转化生长因子β调节子4对人肺鳞状细胞癌类器官增殖、侵袭和转移的影响

目的探讨转化生长因子β调节子4(TBRG4)在肺癌细胞中的表达及其对人肺鳞状细胞癌类器官增殖、侵袭和转移的影响,并分析可能的分子机制。方法收集2020年1月至2021年1月蚌埠医学院第一附属医院手术切除的肺鳞状细胞癌患者的癌组织和癌旁组织,采用Western blot法检测癌组织和癌旁组织中TBRG4蛋白的表达。采用胰蛋白酶消化癌组织,分离肿瘤细胞,将分离的肿瘤细胞培养形成人肺鳞状细胞癌类器官。将人肺鳞状细胞癌类器官分为对照组和TBRG4沉默组,对照组类器官转染空载体慢病毒,TBRG4沉默组类器官转染TBRG4沉默慢病毒。采用细胞计数试剂盒-8检测人肺鳞状细胞癌类器官转染24、48、72、96 h时的增殖活力,Transwell法检测人肺鳞状细胞癌类器官的迁移和侵袭能力,Western blot法检测人肺鳞癌类器官中TBRG4、增殖细胞核抗体(PCNA)、磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)、磷酸化磷脂酰肌醇激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达。结果肺鳞状细胞癌组织中TBRG4蛋白相对表达量显著高于癌旁组织(P<0.05)。TBRG4沉默组人肺鳞状细胞癌类器官转染24、48、72、96 h时的增殖活力均显著高于对照组(P<0.05)。TBRG4沉默组穿膜细胞数和迁移细胞数均显著少于对照组(P<0.05)。TBRG4沉默组人肺鳞状细胞癌类器官中TBRG4、PCNA、p-PI3K、p-AKT蛋白的相对表达量均显著低于对照组(P<0.05),PTEN蛋白的相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。结论TBRG4在肺鳞状细胞癌组织中高表达,其可能是通过PTEN/PI3K/AKT信号通路调节人肺鳞状细胞癌类器官的增殖、侵袭和转移,TBRG4有望成为肺癌治疗的新靶点。

骨髓基质细胞负调因子与IL-4、IL-10的关系

目的:探讨IL-4、IL-10对骨髓基质细胞负调因子TGF-β、MIP-1α、LIF的调节。方法:用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定在IL-4、IL-10作用下骨髓基质细胞负调因子TGF-β、MIP-1α、LIF的水平。结果:IL-4作用下,TGF-β、MIP-1α的水平明显升高,P<0.05;而LIF水平却明显降低,P<0.05;IL-10则对三种负调因子无明显作用,P>0.1。结论:IL-能上调骨髓基质细胞TGF-β、MIP-1α表达,而下调LIF的表达;IL-10对这三种负调因子则无明显调控作用。

TBRG4在肺腺癌中的作用及其机制研究

背景与目的:转化生长因子β调节子4(transforming growth factor β regulator 4,TBRG4)是编码转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)的调节子;近年来研究发现,TBRG4表达异常与肿瘤密切相关,但有关TBRG4与肺腺癌关系的研究较少,因此该研究旨在探讨TBRG4在肺腺癌中的作用及其相关机制。方法:收集郑州大学附属肿瘤医院非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的肿瘤组织和癌旁组织样本,采用免疫组织化学方法检测TBRG4的表达。以慢病毒为载体构建TBRG4基因特异性干扰载体,并将特异性干扰载体及空载体转染NCI-H1299细胞,采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测各组细胞生长情况;采用细胞克隆形成实验比较各组细胞克隆形成能力;采用AnnexinⅤ-FITC/PI双染法结合流式细胞术检测细胞凋亡;PI/RNase单染检测细胞周期;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测10号染色体上缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)信号通路相关蛋白表达情况。结果:TBRG4蛋白在NSCLC患者癌组织中表达升高;TBRG4敲低后H1299细胞抑制了H1299细胞的增殖及细胞克隆形成能力,并促进细胞凋亡,同时导致H1299细胞周期停滞于G0/G1期;PTEN、RAP1A及IGF2蛋白表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TBRG4可能参与肺癌的发生、发展过程,其在NSCLC患者肺癌组织中的表达显著高于癌旁组织。TBRG4与肺癌细胞的增殖、调亡等生物学行为密切相关,可能成为肺癌治疗的潜在靶点。