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植物含跨膜域RING E3泛素连接酶研究进展 被引量:1
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作者 孙林静 张融雪 +4 位作者 苏京平 王胜军 佟卉 刘燕清 孙玥 《林业科技情报》 2020年第4期6-9,共4页
E3泛素连接酶(ubiquitin ligase enzyme)能识别底物蛋白并将其泛素化,导致底物蛋白通过26S蛋白酶体进行降解,是调节蛋白水平的重要因子。植物E3泛素连接酶在调控激素响应、参与形态建成、抗病防御反应和非生物胁迫响应方面起着重要作用... E3泛素连接酶(ubiquitin ligase enzyme)能识别底物蛋白并将其泛素化,导致底物蛋白通过26S蛋白酶体进行降解,是调节蛋白水平的重要因子。植物E3泛素连接酶在调控激素响应、参与形态建成、抗病防御反应和非生物胁迫响应方面起着重要作用。RING(Really Interesting New Gene 1)家族是含环指结构(RING finger domain)的E3泛素连接酶家族,一般定位于细胞核。含有跨膜结构域(transmembrane domain,TMD)定位于膜的RING E3泛素连接酶(TMD-RING)是该家族中较为特殊的亚家族。通过对植物中含有跨膜域RING E3泛素连接酶的研究进展进行总结,以期为此类基因研究提供借鉴和帮助。 展开更多
关键词 泛素 E3泛素连接酶 环指结构 跨膜域
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嗜麦芽黄单胞菌CG样受体跨膜域克隆与分析
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作者 梁淑芳 陈曼玲 翟朝阳 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期1250-1253,共4页
根据已知生物LH/CG受体同源性较大的跨膜域序列设计引物,以嗜麦芽黄单胞菌基因组DNA为模板进行PCR扩增,将约600bp目的产物克隆到pUCm T载体上,经酶切及PCR扩增筛选鉴定得到重组质粒pUCm Rec.以DIG标记的PCR扩增片段作为探针进行DNA斑点... 根据已知生物LH/CG受体同源性较大的跨膜域序列设计引物,以嗜麦芽黄单胞菌基因组DNA为模板进行PCR扩增,将约600bp目的产物克隆到pUCm T载体上,经酶切及PCR扩增筛选鉴定得到重组质粒pUCm Rec.以DIG标记的PCR扩增片段作为探针进行DNA斑点杂交,确证目的PCR扩增片段与该菌染色体DNA有同源性.克隆到的593bpCG样受体跨膜域序列在GenBank中的注册号为AY355346.再以地高辛标记的593bp跨膜域序列为探针,从构建的该菌基因组文库中,筛选到可能与CG样受体属于同一跨膜受体家族的编码组氨酸激酶/效应调节杂合蛋白部分序列的685bp核酸片段(其在GenBank中的注册号为AY359445). 展开更多
关键词 嗜麦芽黄单胞菌 CG样受体 跨膜域 基因组文库
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编码人肝脂解激活受体跨膜域和配体结合域的基因cDNA片段的克隆及表达
3
作者 刘皓 刘秉文 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1534-1534,共1页
关键词 基因编码 人肝脂解激活受体 跨膜域 配体结合 基因CDNA片段 基因克隆 基因表达
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一种只有一个跨膜域的离子通道蛋白
4
作者 陆芳民 陈宜张 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期340-342,共3页
IsK蛋白只含有一个跨膜域,但具有电压依赖的慢K^+通道活性。突变分析表明,IsK蛋白本身就构成了K^+通道,提示存在一类新的电压依赖性通道蛋白。
关键词 跨膜域 离子通道蛋白 生物
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七跨膜域受体和心脏功能
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作者 徐平 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2002年第2期108-109,共2页
准确的理解心脏如何与许多不同的细胞外信号分子识别与反应,将有助于我们发现治疗心脏疾病的新靶点.本文集中论述了七跨膜域受体(或G蛋白偶联受体)的最新研究进展,以期阐明受体与心脏信号传导通路和环境之间的相互作用,从而为临床治疗... 准确的理解心脏如何与许多不同的细胞外信号分子识别与反应,将有助于我们发现治疗心脏疾病的新靶点.本文集中论述了七跨膜域受体(或G蛋白偶联受体)的最新研究进展,以期阐明受体与心脏信号传导通路和环境之间的相互作用,从而为临床治疗提供理论依据和有益提示. 展开更多
关键词 跨膜域受体 心脏功能 G蛋白偶联受体 信号传导通路
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跨膜4域亚家族成员6D基因敲除致雄性小鼠生育力降低实验研究 被引量:1
6
作者 刘俊璇 曾继涛 何畏 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第10期1283-1288,共6页
目的:探讨跨膜4域亚家族成员6D(Ms4a6d)基因敲除对雄性小鼠生育力的影响。方法:采用聚合酶链式反应(PCR)鉴定小鼠基因型,将Ms4a6d^(-/-)雄鼠和野生型C57小鼠分别与同龄野生型雌鼠合笼交配,统计各组雌鼠怀孕产仔情况,收集睾丸组织,称重... 目的:探讨跨膜4域亚家族成员6D(Ms4a6d)基因敲除对雄性小鼠生育力的影响。方法:采用聚合酶链式反应(PCR)鉴定小鼠基因型,将Ms4a6d^(-/-)雄鼠和野生型C57小鼠分别与同龄野生型雌鼠合笼交配,统计各组雌鼠怀孕产仔情况,收集睾丸组织,称重并计算器官指数,评估附睾尾精子数量、运动参数等变化情况,通过形态学分析和HE染色评估小鼠睾丸组织形态学变化,采用免疫荧光染色分析睾丸巨噬细胞变化。结果:Ms4a6d^(-/-)雄鼠子代数目显著低于WT雄鼠(P<0.05);Ms4a6d^(-/-)雄鼠睾丸体积及质量均减少(均P<0.05);Ms4a6d^(-/-)雄鼠附睾尾精子浓度下降(P<0.05),各项运动参数未见统计学差异(P>0.05);睾丸组织切片HE染色结果显示Ms4a6d^(-/-)雄鼠睾丸曲细精管直径及管腔厚度均明显减少,支持细胞、精原细胞、初级精母细胞及精子细胞均减少;免疫荧光结果显示Ms4a6d^(-/-)雄鼠睾丸巨噬细胞受到影响。结论:Ms4a6d基因敲除干扰了雄性小鼠睾丸的发育,并造成生精小管直径减少、厚度变薄,附睾尾部精子数量显著下降,从而使成年雄鼠的生育力显著下降。 展开更多
