比1.10±0.11,t=33.116、21.108,P<0.01)。也可以降低过表达AR所致的TMPRSS2蛋白表达(1.09±0.13比0.55±0.08、1.36±0.21比0.76±0.10,t=3.760、10.105,P<0.05);ChIP结果表明,let-7c-5p可以与H1355和A549细胞中TMPRSS23’启动子区域的AREs结合(0.23±0.02比1.32±0.20、0.34±0.03比1.10±0.10,t=7.110、5.175,P<0.05),双荧光素酶检测结果显示,let-7c-5p可以抑制野生型TMPRSS23’端非编码区(3’UTR)结构的荧光素酶表达,而不能抑制突变型TMPRSS23’UTR结构的荧光素酶表达(1.25±0.14比0.44±0.03、0.58±0.03比0.66±0.08,t=12.510,P<0.05;t=1.175,P>0.05);通过IVIS对裸鼠肿瘤进行评估,发现oeAR+luc组比Ctrl+luc组发生更多的肿瘤细胞侵袭(0.33±0.04比0.78±0.08,t=7.566,P<0.05),而oeAR+shTMPRSS2+luc组较oeAR+luc组侵袭降低(0.19±0.04比0.78±0.18,t=8.56,P<0.05)。结论AR可以通过改变let-7c-5p/TMPRSS2信号通路来促进肺癌细胞A549及H1533侵袭。

慢病毒介导跨膜丝氨酸蛋白酶2∶ERG融合基因短发卡RNA靶向抑制前列腺癌细胞生长

目的 观察靶向抑制跨膜丝氨酸蛋白酶2（TMPRSS2）：ERG融合基因后对前列腺癌细胞生长的影响.方法 设计特异性作用于TMPRSS2∶ ERG融合基因的短发卡RNA （shRNA）,并进行慢病毒包装后感染前列腺癌细胞,进一步通过噻唑蓝（MTT）实验,以及流式细胞术研究ERG基因沉默后前列腺癌细胞增殖的变化.结果 成功构建并筛选到高效特异性的shRNA1序列,在mRNA水平的靶向抑制效率为79％,蛋白水平的靶向抑制率为93％;靶向抑制TMPRSS2∶ ERG融合基因表达96 h后,前列腺细胞生长速度降低了33.34％;细胞周期分析发现ERG基因沉默后的VCaP细胞S期和G2/M期细胞比例分别由10.0％降至6.6％,29.1％下降到17.25％,而G0/G1期细胞比例由51.7％升高到71.2％.结论 靶向抑制TMPRSS2∶ ERG融合基因的表达可以显著抑制前列腺癌细胞的生长.

前列腺癌中跨膜丝氨酸蛋白酶2-E26转录因子融合基因和相关蛋白的表达及其意义

目的研究前列腺癌组织中跨膜丝氨酸蛋白酶2-E26转录因子(TMPRSS2-ETS)融合基因及ETS相关基因(ERG)、ETS变异体1(ETV1)、同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(PTEN)、雄激素受体(AR)蛋白表达情况。方法收集大同市第三人民医院2016年12月至2017年10月前列腺癌患者石蜡标本50例,以同期前列腺增生患者标本30例作为对照。采用荧光原位杂交检测TMPRSS2-ERG、TMPRSS2-ETV1以及TMPRSS2-ETV4基因融合状况;免疫组织化学法检测ERG、ETV1、PTEN、AR蛋白的表达。结果前列腺癌组织中TMPRSS2-ETS融合基因阳性率为70%(35/50),前列腺增生组织中未检测到TMPRSS2-ETS融合基因。TMPRSS2-ETS融合基因的表达在不同年龄、血清前列腺特异性抗原(PSA)值及是否远处转移前列腺癌患者组间的差异均无统计学意义(均P>0.05),而Gleason评分>7分的前列腺癌患者TMPRSS2-ETS融合基因的表达高于≤7分的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。ERG及ETV1在前列腺癌组织中的表达高于前列腺增生组织,差异均有统计学意义(均P<0.05);PTEN在前列腺癌组织中的表达低于前列腺增生组织,差异有统计学意义(P<0.05);AR在前列腺癌组织及前列腺增生组织中的表达差异无统计学意义(P>0.05)。TMPRSS2-ETS融合基因与ERG在前列腺癌中的表达呈正相关(r=0.302,P<0.05);TMPRSS2-ETS融合基因与ETV1、PTEN、AR在前列腺癌中的表达均无相关性(均P>0.05)。结论TMPRSS2-ETS融合基因和ERG、ETV1蛋白在前列腺癌中表达上调,可能参与了肿瘤的发生、发展,检测TMPRSS2-ETS融合基因和ERG蛋白有助于前列腺癌的诊断。

