加味消渴康对糖尿病肾病大鼠丝裂原活化蛋白激酶P38及转化生长因子-β1表达的影响

目的:探讨加味消渴康对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织丝裂原活化蛋白激酶P38(P38MAPK)及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:采用单侧肾切除加链脲佐菌素诱导的DN模型,分为正常组、模型组、中药组和西药组。中药组予加味消渴康灌胃,西药组予氯沙坦灌胃,正常组及模型组每日灌服等量蒸馏水,共灌胃12周。各组大鼠于第12周末处死取出肾脏,观察肾组织病理学改变以及P38MAPK和TGF-β1的表达。结果:加味消渴康对DN大鼠肾组织病理损伤有较好的改善作用,并能降低肾组织P38MAPK及TGF-β1的表达。结论:加味消渴康对DN有一定的治疗作用。

ERK和P38MAPK在转化生长因子-β_1诱导肾系膜细胞合成纤维连接蛋白中的作用

目的:研究细胞外信号调节激酶(ERK)和P38丝裂原活化的蛋白激酶(P38MAPK)在转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导肾系膜细胞合成纤维连接蛋白中所介导的作用。方法:用Westernblot检测TGF-β1诱导的肾系膜细胞纤维连接蛋白合成以及ERK和P38MAPK的磷酸化。用PD98059和SB203580分别来抑制ERK和P38MAPK的活性。结果:加入TGF-β1后,系膜细胞ERK、P38MAPK磷酸化水平逐渐增加,5小时达高峰。TGF-β1显著增加系膜细胞纤维连接蛋白的表达。用PD98059预处理能增加TGF-β1引起的纤维连接蛋白合成,且具有浓度依赖性。SB203580预处理能降低TGF-β1引起的纤维连接蛋白表达,也具有浓度依赖性。结论:ERK活化可能负性调控TGF-β1引起的纤维连接蛋白表达,而P38MAPK活化对其则可能起正性调控作用。

p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路在糖尿病性视网膜病变中的作用研究进展

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein ki-nase,MAPK)通路是细胞将信号从细胞膜传递到核的主要通路,它是细胞促增殖和传递应激信号的关键激酶。该家族包括细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)、c-Jun氨基端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)、p38MAPK等亚族,其中p38MAPK在糖尿病性视网膜病变(di-abetic retinopathy,DR)的形成及发展中起着非常重要的作用。最近的研究显示,糖尿病状态下的高糖——蛋白激酶C(pro-tein kinaseC,PKC)通路、糖基化终产物、氧化应激、生长因子、渗透压、牵张刺激等都可激活MAPK家族,通过调节转化生长因子β、基质金属蛋白酶活性及葡萄糖转运体的表达等多种途径影响纤维连接蛋白、Ⅳ型胶原的生成,参与DR的发生,影响DR的进程。通过深入研究p38MAPK在DR中的作用,将有助于阐述DR的发病机制,阻断MAPK通路将可能成为治疗DR的新策略、新方法。

柴胡疏肝散对肝纤维化大鼠TGF-β1/p38MAPK信号通路的作用及相关性研究

目的:观察柴胡疏肝散对TGF-β1/p38MAPK信号通路的影响,探索其抗肝纤维化的作用机制。方法:50只Wister大鼠按随机数字表法分为正常对照组、病理模型组、柴胡疏肝散高、中、低剂量组5组。除正常组外,其余各组均用腹腔注射CCl4制备肝纤维化模型。各治疗组于第6周给药至第10周结束。免疫组化S-P法检测肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶MMP-9和金属蛋白酶组织抑制因子TIMP-1蛋白的表达。结果:与模型组比较,柴胡疏肝散中剂量组TGF-β1蛋白、p-p38MAPK和α-SMA蛋白表达显著减弱,MMP-9蛋白表达显著增强,TIMP-1蛋白表达显著减弱。结论:柴胡疏肝散有明显的抗肝纤维化作用。其机制可能与柴胡疏肝散经TGF-β/p38MAPK信号传导通路抑制肝星状细胞(HSC)活化,使HSC低表达TIMP-1、高表达MMP-9从而促进基质降解有关。

