光照、磷和AMF对白车轴草生长的影响

外来植物成功入侵受非生物因素与生物因素的共同调控。本研究以典型入侵植物白车轴草(Trifolium repens L.)为研究对象,通过三因素两水平正交实验,探究光照(L)、磷(P)和丛枝菌根真菌(Arbuscular mycorrhizal fungi,AMF)及其交互作用对其生长的影响。结果显示:(1)高光照、高磷和接种AMF均显著提高白车轴草的生物量及生长速率,且接种AMF对生物量的促进作用随着光照的增加而增强,低磷条件下AMF对总生物量和相对生长速率的促进效应更明显;(2)高光照降低比叶面积;高磷和接种AMF显著增加叶片数和总叶面积,在高光强下尤为明显;(3)高光照可显著提高根表面积、根直径和根质量分数,但降低细根占比和比根长。高磷显著降低根质量分数。不接种AMF时,高磷增加根表面积与根直径,降低细根长占比;但接种AMF后,高磷则降低根表面积与根直径,增加细根长占比。AMF显著降低根质量分数和比根长。研究结果表明,三种因素对白车轴草的生长具有显著影响,且磷和AMF对其生长及地上性状的影响与光照强度相关,AMF对其地下性状的影响与磷浓度相关。

丛枝菌根真菌接种对白车轴草耐盐性的影响

丛枝菌根真菌(AMF)可与植物共生形成复杂的菌丝网络,影响植物生长及抗逆能力。目前关于AMF对白车轴草耐盐性的影响尚存争议,本研究采用盆栽试验,研究在盐胁迫条件下(NaCl浓度为150 mmol·L^(-1)),接种AMF对拉丁诺白车轴草耐盐性的影响。结果表明,在盐胁迫条件下,与对照相比,白车轴草的生长与生理指标均受到抑制。盐胁迫下接种AMF后,白车轴草株高、干重、PSⅡ最大光能转换效率和相对含水量均有增加,丙二醛(MDA)含量以及相对电导率有所降低,渗透调节物质均有提高,其中可溶性糖(SS)和游离脯氨酸(Pro)含量分别提高了32.03%和9.42%。说明盐胁迫抑制白车轴草的生长,接种AMF增强了白车轴草抗逆适应能力,促进白车轴草的生长,增加渗透调节物质含量,提高白车轴草耐盐胁迫的能力。

AgNO_(3)暴露对红车轴草光合作用的影响

从光合相关参数、显/超微结构和基因表达等方面探索了AgNO3对红车轴草光合作用的影响。光合色素含量、光系统Ⅱ最大量子效率(F_(v)/F_(m))、核酮糖-1,5-二磷酸核酮糖羧化酶活性和根长等指标在高浓度AgNO3(588 μmol·L^(-1))作用下分别降低了22.36%(叶绿素a)、18.6%(叶绿素b)、89.53%(Fv/Fm)、80.13%(核酮糖-1,5-二磷酸核酮糖羧化酶活性)和62.47%(根长)。然而在29 μmol·L^(-1)AgNO_(3)暴露下,相比于对照组,叶绿素a含量、叶绿素b含量、F_(v)/F_(m)、核酮糖-1,5-二磷酸核酮糖羧化酶活性和根长分别增加了32.68%、38.37%、30.63%、79.11%和159.53%(低促高抑,即毒物兴奋效应)。另外,AgNO_(3)明显破坏了红车轴草的细胞结构,呈现为叶绿体的解体与细胞内容物的聚集。转录组分析鉴别到了光合相关基因的差异表达(例如SIGE、HD16和PSBQ),表明红车轴草积极调控基因表达以应对光合抑制。蛋白-蛋白相互作用(protein-protein interaction,PPI)分析表明PETC、PSBO_(1)与PSBO_(2)为核心光合抗逆基因,STRING分析显示,AgNO_(3)显著影响了乙醇酸通路、光呼吸和CO_(2)固定等生物过程。本研究系统探索了AgNO_(3)暴露对红车轴草光合作用的影响机制,可以加深AgNO_(3)对植物毒性作用的理解。

