氧化苦参碱对转化生长因子-β_1促肝星状细胞活化及跨膜信号转导影响

目的 观察低浓度氧化苦参碱对大鼠肝星状细胞 (HSC)培养活化和转化生长因子 - β1 ,(TGF - β1 )促活化作用影响 ,并探讨该作用与TGF - β1 受体后信号通路的关系。方法 原代分离培养 2dHSC ,MTT法检测低浓度氧化苦参碱 (0 .2 5～ 8mg/L)对HSC细胞毒作用 (作用 12h)和增殖影响 (作用 48h) ,或给予TGF- β1 (5ng/ml)和 /(或 )氧化苦参碱 (2mg/L)干预 ,相差显微镜观察HSC形态变化 ,分别以RT PCR或Westernblot法检测TGF - β1 及其Ⅰ、Ⅱ型受体、Smad 2 /3、Smad 7以及α 平滑肌肌动蛋白 (α SMA)mRNA和 /(或 )蛋白表达。结果 氧化苦参碱 (0 .2 5～ 8mg/L)对HSC无明显细胞毒作用 ,大于 8mg/L能抑制HSC增殖。氧化苦参碱 (2mg/L)抑制TGF β1 诱导HSC激活时的α SMA表达和形态转化 ,伴随TGF β1 受体mRNA表达升高 ,Smad 7mRNA表达上调及TGF - β1 mRNA表达下降 (与单纯TGF - β1 处理组相比 ,分别上升 1.2 5、0 .87倍或下降 1.92倍 ,P均 <0 .0 5 ) ,但不影响TGF β1 Ⅱ型受体和Smad 3mR NA表达。Westernblot检测Smad 2 /3、Smad 7蛋白表达 ,与RT PCR结果相似。氧化苦参碱对单纯培养激活的HSC有类似作用。结论 低浓度氧化苦参碱 (2mg/L)上调Smad 7表达并抑制TGF β1 表达、上调TGF β1 Ⅰ型受体。

转化生长因子-β1／TGFβ激活激酶信号表达变化在心房颤动心肌纤维化中的作用

目的探讨心房颤动的发生过程中是否存在心房肌的纤维化，以及TGF-β1／TAK1信号系统在心房颤动心肌纤维化中的作用。方法20只新西兰大白兔随机分成两组：假手术组（GroupS）和快速起搏组（GroupP）。给予兔左心房心外膜电起搏，以900次／min高频起搏，建立房颤模型。起搏前后及房颤后记录心电图。取兔心房组织，观察细胞结构变化（HE染色），比较左房重量指数及胶原蛋白的表达水平（Masson染色），免疫组化、Westen—blot检测TGF-61、TAK1蛋白表达水平，PCR检测TGF-β1mRNA、TAKImRNA的表达水平。结果①起搏兔的左房重量、左房重量指数明显高于GroupS。Masson染色显示起搏兔的左心房心肌间质胶原显著增多。②起搏组的TGF—β1、TAK1的表达明显高于GroupS。③在起搏组中，代表心肌纤维化的心肌间质胶原及LAWI与TGF-β1、TAK1的表达密切相关（P〈0．05），其中与TGF—β1呈正相关（R2=0．72，P〈0．05），与TAKI亦呈正相关（R^2=0．762，P〈0．05）。结论心房颤动在发生早期即存在心房组织的纤维化。快速起搏诱导的心房颤动早期，TGF-β1／TAK1通路信号mRNA及蛋白表达水平明显升高，TGF-β1／TAK1通路信号可能是心房纤维化信号途径之一，可能成为房颤治疗的新靶点。

