不同剂量转化生长因子β对兔尺骨骨折愈合作用的研究

目的 探讨不同剂量的外源性转化生长因子 β(Transporminggrowthfacter β ,TGF β)对骨折愈合的作用。 方法 采用兔尺骨骨折模型 ,根据每天注射TGF β剂量 ,3 6只成年兔随机分为对照组、1μg、10 μg、2 0 μg组 ;通过力学试验、骨形态测定和骨密度测量法对骨折愈合进行评估。结果 给予TGF β各组的骨痂面积和最大抗弯强度比对照组均有明显增加 ,在TGF β剂量 1～ 10 μg/d范围内 ,随TGF β剂量增加而增大 ,而当剂量为 2 0 μg/d时 ,无明显增加。在极限应力、抗弯刚度、极限负荷时能量吸收、骨矿物含量、骨皮质厚度和哈佛氏管直径方面 ,TGF β治疗各组与对照组之间无明显差别。 结论 局部应用外源性TGF β可促进骨痂形成 ,增加抗弯强度 ,并呈一定剂量依赖关系 ,从而促进兔骨折愈合。

小剂量强地松、红霉素和富露施联用对大鼠肺纤维化及其转化生长因子β_1干预的实验观察

目的 提供更合理的肺纤维化治疗方案。方法 1 0 0只wistar大鼠 ,随机抽出 2 0只作为正常组 ,气管内注入生理盐水 (作为阴性对照 ) ,剩余 80只经气管内注入博莱霉素造模成功后随机分为模型组 2 0只 (作为阳性对照 ) ,大剂量强地松组 2 0只 ,红霉素和富露施组 2 0只 ,小剂量强地松、红霉素和富露施组 2 0只 ,分别给予相应药物治疗。以上各组动物在第七 ,十四 ,三十 ,六十天每组随机抽出5只处死进行病理切片观察 ,电子计算机图像分析仪进行组织形态学、胶原和转化生长因子 (TGF) β1 定量分析。结果 小剂量强地松、红霉素和富露施组对模型动物干预最强。结论 小剂量强地松、红霉素和富露施联合应用治疗大鼠肺纤维化优于经典方法。

转化生长因子β_1经鼻三叉神经通路入脑研究

目的通过经鼻给予大鼠转化生长因子β1(TGF-β1)来探讨药物经鼻三叉神经通路入脑的可能性。方法将健康雄性SD大鼠19只,随机分为对照组(n=6)和经鼻给药(IN)0.5h组(n=3)、1h组(n=4)、2h组(n=3)、6h组(n=3),即在经鼻给予50μl(20μg)TGF-β1后0.5、1、2、6h处死动物;对照组为不给药大鼠。取各组大鼠动脉血以及小脑、中脑、脑桥、延髓、上颈髓组织和双侧三叉神经,采用ELISA法检测各样本内TGF-β1含量。结果与对照组(15.01±1.50pg/mg)相比,IN0.5、1、2、6h组大鼠三叉神经TGF-β1含量均显著提高(P<0.05),1h(75.46±12.50pg/mg)达高峰。IN1h组大鼠延髓TGF-β1含量为7.57±1.75pg/mg,与对照组(3.30±0.35pg/mg)相比显著提高(P<0.01),脑桥TGF-β1含量(5.92±0.92pg/mg)与对照组(3.41±0.24pg/mg)比较无统计学意义。各实验组大鼠小脑、中脑、上颈髓及血浆中TGF-β1的含量在给药前后均无显著改变。结论经鼻给予TGF-β1后药物可绕过血-脑脊液屏障快速进入三叉神经,并沿三叉神经通路逆行转运至延髓等中枢神经系统(CNS),此种给药途径为治疗三叉神经及CNS疾病提供了一条新的思路。

