转化生长因子β1噬菌体模拟肽抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的实验研究

目的从噬菌体随机12肽库中筛选获得转化生长因子（TGF）β1噬菌体模拟肽，评估其抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的作用。方法以人TGF—β1单克隆抗体为靶，生物淘选噬菌体模拟肽。噻唑蓝（MTT）比色法定量测定活细胞的数量。Annexin V—FITC／PI凋亡检测试剂盒和流式细胞仪检测对成纤维细胞的凋亡作用。免疫荧光测定检测模拟肽与成纤维细胞的亲和力。实时定量PCR分析方法检测成纤维细胞核因子κB（NF—κB），结缔组织生长因子（CTGF）的表达水平。结果共获得10种噬菌体模拟肽，具有与TGF—β1、TGF—β2、TGF—β受体Ⅱ（TβRⅡ）、TGF—β诱导因子、NF—κB或细胞分裂原素活化蛋白激酶（MAPK）相似的序列。MTT比色测定结果显示4种（第7～10组）噬菌体模拟肽组能够抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖（P〈0．05）。免疫荧光测定显示是噬菌体上的模拟肽，而不是噬菌体本身，能够与瘢痕疙瘩成纤维细胞相结合；凋亡实验显示这4种噬菌体模拟肽能够轻度促使瘢痕疙瘩成纤维细胞发生轻度的晚期凋亡；实时定量PCR的结果显示这4种噬菌体模拟肽NF—κB的表达降低，表达量分别是阴性对照组的0．28、0．26、0．46、0．30倍，4种噬菌体模拟肽CTGF的表达降低，表达量分别是阴性对照组的0．26、0．60、0．34、0．17倍。结论噬菌体模拟肽可能是通过调节NF—κB及CTGF的表达，调节瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖。

血管活性肠肽对哮喘气道重塑小鼠肺组织转化生长因子β_1表达的影响

目的探讨血管活性肠肽对哮喘气道重塑小鼠肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法 SPF级雌性Balb/c小鼠30只,随机分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、血管活性肠肽组(C组),每组10只。B组、C组动物建立哮喘气道重塑模型。HE染色观察各组小鼠支气管及肺组织病理改变,以病理图像分析测量小鼠肺组织中支气管基底膜周长(Pbm)、支气管壁面积(WAi)和平滑肌层面积(WAm);实时定量PCR方法检测各组小鼠肺组织TGF-β1 mRNA表达,Western blot方法检测各组小鼠肺组织TGF-β1蛋白表达。结果 B组小鼠肺组织病理改变:胶原沉积和炎性细胞浸润,平滑肌层增厚,其WAi/Pbm及WAm/Pbm较A组明显增加(P<0.05);C组上述指标较A组增加,但较B组降低,差异有统计学意义(P<0.05)。B组TGF-β1mRNA和蛋白表达水平均高于A组,差异有统计学意义(P<0.05);C组TGF-β1 mRNA和蛋白表达水平均低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血管活性肠肽有抑制气道重塑作用,其机制可能与减少TGF-β1表达有关。

转化生长因子-β_1和Ⅲ型前胶原肽在百草枯中毒引发肺纤维化中的作用及机制研究

目的探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)和Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)在百草枯中毒引发肺纤维化中的作用及机制。方法选取百草枯中毒患者19例(中毒组)和体检健康者20例(对照组)。采集两组研究对象静脉血,测定并比较血清中TGF-β1和PⅢP含量。结果组内比较,中毒组血清TGF-β1和PⅢP水平于入院后即刻、中毒第5、10和14天逐渐增高(均P<0.01),差异具有统计学意义。组间比较,中毒组血清TGF-β1和PⅢP水平于入院后即刻、中毒第5、10和14天均明显高于对照组(均P<0.01),差异具有统计学意义。结论百草枯中毒患者血清中TGF-β1和PⅢP水平明显增高且随中毒时间延长呈逐渐增高趋势,表明上述细胞因子在百草枯中毒引发肺纤维化过程中发挥重要作用。