关键词 4亚家族成员6D 基因敲除 雄性小鼠 睾丸 巨噬细胞 生育力
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Ⅱ型细胞色素P450酶氧化β-香树脂醇的选择性调控研究 被引量:2
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作者 孙文涛 张昕哲 +2 位作者 万盛通 王茹雯 李春 《合成生物学》 CSCD 2021年第5期804-814,共11页
细胞色素P450酶(简称P450酶)是天然产物合成过程中的关键修饰酶,其催化的杂泛性使得一种生物合成途径中的一个P450酶可以氧化多个中间体导致多种结构类似物的产生。P450酶催化选择性的传统调控策略主要为催化结构域的改造以及氧化还原... 细胞色素P450酶(简称P450酶)是天然产物合成过程中的关键修饰酶,其催化的杂泛性使得一种生物合成途径中的一个P450酶可以氧化多个中间体导致多种结构类似物的产生。P450酶催化选择性的传统调控策略主要为催化结构域的改造以及氧化还原伴侣工程,然而在由P450酶、细胞色素P450还原酶(CPR)、生物膜构成的Ⅱ型P450酶催化系统中,蛋白跨膜域、膜组分的代谢等因素对其选择性的影响尚不清晰。为探索Ⅱ型P450酶催化选择性调控的新策略,解决甘草次酸合成过程中关键Ⅱ型P450酶CYP72A63(T338S)的底物选择性差而产生副产物11-脱氧甘草次酸的问题,本文通过在CYP72A63(T338S)的N端融合酵母内源P450酶以及其他内质网定位蛋白的跨膜域方式重塑CYP72A63(T338S)的跨膜结构,改造重要膜组分鞘脂的代谢途径,调节生物合成途径中具有底物竞争关系的P450酶表达比例的三种策略,以酿酒酵母为底盘菌株,通过体内验证的方式,探究了跨膜域、鞘脂代谢以及具有底物竞争关系的P450酶表达比例的变化对CYP72A63(T338S)催化特性的影响。结果表明,跨膜域的重塑以及鞘脂代谢的调节显著改变了CYP72A63(T338S)催化的底物选择性,N端跨膜域融合NTE1N以及敲除二氢鞘氨醇4-羟化酶的编码基因SUR2显著抑制了其对β-香树脂醇的氧化选择性;过表达来自毕赤酵母的葡萄糖神经酰胺合酶则会显著促进其对β-香树脂醇的氧化选择性;通过提高Uni25647(来源于乌拉尔甘草的11-氧-β-香树脂醇合成酶)的表达比例,促进了其与CYP72A63(T338S)竞争β-香树脂醇的能力,完全抑制了副产物11-脱氧甘草次酸的合成。本文为P450酶,尤其是膜定位的Ⅱ型P450酶催化特性调控的研究提供了新的思路和方法。 展开更多
关键词 细胞色素P450酶 跨膜域 鞘脂 催化选择性 甘草次酸 酿酒酵母
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C族G蛋白偶联受体激活过程
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作者 刘娜 黄思罗 +2 位作者 Philippe Rondard Jean-Philippe Pin 刘剑峰 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期484-487,共4页
C族G蛋白偶联受体(G protein coupled receptor,GPCR)具有七螺旋跨膜域(heptahelical transmembranedomain,HD)、捕蝇夹域(venusflytrapdomain,VFT)和半胱氨酸富集域(cysteine-rich domain,CRD)等功能域,并在体内组成性形成二聚体。该... C族G蛋白偶联受体(G protein coupled receptor,GPCR)具有七螺旋跨膜域(heptahelical transmembranedomain,HD)、捕蝇夹域(venusflytrapdomain,VFT)和半胱氨酸富集域(cysteine-rich domain,CRD)等功能域,并在体内组成性形成二聚体。该文介绍C族G蛋白偶联受体激活进程中各功能域的构象变化,以及由此产生的构象学效应。 展开更多
关键词 C族G蛋白偶联爱体 捕蝇夹模块 七螺旋跨膜域 半胱氨酸富集
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骨关节炎患者外周血淋巴细胞基因表达谱的生物信息学分析 被引量:1
9
作者 杨威 袁普卫 +3 位作者 杜龙龙 李雪枫 高启萌 韩清民 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第23期3706-3713,共8页
背景:目前没有监测骨关节炎发生或进展的敏感标志物,检测骨关节炎活动期外周血基因表达谱变化,有助于探寻血液中精确的诊疗靶点及阐释发病机制。目的:通过生物信息学方法分析骨关节炎患者与正常人外周血淋巴细胞基因表达谱差异,从分子... 背景:目前没有监测骨关节炎发生或进展的敏感标志物,检测骨关节炎活动期外周血基因表达谱变化,有助于探寻血液中精确的诊疗靶点及阐释发病机制。目的:通过生物信息学方法分析骨关节炎患者与正常人外周血淋巴细胞基因表达谱差异,从分子层面探索血液中骨关节炎的诊疗靶点,为研究骨关节炎提供新思路。方法:从GEO和ArrayExpress数据库中查找骨关节炎血液相关的芯片数据,并下载GSE63359数据集。筛选样本包括46例骨关节炎患者血液和26例健康人血液,其中女性患者32例(健康女性19例)。用R语言limma包分别筛选出男/女性骨关节炎和男/女性健康人之间的差异表达基因,用ggplot2包绘制火山图,ComplexHeatmap包绘制热图。