复苏后大鼠转化生长因子-β1和p38丝裂原活化蛋白激酶变化及治疗

目的 探讨窒息至心脏骤停大鼠复苏后心脑TGF—β1和p38MAPK的变化及血必净对其影响。方法采用呼气末夹闭气管室息法建立大鼠心脏骤停模型，并心肺复苏成功后生存24h，将50只健康Wislar大鼠随机（随机数字法）分为5组，分别为：模型组，正常对照组，小剂量血必净组，中剂量血必净组，大剂量血必净组。复苏24h后处死大鼠，取心、脑组织标本，电镜下观察心、脑组织的病理改变。采用酶联免疫吸附法（EusA）检测心、脑组织中的TGF-β1和p38MAPK含量变化。结果心、脑组织病理观察显示，与对照组相比其他组心脑细胞超微结构出现损伤性改变，其中模型组损伤最承，大剂量血必净组损伤性改变轻微；心、脑中TGV-β1和p38MAPK含量变化，与对照组相比模型组心、脑TGF-β1和p38MAPK含量升高明显，与模型组相比血必净治疗组心、脑TGF-β1含量升高更明显和P38MAPK含量下降更明显，治疗组中，大剂量较小剂量TGF-1含量升高更明显和p38MAPK含量下降更为明显。结论心跳骤停复苏后大鼠心、脑组织内TGF-1和p38MAPK含量增多，血必净可明显调节心、脑组织中的TGF-β1和p38MAPK含量，而且存在明显量一效关系，从而缓解心跳骤停大鼠复苏中缺氧及再灌注后炎性因子所带来的损伤。

肾安提取液对糖尿病小鼠肾脏TGF-β1和p38MAPK表达的影响

目的探讨肾安提取液对链脲佐菌素诱导(STZ)的糖尿病小鼠肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)和p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达的影响。方法 STZ诱导的糖尿病小鼠模型,随机分为模型组、厄贝沙坦组[厄贝沙坦10mg/(kg.d)]、肾安提取液组[肾安提取液9.088 mg/(kg.d)],另设正常对照组,疗程4周。RT-PCR检测肾脏TGF-β1和p38MAPK mRNA的表达;免疫化学法检测肾脏磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)和纤连蛋白(FN)表达;并检测血糖、24 h尿蛋白定量、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、肾质量指数、肾小球硬化指数、肾小球基底膜(GBM)厚度。结果肾安组及厄贝沙坦组肾脏TGF-β1和p38 MAPK mRNA表达较模型组明显降低(P<0.01),肾脏p-p38MAPK和FN的表达较模型组明显减少(P<0.01);24h尿蛋白定量、BUN、Scr、肾质量指数、肾小球硬化指数、GBM厚度均较模型组明显改善(P<0.01);肾安组及厄贝沙坦组间上述指标无显著性差异(P>0.05);模型组、厄贝沙坦组及肾安提取液组间血糖差异无统计学意义(P>0.05)。结论肾安提取液可延缓糖尿病肾病的发生发展,机制可能与抑制TGF-β1和p38MAPK的表达有关。

抑制P2X7受体表达对高糖诱导的肾间质成纤维细胞TGF-β1/p38MAPK信号通路的影响

目的探究抑制P2X7受体(R)表达对高糖诱导的肾间质成纤维细胞转化生长因子(TGF)-β1/p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法设计、合成P2X7R序列并制备慢病毒悬液,分离肾间质成纤维细胞,分为空白组、高糖组、过表达组、沉默组,空白组细胞使用DMEM完全培养液+5.5 mmol/L葡萄糖培养;高糖组使用DMEM完全培养液+25 mmol/L葡萄糖培养;过表达组细胞使用2 ml按照1∶1比例混合的siNC P2X7R慢病毒悬液和DMEM培养液+25 mmol/L葡萄糖培养;沉默组细胞使用2 ml按照1∶1比例所混合的siRNA P2X7R慢病毒悬液和DMEM培养液+25 mmol/L葡萄糖培养。对比4组细胞增殖、凋亡能力、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平及TGF-β1/p38MAPK信号通路因子表达量。结果沉默组细胞增殖率低于过表达组,细胞凋亡率高于过表达组,具有统计学差异(P<0.05)。沉默组MDA水平低于过表达组,SOD水平高于过表达组,具有统计学差异(P<0.05)。沉默组TGF-β1、p38MAPK、Caspase-3 mRNA表达量均低于过表达组,具有统计学差异(P<0.05)。结论抑制P2X7受体表达可经影响高糖诱导的肾间质成纤维细胞TGF-β1/p38MAPK信号通路,抑制氧化应激及增殖,促进凋亡,进而减轻肾损伤。