Ang-1模拟肽协同血管内皮生长因子对心肌梗死大鼠心脏功能的影响

目的观察心脏细胞外基质(c-ECM)结合胶原靶向血管内皮生长因子(CBD-VEGF)和Ang-1模拟肽(AMP)对心肌梗死大鼠心脏功能的影响。方法对AMP行MTT体外人脐静脉内皮细胞(HUVEC)活性试验及对修饰了Biotin的AMP(Bio-AMP)进行与c-ECM的结合试验。将SD大鼠行左前降支结扎构建心肌梗死模型,然后随机分为PBS组(A组)、c-ECM/CBD-VEGF组(B组)和CBD-VEGF/c-ECM/AMP组(C组),每组4只,分别于梗死部位注射PBS、CBD-VEGF/c-ECM和CBD-VEGF/c-ECM/AMP进行治疗。3个月后采用超声心动图评价3组大鼠的心脏功能,采用免疫荧光染色方法检测3组大鼠心肌梗死区域血管数量、vWF阳性面积比和ZO1阳性面积比。结果MTT试验检测结果显示,AMP和Ang-1具有相似的促进HUVEC增殖的能力;结合实验结果显示,Bio-AMP可以连接在c-ECM上。处理3个月后,C组大鼠术后心脏射血分数(EF)显著高于A组和B组(t=7.794、3.613,P<0.05)。大鼠心肌梗死区域免疫荧光染色显示,C组血管数量和vWF阳性面积比高于A组(t=4.950、22.390,P<0.05),并且C组vWF阳性面积比显著高于B组(t=11.400,P<0.05)。C组和B组的ZO1阳性面积比明显高于A组(t=13.290、4.328,P<0.05),C组的ZO1阳性面积比明显高于B组(t=8.243,P<0.05)。结论将本研究合成的CBD-VEGF/c-ECM/AMP水凝胶注射于大鼠心肌梗死区域后具有促进大鼠心脏功能恢复和促进心肌梗死后血管再生及细胞连接的作用。

还原型谷胱甘肽对糖尿病大鼠肾组织糖基化及转化生长因子β_1表达的影响

目的观察还原型谷胱甘肽及盐酸氨基胍对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肾组织非酶糖化及转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,以发现更为有效的防治糖尿病肾病及减少终末期肾病发病率的方法。方法应用链脲佐菌素建立大鼠糖尿病模型,随机分为正常对照组、糖尿病对照组(DM组)、氨基胍治疗组(DM+AG组)、还原型谷胱甘肽治疗组(DM+GLUT组)、氨基胍+还原型谷胱甘肽治疗组(DM+AG+GLUT组)。第8周留取双侧肾脏,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学等方法研究5组大鼠肾脏TGF-β1mRNA及蛋白质表达、肾皮质糖基化终末产物(AGEs)含量、24 h尿白蛋白、肾组织学形态,测定肾重/体重比值、血糖、糖化血红蛋白、血肌酐水平,计算肌酐清除率。结果(1)与正常对照组相比,各组糖尿病大鼠TGF-β1mRNA表达明显上调(P<0.01);肾皮质匀浆及血清TGF-β1蛋白量均明显高于正常对照组(P<0.01);肾皮质匀浆脂相、蛋白质相荧光值即AGEs含量均明显增高(P<0.01);血糖、糖化血红蛋白、尿白蛋白排泄量、内生肌酐清除率及肾重/体重比值均明显增高(P<0.01);(2)与DM组相比,DM+AG组、DM+GLUT组及DM+AG+GLUT 3组TGF-β1mRNA表达增加被明显逆转(P<0.05或P<0.01);肾皮质匀浆及血清TGF-β1蛋白量均明显降低(P<0.01或P<0.05);AGEs含量均明显降低(P<0.01或P<0.05);尿白蛋白排泄量、内生肌酐清除率及肾重/体重均明显降低(P<0.01);(3)PAS、PAM、Masson染色显示:DM组肾小球可见轻度系膜增殖,未见系膜细胞增生、局灶节段性硬化及肾小球基底膜(GBM)增厚;正常对照组、DM+AG组、DM+GLUT组、DM+AG+GLUT组肾小球无明显异常。结论还原型谷胱甘肽及盐酸氨基胍可以减轻糖尿病大鼠肾组织的非酶糖化过程,并减轻肾小球肥大及肾肥大,延缓其肾病发展,对糖尿病肾脏具有保护作用,二者对肾脏的保护作用至少部分与抑制TGF-β1在肾脏的过度表达有关。