转化生长因子-β刺激人近端肾小管上皮细胞结缔组织生长因子的表达

目的:探讨转化生长因子-β(TGF-β)对人近端肾小管上皮细胞结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:应用逆转录-聚合酶链反应(RTP-CR)和蛋白印迹技术,观察TGF-β1对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和CTGFmRNA及其蛋白质表达的影响,同时观察肾小管上皮细胞形态改变。结果:HK2细胞有基础量的CTGFmRNA和蛋白质分子表达,在TGF-β1刺激下,其表达量显著增加,经不同浓度TGF-β1干预24h后,CTGFmRNA表达量明显升高,且呈剂量依赖性。1ng/mlTGF-β1刺激时,CTGFmRNA表达量开始显著增加,5ng/ml时达到高峰,10ng/ml时略有下降,CTGFmRNA表达量分别为对照组的2.40倍,3.34倍和2.73倍(P<0.05)。CTGFmRNA表达量呈时间依赖效应。TGF-β1(5ng/ml)干预30min后,CTGFmRNA表达量开始呈现增加趋势,为对照组的1.48倍(P>0.05),2h后出现显著差异,为对照组的2.14倍(P<0.05);CTGFmRNA表达量在24h达到高峰,持续至36h,分别为对照组的3.19倍和2.75倍(P<0.005);0.5ng/mlTGF-β1刺激时,CTGF蛋白表达量略有增加,5ng/ml时达到高峰,10ng/ml时略有下降。在TGF-β1(5ng/ml)干预下,HK2细胞由立方形铺路石样逐渐转变为长梭形长条样,免疫荧光检测见梭形细胞胞浆中有大量αSMA表达。大部分细胞转分化的时间(72h)明显晚于CTGFmRNA?

丙丁酚抑制氧化型低密度脂蛋白诱导系膜细胞转化生长因子-β_1表达

目的 观察丙丁酚对ox- LDL诱导系膜细胞AP -1活性和TGF -β1 表达的作用 ,探讨抗氧化剂治疗脂质肾损伤的分子机制。方法 大鼠系膜细胞随机分为正常细胞组、ox- LDL处理组和ox- LDL +丙丁酚处理组。运用凝胶迁移率实验检测AP-1活性变化 ,Western杂交检测c- Jun、JNK/SAPK磷酸化及TGF- β1 蛋白表达水平的改变。运用Northern杂交检测TGF- β1- mRNA表达。结果 丙丁酚 5 0 μmol/L预处理系膜细胞 2 0h ,显著降低ox LDL诱导系膜细胞AP 1活性。丙丁酚浓度为 5 0、1 0 0、2 0 0 μmol/L时 ,均显著抑制ox- LDL诱导JNK ,/SAPK磷酸化 ;且ox LDL +丙丁酚处理组的c Jun蛋白表达分别为ox- LDL处理组的 6 0 %、5 1 %和 4 6 %。Northern杂交显示 :ox LDL为 1 0 μg/mL时并不激活TGF- β1 mRNA表达 (P >0 .0 5 ) ;而当ox-LDL浓度增至 5 0、1 0 0 μg/mL时 ,TGF -β1 mRNA表达分别增加 1 .8和 1 .9倍。Western杂交显示ox -LDL呈剂量依赖方式增加TGF β1 蛋白质表达。加入丙丁酚后显著降低ox LDL诱导系膜细胞的TGF -β1- mRNA和蛋白质表达 (P <0 .0 5 )。结论 丙丁酚可能通过抑制JNK1 /SAPK磷酸化和AP 活性下调ox- LDL诱导系膜细胞TGF- β1 表达。

孕酮对小鼠妊娠早期子宫内膜转化生长因子β_1Ⅰ型受体表达的影响

采用免疫组织化学 SABC法 ,研究了外源性孕酮对妊娠小鼠着床早期子宫内膜转化生长因子 β1 型受体(TGFβR )表达的影响。结果显示 :(1)孕 4 d,注射 2 mg孕酮组 ,子宫表面上皮、腺上皮及基质中 TGFβR 表达增加 ,与对照组和注射孕酮 4 mg组差异显著 (P <0 .0 1)。注射孕酮 4 mg组 ,表面上皮 TGFβR 表达无显著增加 ;腺上皮细胞 TGFβR 表达稍有下降 ,但与对照组差异不显著 ;基质细胞 TGFβR 表达明显增加 ,与对照组差异显著 (P <0 .0 1)。 (2 )孕 5 d,试验组表面上皮和腺上皮 TGFβR 随着孕酮剂量的加大 ,其表达下降 ;基质细胞 TGFβR 表达则随孕酮剂量的增加而增多 ,且 3组间差异显著 (P <0 .0 1)。 (3)孕 6 d,注射 2 mg组 ,表面上皮及基质细胞 TGFβR 表达增加 ,与对照组差异显著 (P <0 .0 1) ,而腺上皮 TGFβR 表达呈下降趋势。注射 4 m g组 ,表面上皮、腺上皮及基质表达变化趋势同孕 5 d。结论 :外源性孕酮对妊娠小鼠着床早期子宫内膜转化生长因子β 型受体表达有一定影响 ,即孕酮可显著提高基质 TGFβR 表达 ,但对腺上皮 TGFβR 的表达有下调作用 ;对表面上皮 TGFβR 的表达作用不定 ,2 mg使表面上皮 TGFβR 表达增多 ,4 mg使 TGFβR