螺内酯对高糖培养大鼠肾小球系膜细胞P-p38MAPK和TGF-β1变化的影响

目的:研究糖尿病肾病(diabetic nephropath,DN)大鼠肾小球系膜细胞p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的表达及螺内酯对其的影响。方法:以高糖孵育大鼠肾小球系膜细胞(mesangial rell,MC)24h,用细胞免疫荧光法检测MC的磷酸化p38MAPK(P-p38MAPK)活性,并用ELISA检测转化生长因子-β1(TGF-β1)分泌状况。p38MAPK特异性抑制剂SB203580及不同浓度螺内酯预处理对其影响。结果:高糖激活p38MAPK,增加RMC的P-p38MAPK活性和TGF-β1的表达;SB203580显著抑制TGF-β1表达(P<0.01);螺内酯抑制P-p38MAPK的活化并减少TGF-β1的蛋白表达(P<0.01),并随浓度增高,抑制作用增强。结论:p38MAPK可能是糖尿病肾病发生的始动信号之一,螺内酯可能通过抑制p38MAPK磷酸化而减少TGF-β1分泌。

氯沙坦对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞TGF-β_1、p38MAPK表达的影响

目的研究氯沙坦对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞TGF-β1、p38MAPK表达的影响。方法将60只W istar大鼠随机等分为对照组、糖尿病组和氯沙坦组;给予一次腹腔注射链尿佐菌素(STZ)制造糖尿病模型,模型成功后,氯沙坦组给予氯沙坦40mg/kg.d-1灌胃,正常对照组和糖尿病组给予等量清水灌胃。第8周测定各组大鼠尿蛋白、内生肌酐清除率,处死大鼠取肾组织石蜡包埋切片,免疫组织化学法观察肾小管上皮细胞TGF-β1、p38MAPK表达并进行半定量分析。结果糖尿病大鼠尿蛋白排泄、内生肌酐清除率均显著高于对照组(P<0.01),肾间质损害明显;氯沙坦组24 h尿蛋白排泄、肾间质纤维化均较糖尿病组减轻;糖尿病组大鼠肾小管上皮细胞TGF-β1、p38MAPK阳性表达相对面积分别为0.2209±0.0405和0.1942±0.0857,与对照组比较均显著上调(P<0.01);氯沙坦组肾小管上皮细胞TGF-β1、p38MAPK阳性表达相对面积分别为0.0873±0.0176和0.1284±0.0571,较糖尿病组显著下调(P<0.01)。结论氯沙坦能显著下调糖尿病大鼠肾小管上皮细胞TGF-β1、p38MAPK表达。

转化生长因子β1对大鼠腹膜间皮细胞IL-8表达的影响

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对大鼠腹膜间皮细胞(RPMCs)IL-8表达的影响及机制。方法 10μg.L-1 TGF-β1刺激体外培养的RPMCs,RT-PCR法检测IL-8的表达;体外转染Smad7和pcDNA3空载体至RPMCs后,观察10μg.L-1 TGF-β1刺激RPMCs对IL-8和p38表达的影响。采用p38抑制剂SB203580(10μmol.L-1)预处理RPMCs后,加入10μg.L-1 TGF-β1,观察阻断p38信号通路对IL-8表达的影响。结果与0h刺激组相比,3、6、12hTGF-β1刺激组IL-8表达明显增加(P<0.05或P<0.01),其中3h达高峰。上调表达Smad7以及SB203580均能显著抑制TGF-β1刺激RPMCs产生IL-8(P<0.01)。与正常对照组比较,TGF-β1刺激磷酸化p38(p-p38)的表达显著增加(P<0.05),与TGF-β1刺激组比较,外源性Smad7转染组p-p38的表达显著减弱(P<0.05)。结论 TGF-β1促进RPMCs IL-8的表达,其机制可能是TGF-β1通过活化p38磷酸化来实现的。