左归补髓生血汤治疗小儿急性白血病白细胞减少症的疗效及对血清可溶性细胞间黏附分子-1和转化生长因子-β_1的影响

目的:探讨左归补髓生血汤治疗小儿急性白血病白细胞减少症的疗效及对血清可溶性细胞间黏附分子-1(s ICAM-1)、转化生长因子-β_1(TGF-β_1)的影响。方法:选取2015年1月至2017年1月进行化疗的急性白血病患儿120例,均存在化疗后白细胞减少症,将其随机分为对照组及观察组,各60例。2组患儿均给予鲨肝醇片50 mg/次,维生素B4片,20 mg/次,2次/d,观察组给予左归补髓生血汤治疗,2组均连续服用14 d。于治疗前及治疗后3 d、7 d、14 d、21 d检测并记录2组患儿白细胞及中性粒细胞计数,统计2组临床疗效及治疗期间患儿感染情况,检测并比较2组治疗前后血清s ICAM-1、TGF-β_1水平的变化。结果:观察组临床总有效率为83.33%,显著高于对照组的53.33%(P<0.05)。治疗期间观察组发生感染13例,平均抗生素使用时间(7.01±2.34)d;对照组发生感染28例,平均抗生素使用时间(13.42±4.67)d;2组间感染发生率及抗生素使用时间差异有统计学意义(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后3~21 d 2组患儿白细胞及中性粒细胞计数呈逐渐升高趋势(P<0.05),且治疗后观察组白细胞及中性粒细胞计数均高于对照组(P<0.05或P<0.05)。与治疗前比较,治疗后2组患儿血清中s ICAM-1明显降低,且观察组低于对照组(P<0.05),TGF-β_1水平明显升高,且观察组高于对照组(P<0.05)。结论:左归补髓生血汤联合常规方法治疗小儿急性白血病化疗后白细胞减少症效果显著,可有效增加外周血白细胞及中性粒细胞数量,可能与其能够调节血清中s ICAM-1、TGF-β_1水平有关。

芪倍合剂对UC小鼠模型TGF-β1/Smad2信号通路及Th17/Treg平衡、炎性细胞因子表达的影响

目的探究芪倍合剂对溃疡性结肠炎(UC)小鼠模型转化生长因子(TGF)-β1/Smad2信号通路及T辅助细胞(Th)17/调节T细胞(Treg)平衡、炎性细胞因子表达的影响。方法30只小鼠随机分为对照组、UC组和UC+芪倍合剂组,每组10只。UC组和UC+芪倍合剂组通过葡聚糖硫酸钠构建UC模型,UC+芪倍合剂组通过芪倍合剂灌肠。比较两组结肠黏膜病变情况、外周血炎性细胞因子Th17、Treg和TGF-β1/Smad2信号通路水平。结果与对照组比较,UC组干预后每日疾病活动指数(DAI)评分、结肠病变程度、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1、Th17、Treg、Th17/Treg及结肠黏膜和淋巴细胞中的TGF-β1/Smad2通路水平显著升高,IL-4水平显著降低(P<0.05)。UC+芪倍合剂组干预后DAI评分、结肠病变程度、TNF-α、IL-1、Th17、Treg、Th17/Treg及结肠黏膜和淋巴细胞中TGF-β1/Smad2通路水平显著低于UC组,IL-4水平显著高于UC组(P<0.05)。结论芪倍合剂可以通过抑制结肠黏膜和淋巴细胞中TGF-β1/Smad2通路抑制炎性反应和调节Treg/Th17细胞平衡,从而起到缓解UC的作用。

转化生子因子β_1对培养心脏成纤维细胞α-SMA及Cx43表达的影响

目的:本研究拟观察转化生子因子β1(TGFβ1)诱导乳鼠CFs向MFs分化中α-SMA及Cx43表达的影响。方法:酶解-差速贴壁分离法分离培养乳鼠CFs,将10ng/mL的TGFβ1诱导培养第1天细胞;细胞免疫荧光及共聚焦纤维观察α-SMA及Cx43表达;以免疫印迹和RT-PCR分别半定量比较两者α-SMA及Cx43蛋白和mRNA表达。结果:分离培养2d的原代CFs细胞极少表达α-SMA及Cx43蛋白及其mRNA;经TGFβ1诱导24h后α-SMA及Cx43蛋白及其mRNA表达显著增高(P<0.01)。结论:TGFβ1可诱导乳鼠CFs向MFs分化,导致α-SMA及Cx43蛋白及其mRNA表达显著增高。