内皮素-1对人腹膜间皮细胞合成细胞外基质及转化生长因子β_1的影响

目的:研究内皮素1(ET1)及非特异性内皮素受体拮抗剂即ETA/ETB拮抗剂PD142893对人腹膜间皮细胞(HPMC)分泌细胞外基质(ECM)及转化生长因子β1(TGFβ1)产生的影响。方法:以人腹膜间皮细胞株(HMrSV5)为研究对象,采用放免法、半定量逆转录多聚酶链反应(RTPCR)观察不同浓度的葡萄糖及PD142893对HPMCET1、Ⅳ型胶原(ColⅣ)、纤连蛋白(Fn)分泌和基因表达的影响,及TGFβ1蛋白水平(ELISA),基质金属蛋白酶2(MMP2)基因表达(RTPCR)。结果:①葡萄糖对ET1的影响:高浓度葡萄糖增加HPMCET1的分泌及基因表达,葡萄糖浓度为50、100、150mmol/LET1分泌分别为(2.57±0.18)、(2.82±0.89)、(4.12±0.83)pg/ml·105cell,呈剂量依赖。②ET1促进HPMC分泌ColⅣ,增强ColⅣ、MMP2mRNA的表达。PD142893可下调高糖诱导的ColⅣ、Fn和MMP2。③ET1刺激HPMC分泌TGFβ1呈剂量依赖,ET1浓度为0、10、50、100nmol/L时分泌TGFβ1分别为(2141.74±45.16)、(2181.6±95.13)、(4360.58±139.74)、(6966.88±444.93)pg/ml·105cell,PD142893可明显抑制高糖诱导TGFβ1的分泌。结论:ET1促进HPMC分泌ECM,高糖诱导间皮细胞ECM合成与ET1及TGFβ1途径有关。

肝细胞生长因子对转化生长因子-β1诱导的人Tenon囊成纤维细胞增生及转分化的抑制作用

目的 研究肝细胞生长因子(HGF)对转化生长因子.β1(TGF.β1)诱导的人Tenon囊成纤维细胞增生和转分化的影响.方法 人Tenon囊成纤维细胞进行常规培养后分为空白对照组、TGF.β1处理组及不同质量浓度HGF+TGF.β1组.TGF.β1处理组在细胞培养液中添加10μg/L TGF.β1,不同质量浓度HGF+TGF.β1组在细胞培养液中分别添加10μg/L TGF.β1,然后分别添加不同质量浓度的HGF(25、50、100、200μg/L),采用甲基偶氮四唑(MTT)法检测波长560 nm处各组细胞的吸光度(A560);然后选用100μg/L的HGF进行干预,采用细胞免疫荧光染色技术检测人Tenon囊成纤维细胞中α.平滑肌肌动蛋白(α.SMA)的表达分布;采用Western blot法检测细胞中α.SMA蛋白的相对表达量.结果 体外培养的人Tenon囊成纤维细胞呈长梭形,边界清楚,细胞中波形蛋白表达阳性并定位于细胞质.MTT检测显示空白对照组、TGF.β1处理组及HGF25μg/L+TGF.β1组、HGF50μg/L+TGF.β1组、HGF100μg/L+TGF.β1组、HGF200μg/L+TGF.β1组细胞的增生值分别为0.203±0.025、0.497±0.101、0.426±0.062、0.354±0.040、0.272±0.084和0.241±0.011,组间比较差异有统计学意义(F=9.210,P=0.003),TGF.β1处理组细胞增生值明显高于空白对照组,不同质量浓度HGF+TGF.β1组细胞增生值均明显低于TGF.β1处理组,差异均有统计学意义(均P<0.05).免疫荧光染色结果显示空白对照组细胞中未见α.SMA的表达,TGF.β1处理组及HGF100μg/L+TGF.β1组细胞的胞质中均可见α.SMA的表达,呈红色荧光,HGF100μg/L+TGF.β1组细胞中α.SMA表达荧光减弱,α.SMA表达细胞明显减少.TGF.β1处理组和HGF100μg/L+TGF.β1组细胞中α.SMA染色阳性细胞百分比分别为(60.0±4.7)%和(14.3±3.1)%,差异有统计学意义(t=19.856,P<0.001).Western blot检测显示空白对照组、TGF.β1处理组和HGF100μg/L+TGF.β1组细胞中α.SMA蛋白相对表达量分别为0.642±0.032、1.330±0.069和0.884±0.040,总体比较差异有统计学意义(F=13.370,P<0.001),其中TGF.β1处理组细胞中 α.SMA蛋白相对表达量明显高于空白对照组,HGF100μg/L+TGF.β1组细胞中α.SMA蛋白相对表达量明显低于TGF.β1处理组,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 HGF抑制TGF.β1诱导的人Tenon囊成纤维细胞的过度增生,下调细胞中α.SMA蛋白的表达,阻止成纤维细胞的表型转化.

