长链非编码RNA通过调控上皮-间充质转化参与胶质瘤侵袭和转移的研究进展

胶质瘤是发病率和病死率均较高的恶性肿瘤之一,治疗后易复发且患者中位生存期短。上皮-间充质转化(EMT)在胶质瘤的侵袭、转移过程中具有重要作用。长链非编码RNA(lncRNA)通过多种信号通路参与胶质瘤细胞的EMT过程,EMT可增强肿瘤细胞的运动和迁移能力,促进肿瘤细胞进入血液或淋巴循环,进而发生转移。EMT的调控机制十分复杂,多种生长因子、激酶、转录因子、非编码RNA等参与其中。本文对lncRNA通过调控EMT参与胶质瘤侵袭和转移的研究进展做一综述。

长链非编码RNA X失活特异转录物调控miR-340-5p对卵巢癌细胞上皮间质转化的影响

目的探讨长链非编码RNA X失活特异转录物(lncRNA XIST)通过调控miR-340-5p对卵巢癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测卵巢癌组织和细胞系中lncRNA XIST和miR-340-5p表达水平。A2780细胞分为Control组、si-NC组、si-lncRNA XIST组、si-lncRNA XIST+NC inhibitor组、si-lncRNA XIST+miR-340-5p inhibitor组。双荧光素酶实验证实lncRNA XIST和miR-340-5p的调控关系;划痕实验和Transwell法检测迁移和侵袭能力;RT-qPCR、Western blot和免疫荧光染色分析EMT标志蛋白(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)的mRNA和蛋白表达。结果在卵巢癌组织和细胞系中,lncRNA XIST高表达,miR-340-5p低表达(P<0.05)。选择lncRNA XIST表达最高的A2780细胞作为转染对象。lncRNA XIST能够直接靶向下调miR-340-5p表达(P<0.05)。转染si-lncRNA XIST后,lncRNA XIST水平、划痕愈合率、侵袭细胞数和N-cadherin、Vimentin表达降低,E-cadherin表达升高(P<0.05);共转染si-lncRNA XIST和miR-340-5p inhibitor后上述指标均得到逆转(P<0.05)。结论lncRNA XIST通过下调miR-340-5p促进卵巢癌细胞EMT。

联合检测被转化生长因子b激活的长链非编码RNA和糖链抗原19-9对胰腺癌的诊断和预后价值

目的探讨联合检测被转化生长因子b激活的长链非编码(lncRNA-ATB)和糖链抗原19-9(CA19-9)在胰腺癌诊断和预后评估中的价值。方法选取2012年4月至2014年7月在安阳市人民医院肝胆外科接受手术治疗的胰腺癌病人103例(观察组)、良性疾病150例(良性组)以及同期健康体检者150例(健康组)。分别检测三组研究对象血清lncRNA-ATB的表达和CA19-9水平;采用受试者工作特征曲线(ROC)分析lncRNA-ATB和CA19-9对胰腺癌的诊断价值,采用比例风险(COX)回归模型分析影响胰腺癌病人预后的独立危险因素。结果观察组lncRNA-ATB和CA19-9水平[lncRNA-ATB(4.03±1.35),CA19-9:89.02±24.63)U/mL]均显著高于良性组[lncRNA-ATB(2.76±0.84),CA19-9(58.74±18.62)U/mL]和健康组[lncRNA-ATB(1.68±0.43),CA19-9(16.93±6.31)U/mL,均P<0.05],良性组lncRNA-ATB和CA19-9水平显著高于健康组(P<0.05)。ROC曲线显示,血清lncRNA-ATB、CA19-9以及两者联合的曲线下面积(AUC)分别为0.833(95%CI:0.793~0.868,P<0.001)、0.765(95%CI:0.720~0.805,P<0.001)、0.884(95%CI:0.849~0.914,P<0.001)。其中,两者联合检测与lncRNA-ATB及CA19-9的AUC差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示,lncRNA-ATB与CA19-9呈显著正相关(r=0.307,P<0.001)。COX回归分析显示较高血清lncRNA-ATB[OR(95%CI):1.11(1.04~1.17)]相对表达量是影响胰腺癌病人术后生存的独立危险因素。结论血清lncRNA-ATB和CA19-9在胰腺癌病人中表达显著上调,两者联合检测对胰腺癌的诊断效能更佳,是胰腺癌早期诊断和预后评估的潜在生物标志物。

