Ⅰ/Ⅱ型肌球蛋白亚型的提取及纯化方法

肌纤维类型是决定肉及肉制品品质特性的内因,肌球蛋白亚型决定了肌纤维类型。为突破不同肌球蛋白亚型难以从混合肌纤维中分离纯化的难点,以牛咬肌(100%的Ⅰ型肌纤维)和牛躯干皮肌(93%的Ⅱ型肌纤维)为原料,确立一种可同时适用于两种肌球蛋白亚型的提取及纯化方法。从已报道的4种不同物种源肌球蛋白提取方法中筛选出较适宜的一种,进而对其组织破碎程度、肌浆蛋白去除效果、硫酸铵分级沉淀效果进行优化,通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺电泳和纳升液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱联用技术分析提取物的蛋白质组成及肌球蛋白亚型纯度。结果表明:分别从牛咬肌和躯干皮肌中获得纯度高达95%的Ⅰ型肌球蛋白和93%的Ⅱ型肌球蛋白。本研究确立的方法可为促进肉品品质研究深入到肌球蛋白亚型水平提供技术可行性,为推动肌球蛋白亚型与肉品品质特性关系的研究奠定基础。