奥沙利铂对大鼠后根神经节及神经生长因子表达的影响

目的探讨神经生长因子的表达(nerve growth factor, NGF)在奥沙利铂(草酸铂)应用期间的变化规律以及与其对周围神经系统毒性的靶器官后根神经节(dorsal root ganglia,DRG)的神经元形态改变的相关性.方法采用光镜技术和免疫组化染色法观察DRG在不同时间及不同剂量时的形态改变以及DRG内NGF的表达,并以图像分析仪进行分析.结果 DRG内NGF表达下调与神经元的形态改变均在用药后24～48小时最为显著,5周后基本恢复,且均表现为药物剂量依赖性.结论草酸铂应用期间,DRG内NGF表达下调具有药物剂量依赖性及可恢复性的特点,且与DRG内感觉神经元核仁的形态改变呈正相关(r2=0.9929,P＜0.0001),提示NGF表达的变化与草酸铂的周围神经系统毒性有关,为外源性NGF可能缓解其周围神经毒性提供依据.

表皮生长因子联合湿润烧伤膏治疗糖尿病皮肤溃疡疗效观察

【目的】观察表皮生长因子（EGF）联合湿润烧伤膏治疗糖尿病（DM）皮肤溃疡的疗效。【方法】将2009年9月至2012年6月在本院内分泌科住院治疗的78例DM皮肤溃疡患者随机分为观察组和对照组各39例，在接受控制血糖、抗感染和溃疡面换药等处理的基础上，观察组采用EGF联合湿润烧伤膏治疗，对照组采用湿润烧伤膏治疗，比较两组的有效率和溃疡愈合时间。【结果】观察组有效率为97．4％，溃疡愈合时间为（9．8±1．2）d，对照组为94．9％，溃疡愈合时间为14．6±1．5）d，两组总有效率无显著性差异（P〉0．05），观察组的愈合时间明显短于对照组（P〈0．05）。【结论】表皮生长因子联合湿润烧伤膏治疗DM皮肤溃疡相对单用湿润烧伤膏可明显缩短溃疡愈合时间。

常规局部治疗基础上采用表皮生长因子联合高压氧治疗糖尿病足溃疡创面效果观察

【目的】观察常规局部治疗基础上采用表皮生长因子联合高压氧治疗糖尿病足溃疡创面的效果。【方法】125例Wagner分级为2～3级的2型糖尿病足患者随机分为三组：A组（42例）局部清创＋创面外喷生理盐水；B组（40例）在A组基础上＋高压氧治疗；C组（43例）在B组基础上使用表皮生长因子外喷创面。观察各组创面愈合情况、肉芽组织成熟程度。疗程均4周。【结果】A组、B组及C组局部溃疡感染治愈率分别为69．05％、77．50％、93．62％．各组间比较有统计学意义（P〈0．05）。C组足部溃疡肉芽组织生长情况均优于A组、B组（P〈0．05）。【结论】表皮生长因子联合高压氧治疗能有效促进糖尿病足患者溃疡创面组织再生与修复，加速溃疡愈合。