1,25-(OH)_(2)D_(3)干预糖尿病大鼠模型对P38MAPK与TGF-β1的影响及肾保护作用研究

目的研究1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)_(2)D_(3)]干预糖尿病大鼠模型对P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)与转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法选用雄性大鼠作为实验动物,采用随机数字表法将大鼠分为A、B、C 3组,每组各28只。A组给予常规饲料喂养,B、C组给予高脂高胆固醇饲料喂养6周,糖尿病大鼠模型建模成功后,A组继续常规饲料喂养,B、C组继续给予高脂高胆固醇喂养,同时B组给予1,25-(OH)_(2)D_(3)干预,共7次。处死大鼠,分别在喂养开始时(T1)、建模成功时(T2)及1,25-(OH)_(2)D_(3)干预完成后2周时(T3)取血,检测血肌酐(Scr)、尿肌酐(Ucr)、血尿素氮(BUN)和胱抑素C(Cys-C)肾功能指标水平,计算内生肌酐清除率(Ccr)。处死大鼠后取肾组织,采用免疫组化法和Western blot法检测P38MAPK与TGF-β1表达情况。分析P38MAPK与TGF-β1的关系。结果 3组大鼠T2和T3时Ccr、BUN及Cys-C水平比较有统计学意义(P<0.05),其中T2时B、C 2组Ccr、BUN及Cys-C水平显著高于A组(P<0.05),T3时B组Ccr、BUN及Cys-C显著低于C组(P<0.05)。3组大鼠肾组织P38MAPK与TGF-β1表达差异具有统计学意义(P<0.05)。3组大鼠肾组织P38MAPK与TGF-β1蛋白相对表达量差异有统计学意义(P<0.05),B组大鼠P38MAPK与TGF-β1显著低于C组(P<0.05)。3组大鼠肾组织P38MAPK与TGF-β1蛋白相对表达量呈显著正相关性(r=0.418,P<0.05)。结论 1,25-(OH)_(2)D_(3)干预能显著改善糖尿病大鼠肾功能,这可能与其抑制P38MAPK与TGF-β1表达有关。

TGF-β/Smad、p38MAPK及JNK/SAPK信号通路在糖尿病肾病发生发展中作用机制的研究进展

糖尿病肾病(DKD)是糖尿病常见的微血管并发症,由细胞因子介导的相关信号传导通路在DKD损伤过程中发挥显著作用,其中TGF-β/Smad、p38MAPK、JNK/SAPK是DKD发生发展过程中重要的信号分子。TGF-β/Smad是诱导足细胞凋亡、损伤,介导肾小球硬化及肾间质纤维化的经典信号通路。p38MAPK、JNK/SAPK信号通路可以通过氧化应激、触发炎症因子及活化炎症途径等过程,参与足细损伤,导致肾脏功能性及器质性改变,引起蛋白尿和肾小球硬化。

