车前子黄酮的响应面法优化微波提取及其对鸡抗氧化能力的影响

本试验旨在单因素试验的基础上,考察乙醇体积分数、料液比、微波处理时间对车前子黄酮提取率的影响,利用响应面法确定微波提取车前子黄酮的最佳工艺,并研究微波提取的车前子黄酮对环磷酰胺(cyclophosphamide,CY)诱导鸡氧化应激的影响。选用100只1日龄白羽种蛋鸡公雏,随机分为5组(每组20只),即空白组、CY组(环磷酰胺+生理盐水)组、高剂量组(环磷酰胺+60 mg/mL车前子黄酮)、中剂量组(环磷酰胺+40 mg/mL车前子黄酮)和低剂量组(环磷酰胺+20 mg/mL车前子黄酮),比较不同水平车前子黄酮对氧化应激鸡抗氧化能力的影响。结果显示,车前子黄酮最佳提取条件是乙醇体积分数为64.80%、料液比为1∶21.58、微波处理时间为7.08 min,该条件下黄酮的提取率为11.40 mg/g。动物试验结果表明,车前子黄酮可显著提高氧化应激鸡血清的总抗氧化能力,提高超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶的活性,并可以降低血清中丙二醛的浓度。结果表明,采用响应面法对车前子黄酮提取条件进行优化合理可行,车前子黄酮可在一定程度上提高鸡机体的抗氧化能力。

车前子总黄酮的纯化及其成分的液相质谱联用分析

采用DPPH自由基清除法和邻苯三酚自氧化抑制法对车前子黄酮初提液的不同溶剂萃取液的体外抗氧化能力进行了比较,发现正丁醇萃取液具有与初提液相近的抗氧化能力,说明用正丁醇能萃取出大部分有效成分。并比较了AB-8、D101、NKA-2、NKA-9四种大孔吸附树脂对车前子黄酮的吸附及解吸性能,以选择合适的车前子黄酮纯化工艺。将纯化液进行液质联用分析其组成。结果表明,AB-8型树脂吸附和解吸率最高,适合萃取后的车前子黄酮的纯化,纯化后黄酮含量可从4%提高到30%以上。采用液质联用技术分析纯化液,确定其主要成分为苯乙醇苷类毛蕊花苷、异毛蕊花苷、大车前苷和黄酮类物质野漆树苷。