利拉鲁肽联合替米沙坦对高血压并糖尿病患者血清成纤维细胞生长因子21、脂联素的影响

【目的】观察利拉鲁肽联合替米沙坦治疗高血压并糖尿病患者的疗效，并探讨其对血清中成纤维细胞生长因子21（FGF-21）和脂联素（AP）的水平变化的影响。【方法】收集高血压并糖尿病患者86例，随机分成两组。观察组给予利拉鲁肽联合替米沙坦治疗，对照组仅给予替米沙坦单独治疗。比较两组患者治疗前后收缩压、舒张压、空腹血糖（FPG）、胰岛素（FINs）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）、FGF-21及AP水平。【结果】两组患者治疗后收缩压和舒张压均较治疗前明显的下降（P〈0．05），且两组收缩压与舒张压比较差异无统计学意义（P〉0．05）。两组治疗前血清AP和FGF-21水平比较差异无统计学意义（P〉0．05）；对照组患者治疗后血清AP和FGF-21水平与治疗前比较差异无统计学意义（P〉0．05）；而观察组患者治疗后AP水平明显上升（P〈0．05），而FGF-21水平则显著下降（P〈0．05）。两组患者治疗后FPG、FIN及H0-MA-IR均明显下降，且观察组下降更为明显（P〈0．05）。【结论】利拉鲁肽与替米沙坦能发挥协同作用，降低FGF-21在体内的代偿性增高、提高AP水平，改善胰岛素抵抗、值得临床推广应用。

不同剂量配比黄芪-莪术抑制Lewis肺癌生长转移及其对TGF-β1、HIF-1α表达的影响

目的探讨黄芪-莪术不同剂量配比的抗肿瘤效果及其抗肿瘤血管生成机制。方法以皮下注射瘤细胞方法构建C57BL/6小鼠Lewis肺癌荷瘤模型,随机分为模型组、顺铂组及黄芪-莪术0∶1、1∶1、2∶1、3∶1配比组。各组小鼠给予不同剂量的药物或等量生理盐水灌胃15天,并分别在第1、3、5、7、9、11、13、15天腹腔注射顺铂或生理盐水。于第16天处死后剥离肿瘤组织,称重计算瘤重指数及抑瘤率,观察肺转移结节数,HE染色分析瘤组织病理学变化,Western Blot法检测肿瘤组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和缺氧诱导因子1-α(HIF-1α)表达。结果与模型组比较,莪术与不同比例的黄芪配伍均能明显降低瘤重和瘤重指数,减少肺转移结节数目(P <0. 05); 0∶1、1∶1、2∶1和3∶1配比组的抑瘤率分别为21. 91%、23. 89%、37. 70%、43. 22%。各中药组的瘤重虽高于顺铂组(P <0. 05),但瘤重指数3∶1和2∶1配比组与顺铂组相比差异无统计学意义(P>0. 05),3∶1配比组对瘤重的抑制效果优于其他配比组(P <0. 05)。3∶1和2∶1配比组的TGF-β1蛋白表达与模型组相比均显著降低(P <0. 01),且两配比组差异无统计学意义(P>0. 05);各配比组的HIF-1α蛋白表达与模型组相比均显著降低(P <0. 01),而3∶1配比组降低程度最接近于顺铂组,低于其他配比组(P <0. 01)。结论较高比例的黄芪能够促进莪术的抑瘤和抗转移作用,其机制可能与黄芪通过增强莪术对肿瘤细胞TGF-β1、HIF-1α表达的抑制作用有关。

转化生长因子α对鼠视网膜Muller细胞谷氨酸转运体调控作用的研究

目的 观察转化生长因子α（TGFα）对鼠视网膜Muller细胞谷氨酸转运体（GLAST）mRNA、蛋白质表达及摄取活性的调控作用。方法取出生后7～10d的新生昆明小鼠视网膜组织，体外进行Muller细胞的培养。同一原代细胞的第3～4代细胞培养后随机分为2组：①TGFα干预组：分别加入浓度为50、75、125、150ng／ml的TGFα，每种浓度3孔；②对照组：仍用含20％胎牛血清的Dulbeccon改良Eagle培养基培养。采用L-3H-谷氨酸摄取分析方法观察不同浓度TGFa对Muller细胞GLAST摄取活性的影响；逆转录聚合酶链反应方法分析MOiler细胞GLAST mRNA表达的差异；免疫组织化学染色方法检测Muller细胞GLAST蛋白质表达的变化。结果随着TGFα浓度的增加，L-3H-谷氨酸的摄取量及GLAST mRNA表达量均逐渐增加，TGFα浓度为125ng／ml时，L-3H-谷氨酸的摄取量达到最大值，为对照组的266％，同时GLAST mRNA表达量也达到最大值，为对照组的近4倍。免疫组织化学染色显示当TGFα浓度为125ng／ml时，干预组Muller细胞内的GLAST蛋白表达量明显高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论TGFα可通过上调GLAST mRNA和蛋白质的表达增加视网膜Muller细胞谷氨酸转运体GLAST的摄取活性。