跨膜丝氨酸蛋白酶2在病毒感染中的作用及其抑制剂的研究进展

跨膜丝氨酸蛋白酶2(transmembrane serine proteinase 2,TMPRSS2)是细胞膜表面丝氨酸蛋白酶家族的一员,它具有介导冠状病毒棘突蛋白水解的作用,为冠状病毒感染宿主必需的宿主蛋白。现就近年来TMPRSS2在分子生物学功能方面的研究;TMPRSS2在呼吸系统病毒感染,尤其是在冠状病毒感染中的作用,以及以TMPRSS2为靶点的药物研究进展作一概述,旨在对冠状病毒特别是新冠病毒的预防和治疗,提供新的靶点和方向。

以跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)为受体挖掘治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)潜在单体化合物

目的探讨以跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)为受体的单体化合物治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的作用机制。方法借助BindingDB数据库检索作用于TMPRSS2受体的单体化合物。通过UniProt、GeneCards等数据库查询单体化合物作用靶点对应的基因名,进而运用Cytoscape 3.2.1构建化合物-靶点(基因)网络,通过WebGestalt数据库进行GO功能注释和Pathway通路分析,预测其作用机制。运用SWISS-MODEL进行TMPRSS2蛋白质三级结构预测,利用Auto Dock软件进行化合物与TMPRSS2受体的分子对接。结果通过BindingDB数据库发现3个作用于TMPRSS2的单体化合物:(2S)-1-[((2R)-2-(苄基磺酰基氨基)-5-(二氨基亚甲基氨基)戊酰基]-N-[(4-氨基甲酰基苯基)甲基]吡咯烷-2-羧酰胺(CID-46899577,分子式C26H36N8O4S)、4-[[[((5R)-5-(苄磺酰基氨基)-8-(二氨基甲基亚氨基)氨基-4-氧代辛烷-3-基]氨基]甲基]苯羧酰亚胺(CID-56677007,分子式C24H35N7O3S)、4-[[[((4S,6R)-6-(苄基磺酰基氨基)-9-(二氨基亚甲基氨基)-5-氧肟酮-4-基]氨基]甲基]苯羧酰亚胺(CID-56663319,分子式C25H37N7O3S);单体化合物-靶点网络中靶点58个,GO功能富集分析得到GO条目380个(P<0.05),其中生物过程(BP)条目310个,细胞组成(CC)条目14个,分子功能(MF)条目56个。KEGG通路富集筛选得到26条信号通路,涉及干扰素-γ信号传导途径、转化生长因子-β(TGF-β)信号通路、白介素信号通路等。分子对接结果显示,TMPRSS2与C26H36N8O4S、C24H35N7O3S及甲磺酸卡莫司他都能自发结合,且2种化合物与甲磺酸卡莫司他结合能相近。结论单体化合物C26H36N8O4S、C24H35N7O3S与TMPRSS2能自发结合,作用于F2、PLG、PLAU、PLAT、HSP90AA1、XIAP、AKT1、AKT2、AKT3等靶点调节多条信号通路,有可能对COVID-19有治疗作用。

TMPRSS2-ERG融合基因在前列腺癌中的研究进展

在前列腺癌中,跨膜丝氨酸蛋白酶2(transmembrane serine protease 2,TMPRSS2)-E26转化特异性相关基因[E26 transformation-specific(ETS)-related gene,ERG]融合基因由雄激素调控基因TMPRSS2(染色体21q22.2)与ERG(染色体21q22.3)融合形成。TMPRSS2-ERG可导致ERG过表达,过表达的ERG在多种因素协同作用下可引起相关靶基因表达并激活下游信号通路,从而参与前列腺癌的发生、发展过程。TMPRSS2-ERG有望成为前列腺癌的有效治疗靶点。本文对TMPRSS2-ERG在前列腺癌中的作用机制及其在前列腺癌诊疗中的研究进展进行综述。

