微波提取车前穗中总黄酮及其含量测定

目的 :从车前穗中提取总黄酮 ,并测定其含量。方法 :运用微波技术提取车前穗总黄酮 ,用比色法测定总黄酮含量。结果 :测得车前穗中总黄酮含量为 5 2 1% ,平均回收率为 97 9% ,RSD =1 74 % (n =6 )。结论 :首次运用微波技术从车前穗中提取出总黄酮 ,本方法反应速度加快 ,实验结果令人满意。

车前草穗枯病研究——Ⅰ.症状及病原菌鉴定

对车前草穗枯病症状进行了系统观察,并对其病原菌进行了鉴定.车前草穗枯病主要为害穗部,也为害穗轴和叶片.穗部主要表现为顶端变黑腐烂,后引起全穗枯死;叶片出现圆形、直径1～2 cm大型病斑,病斑中央灰绿色,边缘暗绿色,病叶易发生焦枯;穗轴、叶柄产生椭圆形或梭形大斑,病斑呈暗绿色或灰白色.病部易产生大量黑色小点(子座).病菌鉴定按柯赫氏法则进行.在成功完成病菌分离、回接及再分离过程的基础上,对病菌的形态及大小进行了观察和测量,结果表明车前草穗枯病病原菌为一种壳梭孢属真菌(Fusicoccum sp.).

车前草穗枯病研究Ⅱ.病原菌生物学特性

对车前草穗枯病菌菌丝生长条件和人工诱导产孢进行系列试验,结果表明菌丝生长适宜温度15～30℃,最适25℃;适宜pH值4.01～7.02,最适4.98;不同碳源对菌丝生长有一定影响,以蔗糖最佳;光照对菌丝生长影响不大。产孢试验表明,PDA及其他各种培养基上不能产生子座、分生孢子器和分生孢子,采用光暗交替、变温处理、紫外线照射和菌丝切割等多种方法也不能产生,而用灭菌的车前草叶片和穗轴接种培养,便可获得成功产孢,但产生的子座比自然病株上的明显偏大,分生孢子器及分生孢子则差异不明显。

5种杀菌剂对车前草穗枯病菌的毒力测定和田间药效试验

车前草穂枯病是江西吉安车前草产区一种毁灭性真菌病害。本文采用菌丝生长速率法测定了火把、凯润、爱普、温立停和甲基托布津5种杀菌剂对车前草穗枯病菌(Fusicoccum sp.)的毒力,各药剂的EC50值依次为:1.2514、8.7601、20.9266、196.7915和4887.4862μg/mL。田间试验结果表明:火把对车前草穗枯病的防效最好,达94.92%,凯润和爱普也有较好的防效,分别为84.96%和82.11%,而温立停和甲基托布津的防效较差,分别只有64.02%和41.87%。

车前草穗枯病研究——Ⅲ杀菌剂室内毒力测定

车前草穂枯病是江西吉安车前草产区发生最严重的一种真菌病害。本文采用菌丝生长速率法测定了6种杀菌剂对车前草穂枯病菌的毒力,结果表明菌毒神丹的毒力最强,EC50值为3.2921μg/mL;多菌灵的毒力最弱,EC50值为8 316.0393μg/mL;其他4种药剂已蒜素、奥普安、代森锰锌和菌毒克的毒力介于其间,EC50值依次为7.8253μg/mL,32.9139μg/mL、140.7006μg/mL和400.4089μl/mL。

车前草穗枯病菌分子鉴定

采用真核生物通用引物ITS1/ITS4,对来自江西省吉安县2个车前草穗枯病菌菌株进行rDNA-ITS区段的PCR扩增,对扩增产物进行测序,结果获得2个长度均为579 nt且序列完全一致的rDNA-ITS序列,该序列与GenBank中当归间座壳菌(Diaporthe angelicae)及其无性态拟茎点霉菌(Phomopsis subordinaria)对应序列的同源性高达99.0%,根据以rDNA-ITS序列同源性大小划分种类的标准,将车前草穗枯病菌鉴定为当归间座壳菌。

野生车前草抗穗枯病种质资源鉴定

为发掘和利用野生车前草抗穗枯病种质资源,本文采用车前草穗枯病菌(Diaporthe angelicae)强致病力菌株进行挑战接种,对从江西7县多点采集的175份野生车前草种质进行抗病性鉴定,结果表明有2、5、71和97份种质分别表现为高抗、抗病、感病和高感,可见野生车前草种质普遍对穗枯病不抗病。2份高抗穗枯病野生车前草种质的成功筛选为车前草抗穗枯病品种的传统和分子育种奠定了良好的基础。