中药生精汤对雄性不育大鼠睾丸转化生长因子-β_1表达的影响

目的观察中药生精汤对雄性不育大鼠睾丸转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、小剂量组、大剂量组,采用腺嘌呤制作雄性大鼠不育模型,小、大剂量组给予生精汤灌胃。造模后30 d处死大鼠,观察睾丸组织形态学变化;采用免疫组织化学法及图像分析系统检测睾丸内TGF-β1的平均光密度;同时测定大鼠体质量和睾丸质量。结果大剂量组与模型组比较睾丸系数明显增加(P<0.05);TGF-β1阳性表达主要见于早期精母细胞、圆形精子细胞以及支持细胞,生精汤大剂量组TGF-β1阳性的表达与模型组比较明显降低(P<0.01)。结论生精汤通过下调TGF-β1的表达实现对睾丸生精功能的调节,对腺嘌呤所致的雄性大鼠不育有一定的治疗效果。

益气活血通络汤与低分子肝素抗凝对大鼠骨折愈合、血液流变学及TGF-β1表达的影响

目的探究益气活血通络汤与低分子肝素抗凝对大鼠骨折愈合、血液流变学及转化生长因子(TGF)-β1表达的影响。方法选取50只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(A)组、模型(B)组、益气活血通络汤(C)组、低分子肝素(D)组、益气活血通络汤联合低分子肝素(E)组,每组10只,对B、C、D、E组采用骨钳截断加克氏针髓内固定法建立胫骨骨折模型,A组不建立该模型,建模成功后,C组4 g/kg益气活血通络汤灌胃,D组500 U/kg低分子肝素灌胃,E组给予益气活血通络汤联合低分子肝素治疗,A组、B组同期灌胃同体积生理盐水,X线摄片检测骨折愈合程度,苏木素-伊红(HE)染色法检测骨组织病理形态,全自动血流变仪检测血液流变学相关指标,免疫组化法检测骨组织中TGF-β1蛋白表达。结果与A组相比,B组骨折线清晰,且没有形成明显骨痂;与B组相比,C、D、E组骨愈合速度明显加快,C、D组骨折线仍可见但折断端边缘趋于模糊,且形成明显骨痂,而E组骨折基本消失,髓腔再通,外骨痂减少,可见大部分骨痂长入骨折线,已有骨外膜形成并可见骨连接形成;A组骨组织形态完整,骨小梁生长旺盛,排列规则有序,且无坏死区域;B组骨组织形态紊乱,出现部分坏死区域,并可见少量纤维组织;C、D组骨痂组织中可见大量肉芽组织、纤维组织长入,成软骨细胞增生活跃,并有网状交织的骨小梁;E组骨组织形态已趋于完整,排列有序且部分已被正常组织替代,骨小梁排列相对规则,可见部分成熟板状骨形成;与A组比较,B、C、D、E组软骨比例、胫骨组织TGF-β1蛋白表达显著降低,纤维性骨痂比例、全血低切黏度、中切黏度、高切黏度及血浆黏度显著升高(P<0.05);与B组比较,C、D、E组软骨比例、胫骨组织TGF-β1蛋白表达显著升高,纤维性骨痂比例、全血低切黏度、中切黏度、高切黏度及血浆黏度显著降低(P<0.05);与C、D组相比,E组上述指标变化显著(P<0.05),而各组骨性骨痂相比无明显差异(P>0.05)。结论益气活血通络汤联合低分子肝素抗凝具有显著疗效,其可显著促进骨折愈合,改善血液流变学,并促进TGF-β1表达。