胰激肽原酶对自发性高血压大鼠心肌转化生长因子-β_1表达及胶原重构的影响

目的:观察胰激肽原酶对自发性高血压大鼠(SHR)左室肌转化生长因子-β1(TGF-β1)表达及胶原网络重构的影响并探讨其机制。方法:雄性15周龄SHR24只,随机分成SHR组、胰激肽原酶组及卡托普利组,每组8只,另取8只雄性同龄健康Wistar大鼠作为正常血压对照组。胰激肽原酶腹腔注射(7.2U.kg-1.d-1),卡托普利组灌胃给药(10mg.kg-1.d-1),SHR组和正常血压对照组给予0.9%NaCl溶液腹腔注射(2mL.kg-1.d-1)。实验4周后行颈动脉插管测量血压,然后处死动物,测量各组左心室重量指数(LVMI)、心肌胶原体积比例(CVF)、心肌血管周围胶原与管腔面积的比例(PVCA)及左室肌TGF-β1的表达。结果:SHR组收缩压(SBP)、LVMI、CVF、PVCA增高(P<0.05),TGF-β1的表达量增加,与正常血压对照组比较,差异均具有显著性(P<0.05)。用药4周后,胰激肽原酶组SBP、LVMI、CVF、PVCA及TGF-β1均较SHR组显著下降,两组比较差异均具有显著性(P<0.05);胰激肽原酶组SBP高于卡托普利组(P>0.05),其他各项指标与卡托普利组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:胰激肽原酶具有减轻SHR心肌胶原网络破坏及反应性胶原过度沉积的作用,其机制可能与抑制心室肌高表达的TGF-β1有关。

转化生长因子β_1、Bax多肽在高血压大鼠肾上腺的表达

目的 观察Dahl大鼠肾上腺中转化生长因子 β1(TGF β1)、凋亡相关基因Bax多肽表达的动态变化 ,探讨原发性高血压与肾上腺细胞凋亡的关系。方法 应用日本引进的Dahl高血压大鼠 ,SP免疫组织化学方法染色。结果 TGF β1、Bax免疫阳性细胞主要分布于肾上腺髓质 ,阳性反应产物见于细胞质中。TGF β1和Bax的阳性细胞数 ,在盐敏感性高血压 (DahlS)大鼠 ,均随着高血压的进展而有显著提高趋势。结论 TGF β1和Bax在Dahl大鼠肾上腺髓质均有表达 ,随着高血压的病程延长 ,表达逐渐明显升高 。

囊素五肽对人肺成纤维细胞细胞外基质及转化生长因子β_1/Smad信号通路的影响

目的观察囊素五肽(BP5)对转化生长因子β1(TGF-β1)刺激的人肺成纤维细胞分泌的细胞外基质以及对转化生长-β1/Smad信号通路的影响,探讨囊素五肽抗肺纤维化的机制。方法HLF细胞分为阴性对照组、TGF-β1刺激组、TGF-β1+BP5药物干预组(三组均用TGF-β1刺激后分别使用不同浓度BP5 2.5、5及10μg/mL进行干预)。免疫荧光法测定细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达,Western blot方法检测collagen-Ⅰ、p-Smad2/3、p-Smad3和Smad7蛋白的表达。结果TGF-β1刺激细胞经免疫荧光标记显示α-SMA阳性表达,说明人肺成纤维细胞在TGF-β1刺激下转化为肌成纤维细胞(MF),TGF-β1刺激同时加BP5不同药物浓度组中,10μg/mL的BP5药物浓度能显著减少细胞增殖转化。经TGF-β1刺激后,人肺成纤维细胞collagen-Ⅰ[(1.402±0.158)比(0.605±0.367)]、p-Smad2/3[(1.457±0.111)比(0.815±0.039)]、p-Smad3[(1.320±0.147)比(0.623±0.128)]蛋白表达较刺激前表达明显增多(P<0.01),Smad7表达较对照组降低[(0.613±0.107)比(0.865±0.063),P<0.05)];与TGF-β1处理组相比,BP5可抑制由TGF-β1刺激人肺成纤维细胞引起的collagen-Ⅰ蛋白[(0.718±0.049)比(1.402±0.158)]、p-Smad2/3[(0.696±0.031)比(1.457±0.111)]p-Smad3[(0.766±0.006)比(1.320±0.147)]表达上调(P均<0.01),而Smad7的蛋白表达明显增加[(1.237±0.173)比(0.614±0.107),P<0.05]。结论 BP5可能通过抑制TGF-β1/Smads信号通路激活,下调TGF-β1刺激下人肺成纤维细胞的collagen-I及α-SMA蛋白的表达,提示BP5可能对肺纤维化具有一定的干预作用。

吡格列酮联合利拉鲁肽对老年2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者血浆脂联素、转化生长因子-β1水平的影响