设定阈值为P<0.05&|log2FC|>0.5获取差异表达基因,然后制作韦恩图,得到8个差异表达基因:MAP2K7、CREBZF、CLK4、TRIM37、IL18RAP、LRRN3、BLNK和MS4A1;通过DAVID对差异表达基因进行GO和KEGG通路分析,并用R语言ggplot2包绘制气泡图。用STRING和Cytoscape软件构件PPI网络,Mcode和centiscape插件进行模块分析,Cytohubba筛选出关键基因。结果与结论:共筛选出差异表达基因115个,其中上调基因16个,下调基因99个,对所有差异表达基因进行GO富集分析主要集中在“淋巴细胞介导的免疫”“体液免疫反应”“抗原受体介导的信号通路”“B细胞受体信号通路”“免疫球蛋白介导的免疫反应”和“吞噬作用的正调控”等生物功能上;KEGG主要富集在5条与骨关节炎相关的通路上:造血细胞谱系、Th1和Th2细胞分化、Th17细胞分化、破骨细胞分化和TNF信号通路。利用PPI网络及相关插件筛选出10个与骨关节炎高度相关的关键基因,其中瘤坏死因子、CD19、转铁蛋白受体、配对框5、丝裂原活化蛋白激酶7、CD24、CD20和B细胞连接器8个核心基因与骨关节炎炎症和细胞凋亡高度相关。提示:通过生物信息学分析发现骨关节炎和健康人的外周血淋巴细胞基因表达差异集中在炎症反应和细胞凋亡,从而使血液表达谱成为监测骨关节炎靶点标记物和研究其潜在分子机制的有效突破口。 展开更多
关键词 骨关节炎 外周血淋巴细胞 基因表达谱 B细胞连接器 4A1 炎症 丝裂原活化蛋白激酶激酶7 凋亡 生物信息学
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The matrix metalloproteinase stromelysin-3 cleaves laminin receptor at two distinct sites between the transmembrane domain and laminin binding sequence within the extracellular domain 被引量:5
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作者 Tosikazu AMANO Olivia KWAK Anastasia MARSHAK 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2005年第3期150-159,共10页
The matrix metalloproteinase (MMP) stromelysin-3 (ST3) has long been implicated to play an important role in extracellular matrix (ECM) remodeling and cell fate determination during normal and pathological processes. ... The matrix metalloproteinase (MMP) stromelysin-3 (ST3) has long been implicated to play an important role in extracellular matrix (ECM) remodeling and cell fate determination during normal and pathological processes. However like other MMPs, the molecular basis of ST3 function in vivo remains unclear due to the lack of information on its physiological substrates. Furthermore, ST3 has only weak activities toward all tested ECM proteins. Using thyroid hormone-dependent Xenopus laevis metamorphosis as a model, we demonstrated previously that ST3 is important for apoptosis and tissue morphogenesis during intestinal remodeling. Here, we used yeast two-hybrid screen with mRNAs from metamorphosing tadpoles to identify potential substrate of ST3 during development. We thus isolated the 37 kd laminin receptor precursor (LR). We showed that LR binds to ST3 in vitro and can be cleaved by ST3 at two sites distinct from where other MMPs cleave. Through peptide sequencing, we determined that the two cleavage sites are in the extracellular domain between the transmembrane domain and laminin binding sequence. Furthermore, we demon strated that these cleavage sites are conserved in human LR. These results together with high levels of human LR and ST3 expression in carcinomas suggest that LR is a likely in vivo substrate of ST3 and that its cleavage by ST3 may alter cell-extracellular matrix interaction, thus, playing a role in mediating the effects of ST3 on cell fate and behavior ob- served during development and pathogenesis. 展开更多