新型冠状病毒感染相关蛋白ACE2和TMPRSS2在人结膜组织中的表达及意义

目的探讨新型冠状病毒肺炎(COVID-19)病毒感染相关蛋白血管紧张素转换酶2(ACE2)和跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)在人眼部结膜组织中的表达及其临床意义。方法收集2019年6月至2020年6月于西安市人民医院眼科手术切除的人体结膜组织标本50例,包括正常结膜组织10例、结膜乳头状瘤组织15例、结膜色素痣组织15例和结膜囊肿10例,并收集10例因外伤摘除眼球的角膜组织作为对照。采用免疫组织化学法对不同眼表组织标本中ACE2和TMPRSS2阳性表达进行定位,并对其表达强度进行比较。结果ACE2和TMPRSS2均表达于正常结膜上皮细胞、结膜乳头状瘤上皮细胞、结膜色素痣上皮细胞和结膜囊肿囊壁细胞中,ACE2主要表达于结膜上皮的表层细胞和中间层细胞,在基底层细胞和杯状细胞不表达,TMPRSS2表达于全层细胞,二者在结膜组织中的阳性表达率均为100%;ACE2和TMPRSS2在正常结膜组织、结膜乳头状瘤、结膜色素痣和结膜囊肿中的表达强度比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);ACE2和TMPRSS2在角膜组织中均为弱阳性表达,二者在不同结膜组织中中度阳性和强阳性表达例数增多。ACE2和TMPRSS2在正常结膜组织、结膜乳头状瘤、结膜色素痣和结膜囊肿中不同强度等级表达例数与角膜组织比较,差异均有统计学意义(ACE2:Z=-3.473、-4.183、-3.970、-3.873,均P<0.01;TMPRSS2:Z=-4.119、-4.472、-4.443、-4.147,均P<0.001)。结论COVID-19病毒感染相关受体蛋白ACE2和TMPRSS2表达于眼表结膜组织中,为COVID-19经眼表的感染途径提供了组织学证据。

跨膜丝氨酸蛋白酶TMPRSS2在SARS-Cov-2感染人体中的作用

跨膜丝氨酸蛋白酶2(Transmembrane serine protease 2,TMPRSS2)是一种雄激素依赖性表达的丝氨酸蛋白酶,以往报道其在肿瘤转移侵袭和病毒感染中具有重要的病理学功能。严重急性呼吸综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome corona virus 2,SARS-CoV-2)进入宿主细胞是其传播和致病的前提,TMPRSS2可通过激活冠状病毒刺突糖蛋白从而介导病毒侵入宿主细胞,因此被认为是干预冠状病毒感染的潜在靶点。现有报告的TMPRSS2的有效抑制剂都是针对丝氨酸蛋白酶家族的广谱性药物,因此新型TMPRSS2特异性抑制分子亟需被挖掘和开发。文章综述了TMPRSS2的生物学特性和病理学功能研究概况,重点对TMPRSS2在人致病性冠状病毒感染中的普遍性功能以及TMPRSS2抑制剂的最新研究动态作一概述,以此强调靶向TMPRSS2有希望成为一种预防和限制新型冠状病毒早期感染和传播的新策略。

新型冠状病毒相关TMPRSS2蛋白结构特征和抗原表位分析

采用生物信息学方法分析预测新型冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)跨膜蛋白酶丝氨酸2(transmembrane protease serine 2,TMPRSS2)的理化特性、结构特征和抗原表位,为抗SARS-CoV-2药物研发提供参考。利用ProtParam、ProtScale分析预测TMPRSS2蛋白酶的理化特性;利用COILS Server、SignalP、TMPred、TargetP Server、NetPhos Server、NetNGlyc Server服务器对TMPRSS2蛋白酶结构进行功能结构的分析预测;利用SOPMA、Pfam、SWISS MODEL分析预测TMPRSS2蛋白酶高级结构;利用IEBD分析预测TMPRSS2蛋白酶B细胞、T细胞表位。TMPRSS2蛋白酶氨基酸组成数为492个,其中丝氨酸占比最高;亲水性较高,含10个跨膜螺旋区;具有4个磷酸化位点,3个糖基化修饰点;二级结构中无规则卷曲占据主导地位,三级结构能与已知的5ce.1.1.A(SMTL ID)模型同源建模;存在13个潜在的B细胞表位,12个得分较高的T细胞表位。