矽肺患者血液中转化生长因子-β_1表达水平的研究

为探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)与矽肺的关系,采集16例矽肺患者和15例正常人的静脉血8ml,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血液中TGF-β1的含量。提取外周血淋巴细胞中的总RNA以及血清中的总蛋白质,分别用RT-PCR和Western-blot检测方法检验TGF-β1的mRNA和蛋白质表达水平。结果显示,矽肺患者血清TGF-β1为(203.14±32.38)μg/ml,正常人血清TGF-β1为(42.66±15.50)μg/ml,两者差异有统计学意义(t=19.51,P<0.01);矽肺患者血液中TGF-β1水平明显高于正常人。TGF-β1可作为矽肺患者的血清学检测指标。

糖尿病大鼠肾脏蛋白聚糖Ⅱ和转化生长因子-β_1mRNA的动态变化

目的了解糖尿病大鼠肾皮质中蛋白聚糖Ⅱ(PGⅡ)mRNA和转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA随时间的变化及相互关系。方法用链脲佐菌素(STZ)造成大鼠糖尿病模型,在造模成功后第3、7、14、30、60、90天分别用免疫组化法检测糖尿病组和对照组肾脏Ⅳ型胶原分布,半定量RT-PCR法检测肾皮质PGⅡmRNA和TGF-β1mRNA的含量。结果与对照组相比,糖尿病组肾脏Ⅳ型胶原含量增加(除第3、7天,其余时点均P<0.05),TGF-β1mRNA从第7天起升高(P<0.05),PGⅡmRNA后期升高(第60天P<0.05鸦第90天P=0.01)。PGⅡmRNA和TGF-β1mRNA呈正相关关系(r=0.7熏P<0.01)。结论STZ诱导的糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1mRNA和PGⅡmRNA先后升高,TGF-β1mRNA可能是引起PGⅡmRNA升高的原因之一。

益气养阴化浊通络方对糖尿病肾病大鼠转化生长因子-β1/Smads信号通路的影响

目的观察益气养阴化浊通络方对糖尿病肾病(DN)大鼠转化生长因子(TGF)-β1/Smads信号通路的影响,探讨其对DN的作用机制及治疗效果。方法选择50只健康雄性SD大鼠,随机分为正常组10只,造模组40只。造模组大鼠接受单侧肾切除手术2 w后,给予高糖高脂饮食4 w,再加用小剂量链脲佐菌素(30 mg/kg)腹腔注射,造模组在DN模型成模后,随机分为模型组、中药组、西药组。中药组给予益气养阴化浊通络方煎剂,西药组给予贝那普利,治疗8 w后处死大鼠。测定血糖、24 h尿蛋白定量、血尿素氮及肌酐的变化,同时检测肾组织TGF-β1、p-Smad2/3、Smad7蛋白的表达。结果与模型组相比,中药组血糖、24 h尿蛋白量、血尿素氮及肌酐均显著降低(P<0.01),TGF-β1、p-Smad2/3蛋白表达下调,Smad7蛋白表达增强(P<0.05,P<0.01)。结论在DN大鼠模型中,益气养阴化浊通络方能够改善肾功能,保护肾组织,调节TGF-β1/Smad信号通路是其作用机制之一。