目的探讨吡格列酮联合利拉鲁肽对老年2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者血浆脂联素、转化生长因子(TGF)-β1水平的影响。方法选择老年2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者62例,按照随机表法分为对照组与治疗组,各31例。对照组给予利拉鲁肽治疗,观察组在对照组基础上结合吡格列酮治疗。两组疗程均为12 w。比较两组疗效,治疗前后糖代谢变化、肝功能、脂联素和TGF-β1水平变化。结果治疗组治疗总有效率显著高于对照组(χ^2=5.415,P<0.05)。治疗组治疗后空腹血糖(FPG,6.73±0.43)mmol/L、糖化血红蛋白(HbA1c,7.08%±0.32%)和2 h餐后血糖(2 h PG,9.21±0.76)mmol/L显著低于对照组〔(7.21±0.28)mmol/L、(7.71±0.41)%和(10.63±0.89)mmol/L,t=5.208、6.744、6.756,P<0.05〕。治疗组治疗后谷丙转氨酶(ALT,37.76±3.37)U/L、γ谷氨酰转肽酶(GGT,43.19±3.26)U/L和谷草转氨酶(AST,28.93±2.24)U/L显著低于对照组〔(42.18±2.78)U/L、(48.42±3.78)U/L和(32.26±2.37)U/L,t=5.633、5.834、5.686,P<0.05〕。治疗组治疗后血清脂联素(6.32±0.61)mg/L显著高于对照组〔(5.49±0.46)mg/L〕,而TGF-β1〔(7.43±0.76)μg/L〕显著低于对照组〔(9.89±1.02)μg/L,t=6.049、10.768,均P<0.05〕。结论吡格列酮联合利拉鲁肽对老年2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝患者疗效明显,可改善患者糖代谢和肝功能,且可提高脂联素水平及降低TGF-β1水平。

噬菌体肽库筛选转化生长因子βⅡ型受体亲和肽

目的:从噬菌体随机肽库中筛选转化生长因子β(TGF-β)Ⅱ型受体的亲和短肽。方法:以重组可溶性人TGF-βⅡ型受体作为靶标,应用噬菌体随机十二肽库进行筛选,经过3轮淘选,提取阳性噬菌体克隆ssDNA,测序并进行序列分析。结果:通过筛选噬菌体获得富集,挑选10个能与人TGF-βⅡ型受体特异性结合的噬菌体克隆,测序得到4个核酸序列,未发现共有保守序列。结论:通过噬菌体肽库技术能筛选出与TGF-βⅡ型受体结合的噬菌体展示肽,为进一步研究TGF-βⅡ型受体亲和短肽及在抗肝纤维化中的作用提供依据。

转化生长因子β_1的c-jun氨基端激酶和p38蛋白激酶通路及其抑制剂与纤维化

转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β-)是一个多功能肽类生长因子,对生长、分化、细胞外基质(extracellular matrix,ECM)沉积和免疫应答有广泛的潜在作用.TGF-β1是体内最有力的促纤维化因子之一,已表明其是多种组织纤维化发生的关键介导者.

从噬菌体肽库中筛选生长因子模拟肽的研究进展

生长因子通过膜受体可将胞外信号转导至胞内 ,现已发现一些小分子肽能够作为受体的配体模拟天然配体的生物学作用。以可溶性受体的纯化蛋白或转染了膜受体的完整细胞为靶标 ,人们从噬菌体肽库中筛选出多种模拟肽 ,对这些肽的序列和生物学功能进行分析 ,发现它们能够竞争受体与天然配体相结合 ,可作为生长因子受体的拮抗剂或激动剂。噬菌体展示技术的应用不仅为生物大分子间的结构和功能关系提供信息 ,而且为新药的研究提供了新思路。本文对从噬菌体肽库中筛选生长因子受体肽类拮抗剂或激动剂的研究进展作一综述。

人转化生长因子β1成熟肽基因的克隆及序列测定

转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF β1)作为细胞主要的负调控生长因子,参与了哺乳动物各种细胞的病理和生理过程。此外,TGF β1可望应用于创伤愈合、免疫抑制、肿瘤抑制等方面,具有潜在的临床应用前景。我们在完成了人TGF β1基因的克隆及其在真核细胞中的表达后,准备进行其在大肠杆菌中的高效表达研究。