长链非编码RNA uc.412介导转化生长因子-β1诱导的系膜细胞自噬的机制研究

目的探究长链非编码RNA uc.412(long non-coding RNA uc.412,LncRNA uc.412)在转化生长因子-β1(transforming growth factor,TGF-β1)诱导的系膜细胞自噬中的作用及相关机制。方法用TGF-β1(10μg/L)干预大鼠系膜细胞,Western blot法检测自噬标志物LC3、p62的蛋白表达,Real-time PCR法检测LncRNA uc.412的表达;采用LncRNA uc.412过表达慢病毒转染系膜细胞并用Real-time PCR法检测转染效率,分别采用Western blot法和Real-time PCR法检测LC3和p62在蛋白水平和mRNA水平表达变化;用TGF-β1(10μg/L)和Smad3特异性磷酸化抑制剂SIS3(1μmol)干预系膜细胞,Western blot法检测pSmad3的蛋白表达,Realtime PCR法检测LncRNA uc.412的表达。结果与对照组相比,TGF-β1组LC3Ⅱ/Ⅰ、p62表达上调(P<0.05),LncRNA uc.412表达增加(P<0.05);过表达LncRNA uc.412组LC3和p62在蛋白和mRNA水平高于对照组和病毒空载组(P<0.05);与对照组相比,TGF-β1组p Smad3蛋白和LncRNA uc.412表达上调(P<0.05);与TGF-β1组相比,TGF-β1+SIS3组p Smad3蛋白和LncRNA uc.412表达下降(P<0.05)。结论LncRNA uc.412可能作为TGF-β1/Smad3通路的下游效应分子促进系膜细胞自噬,并且为慢性肾脏病的诊治提供新的思路。

长链非编码RNA在心肌梗死后心肌纤维化中的机制研究进展

心肌梗死(myocardial infarction,MI)是最常见、危害最大的心血管疾病之一,MI后心肌修复与纤维化直接影响MI的预后与转归。近年来,长链非编码RNA(long noncoding RNA,lnc RNA)在心肌梗死后心肌纤维化(cardiac fibrosis after myocardial infraction,CFMI)中的调控作用逐渐成为研究热点。lncRNA在CFMI中扮演重要角色,可通过多种途径调控CFMI进程。本文对lncRNA在CFMI中的调控机制作一综述,为寻找CFMI早期诊断生物标志物和药物治疗新靶点提供思路。

lncRNA AK09679联合血浆骨形成蛋白-7与转化生长因子-β1用于预测早产儿支气管肺发育不良的价值

目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)AK09679联合血浆骨形成蛋白-7(BMP-7)与转化生长因子-β1(TGF-β1)用于预测早产儿支气管肺发育不良(BPD)的临床价值。方法:选择2018年6月~2020年8月74例早产儿为研究对象,按照早产儿BPD诊断标准分成44例的非BPD组和30例BPD组,对患儿的lncRNA AK09679、BMP-7、TGF-β1进行检测,分析以上指标对早产儿BPD的预测价值。结果:与非BPD组相比,BPD组在出生第1天、第7天、第14天的血浆TGF-β1、BMP-7水平均较高,差异有统计学意义(P<0.05);与非BPD组相比,BPD组脐带血lncRNA AK096792表达水平均更高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:lncRNA AK09679、血浆骨形成蛋白-7与转化生长因子-β1与早产儿BPD的发生密切相关,对早期预测早产儿BPD临床价较高。