转化生长因子β_1/Smads通路在急性心肌梗死后心肌重塑中的作用及祛瘀生新法的干预研究

目的通过研究祛瘀生新中药对转化生长因子(TGF)-β1/Smads通路的影响,探讨祛瘀生新法对急性心肌梗死后心肌重塑的效应机制。方法清洁级雄性Wistar大鼠50只随机分为正常组、假手术组、模型组、中药组、西药组,每组10只。中药组大鼠术前3 d给药,1次/d。7 d后,检测外周血骨髓间充质干细胞(BMSCs)含量,实时荧光定量RT-PCR检测心肌组织TGF-β1mRNA、Smad3 mRNA、Smad7 mRNA表达,并观察心肌组织HE染色结果及免疫组化检测心肌c-kit细胞数。结果模型组较假手术组心肌组织TGF-β1mRNA、Smad3 mRNA表达均增加(P<0.05),Smad7 mRNA表达降低(P<0.05)。中药组心肌组织TGF-β1mRNA、Smad3 mRNA表达降低,Smad7 mRNA表达增加,中药组及西药组较模型组c-kit细胞数明显增多,并能减轻心肌组织的病理损伤。中药组与西药组比较,TGF-β1mRNA、Smad3 mRNA和Smad7 mRNA表达无显著性差异(P>0.05)。结论祛瘀生新法能有效抑制急性心肌梗死后心肌重塑。

补脏通络方对糖尿病大鼠肾组织Ⅳ型胶原、转化生长因子-β表达及基质金属蛋白酶-9/金属蛋白酶抑制剂-1平衡的影响

目的观察补脏通络方对糖尿病(DM)大鼠肾组织Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、转化生长因子(TGF)-β表达及基质金属蛋白酶(MMP)-9/金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1平衡的影响。方法大鼠以脂肪乳灌胃21 d后一次性尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg造模,后予补脏通络方治疗。于第8周末取左肾,测算肾重指数;SABC-FITC免疫组织化学荧光法检测肾组织Ⅳ-C、TGF-β表达;免疫印迹法分析肾组织MMP-9、TIMP-1蛋白含量。结果病理组较正常组肾重指数增加(P<0.01),各治疗组较病理组肾重指数降低(P<0.01)。病理组肾小球体积增大,系膜区扩大病变经治疗后均有不同程度改善。病理组较正常组,肾组织Ⅳ-C、TGF-β、TIMP-1表达增高(P<0.01),MMP-9表达和MMP-9/TIMP-1比值下降(P<0.01);各治疗组较病理组,肾组织Ⅳ-C、TGF-β、TIMP-1表达下降(P<0.01),MMP-9表达和MMP-9/TIMP-1比值上升(P<0.01);中、高剂量组降低TIMP-1表达,升高MMP-9/TIMP-1比值的作用优于低剂量组(P<0.01)。结论下调肾组织TGF-β表达,调节MMP-9/TIMP-1平衡,促进胶原降解,可能是补脏通络方保护DM肾脏作用的机制之一。

霉酚酸酯对阿霉素肾病大鼠血管内皮生长因子和转化生长因子-β1表达的影响

目的观察霉酚酸酯(MMF)对阿霉素肾病大鼠血管内皮生长因子(VEGF)与转化生长因子(TGF)-β1表达的影响。方法应用阿霉素制造肾病综合征(NS)大鼠模型,将实验动物随机分为正常对照组、NS模型组、低剂量MMF干预组和高剂量MMF干预组。考马斯亮蓝方法检测24 h各组尿蛋白水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测肾组织匀浆中VEGF、TGF-β1的含量。结果干预前NS模型组、低剂量MMF干预组和高剂量MMF干预组尿蛋白含量、肾组织中VEGF、TGF-β1的表达与正常对照组差异明显(P<0.05);MMF灌胃4、6、8 w后,低、高剂量MMF干预组尿蛋白含量、肾组织中VEGF、TGF-β1的表达较正常对照组、NS模型组均显著降低(P<0.05);高剂量MMF干预组尿蛋白含量、肾组织中VEGF、TGF-β1的表达与低剂量MMF干预组无明显差异。结论 MMF对大鼠NS的拮抗作用可能是通过下调TGF-β1和VEGF在肾组织中表达来实现的。

