跨膜蛋白45A对瘢痕疙瘩成纤维细胞合成细胞外基质的影响

目的研究跨膜蛋白45A(TMEM45A)在瘢痕疙瘩组织及成纤维细胞中的表达,探讨其对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KF)细胞外基质(ECM)的影响。方法收集2019年1月至2020年12月期间在延边大学附属医院皮肤科及泌尿外科手术切除的瘢痕疙瘩和正常包皮组织标本,采用Western印迹法检测瘢痕疙瘩组织及KF中TMEM45A蛋白表达情况。将KF分成两组,分别通过特异性TMEM45A小干扰RNA(siRNA)和对照siRNA转染,进而采用Western印迹法检测TMEM45A基因的下调对肌成纤维细胞标志性蛋白(α平滑肌肌动蛋白)及ECM相关蛋白表达的影响。结果与正常皮肤组织(1.00±0.11)及成纤维细胞(1.00±0.20)相比,TMEM45A在瘢痕疙瘩(0.26±0.05)及KF(0.41±0.09)中的表达显著降低(t值分别为10.76、4.75,P值分别<0.001,=0.009)。TMEM45A特异性siRNA组中α-平滑肌肌动蛋白(t=-5.98,P=0.004)及ECM蛋白Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白(t值分别为-4.57、-4.90,P值分别为0.010、0.008)和纤连蛋白(t=-7.19,P=0.002)的表达均高于对照siRNA组。结论瘢痕疙瘩中低表达的TMEM45A可能通过促进ECM生成在瘢痕疙瘩发病过程中起重要作用。

敲降TMEM45A基因对卵巢癌细胞增殖、黏附及侵袭的影响

目的观察跨膜蛋白45A(TMEM45A)基因对卵巢癌细胞增殖、侵袭能力的调节作用,并进一步探索其可能相关信号通路。方法通过分析TCGA数据库卵巢癌组RNA测序数据和25对卵巢癌及其配对非癌组织样本的RT-PCR数据,比较卵巢癌组织和正常组织中TMEM45A的表达。在两种卵巢癌细胞系HO-8910和A2780中进行RNA干扰,抑制TMEM45A的表达;使用CCK-8、PI染色、细胞黏附和Transwell实验检测细胞增殖、细胞周期分布、黏附和侵袭能力;分析TGF-β信号传导途径、粘着斑途径与TMEM45A的高表达的相关性;采用RT-PCR和Western检测TGF-β1、TGF-β2、Rho A、ROCK2 mRNA和蛋白水平。结果 TM EM 45A在卵巢癌中过表达(P<0.001);TM EM 45A基因的沉默抑制了细胞增殖(P<0.05),增加了处于G1期的细胞群(P<0.05);敲降TMEM45A基因可以抑制细胞黏附和侵袭(P<0.05);抑制TMEM45A显著下调TGF-β1/2、Rho A和ROCK2的表达(P<0.05)。结论 TM EM 45A可能是卵巢癌的致癌基因,敲降TM EM 45A基因可能成为卵巢癌的治疗靶点。

TEMEM45A在子痫前期胎盘组织中的表达及其临床意义

目的:探讨跨膜蛋白-45A(TMEM45A)在子痫前期(PE)的胎盘组织中的表达及其临床意义,并观察缺氧状态对于人绒毛膜滋养层细胞HTR-8/SV-NEO中TMEM45A表达的影响。方法:采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测PE胎盘组织TMEM45A mRNA表达水平。采用western blotting和免疫组织化学(IHC)染色法检测PE胎盘组织TMEM45A蛋白表达水平,并分析TMEM45A表达水平与PE患者临床特征间的关系。构建HTR-8/SV-NEO细胞缺氧模型,探究缺氧对TMEM45A表达的影响。从基因表达综合数据库(GEO)中收集RNA-seq数据集及芯片数据,使用meta分析评估TMEM45A对PE的影响,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析TMEM45A对PE的诊断效能。结果:PE胎盘组织TMEM45A mRNA及其蛋白表达均高于正常妊娠胎盘组织(P<0.05)。TMEM45A蛋白低表达组与高表达组PE患者年龄、孕期增长的体重、孕次、产次、孕周、新生儿体重及尿蛋白、尿素氮(BUN)水平比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。TMEM45A在HTR-8/SV-NEO缺氧细胞中的表达显著升高(P<0.05)。Meta分析显示:TMEM45A表达为PE的危险因素[总SMD=1.23(0.31~2.14),I^(2)=80.0%,P<0.001]。TMEM45A诊断PE的ROC曲线下面积(AUC)为0.788(95%CI:0.718~0.847,P<0.001)。结论:TMEM45A在PE胎盘组织中呈高表达,对PE有一定的诊断价值;缺氧环境可导致滋养细胞的TMEM45A表达升高。