关键词 stromelysin-3 laminin receptor matrix metalloproteinase extracellular matrix Xenopus laevis cell surface substrate.
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猪流行性腹泻病毒ORF3蛋白40-91 aa是其细胞质定位的关键结构域 被引量:5
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作者 陈冰清 沈媚 +4 位作者 司伏生 董世娟 于瑞嵩 谢春芳 李震 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1113-1125,共13页
ORF3蛋白是猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)基因组编码的唯一的辅助蛋白,与病毒毒力相关。为确定PEDV ORF3细胞质定位信号,文中构建了系列PEDV DR13wt ORF3蛋白全长或截短肽重组表达载体,转染Vero细胞并利用激... ORF3蛋白是猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)基因组编码的唯一的辅助蛋白,与病毒毒力相关。为确定PEDV ORF3细胞质定位信号,文中构建了系列PEDV DR13wt ORF3蛋白全长或截短肽重组表达载体,转染Vero细胞并利用激光共聚焦显微镜分析与EGFP融合表达的全长ORF3蛋白和其系列截短肽在细胞内的分布。结果表明,全长ORF3蛋白或所有包含2个跨膜域的40–91 aa基序的ORF3截短肽均只定位于细胞质中,而不包含40–91aa基序的ORF3截短肽分布于整个细胞中(细胞质和细胞核均有分布)。这表明40–91 aa是猪流行性腹泻病毒ORF3蛋白细胞质定位的关键结构域。PEDVORF3蛋白细胞质定位结构域的明确为进一步研究其细胞内转运和生物学功能提供了参考。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 ORF3蛋白 细胞质定位 定位信号 跨膜域
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Analysis of the Secondary Structure of the Transmembrane Domain of SARS CoV E Protein Using FTIR Spectroscopy
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作者 Qasem Abu-Remeleh Abd-Alkareem Alsharif Mutaz Akkawi 《Journal of Chemistry and Chemical Engineering》 2010年第6期8-14,共7页
One of the major obstacles facing the field of structural biology in the post genomic era is the inherent difficulty of analyzing the structure of membrane proteins under native conditions. The method of choice for st... One of the major obstacles facing the field of structural biology in the post genomic era is the inherent difficulty of analyzing the structure of membrane proteins under native conditions. The method of choice for studying such proteins is FTIR spectroscopy. Following the outbreaking of the severe acute respiratory syndrome (SARS) virus, in 2003, extensive work has been directed at elucidating the structure of the E transmembrane proteins of the SARS coronavirus. In this study, the secondary structure of the transmembrane a-helical bundles was analysised using the biophysical method site specific infrared dichroism (SSID). Sixteen amino acids were isotopically labeled with (~3C=180) at different positions of the primary structure of the synthesized E protein CoV. The secondary structure was studied using Attenuated Total Internal Reflection (ATR) FTIR spectroscopy. Based on our findings, the presence of two possible H-bonding interactions between the carbonyl oxygen of two residues 26 and 31 (Phe and Leu) respectively with water molecules which may be trapped within the helix structure were postulatesed. These interactions may cause a change in this structure. 展开更多
关键词 SARS CoV a-helix SSID ATR- FTIR H-bonding interactions.