低剂量环境镉暴露人群肾功能状况与血浆转化生长因子-β1的关系

[目的]探讨低剂量环境镉暴露对肾功能和血浆转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响,以及相互之间的关系。[方法]采用横断面研究,选择太原市有污染灌溉史且土壤镉含量为2.30 mg/kg的某自然村居民为暴露组,选择无污染灌溉史且与暴露组村落相距约32 km、土壤镉含量为0.22 mg/kg的某自然村居民为对照组。调查对象在当地的居住年限均大于5年。检测调查对象的血浆TGF-β1、尿镉、尿-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(UNAG)、尿白蛋白(UALB)和尿肾损伤因子1(UKim-1)。分别用非参数检验、χ~2检验对肾损伤异常率进行比较,肾功能指标及血浆TGF-β1经对数转换后进行Pearson相关分析,影响因素采用多元线性回归分析。[结果]暴露组人群尿镉水平为1.06μg/g(以尿肌酐计,后同),高于对照组(0.71μg/g)(P<0.001),男性、女性尿镉水平(1.08、1.01μg/g)均高于同性别对照组人群(0.73、0.70μg/g,均P<0.05)。暴露组人群UNAG(17.40 U/g)、UALB(12.79 mg/g)均高于对照组(分别为14.80 U/g、11.70 mg/g)(均P<0.05)。随着尿镉水平的升高,UNAG、UALB、UKim-1的异常率升高(χ_(趋势)~2分别为19.945、13.356、12.068,均P_(趋势)<0.05)。暴露组血浆TGF-β1(13.38μg/L)高于对照组(10.11μg/L)(P<0.001),但不同尿镉水平人群血浆TGF-β1的差异无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关分析结果显示:尿镉与UNAG、UALB、UKim-1和年龄均呈正相关关系(相关系数分别为0.14、0.22、0.10和0.19,均P<0.05);血浆TGF-β1与尿镉无相关性,与UNAG呈正相关关系(相关系数为0.12,P<0.05)。多元线性回归分析结果显示,尿镉对UNAG、UALB和UKim-1的变化影响较大(b'分别为0.22、0.25和0.15,均P<0.05)。[结论]环境镉暴露可引起肾脏功能的损害。随着尿镉水平增加,肾功能异常率也明显增加;且血浆TGF-β1与UNAG呈正相关。本研究所调查地区研究对象镉暴露水平相对较低,尚未发现尿镉与血浆TGF-β1之间的关系。

负载转化生长因子β3的藻酸钙凝胶复合脂肪间充质干细胞修复兔关节软骨缺损的实验研究

目的以负载转化生长因子β3(TGF-β3)的藻酸钙凝胶(CAG)复合脂肪间充质干细胞(ADSCs)构建的组织工程软骨,探讨其修复兔关节软骨缺损的效果。方法取新西兰白兔皮下脂肪,分离培养得到ADSCs。暴露股骨踝关节面,并做全层关节软骨缺损模型。将ADSCs种植到负载TGF-β3的CAG支架材料上,构建组织工程软骨,移植到兔关节软骨缺损处。实验分为对照组(向关节腔内注射无菌等渗盐水)、CAG组(注射CAG)、ADSCs+CAG组(注射负载ADSCs的CAG)、TGF-β3+CAG组(注射负载TGF-β3的CAG)、TGF-β3+ADSCs+CAG组(注射负载TGF-β3、ADSCs的CAG),每组10只。于术后12周,分别采用大体观察、HE染色、番红-O及Ⅱ型胶原免疫组化染色等方法观察关节软骨缺损的修复情况,并用国际关节软骨修复协会(ICRS)制订的评分法进行组织学评分。结果 TGF-β3+ADSCs+CAG组的缺损软骨修复效果明显优于其他组,其新生组织与周围正常组织紧密结合,并且细胞外基质的分泌情况与正常组织相似。对照组、CAG组、ADSCs+CAG组、TGF+β3+CAG组和TGF-β3+ADSCs+CAG组的ICRS评分分别为(7.06±0.18)分、(7.15±0.23)分、(7.45±0.25)分、(7.47±0.24)分和(15.78±0.24)分,TGF-β3+ADSCs+CAG组明显优于其他各组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论负载TGF-β3、ADSCs的CAG修复兔关节软骨缺损具有较好的效果,而且是一种结构性的修复。