miR-223-3p通过靶向TGFBR3促进LncRNA ADAMTS9-AS2表达上调抑制肺癌细胞的增殖和迁移作用

目的:探讨miR-223-3p通过靶向转化生长因子-βⅢ型受体(TGFBR3)促进长链非编码RNA(LncRNA)ADAMTS9-AS2表达上调抑制肺癌细胞增殖和迁移的作用及可能机制。方法:采用RT-PCR检测肺癌H1299细胞中miR-223-3p和TGFBR3 mRNA表达水平,Western blotting检测TGFBR3的蛋白表达水平,RT-qPCR检测LncRNA ADAMTS9-AS2的表达水平,CCK-8检测细胞增殖能力,Transwell细胞迁移实验和划痕实验检测细胞迁移能力。采用脂质体转染miR-223-3p模拟物(过表达组)、抑制剂(抑制组)、对照质粒(对照组)于H1299细胞中,比较各组转染前后miR-223-3p、TGFBR3、LncRNA ADAMTS9-AS2表达水平、细胞增殖能力、细胞迁移能力。结果:与转染前比较,过表达组转染后的H1299细胞中miR-223-3p、LncRNA ADAMTS9-AS2表达水平均升高(P<0.05),TGFBR3蛋白和mRNA表达水平均降低(P<0.01和P<0.05),细胞增殖和迁移能力下降(P<0.05);抑制组转染后的细胞中miR-223-3p和LncRNA ADAMTS9-AS2表达水平均降低(P<0.05),TGFBR3蛋白和mRNA表达水平均升高(P<0.01和P<0.05),细胞增殖和迁移能力均增加(P<0.05)。转染72 h后,TGFBR3蛋白表达水平及mRNA的表达水平细胞增殖与迁移能力:抑制组>观察组>过表达组(P<0.01)。3组miR-223-3p、LncRNA ADAMTS9-AS2 mRNA表达水平逐渐降低,抑制组<对照组<过表达组(P<0.01)。结论:miR-223-3p抑制肺癌H1299细胞的增殖和迁移,靶向下调TGFBR3和上调LncRNA ADAMTS9-AS2表达可能为其作用机制。

长链非编码RNA uc.412在肾脏纤维化中的表达及作用

目的探讨长链非编码RNA uc.412(LncRNA uc.412)在肾脏纤维化中的作用及可能的作用机制。方法将12只雄性C57B/6小鼠随机分为对照组和单侧输尿管结扎(UUO)组,各6只。UUO组小鼠行左侧单侧输尿管结扎手术使其梗阻,构建肾脏纤维化模型;对照组小鼠行输尿管钝性分离但未进行结扎。于术后14 d处死小鼠,分别收集两组小鼠的血液及肾脏组织标本,检测血肌酐、血尿素氮;Masson染色检测肾脏纤维化程度;实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测肾组织内LncRNA uc.412、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))、胶原蛋白1(COL1)基因表达水平;蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测肾组织中COL1蛋白的表达。体外培养大鼠系膜细胞,以TGF-β_(1)和siRNA处理细胞,应用qPCR法检测LncRNA uc.412表达,Western blot法检测细胞内α-SMA蛋白的表达。体外培养大鼠系膜细胞,以TGF-β_(1)、Smad3磷酸化特异性抑制剂SIS3处理细胞,qPCR法检测LncRNA uc.412表达水平。结果动物实验中,UUO组小鼠血肌酐和血尿素氮水平显著高于对照组[(135.6±4.1)μmol/L比(14.4±0.9)μmol/L,(23.4±2.2)mmol/L比(8.3±1.3)mmol/L](P<0.01),Masson染色显示UUO组纤维化改变明显。UUO组小鼠组织内LncRNA uc.412、α-SMA、TGF-β_(1)、COL1的mRNA高于对照组[(13.07±3.78)比(1.05±0.30),(13.03±2.20)比(1.16±0.54),(14.87±5.18)比(1.20±0.77),(188.61±34.79)比(1.03±0.25)](P<0.05),且UUO组COL1蛋白表达量明显高于对照组[(2.629±0.045)比(0.969±0.003)](P<0.01)。siRNA对TGF-β_(1)诱导大鼠系膜细胞中,TGF-β_(1)组LncRNA uc.412的表达高于对照组,TGF-β_(1)+25 nmol/L siRNA组、TGF-β_(1)+50 nmol/L siRNA组、TGF-β_(1)+75 nmol/L siRNA组低于TGF-β_(1)组(P<0.05);TGF-β_(1)组α-SMA蛋白表达高于对照组,TGF-β_(1)+siRNA组低于TGF-β_(1)组(P<0.05)。SIS3干预大鼠系膜细胞中,TGF-β_(1)组LncRNA uc.412表达高于对照组,TGF-β_(1)+SIS3组低于TGF-β_(1)组P<0.05)。结论LncRNA uc.412表达水平升高参与UUO模型肾脏纤维化的发生。TGF-β_(1)可能通过TGF-β_(1)/Smad3信号通路诱导系膜细胞LncRNA uc.412的表达增加,进而引起肾脏纤维化的改变。