祛瘀护膜剂调控TGF-β_(1)/p38MAPK信号通路对反流性食管炎模型大鼠食管黏膜修复的影响

目的基于转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路探讨祛瘀护膜剂对反流性食管炎(RE)模型大鼠食管黏膜的修复作用机制。方法取60只健康雄性SPF级大鼠,随机选择10只作为正常组,其余大鼠使用“4.2 mm幽门夹+2/3胃底结扎术”建立反流性食管炎大鼠模型,造模7 d后将大鼠随机分为模型组、西药组、祛瘀护膜剂低剂量组、祛瘀护膜剂中剂量组、祛瘀护膜剂高剂量组,每组10只。祛瘀护膜剂各组给予相应剂量祛瘀护膜剂灌胃,西药组给予铝镁加混悬液灌胃,正常组和模型组给予蒸馏水+淀粉灌胃,均连续灌胃14 d。观察灌胃过程中各组大鼠进食情况、行为状态、体重变化及死亡情况,灌胃结束后采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠食管组织病理变化,运用ELISA法检测各组大鼠血清中TGF-β_(1)水平,采用Western blot法检测各组大鼠食管组织中p38MAPK、TGF-β_(1)蛋白表达情况。结果模型组和祛瘀护膜剂高剂量组各死亡1只,其余给药大鼠进食情况、行为状态均明显好于模型组,体重高于模型组。祛瘀护膜剂各组和西药组大鼠食管黏膜下层炎症明显较模型组轻,祛瘀护膜剂高剂量组黏膜上皮基本恢复。模型组大鼠血清TGF-β_(1)水平及食管组织中p38MAPK、TGF-β_(1)蛋白表达量均明显高于正常组(P均<0.05);祛瘀护膜剂各组和西药组血清TGF-β_(1)水平及食管组织中p38MAPK蛋白表达量均明显低于模型组(P均<0.05),且祛瘀护膜剂中、高剂量组均明显低于西药组和祛瘀护膜剂低剂量组(P均<0.05);祛瘀护膜剂各组和西药组食管组织中TGF-β_(1)蛋白表达量均明显高于模型组(P均<0.05),且祛瘀护膜剂低、中、高剂量组依次增高,各组间比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论祛瘀护膜剂可能通过抑制TGF-β_(1)/p38MAPK信号通路的过度激活,在食管黏膜修复的过程中调控TGF-β_(1)的表达,从而促进大鼠反流性食管炎的黏膜愈合。

丹参提取物对系膜增生性肾小球肾炎大鼠TGF-β1/p38MAPK信号通路的影响研究

目的:观察丹参提取物对系膜增生性肾小球肾炎(Mesangial proliferative glomerulonephritis,MsPGN)大鼠肾组织转化因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)的影响。方法:将46只SD大鼠分为正常组、缬沙坦组、模型组、丹参提取物组,除正常组外,其余各组大鼠建立MsPGN模型。丹参提取物组按丹参5 g/(kg·d)的剂量灌胃给药;缬沙坦组按缬沙坦0.01 g/(kg·d)的剂量溶于温水灌胃,模型组和正常组每天给予等量温水灌胃,连续灌胃12周后处死大鼠。Western blot检测大鼠肾组织TGF-β1和p38 MAPK蛋白的表达,RT-PCR检测TGF-β1和p38MAPK的mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠24 h尿蛋白水平、TGF-β1和p38MAPK蛋白相对表达量及mRNA表达均显著升高(P<0.05);与模型组比较,给药6周和12周缬沙坦组、丹参提取物组24 h尿蛋白水平显著降低(P<0.05);TGF-β1和p38MAPK蛋白相对表达量及mRNA表达均显著下降(P<0.05);与缬沙坦组比较,丹参提取物组TGF-β1和p38MAPK mRNA表达均下降(P<0.05)。结论:丹参提取物的肾保护作用可能是通过下调TGF-β1、p38MAPK蛋白和mRNA水平,抑制TGF-β1/p38MAPK信号通路激活来实现的。

硫化氢通过p38MAPK和TGF-β_1影响糖尿病小鼠心肌纤维化的研究

目的探讨硫化氢(H2S)对糖尿病小鼠心肌组织中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、转化生长因子-β_1(TGF-β_1)及Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)表达的影响,以及对糖尿病心肌纤维化的保护作用。方法 18只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组(NC组)、糖尿病对照组(ALX组)、H_2S治疗组(ALX+H_2S组),每组6只。采用四氧嘧啶(ALX)200 mg/kg腹腔注射复制糖尿病小鼠模型;模型复制成功后,NC组和ALX组每天自由饮用自来水;ALX+H_2S组自由饮用浓度为90μmol/L的NaH(HS_2S供体)溶液。8周后取材,监测空腹血糖、血脂;苏木精-伊红染色法观察心肌组织形态学变化;采用Western blot检测p-p38MAPK、TGF-β_1及CollagenⅠ蛋白表达;实时定量荧光聚合酶链反应检测p38MAPK和TGF-β_1m RNA的表达。结果与NC组比较,ALX组血糖、血脂升高(P<0.05),心肌组织胶原表达量增加,心肌间质出现明显纤维化,p-p38MAPK、TGF-β_1及CollagenⅠ蛋白表达增高(P<0.05),p38MAPK和TGF-β_1m RNA表达增加(P<0.05);糖尿病小鼠经H2S干预,血糖、血脂改善(P<0.05),心肌间质胶原纤维明显减少,p-p38MAPK、TGF-β_1及CollagenⅠ蛋白表达下降(P<0.05),p38MAPK和TGF-β_1mRNA表达减少(P<0.05)。结论 H_2S可改善糖尿病小鼠血糖、血脂及心肌纤维化,可能与调节p38MAPK和TGF-β_1的表达有关。