老年鼻咽癌患者血浆Ras相关区域家族1A基因、血清转化生长因子-β1及乳铁蛋白的表达及相关性

目的探讨血浆Ras相关区域家族(RASSF)1A基因、转化生长因子(TGF)-β1及乳铁蛋白(LTF)在老年鼻咽癌(NPC)患者及其不同临床病理特征中的表达及相关性。方法 NPC患者50例为NPC组,鼻咽炎患者50例为鼻咽炎组,健康志愿者50例为正常对照组。3组采用定量甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)(RQ-MSP)检测RASSF1A基因、血清TGF-β1及LTF的表达情况,并分析相关性。结果 NPC组血浆中RASSF1A、TGF-β1及LTF的表达与鼻咽炎组、正常对照组差异有统计学意义(P<0.05)。NPC组血浆RASSF1A、TGF-β1及LTF水平:Ⅰ期与其他期差异显著(P<0.01);Ⅲ期与Ⅳa期、Ⅳb期差异有统计学意义(P<0.01);未分化癌与鳞癌、腺癌差异显著(P<0.01);无淋巴结转移与有淋巴结转移差异有统计学意义(P<0.01),颈部和远处淋巴结转移差异有统计学意义(P<0.05)。结论 RASSF1A、TGF-β1及LTF在老年鼻咽癌患者血清中表达呈上调或下降趋势,与鼻咽癌分期、病理类型及淋巴结转移相关。

转化生长因子-β1/Smads通路在心血管疾病中作用的研究进展

目前,我国心血管疾病患者2.9亿,其中高血压2.7亿、脑卒中至少700万、心肌梗死250万、心力衰竭450万,平均每5个成年人中就有1人患有心血管病〔1〕。心血管疾病的发病呈逐年上升趋势。转化生长因子（TGF）-β是具有广泛生物学效应的一类生长因子,主要通过TGF-β1/Smads通路发挥效应。

滇白珠水提物对慢性阻塞性肺疾病大鼠转化生长因子-β1、白细胞介素-8的影响

目的利用滇白珠水提物对慢性阻塞性肺疾病(COPD)实验性大鼠进行干预,检测其转化生长因子(TGF)-β1、白细胞介素(IL)-8的变化并对其机制进行探讨。方法健康SD雄性大鼠36只,随机分为正常对照组、模型组和用药组,每组12只。模型组大鼠用药后观察各组大鼠肺组织的病理改变,免疫组化法观察肺组织中TGF-β1的表达及酶联免疫试验观察肺泡灌洗液和血清中的TGF-β1、IL-8的表达情况。结果模型组TGF-β1的表达为(0.732±0.083),与正常对照组(0.168±0.018)比较差异显著(P<0.01);用药组支气管灌洗液中TGF-β1、IL-8的活性分别为(61.48±6.89)ng/ml,(148.69±21.47)ng/ml,与模型组比较差异显著。用药组血清中TGF-β1、IL-8的活性分别为(63.48±7.33)ng/ml,(0.69±0.09)ng/ml,与模型组比较差异显著(P<0.01)。结论滇白珠对COPD治疗有很好的指导意义。

ADAMTS-1对小鼠成纤维细胞转化生长因子及其下游信号通路PI3K/AKT的影响

目的探索含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)对体外小鼠成纤维细胞(NIH3T3)转化生子因子(TGF-β1)及其下游信号通路磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)的影响。方法体外培养小鼠成纤维细胞,以ADAMTS-1为处理因素,按照不同浓度,将NIH3T3分为空白组、低浓度组(1 nM)、中浓度组(10 nM)、高浓度组(20 nM),通过RT-PCR检测细胞TGF-β1mRNA的表达情况,利用Western-blot观察细胞TGF-β1及磷酸化蛋白激酶B(pAKT)的蛋白表达情况。结果根据RTPCR图像显示,与空白组相比,其他各组TGF-β1mRNA的表达均下降,且随着浓度的增高,呈逐渐降低趋势(P<0.05)。根据Western-blot图像显示,与对照组相比,其他各组TGF-β1、pAKT的蛋白表达均下降,且随着浓度的增高,呈逐渐降低趋势(P<0.05)。结论 ADAMTS-1可能下调TGF-β1及其下游PI3K/AKT信号通路。