红车轴草与白车轴草的中药鉴别研究

目的:鉴别红、白车轴草在种属基源、性状、显微和紫外谱线组等方面的不同,开发其药用价值。方法:采用基原、性状、显微、紫外谱线组鉴别等方法。结果:红车轴草的茎叶被柔毛,而白车轴草茎叶表面光滑;红车轴草茎横切面中央有空腔,白车轴草茎横切面中央无空腔;红车轴草与白车轴草的紫外谱线组图有明显不同。结论:红、白车轴草在性状、显微和紫外谱线组等方面可以明显鉴别。

两种车轴草的染色体研究

对山东两种车轴草进行了染色体研究。结果显示:白车轴草(TrifoliumrepensL.)染色体数目2n=32,核型公式K(2n)=4x=32=32m,相对长度组成2n=32=12M2+20M1,核型为"1A"类型;红车轴草(TrifoliumpratensL.)染色体数目2n=16,核型公式K(2n)=2x=16=16m,相对长度组成2n=16=2L+4M2+10M1,核型为"1A"类型。讨论了染色体在分类学上的意义。

种间竞争梯度对白车轴草与其病原菌白车轴草单孢锈菌相互作用的影响(英文)

白车轴草 (Trifolium repens)在与其病原菌白车轴草单孢锈菌 (Uromyces trifolii- repentis)的长期相互作用中分化形成了抗病型 (Resistance)无性系和易感型 (Susceptibility)无性系。该研究工作旨在了解 :1)在种间竞争不断增强的环境梯度中 ,抗病型无性系和易感型无性系的生长表现有何区别 ?2 )在同样的实验条件下 ,分别对抗病型无性系和易感型无性系进行接种感染后 ,两者的生长表现又有何区别 ?在一严重感病的白车轴草自然种群中 ,分别标定 17个抗病型无性系和 14个易感型无性系 ,从各无性系的匍匐茎上分别剪取长 5 cm ,具两个叶两个腋芽的小段作实验材料。接种孢子采自同一植物种群植株的病叶。实验在一个处在次生演替阶段的草本植物群落上进行 ,在该群落的种间竞争梯度上选定 3个分别具有弱、中等和强种间竞争的生境 (Habitat)建立实验站 ,每站设置等量的实验组和对照组。结果显示 :1)随着环境中种间竞争强度的增加 ,无论接种与否 ,抗病型和易感型白车轴草的叶生长量均递减 ;2 )在弱或强种间竞争环境条件下 ,无论接种与否 ,易感型无性系的生长均好于抗病型无性系 ;但在中等种间竞争强度的环境条件下 ,对照实验中易感型无性系的生长显著好于抗病型无性系 ,而接种实验中的结果相反。

车轴草属植物异黄酮分析和比较研究

目的形成吉林省红、白车轴草异黄酮成分提取、分离、纯化方法,进行车轴草属植物异黄酮有效成分对比分析和研究。方法用乙醇提取车轴草属植物异黄酮有效成分,采用溶剂纯化法精制异黄酮,采用紫外分光光度法进行总异黄酮含量测定及提取工艺优化研究。结果车轴草属植物含有刺芒柄花素、鹰嘴豆芽素、染料木素及大豆苷元等,其中刺芒柄花素在车轴草属植物各部位含量丰富均衡,色谱分析结果稳定,可作为吉林省野生车轴草异黄酮成分分析标准品。结论吉林省野生红车轴草药用植物中所含异黄酮种类丰富,白车轴草中含有染料木素、刺芒柄花素等异黄酮成分,研究结果有望为我省长白山地区野生车轴草药用植物资源开发利用提供指导。

白车轴草(Trifolium repens)植株抗病性和生长与植物病史的关系(英文)