长链非编码RNA转化生长因子-β诱导HOXA转录物调控KHDRBS3介导的肿瘤干细胞机制研究

目的研究长链非编码RNA(LncRNA)转化生长因子(TGF)-β诱导HOXA转录物(HIT)在胰腺癌组织中的表达及其与细胞转移间的关系及机制。方法培养人肾上皮细胞系293T并进行HIT干扰载体的慢病毒细胞包装,构建Capan-1干扰HIT细胞模型,分为对照组、干扰1#组及干扰2#组,以Transwell侵袭及迁移实验检测各组细胞侵袭及迁移数量的变化,以蛋白质印迹(Western Blot)法检测各组细胞KHDRBS3及CD44的蛋白表达变化。结果对照组、干扰#1组及干扰#2组中HIT mRNA表达水平分别为1.00±0.07,0.36±0.02及0.30±0.03,KHDRBS3 mRNA表达水平分别为1.00±0.11,1.22±0.13及0.93±0.09,CD44 mRNA表达水平分别为1.00±0.09,0.61±0.06及0.46±0.04,KHDRBS3蛋白相对表达水平分别为0.81±0.06,0.12±0.01及0.18±0.02,CD44蛋白相对表达水平分别为0.57±0.06,0.19±0.02及0.23±0.03,每视野侵袭细胞数分别为(66.0±7.4),(32.5±5.1)和(26.1±5.8)个,每视野迁移细胞数分别为(71.6±8.0),(21.5±3.7)及(24.9±4.2)个,干扰#1组及干扰#2组侵袭及迁移细胞数显著低于对照组(P<0.01);干扰1#组及干扰2#组KHDRBS3蛋白及CD44 mRNA和蛋白表达明显低于对照组(P<0.01)。结论LncRNA HIT在胰腺癌组织中高表达,且可通过激活KHDRBS3/CD44通路,促进胰腺癌细胞的侵袭转移能力。

TGF-β1干预构建的人支气管上皮细胞上皮-间质转化模型中lncRNA和miRNA表达及其意义

目的探讨人转化生长因子β1(TGF-β1)干预构建的人支气管上皮细胞16HBE上皮-间质转化(EMT)模型中lncRNA和miRNA的表达情况。方法体外培养16HBE细胞,设立对照组和处理组。处理组以TGF-β1诱导细胞构建EMT细胞模型,对照组加入等量RPMI基础培养液。分别于TGF-β1处理细胞后24、48、72 h使用倒置显微镜观察两组细胞形态及分布。当处理组细胞开始出现明显梭形改变时,采用RNA分离、逆转录以及实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测两组细胞中lncRNA和miRNA相对表达量。结果经TGF-β1处理细胞48 h后,处理组细胞梭形改变明显,细胞间隙增大,显示EMT模型构建成功。同时在该时间点,两组细胞中TBILA、NKILA、LNCRNA-ATB、HOTAIR、NEAT 1、miR-125b-5p、miR-21-3p、miR-21-5p、miR-27a-3p、miR-27a-5p、miR-141-3p、miR-200c-3p、miR-17-5p、miR-34a-5p的相对表达量比较差异均具有显著意义(t=-16.353~6.460,P<0.05)。结论TGF-β1干预能够成功构建EMT细胞模型,该细胞模型中的细胞与正常细胞相比,多个lncRNA和miRNA表达具有显著差异。上述基因可能参与了EMT或气道重塑的形成和发展,或许为这些疾病的防治提供分子理论支持。

温阳消癥方调控LncRNA MEG3对TGF-β_(1)诱导的肾小管上皮细胞纤维化因子的影响

目的:探讨温阳消癥方对TGF-β_(1)诱导的人近端肾小管上皮细胞LncRNA MEG3的调控作用及对纤维化因子的影响。方法:体外培养人近端肾小管上皮细胞(HK-2),分为对照组、TGF-β_(1)组、TGF-β_(1)+3.5 mg/ml温阳消癥组、TGF-β_(1)+14 mg/ml温阳消癥组,MTT法检测细胞增殖,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)及结缔组织生长因子(CTGF)mRNA及长链非编码RNA母系表达基因3(LncRNA MEG3)表达,蛋白质印迹法检测α-SMA、FN、CTGF蛋白表达。结果:3.5、7、14 mg/ml温阳消癥不影响细胞增殖,35 mg/ml组细胞增殖明显降低(P<0.01);与对照组比较,TGF-β_(1)组中α-SMA、FN、CTGF mRNA、LncRNA MEG3及FN、CTGF蛋白表达显著升高(P<0.01),α-SMA蛋白表达升高(P<0.05);与TGF-β_(1)组比较,两个温阳消癥方治疗组α-SMA、FN、CTGF mRNA、LncRNA MEG3、FN蛋白表达,及TGF-β_(1)+14 mg/ml温阳消癥组α-SMA、CTGF蛋白表达均显著降低(P<0.01),TGF-β_(1)+3.5 mg/ml温阳消癥组α-SMA、CTGF蛋白表达降低(P<0.05);与TGF-β_(1)+3.5 mg/ml温阳消癥组相比,TGF-β_(1)+14 mg/ml温阳消癥组α-SMA、CTGF mRNA及CTGF蛋白表达均显著降低(P<0.01),FN mRNA及LncRNA MEG3表达降低(P<0.05)。结论:温阳消癥方可下调LncRNA MEG3的表达,抑制TGF-β_(1)诱导的HK-2细胞纤维化,其抑制纤维化的作用可能和调控LncRNA MEG3的表达有关。