氨茶碱对支气管哮喘小鼠气道平滑肌细胞增殖及转化生长因子-β1表达的影响

气道重塑是支气管哮喘（简称哮喘）具有特征性的病理改变之一，气道平滑肌细胞（ASMC）增殖是气道重塑的重要组分。许多细胞因子都可引起ASMC增殖，近年来转化生长因-β1（TGF-β1）在哮喘ASMC增殖中具有重要作用。研究发现小剂量氨茶碱具有一定的抗炎和免疫调节作用，但其作用机制尚不清楚。我们通过建立慢性哮喘小鼠动物模型检测小鼠肺内TGF-β1，表达、ASMC增殖的变化及二者的相互关系，进一步阐明氨茶碱的可能作用机制，并与糖皮质激素（简称激素）的治疗作用进行比较。

氨磷汀与放射性肺损伤中肺剂量体积因素V_(20)的关系

目的建立氨磷汀干预下^(60)Co-γ放射性肺损伤大鼠模型,并探讨氨磷汀在放射性肺损伤剂量体积因素V_(20)=25%和V_(20)=35%条件下发生肺损伤的作用。方法雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组Ⅰ(照射V_(20)=25%)、模型组Ⅱ(照射V_(20)=35%)、药物干预组Ⅰ(氨磷汀+照射V_(20)=25%)、药物干预组Ⅱ(氨磷汀+照射V_(20)=35%)。模型组、药物干预组用^(60)Co-γ射线对大鼠右肺进行照射,于照射后第1,2,4,8和12周末处死大鼠,腹主动脉取血,ELISA法测定血清中转化生长因子β1(TGF-β_1)含量;同时间点取照射后肺组织,HE、Massons染色观察肺组织的病理损伤变化。结果与空白组比较,模型组大鼠肺泡壁增厚,肺泡间质大部分为增生纤维组织和弹力纤维组织,血清TGF-β_1显著升高(P<0.05);与模型组比较,大鼠肺组织在药物干预组(V_(20)分别为25%和35%)出现肺泡壁增厚和纤维化的时间滞后且程度轻,仍见大部分正常肺泡结构,且血清TGF-β_1明显降低(P<0.05);模型组Ⅱ中大鼠肺组织病理损伤和血清TGF-β_1均高于模型组Ⅰ,而其在药物干预组Ⅰ和Ⅱ之间未见显著改变。结论氨磷汀能减轻放射性肺损伤发生的概率,对V_(20)限定值可适当提高。

罗格列酮对转化生长因子β1诱导的人肾小管上皮细胞结缔组织生长因子表达的影响

目的探讨体外条件下转化生长因子(TGF)β1对人近端肾小管上皮细胞系(HK-2)表达结缔组织生长因子(CTGF)的诱导情况,以及罗格列酮对其影响和作用途径。方法应用RT-PCR方法检测CTGF和α-平滑肌肌动蛋白(SMA)mRNA表达。应用Western印迹方法检测CTGF和纤连蛋白(FN)的蛋白表达。结果(1)HK-2细胞低水平表达CTGFmRNA和蛋白,TGF-β1呈剂量和时间依赖性增加HK-2细胞CTGFmRNA和蛋白表达(P<0.01)。(2)罗格列酮和15脱氧前列腺素J2(15d-PGJ2)呈剂量依赖性抑制TGF—β1(4ng/ml)诱导的HK-2细胞CTGFmRNA和蛋白的表达。(3)过氧化物酶体增殖体激活受体(PPAR)γ特异性抑制剂GW9662(1μmol/L)完全阻断罗格列酮和15d—PGJ2对CTGFmRNA和蛋白表达的抑制作用。(4)与单纯TGF-β14ng/ml刺激组相比,罗格列酮5、10μmol/L处理组HK-2细胞FN蛋白分别下调39.9%和53.4%(P<0.01),并呈剂量依赖性(P<0.01),而GW9662完全阻断该作用。结论在体外,罗格列酮可通过激活肾小管上皮细胞PPARγ抑制TGF-β1诱导的CTGF转录和表达,同时也可抑制FN的表达。