缬沙坦对高糖培养的肾小球系膜细胞p38MAPK传导通路的影响

目的探讨高糖状态下肾小球系膜细胞中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、其上游因子MAPK激酶3/6(MKK3/6)和下游因子cAMP反应元件结合蛋白1(CREB1)的表达以及血管紧张素受体1拮抗剂(AT1Ra)缬沙坦的影响。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分别给予高糖和缬沙坦干预,采用Western bolt检测MKK3/6、p38 MAPK和CREB1及其磷酸化蛋白的表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测系膜细胞内TGF-β1和FN mRNA的表达。放免法测定细胞上清液中纤维连接蛋白(FN)和IV型胶原的含量。MTT法检测缬沙坦在不同时间、不同药物浓度对细胞增殖状态的影响。结果①与低糖对照组相比,高糖组系膜细胞p-p38 MAPK、p-MKK3/6和p-CREB1表达明显上调,TGF-β1和FN mRNA的表达增加,FN和IV型胶原含量增加。②缬沙坦组p-p38 MAPK、p-MKK3/6和p-CREB1的表达明显下调,TGF-β1和FN mRNA的表达降低,同时FN和IV型胶原的含量减少。③MTT法检测显示不同浓度的缬沙坦对细胞增殖状态都有所抑制,并随药物浓度的增加而作用增强。结论缬沙坦抑制肾小球系膜细胞TGF-β1的表达和细胞外基质的分泌可能部分是通过影响p38 MAPK传导通路的激活来实现的。

贝那普利对C-BSA诱导膜性肾病大鼠足细胞的影响

目的 探讨贝那普利对阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)诱导的膜性肾病(MN)保护作用及其机制。方法 选取雄性SD成年大鼠24只,随机分为正常对照组、模型组、贝那普利干预组、贝那普利对照组,每组6只。按改良Border法用阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)复制MN大鼠模型,贝那普利以10 mg/kg灌胃。检测24 h尿蛋白定量、血清白蛋白(Alb)、肌酐(Scr)及尿素氮(BUN)水平,光镜观察肾脏及足细胞病理改变,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测肾小球细胞凋亡情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肾组织匀浆血管紧张素(Ang)Ⅱ含量,免疫组织化学方法检测肾小球中转化生长因子(TGF)-β1、P38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、促凋亡蛋白Bcl-2相关X蛋白(Bax)、足细胞特异蛋白肾母细胞瘤悼蛋白(WT)1的表达。结果 与模型组相比,贝那普利干预组血Alb水平明显升高,Scr明显降低(P<0.05),肾脏病理损害有所减轻,肾脏组织匀浆AngⅡ含量及肾小球凋亡指数明显减少,肾小球TGF-β1、P38MAPK、Bax表达明显减少,Bcl-2、WT-1表达明显增加(P<0.05)。结论 贝那普利可以减轻C-BSA诱导的MN大鼠肾组织病变,改善临床症状,其机制可能与抑制AngⅡ/TGF-β1/P38MAPK信号轴有关。

p38 MAPK和JNK信号通道在TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞上皮-间质转化中的意义

