跨膜蛋白48对宫颈癌细胞增殖、侵袭、迁移及Yes相关蛋白通路影响研究

目的 探讨跨膜蛋白48(TMEM 48)对宫颈癌细胞增殖、侵袭、迁移及Yes相关蛋白(YAP)通路的影响。方法 用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法和蛋白免疫印迹法分别检测35例宫颈癌组织及其配对的癌旁组织、正常宫颈上皮细胞(H8)和宫颈癌细胞系(SiHa、HeLa、CaSki、C33A)的TMEM 48基因及蛋白表达水平。分别用TMEM 48 si-RNA(沉默组)或者si-control(对照组)转染HeLa和CaSki细胞。用CCK-8法检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞侵袭和迁移。实时荧光定量PCR法检测TMEM 48基因表达水平;蛋白免疫印迹法检测细胞TMEM 48、YAP、pYAP蛋白表达水平,检测细胞核和细胞质中YAP蛋白表达水平。结果 与癌旁组织比较,癌组织中TMEM 48基因和蛋白表达水平均较高,差异有统计学意义(P<0.05)。与正常宫颈上皮细胞H8比较,宫颈癌SiHa、HeLa、CaSki、C33A细胞系的TMEM 48基因和蛋白表达水平较高,差异有统计学意义(P<0.05)。在HeLa和CaSki细胞中,对照组CCK-8实验72 h时的细胞增殖活性、侵袭细胞数、迁移细胞数均低于沉默组,差异有统计学意义(P<0.05)。沉默组TMEM 48基因和蛋白相对表达量均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,沉默组pYAP蛋白表达水平、pYAP/总YAP、YAP蛋白的核质比均较低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 宫颈癌细胞和组织中TMEM 48表达水平较高,沉默TMEM 48表达可以抑制宫颈癌细胞的增殖、侵袭、迁移及YAP通路激活。