TMPRSS2重组蛋白阻断SARS-CoV-2假病毒的感染

为了探究Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶(type Ⅱ transmembrane serine protease,TMPRSS2)重组蛋白阻断严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)侵染宿主的能力,在体外构建假病毒感染细胞的体系,使用SARS-CoV-2 S(spike glycoprotein)蛋白携带水疱性口炎病毒(ΔG-VSV/荧光素酶)感染细胞,利用293F细胞体外纯化酶活及自身剪切位点突变的TMPRSS2重组蛋白,发现纯化的剪切位点R255Q和酶活位点S441A双突变的TMPRSS2重组蛋白,能够有效降低S蛋白与宿主细胞表面TMPRSS2的结合,进而阻断SARS-CoV-2假病毒对Calu3肺癌细胞系的感染。实验结果表明,使用突变的TMPRSS2重组蛋白竞争性结合病毒的刺突蛋白S,同抑制TMPRSS2蛋白酶的活性一样,都能阻断S蛋白的切割活化,抑制病毒与宿主细胞的膜融合,最终达到阻止病毒入侵的目的,这为阻断SARS-CoV-2感染提供了新的潜在靶点和思路。

前列腺癌中TMPRSS2-ETS基因融合及机制研究进展

超过50%的前列腺癌中存在跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)和E26(ETS)转录因子间的基因融合,其中TMPRSS2-ERG最为常见。TMPRSS2-ERG基因融合造成的ERG过表达参与了前列腺的癌变。雄激素受体结合和遗传毒性胁迫共同诱导了染色体的靠近和TMPRSS2-ETS的基因融合。TMPRSS2-ERG基因融合可作为前列腺癌诊断的一种生物标志物,并可通过病人尿液检测来实现。文章对TMPRSS2-ETS基因融合的特征、融合及致癌及临床应用进行了综述。

新型冠状病毒相关眼部疾病的研究进展

2019年新型冠状病毒肺炎(COVID-19)自爆发以来已在短时间内呈现出全球大流行状态,新型冠状病毒(SARS-CoV-2)的多种变异株具有高度传染性和致病性。SARS-CoV-2可能通过血管紧张素转化酶2(ACE2)和跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)的介导感染组织细胞从而引发不同疾病。呼吸道、心血管、胃肠道系统的临床疾病较为常见;也有大部分患者以眼部症状为主诉就诊。相较于严重的全身系统疾病,眼部相关症状很容易被忽视。文章通过对SARS-CoV-2相关多种眼部疾病的发病机制和相关病例进行综述,旨在增强临床医师对SARS-CoV-2相关眼病的重视,避免延误病情,造成视力的不可逆损失,并为眼部疾病的预防和治疗提供新思路。

TMPRSS2:ERG融合基因与前列腺原位癌和外周转移癌的相关性研究

目的分析跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)基因和ETS转录因子家族成员相关基因(ERG)融合基因与前列腺原位癌和外周转移癌的相关性。方法采用荧光原位杂交技术对24例前列腺癌(PCa)患者组织标本进行TMPRSS2:ERG融合基因检测,评价TMPRSS2:ERG与前列腺原位癌和外周转移癌的相关性。结果 6例PCa原发癌患者中,4例检出TMPRSS2:ERG融合基因;18例转移性PCa患者中,14例检出该融合基因。外周淋巴结组织标本TMPRSS2:ERG融合基因阳性率为100%(8/8)。14例融合基因阳性转移性PCa患者原发病灶和转移病灶具有一致的融合基因情况。结论 TMPRSS2:ERG融合基因具有较高的PCa诊断特异性和敏感性;应对该融合基因阳性患者尽早采取综合、有效的治疗措施,从而延长患者生存期。