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枣食芽象甲非典型气味受体基因的克隆及组织表达谱分析 被引量:2
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作者 洪波 常青 +3 位作者 翟颖妍 任博文 陈志杰 张锋 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期1143-1152,共10页
为明确枣树主要害虫枣食芽象甲Pachyrhinus yasumatsui非典型气味受体(odorant receptor co-receptor,Orco)基因的分子特征与组织表达谱,利用反转录PCR(reverse transcription-PCR,RTPCR)技术克隆枣食芽象甲Orco基因,对Orco蛋白进行结... 为明确枣树主要害虫枣食芽象甲Pachyrhinus yasumatsui非典型气味受体(odorant receptor co-receptor,Orco)基因的分子特征与组织表达谱,利用反转录PCR(reverse transcription-PCR,RTPCR)技术克隆枣食芽象甲Orco基因,对Orco蛋白进行结构分析和系统发育分析,并采用荧光实时定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)技术测定该基因在成虫不同组织中的表达量。结果表明,克隆获得枣食芽象甲Orco基因并命名为PyasOrco(GenBank登录号为MZ995428)。该基因的cDNA序列全长为2776 bp,其中开放阅读框全长为1449 bp,编码482个氨基酸。PyasOrco蛋白含有7个跨膜域,为疏水性膜蛋白。枣食芽象甲与同为鞘翅目的米象Sitophilus oryzae亲缘关系最近。qPCR检测结果显示,PyasOrco基因主要在枣食芽象甲成虫的触角中表达,且在雄成虫触角中的表达量最高,为雌成虫触角中表达量的1.2倍,该基因在雌成虫足和翅等部位也有少量表达。 展开更多
关键词 枣食芽象甲 非典型气味受体 基因克隆 组织表达谱 跨膜域
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RLKs orchestrate the signaling in plant male-female interaction 被引量:9
14
作者 Hongju Li Wei-Cai Yang 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2016年第9期867-877,共11页
Different from animals, sessile plants are equipped with a large receptor-like kinase(RLK) superfamily. RLKs are a family of single trans-membrane proteins with divergent N-terminal extracellular domains capped by a s... Different from animals, sessile plants are equipped with a large receptor-like kinase(RLK) superfamily. RLKs are a family of single trans-membrane proteins with divergent N-terminal extracellular domains capped by a signal peptide and C-terminal intracellular kinase. Researches in the last two decades have uncovered an increasing number of RLKs that regulate plant development, stress response and sexual reproduction, highlighting a dominant role of RLK signaling in cell-to-cell communications. Sexual reproduction in flowering plants is featured by interactions between the male gametophyte and the female tissues to facilitate sperm delivery and fertilization. Emerging evidences suggest that RLKs regulate almost every aspect of plant reproductive process, especially during pollination. Therefore, in this review we will focus mainly on the function and signaling of RLKs in plant male-female interaction and discuss the future prospects on these topics. 展开更多
关键词 RLK SIGNALING plant reproduction pollen tube female gametophyte male-female interaction pollen tube growth and guidance pollen tube reception
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Diverse roles of SERK family genes in plant growth, development and defense response. 被引量:7
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作者 Min Fan Minmin Wang Ming-Yi Bai 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2016年第9期889-896,共8页
Plant receptor-like protein kinases(RLKs) are transmembrane proteins with an extracellular domain and an intracellular kinase domain, which enable plant perceiving diverse extracellular stimuli to trigger the intracel... Plant receptor-like protein kinases(RLKs) are transmembrane proteins with an extracellular domain and an intracellular kinase domain, which enable plant perceiving diverse extracellular stimuli to trigger the intracellular signal transduction. The somatic embryogenesis receptor kinases(SERKs) code the leucine-rich-repeat receptor-like kinase(LRR-RLK), and have been demonstrated to associate with multiple ligand-binding receptors to regulate plant growth, root development, male fertility, stomatal development and movement, and immune responses. Here, we focus on the progress made in recent years in understanding the versatile functions of Arabidopsis SERK proteins, and review SERK proteins as co-receptor to perceive different endogenous and environmental cues in different signaling pathway, and discuss how the kinase activity of SERKs is regulated by various modification. 展开更多
关键词 RLK SERK signal transduction
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