血清转化生长因子-β1水平与短暂性脑缺血发作患者颈动脉粥样硬化的关系

目的:探讨短暂性脑缺血发作(transient ischemic attack,TIA)患者血清转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)水平与其颈动脉粥样硬化的关系。方法:随机选取56例TIA患者为TIA组,选择同期健康体检者为对照组;比较两组对象颈动脉内中膜厚度(intima-media thicknesss,IMT),观察颈动脉粥样斑块形成情况并判断斑块性质;采用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清TGF-β1水平。结果:TIA组患者颈动脉IMT为(1.21±0.19)mm,高于对照组的(0.91±0.22)mm(P<0.05);TIA组患者的斑块检出率和不稳定斑块检出率均高于对照组(P<0.05);TIA患者中,稳定斑块组患者TGF-β1水平(3175.15±452.09)pg/mL高于不稳定斑块组(2845.61±445.91)pg/mL(P<0.05)。结论:检测血清TGF-β1水平,对于了解TIA患者颈动脉粥样斑块的稳定性、判断TIA的预后具有一定的临床意义。

NLRP6诱导胶质瘤细胞生物活性及对TGF-β1/Smad蛋白的作用

目的探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体(NLR)P6诱导胶质瘤细胞生物活性及对转化生长因子(TGF)-β1/Smad蛋白的作用。方法将胶质瘤细胞U251分为正常组(U251细胞)、NC组(U251细胞+NC-空转)和干预组(U251细胞+NLRP6-shRNA),四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测24、48和72 h U251细胞增殖,Transwell小室法、流式细胞法、Western印迹和聚合酶链反应(PCR)法分别检测24 h后U251细胞迁移数目、凋亡率、TGF-β1/Smad蛋白和mRNA表达。结果与正常组比较,NC组及干预组细胞侵袭数目、TGF-β1 mRNA及蛋白表达水平显著降低;细胞凋亡率、Smad4 mRNA及蛋白表达水平显著升高(均P<0.05)。与NC组比较,干预组细胞侵袭数目、TGF-β1 mRNA及蛋白表达水平显著降低;细胞凋亡率、Smad4 mRNA及蛋白水平显著升高(均P<0.05)。结论沉默NLRP6能够降低胶质瘤细胞U251细胞活性,其作用机制可能与抑制TGF-β1水平及激活Smad4水平相关。

参附注射液对多柔比星致心肌病大鼠心肌组织转化生长因子-β1和Smad3蛋白表达的影响

目的研究参附注射液对多柔比星致心肌病大鼠心肌组织转化生长因子(TGF)-β1和Smad3表达的影响。方法90只大鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组(卡托普利100 mg·kg^(-1)·d^(-1))和低、高剂量(1、4 ml·kg^(-1)·d^(-1))参附组,每组18只。正常对照组仅给予等体积生理盐水,余各组于实验开始后每周腹腔注射多柔比星(4 mg/kg),累计剂量达24 mg/kg。参附组于多柔比星注射6 w后,按低、高剂量组分别腹腔注射参附注射液1、4 ml·kg^(-1)·d^(-1),共2 w;卡托普利组于实验开始前1 w灌胃。实验结束后评价大鼠心功能;光镜观察心肌形态学变化;酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠心肌组织中Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的表达;Western印迹法测定TGF-β1/Smad3蛋白表达。结果与模型组相比,参附组和阳性对照组心功能明显好转,心肌病理学形态有了很大改善,Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达明显减少(P<0.01);TGF-β1蛋白、Smad3蛋白表达明显下降(P<0.01)。结论参附注射液能够抑制心肌病大鼠心肌纤维化,改善心功能,其机制可能与调节TGF-β1/Smad3信号通路各因子水平的表达有关。