α1-抗胰蛋白酶——一种可抵抗SARS-CoV-2细胞侵袭的多功能蛋白的研究进展

α1-抗胰蛋白酶(α1AT)是一种由肝脏合成并分泌至外周血循环系统的多功能糖蛋白,其主要功能是中和肺部组织蛋白酶从而保障肺部不受自体蛋白酶的攻击而引发病变;此外在保持免疫平衡、控制炎症反应、抵御抗原侵袭等方面α1AT也发挥重要作用。近年来的研究发现α1AT具有良好的抗病毒功能,在抵抗包括HIV、SARS等在内的高致病病毒时,α1AT作为机体自身的天然防御分子发挥了很好的屏障作用。最新的研究显示,α1AT通过抑制受体细胞表面跨膜丝氨酸蛋白酶2的活性来降低SARS-CoV-2病毒颗粒与宿主细胞的结合作用,从而抑制SARS-CoV-2对细胞的侵袭。因此,α1AT作为极具潜力的天然蛋白质药物被用于应对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的临床研究和治疗当中。该文从介绍α1AT天然生理学功能入手,展开介绍其抗病毒功能,着重归纳其在抵抗SARS-CoV-2细胞侵袭方面的机理研究进展。

ACE2、TMPRSS2表达与小鼠COVID-19易感年龄及潜在靶器官关系的探讨

目的通过检测血管紧张素转换酶2(ACE2)、跨膜丝氨酸蛋白酶2(TMPRSS2)在小鼠不同年龄阶段(新生期、幼龄期、成年期和老龄期)及不同组织(肺、小肠和心脏)中基因和蛋白的表达水平,探讨小鼠新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的易感年龄与潜在靶器官。方法借助生物信息学分析网站(Uniprot)分析ACE2、TMPRSS2在不同物种间保守性;RT-qPCR检测小鼠不同年龄组和不同组织中ACE2、TMPRSS2 mRNA表达水平;Western blot检测小鼠不同年龄组与不同组织中ACE2、TMPRSS2蛋白表达水平。结果①人、小鼠间ACE2同源性达82.1%、TMPRSS2同源性达78.4%;②与新生组比较,幼龄组、成年组和老龄组小鼠肺和小肠组织中ACE2、TMPRSS2 mRNA表达水平均升高(P<0.05);与新生组比较,幼龄组和成年组小鼠心脏组织中ACE2、TMPRSS2 mRNA表达水平升高(P<0.05),而老龄组的表达水平下降(P<0.05);③同龄组小鼠肺、小肠和心脏组织中ACE2、TMPRSS2 mRNA表达水平差异有统计学意义(P<0.05),且在肺组织中表达水平最高;④ACE2与TMPRSS2蛋白表达水平变化与mRNA具有一致性。结论随着年龄增长,小鼠肺和小肠组织中ACE2、TMPRSS2表达也随之增加,这可能意味着高龄是小鼠乃至人感染新型冠状肺炎病毒(SARS-CoV-2)的独立危险因素之一;此外,同一年龄组小鼠肺组织中ACE2、TMPRSS2的高表达提示了肺部可能是SARS-CoV-2入侵机体的主要靶器官。

抗新型冠状病毒药物研究进展

新型冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染产生的严重急性呼吸系统综合征,可对人体产生严重损害甚至威胁生命,因此研发出安全、有效的抗病毒药物刻不容缓。SARS-CoV-2蛋白结构的解析及其感染机制的揭示,为抗病毒药物的研发提供了重要理论基础。本文综述了国内外科研团体对SARS-CoV-2的结构、感染通路和抗病毒药物的研发进展,重点讲述了多个抗病毒分子的研究概况,并对抗SARS-CoV-2药物的研发提出了一些展望。

新型冠状病毒进入细胞抑制剂的研究进展

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)是导致新型冠状病毒肺炎(COVID-19)大流行的病原体。当前对SARS-CoV-2的生命周期尚不完全清楚,至今只有瑞德西韦一种抗病毒药物获得美国FDA批准用于COVID-19的临床治疗。虽然已有多种新冠疫苗上市,但不断出现的病毒突变株影响了疫苗的有效性,导致疫苗的持久性及安全性需进一步评估。因此,药物治疗及预防仍是应对新冠疫情的有效方式。通过综合现有文献对SARS-CoV-2进入细胞的分子机制进行简要总结,确定这一病毒主要通过两种途径进入细胞:病毒与细胞膜发生膜融合后进入细胞或与内体发生膜融合后进入细胞。此外,通过对已报道的SARS-CoV-2进入细胞抑制剂进行总结,并根据抑制剂起效的靶点对抑制剂进行分类,期望为抗SARS-CoV-2药物的后续研究及临床应用提供参考依据。