从白车轴草 (Trifoliumrepens)自然种群中采集无白车轴草单孢锈菌病史的无性系 (clones) 17个 ,有白车轴草单孢锈菌病史的无性系 14个 ,分别作为抗病型和感受型植物实验材料 ;采集白车轴草单孢锈菌 (Uromycestrifolii repentis)菌系 (strains) 10个 ,作为病菌实验材料 .分别设置并进行了两个温室实验、一个田间盆栽实验和一个原生长地移栽实验 ,实验处理上分对照、单菌系接种和 10个菌系接种等 3种 .实验结果表明 ,无论是用单菌系接种还是 10个菌系接种 ,植株发病的概率和程度均与其抗病性有关 ,抗病型植株 (无病史 )发病的概率和程度显著低于感受型 (有病史 )植株 .在相同处理的实验中 (无论是田间实验还是温室实验 ) ,无病史植株和有病史植株的生长无显著差异 ;不同处理田间实验植株的生长有显著差异 ,病情愈重 ,生长愈差 .无病史植株的抗病性明显强于有病史植株 .但是 ,原生长地的移栽实验结果表明 ,在无病原菌存在的情况下 ,有病史植株的 (叶 )生长显著好于无病史植株 .可以认为 ,研究生物个体对环境因子反应性差异的实验应当在自然条件下和自然梯度范围内进行 .

红车轴草总黄酮对H_2O_2诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用

目的观察红车轴草总黄酮对H2O2诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制。方法利用体外培养的人脐静脉血管内皮细胞ECV-304,采用H2O2诱导细胞损伤模型,观察红车轴草总黄酮对H2O2所致的血管内皮细胞损伤的保护作用。MTT法检测细胞存活率、试剂盒测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及细胞中丙二醛(MDA)的含量、乳酸脱氢酶(LDH)的漏出量;荧光法检测Caspase-3的活性;Hoechst33342及PI荧光染色法观察红车轴草总黄酮对H2O2诱导血管内皮细胞凋亡的影响;JC-1染色法检测红车轴草总黄酮对H2O2损伤血管内皮细胞线粒体膜电位的影响,检测各组细胞内ROS的表达水平。结果与空白对照组相比,H2O2损伤组细胞存活率降低、细胞内LDH,漏出量增加(P<0.001);抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px活性降低、MDA含量升高(P<0.01);Caspase-3活性升高(P<0.001)、ROS含量升高、线粒体膜电位降低;与模型组相比,红车轴草总黄酮各剂量组(12.5、25、50mg.L-1)及槲皮素组(30 mg.L-1)细胞存活率明显增加(P<0.01,P<0.05),红车轴草总黄酮各剂量组(12.5、25、50 mg.L-1)及槲皮素组(30 mg.L-1)均能明显降低LDH漏出量(P<0.01,P<0.05)、明显增强SOD、CAT及GSH-Px活力(P<0.01,P<0.05)、降低MDA、ROS含量及Caspase-3活性(P<0.05,P<0.01)、升高线粒体膜电位(P<0.01)。结论红车轴草总黄酮对H2O2诱导的内皮细胞损伤有明显的保护作用,其初步作用机制可能与抗自由基,减轻脂质过氧化、降低Caspase-3活性及稳定线粒体膜电位有关。

不同光照强度下豆链格孢菌对白车轴草生理生化特性的影响

通过盆栽实验研究了不同光照强度下,接种豆链格孢菌(Alternariaazukiae(hara)comb.nov)对白车轴草(TrifoliumrepensL.)叶组织细胞膜透性、色素含量、丙二醛(MDA)含量、蛋白质含量、脯氨酸含量以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性的影响。结果表明:豆链格孢菌使白车轴草叶组织细胞膜透性上升,电导率显著升高,膜脂过氧化加强,MDA水平上升,色素含量、蛋白质含量以及脯氨酸含量下降。随着处理光照强度的减弱,以上各生理指标的变化趋势更为明显,电导率和MDA含量均与光照强度显著负相关,而色素含量、蛋白质含量及脯氨酸含量均与光照强度显著正相关。接种豆链格孢菌后,色素含量明显下降,且弱光下(75%遮阳),豆链格孢菌对白车轴草叶片色素含量的影响更为明显,对照组的叶绿素a、叶绿素b、叶绿素(a+b)和类胡萝卜素含量均显著高于接种组的色素含量。在豆链格孢菌的刺激下,活性氧清除系统遭到破坏,保护酶系统失衡,其中SOD和CAT活性显著下降,而POD活性却明显上升,并且SOD、POD和CAT三种酶活性均与光照强度存在着明显的负相关系。