还原型谷胱甘肽通过抑制转化生长因子-β1／Smads信号通路减轻博莱霉素致大鼠肺纤维化

目的探讨还原型谷胱甘肽（GSH）对博莱霉素（BLM）致肺纤维化的保护作用和可能机制。方法将40只SD大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、地塞米松组及GSH组，每组10只。采用气管内滴注博莱霉素5mg／kg诱导大鼠肺纤维化模型；对照组气管内滴注生理盐水2mud。24h后，模型组、地塞米松组及GSH组分别腹腔内注射生理盐水2mL／d、地塞米松1mg·kg^-1·d^-1及GSH120mg·kg^-1·d^-1进行干预。制模28d处死大鼠取肺组织，苏木素-伊红（HE）染色评价肺组织病理学改变；Masson染色评价肺间质纤维化程度；免疫组化染色检测肺组织仅-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达水平；反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）测定肺组织转化生长因子-β1（TGF-β1）及Smad3和Smad7的mRNA表达。结果光镜下可见对照组肺组织结构完整，无炎性细胞浸润；模型组肺组织大片肺泡结构破坏，肺泡间隔明显增厚，可见大量炎性细胞浸润；GSH组与地塞米松组肺组织病理改变较模型组减轻，以GSH组肺泡炎及肺纤维化程度减轻更显著。与对照组比较，模型组肺组织胶原纤维染色面积显著增加（μm2：127．47±6．98比39．29±5．42），α-SMA表达明显升高[吸光度（4）值：12．22±1．21比1．97±0．75]，TGF-β1与Smad3的mRNA表达明显减少，Smad7的mRNA表达明显增多（对照组为1，TGF-β1、Smad3、Smad7的mRNA相对表达量分别为5．79±0．61、8．49±0．38、0．32±0．05，均P〈0．01）。地塞米松与GSH干预均可减轻上述损伤效应，以GSH组改善更为显著，GSH组肺组织胶原纤维染色面积（87．81±7．71）、饯-SMA表达（8．34±1．48）、TGF-β1mRNA（1．58±0．22）、Smad3mRNA（2．21±0．19）、Smad7mRNA（0．87±0．04）表达水平与模型组比较差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论GSH早期应用可能通过抑制TGF-β1、Smad3的表达及促进Smad7的表达来发挥对BLM致大鼠肺纤维化的保护作用。

百草枯解毒成方辅助治疗对急性百草枯中毒患者血Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型前胶原肽及转化生长因子β1的影响

目的观察百草枯解毒成方辅助治疗对急性百草枯中毒(APP)患者Ⅰ型胶原蛋白(PⅠCP)、Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)及转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法选择河北医科大学附属衡水市人民医院2016年7月至2018年7月收治的APP患者78例,按入院先后顺序随机分为对照组和观察组,各39例。2组患者均给予常规系列治疗,对照组在洗胃后给予20%甘露醇导泻;观察组在洗胃后给予百草枯解毒1号方导泻,导泻结束后加用百草枯解毒2号方口服,2次/d,连用14 d。2组患者均在治疗前及治疗3、7、14、28 d后检测动脉血氧分压(PaO2)、PⅠCP、PⅢNP、TGF-β1并行胸部高分辨率CT(HRCT)检查。统计2组患者28 d病死率。结果观察组28 d病死率明显低于对照组[48.7%(19/39)比71.8%(28/39)](P<0.05)。2组治疗后HRCT评分逐渐增加,治疗14 d后达到顶峰然后逐渐下降,观察组治疗3、7、14、28 d后HRCT评分均明显低于对照组(均P<0.05)。2组治疗后PaO2逐渐降低,治疗7 d后降至最低然后逐渐回升,观察组回升迅速;PⅠCP、PⅢNP及TGF-β1逐渐升高,治疗7 d后达高峰然后逐渐下降,观察组下降更快;观察组治疗3、7、14、28 d后的PaO2均高于对照组,而PⅠCP、PⅢNP及TGF-β1均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论百草枯解毒成方辅助治疗能使APP患者血中PICP、PⅢNP及TGF-β1增长缓慢,延缓肺纤维化形成,改善预后,降低患者病死率。