目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）和c-Jun氨基端激酶（JNK）信号通道在转化生长因子β1 （TGF-β1）诱导的人肺泡上皮细胞上皮-间质转化（epithelial to mesenchymal transition,EMT）中的意义,从而进一步揭示肺纤维化的发病机制.方法 使用TGF-β1诱导A549细胞EMT,分别在蛋白水平（使用p38 MAPK抑制剂SB203580和JNK抑制剂SP600125）和RNA水平（RNA干扰）抑制p38 MAPK和JNK信号通道,检测抑制后A549细胞的p38 MAPK和JNK的蛋白和mRNA,以及间质细胞表型蛋白包括结蛋白、波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白和上皮细胞表型蛋白包括E-钙黏素、紧密连接蛋白-1、水通道蛋白-5的表达.结果 TGF-β1可以诱导A549细胞EMT,表现为间质细胞表型蛋白表达的增加和上皮细胞表型蛋白表达的减少,这一过程p38 MAPK和JNK通道表达也增加,无论蛋白水平抑制或基因沉默p38 MAPK和JNK均可减轻A549细胞的EMT.结论 p38 MAPK和JNK信号通道在TGF-β1诱导的A549细胞EMT过程中起重要作用.

肾炎宁对IgA肾病大鼠TGF-β_1/p38 MAPK的影响

目的探讨肾炎宁对IgA肾病大鼠肾组织TGF-β_1/p38MAPK信号通路的作用。方法将SD大鼠随机分为4组,对照组、模型组、西药组(贝那普利+氯沙坦)、中药组(肾炎宁),应用脂多糖+牛血清白蛋白+四氯化碳方法复制IgA肾病模型,按各组相应药物剂量灌胃。于第15周末行IgA免疫荧光检测,并用RT-PCR法检测肾组织转化生长因子-β_1(transforming growth factor-β_1,TGF-β_1)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen activated protein kinase,p38MAPK)mRNA表达水平。结果中药组、西药组与模型组比较IgA免疫荧光强度、TGF-β_1、p38MAPK mRNA表达水平显著下降(P<0.05)。结论肾炎宁可能通过抑制肾组织TGF-β_1/p38MAPK信号通路,发挥对IgA肾病的治疗作用。

大黄[庶虫]虫丸经p38 MAPK/NF-κB/TGF-β1通路抑制小鼠硅肺纤维化的机制探讨

目的:运用中医经方大黄[庶虫]虫丸干预小鼠硅肺纤维化模型,观察其对小鼠硅肺纤维化的影响并探讨其作用机制。方法:选用SPF级雄性昆明种小鼠36只,分为正常组,模型组,大黄?虫丸高、中、低剂量(1.560,0.780,0.390 g·kg^(-1))组,汉防己甲素组(0.039 mg·kg^(-1)),每组6只。除正常组外,其余组均用静式染毒法连续40 d吸入二氧化硅(SiO2)粉尘复制小鼠硅肺纤维化模型,并用相应药物进行干预28 d后处死小鼠,获得血清和肺组织样品,运用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL^(-1)β),IL-6和羟脯氨酸(HYP)的含量,运用肺组织样本进行病理切片观察,并采用蛋白免疫印迹法(Western blot),实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)方法检测肺组织中p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK),核转录因子-κB(NF-κB),转化生长因子-β1(TGF-β1),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),Smad2,Smad3,Smad7的蛋白和mRNA的表达水平。结果:与正常组比较,模型组中的TNF-α,IL^(-1)β,IL-6和HYP的含量均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,大黄[庶虫]虫丸高剂量组能够明显降低小鼠血清中TNF-α,IL-6和HYP的含量(P<0.05,P<0.01),可见大黄[庶虫]虫丸能够减轻硅肺小鼠肺部炎症。同时,与正常组比较,模型组中的p38 MAPK,NF-κB p65,TGF-β1,α-SMA,Smad2和Smad3蛋白和mRNA表达水平均明显升高(P<0.05,P<0.01),Smad7蛋白和mRNA表达水平均显著降低(P<0.01);与模型组比较,大黄?虫丸高剂量组中的p38 MAPK,NF-κB p65,TGF-β1,α-SMA,Smad2和Smad3蛋白和mRNA表达水平均明显降低(P<0.05,P<0.01),Smad7蛋白和mRNA表达水平均明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:大黄[庶虫]虫丸能改善硅肺小鼠肺泡炎症、细胞外基质沉积的情况,因而起到减轻纤维化的作用,这可能是通过调节p38 MAPK/NF-κB/TGF-β1通路来实现的。