红车轴草异黄酮对维甲酸致小鼠骨质疏松的预防作用

目的研究红车轴草异黄酮对维甲酸致小鼠骨质疏松的预防作用,并探讨其主要作用机制。方法维甲酸(90mg.kg-1)致小鼠骨质疏松模型,红车轴草异黄酮(50、100、200mg·kg-1)灌胃给药,实验过程监测体重,2周后以比色法测定血清钙、磷含量和碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)活性,竞争放射免疫法测定血清中骨钙素(BGP)和雌二醇(E2)含量,取股骨进行骨组织形态学观察。结果维甲酸可引起高转换型骨质疏松,红车轴草异黄酮可升高E2值,降低P、ALP、TRAP、BGP水平。结论红车轴草异黄酮对维甲酸致小鼠骨质疏松有一定的预防作用,其机制可能与其减缓雌激素水平降低,抑制骨高转换有关。

红车轴草中异黄酮的指纹图谱研究

目的 :建立红车轴草中异黄酮类的指纹图谱及定性定量分析方法。方法 :反相高效液相法。结果 :不同产地的红车轴草中异黄酮类的峰高相同或相近 ,但主成分峰高的比值不同。结论 :可利用主成分的峰高或峰面积比值及峰高峰面积值控制红车轴草及其制剂的质量。

红车轴草提取物中异黄酮定量方法的研究

目的 :对红车轴草提取物中异黄酮含量测定方法进行研究。方法 :反向高效液相色谱法进行含量测定 ,C18反相柱 ,MeOH CH3CN 0 .1%H3PO4 为流动相 ,检测波长 2 60nm。结果 :红车轴草提取物水解后的 4种苷元组分获良好分离 ,进样量 0 .0 2 4～ 0 .3 3 6μg与峰面积均成线性关系 ,异黄酮总含量测定结果重现性RSD =1.1%。结论 :为红车轴草提取物及制品提供一种简便、可靠。

铜胁迫下链格孢菌对白车轴草生理生化特性的影响

通过盆栽实验研究了Cu胁迫下接种链格孢菌（Alternaria tenuis Nees）对源自Cu污染区（记作种群Ⅰ）和非污染区（记作种群Ⅱ）白车轴草（Trifolium repens L）生理生化特性的影响.结果表明,两种群白车轴草在Cu处理后接种链格孢菌,0～1500mg·kg^-1时叶片电导率、MDA含量均高于未接种组,且随浓度增加而升高,2000mg·kg^-1时电导率低于未接种组,MDA含量降低但仍高于未接种组.两种群接种后叶绿素、蛋白质含量较未接种组下降,且随Cu浓度增加而降低,其中叶绿素含量与浓度呈显著或极显著负相关,种群Ⅰ和种群Ⅱ相关系数分别为-0.954^＊和-0.961^＊＊.链格孢菌使白车轴草SOD活性低浓度（0和500mg·kg^-1）高于未接种组,高浓度则降低.接种后POD活性随Cu浓度增加先增后减,500mg·kg^-1浓度下接种组POD高于未接种组,而在其他浓度下,显著低于未接种组.0～1000mg·kg^-1时接种组CAT活性高于未接种组,随土壤Cu浓度增加先增后减.3种保护酶对胁迫的敏感性为POD＞SOD＞CAT.高浓度Cu（2000 mg·kg^-1）胁迫下,白车轴草保护酶系统的受损打破了体内活性氧产生与清除之间的正常平衡状态,积累了过量的活性氧,膜脂过氧化程度加重,对白车轴草产生毒害,且这种毒害在接种链格孢菌后表现更为严重.两种群白车轴草相比,种群Ⅰ植物在土壤Cu＜2000mg·kg^-1时可生存,感染链格孢菌后生长土壤Cu浓度应控制在1500mg·kg^-1以内;种群Ⅱ在Cu胁迫浓度不超过1500mg·kg^-1,链格孢菌和Cu双重胁迫时不超过1000mg·kg^-1可生长.种群Ⅰ在Cu处理、链格孢菌单一或双重胁迫下表现的抗逆性较Ⅱ强.