癫痫耐药患者血清和脑脊液中P-糖蛋白、转化生长因子-β1及谷胱甘肽S转移酶的表达

目的观察难治性癫痫患者血清和脑脊液中P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、转化生长因子(transforming growth factor,TGF)β1及谷胱甘肽S转移酶(glutathione S-transferase,GST)的表达。方法选取2018年2月~2020年11月期间解放军联勤保障部队第983医院规范治疗2年以上的癫痫耐药患者79例作为耐药组,同期接受抗癫痫治疗控制良好的患者60例作为敏感组。比较敏感组和耐药组脑脊液、血清中P-gp、GST、TGF-β1水平差异,分别计算同组患者脑脊液和血清中P-gp、GST、TGF-β1的相关性。结果耐药组脑脊液中P-gp、GST、TGF-β1水平均高于敏感组,两组间差异均有统计学意义(P<0.05)。耐药组血清中P-gp、GST水平高于敏感组,两组间差异均有统计学意义(P<0.05);TGF-β1水平差异无统计学意义(P>0.05)。耐药组和敏感组的血清和脑脊液中P-gp和GST表达正相关,耐药组P-gp的相关系数为0.873,GST相关系数为0.891。耐药组和敏感组脑脊液和血清TGF-β1表达无相关性。结论癫痫耐药患者脑脊液中P-gp、GST、TGF-β1水平升高,外周血P-gp、GST水平升高,监测外周血的P-gp、GST变化可能为癫痫药物治疗方案制定提供参考。

兔骨髓基质干细胞的分离培养和鉴定及转化生长因子β1的基因瞬时转染研究

目的：通过研究兔骨髓基质干细胞（BMSC）的体外获取方法、生物学鉴定以及新型靶向性非病毒载体介导转化生长因子β1（TGF-β1）基因在BMSC中的瞬时转染和表达，为下一步的骨组织工程基因治疗研究奠定基础。方法：取4周龄新西兰大白兔骨髓，通过密度梯度离心法和全骨髓培养法获取BMSC，通过倒置相差显微镜、BrdU标记染色观察其形态学特征和生长状况，免疫组化观察其表面抗原表达情况。固相合成法合成含RGD肽K16GRGDSPC（K16-RGD）。以K16-RGD为载体介导TGF-β1基因转染兔BMSC，免疫组化检测其瞬时转染和表达·效率。结果：分离培养的细胞在第10-12代以前生长性状稳定，增殖能力强。免疫组化检测兔BMSC表达CD90、CD44，但不表达CD34、CD45、CD11b和层黏连蛋白Laminine。与全血培养法相比较，密度梯度离心法获取的BMSC纯度更高。K16-RGD介导TGF-β1基因瞬时转染效率可达（21．6±4．3）％。结论：分离培养的细胞成分较为单一，具有干细胞特性；TGF-β1基因能在BMSC中转染和表达，为下一步利用BMSC、K16．RGD和TGF-β1基因进行骨组织工程基因治疗研究奠定了基础。

转化生长因子β1的关键序列筛选及鉴定

目的应用噬菌体随机12肽库,筛选转化生长因子β1(Transforming growth factor-beta1,TGF-β1)的关键序列,进行TGF-β1活性短肽的合成,并检测其与成纤维细胞的亲和力。方法以TGF-β1单克隆抗体为靶,筛选噬菌体随机12肽库,获得TGF-β1的特异性序列。进行序列比对分析,选择TGF-β1的关键序列。进行TGF-β1活性短肽的合成、纯化、修饰及免疫荧光标记。应用免疫荧光法检测TGF-β1活性短肽的成纤维细胞亲和力。结果筛选噬菌体随机12肽库,获得10个与TGF-β1相似的特异性序列。分析获得7个TGF-β1的关键序列。合成获得7个TGF-β1活性短肽,并纯化至98%,短肽的C端进行氨基化封闭,N端进行罗丹明激光染料标记。免疫荧光检测结果显示,1个TGF-β1活性短肽能够与成纤维细胞相结合。结论从噬菌体随机12肽库中筛选到TGF-β1的关键序列,1个TGF-β1活性短肽能够与成纤维细胞相结合,有望应用于促进创面愈合的相关研究。

乙型病毒性肝炎患者血清转化生长因子β1含量的变化分析

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在慢性肝病患者中的变化规律以及与肝损害的关系。方法:采用定量EL ISA方法检测血清TGF-β1含量,并与肝纤维化标志物Ⅲ型前胶原肽(PC III)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、层粘连蛋白(LN)和透明质酸(HA)指标比较。结果:乙肝各病例组的TGF-β1含量均显著高于正常对照组(P<0.05或P<0.01),各组之间除慢性乙肝中度组与重度组之间无显著性差异外,均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。TGF-β1的含量随着肝病严重程度的加重而升高,升高的程度与病情轻重成正相关,并与PC III、CⅣ、LN、HA也成正相关。肝纤四项水平除正常组与轻度组LN水平间无显著性差异外,其余各组间两两比较均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论:TGF-β1可作为一项反映病情轻重及肝纤维化程度的血清学诊断指标。