镉胁迫对白车轴草生长、镉含量及养分分配的影响

为了解镉(Cd)胁迫对白车轴草(Tritolium repens L.)生长发育以及养分的吸收、累积与分配的影响,采用盆栽试验,研究了不同浓度镉处理下白车轴草幼苗的生长、生物量及碳(C)、氮(N)、磷(P)和钾(K)的积累与分配特征。结果表明:随镉胁迫浓度增加,植株幼苗叶面积、主根长、侧根数、侧根长及地上部高先升高后降低,叶柄长明显降低;而根、茎、叶中镉含量逐渐升高,且根系大于茎叶。同时,植物各器官生物量生产及C、N、P和K积累量均表现出随镉添加量的增加而先升高后降低,高浓度镉胁迫处理(50.00、100.00和200.00 mg·kg-1)明显抑制植株生物量生产以及C、N、P和K的积累,显著改变了生物量及其C、N、P和K积累量的分配格局,但低浓度镉处理(12.50mg·kg-1)却无明显影响。一定浓度的镉胁迫处理(12.50和25.00 mg·kg-1)降低植株N、P、K的利用效率,但高浓度镉处理(200.00 mg·kg-1)则提高植株N、P、K的利用效率。本研究为城市园林绿化及镉污染土壤的修复提供了应用潜力,同时也为牧草的安全评估提供了科学借鉴。

红车轴草化学成分的研究

目的对红车轴草(Trifolium pratense L.)的化学成分进行研究。方法应用硅胶柱层析和Sephadex LH-20凝胶柱层析对化合物进行分离,通过理化和波谱分析方法鉴定其结构。结果从红车轴草中分离得到8个化合物,分别鉴定为十八烷醇(Ⅰ)、5-羟基-7,4′-二甲氧基异黄酮(Ⅱ)、鹰嘴豆芽素A(Ⅲ)、樱黄素(Ⅳ)、芒柄花素(Ⅴ)、染料木素(Ⅵ)、芒柄花苷(Ⅶ)和大豆苷元(Ⅷ)。结论化合物Ⅰ和Ⅱ为首次从该植物中得到。

红车轴草异黄酮对去卵巢大鼠骨质疏松防治作用的实验研究

目的探讨红车轴草异黄酮对去卵巢大鼠引起的大鼠骨质疏松症的防治作用。方法采用切除大鼠双侧卵巢方法建立大鼠骨质疏松模型,以尼尔雌醇作阳性对照,采用放射免疫法检测实验大鼠血清雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、骨钙素(BGP)、白细胞介素6(IL6),用生物化学法检测大鼠血浆抗酒石酸盐酸磷酸酶(TRAP)。同时用定量超声检测大鼠股骨近端超声振幅衰减(BUA)及大鼠股骨骨干重和骨灰重。结果红车轴草总异黄酮可显著提高E2水平,降低LH及BGP、TRAP和IL6活性,显著提高实验大鼠股骨干重、灰重。同时大鼠股骨近端BUA明显升高。结论红车轴草异黄酮具有提高雌激素作用,可有效抑制骨吸收,降低骨转化率,加强成骨细胞活性,增加骨密度。对去卵巢引起的大鼠骨质疏松症具有明显的防治作用。

高效液相色谱-电喷雾质谱法测定红车轴草中异黄酮类化合物

采用高效液相色谱与电喷雾质谱联用技术研究了红车轴草中的异黄酮类化合物。实验采用反相C18色谱柱,二元线性梯度洗脱,分离并检测了红车轴草中的14种异黄酮类化合物;通过与电喷雾质谱联用获得了相应化合物的分子量信息,并利用质谱的源内碰撞诱导解离技术鉴定这些化合物的可能结构分别为:大豆苷、野靛苷-7-O-β-D-葡萄糖苷、芒柄花苷、德鸢尾素-4′-O-β-D-葡萄糖苷、大豆苷元、印度黄檀苷、樱黄素-4′-O-β-D-葡萄糖苷、染料木素、红车轴草素、芒柄花素、樱黄素、鹰嘴豆芽素A、野靛苷和德鸢尾素。

红车轴草总黄酮体外清除自由基作用的研究

通过Fenton反应产生·OH,邻苯三酚自氧化产生O2·-模型,研究了红车轴草总黄酮体外清除自由基的作用。结果显示红车轴草总黄酮在6.25～200mg/mL范围内具有清除Fenton反应产生·OH的作用,在6.25～100mg/mL浓度范围内对邻苯三酚自氧化产生的O2·-具有清除作用,二者均呈明显的量效关系,对·OH和O2·-半数清除浓度分别为44.06和54.57mg/mL。