LncRNA PFL通过AMPK-PPARα信号通路改善心肌纤维化

目的研究促纤维化长链非编码RNA(LncRNA PFL)改善压力负荷诱导的心肌纤维化同腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)-过氧化物酶增殖激活的α亚型受体(PPAR)α信号通路的激活是否相关。方法将60只大鼠随机分为A(假手术)组、B(压力负荷诱导的心肌纤维化模型)组、C(压力负荷诱导的心肌纤维化模型+LncRNA PFL抑制剂)组。采用苏木素-伊红(HE)染色检测心肌组织的病理形态和纤维化程度,羟脯氨酸(HYP)检测心肌质量,Western印迹测定心肌组织中AMPK、PPARα蛋白水平。结果与A组比较,B组和C组心脏重量指数(HWI)和左心室重量指数(LVWI)均显著升高(P<0.01);与B组比较,C组显著下降(P<0.01)。HE染色结果:与A组比较,B组和C组心肌细胞的炎症浸润和细胞间胶原纤维均显著增加,神经元细胞损伤程度加重(P<0.05);与B相比,C组显著好转(P<0.05)。免疫荧光结果:B组AMPK及PPARα蛋白水平明显低于A组和C组,且C组明显低于A组。RT-qPCR及Western印迹结果:B组心肌组织中AMPK和PPARαmRNA及蛋白表达显著低于A组和C组,且C组显著高于A组(P<0.05)。结论LncRNA PFL表达下调改善压力负荷诱导的心肌纤维化与激活AMPK-α信号通路有关。

血清lncRNA TGFB2-AS1水平与冠状动脉钙化及其严重程度的关系

目的:探究血清长链非编码RNA(lncRNA)TGFB2-反义RNA 1(TGFB2-AS1)水平与冠状动脉钙化(CAC)及其严重程度的关系。方法:选取2018年5月—2021年7月于丹东市第一医院行CT、冠状动脉造影检查的185例病人为研究对象,根据病人是否发生CAC将其分为非CAC组(47例)与CAC组(138例)。比较CAC组、非CAC组一般资料及血清lncRNA TGFB2-AS1、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))水平;比较不同CAC严重程度病人的血清lncRNA TGFB2-AS1、TGF-β_(1)水平;分析CAC病人血清lncRNA TGFB2-AS1表达水平与TGF-β_(1)的相关性;分析血清lncRNA TGFB2-AS1表达水平诊断CAC的价值。结果:CAC组病人高血压占比、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平、糖尿病占比、冠心病占比及TGF-β_(1)水平高于非CAC组(P<0.05),血清lncRNA TGFB2-AS1水平低于非CAC组(P<0.05);中度、重度CAC组病人血清lncRNA TGFB2-AS1表达水平低于轻度CAC组(P<0.05),TGF-β_(1)水平高于轻度CAC组(P<0.05);重度CAC组病人血清lncRNA TGFB2-AS1表达水平低于中度CAC组(P<0.05),TGF-β_(1)水平高于中度CAC组(P<0.05);CAC病人血清lncRNA TGFB2-AS1表达水平与TGF-β_(1)呈负相关(r=-0.589,P<0.05);血清lncRNA TGFB2-AS1诊断CAC的受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)为0.905,截断值为0.78,此时其敏感度为83.0%,特异度为87.7%。结论:CAC病人血清lncRNA TGFB2-AS1表达水平较低,与TGF-β_(1)相关,其有望成为临床诊断CAC并评估其严重程度的有效指标。

PVT1通过TGF-β1/SMAD通路促进子宫内膜基质细胞过度纤维化的研究

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤多样异位基因1(PVT1)在调控子宫内膜基质细胞纤维化中的病理生理作用及分子机理。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人子宫内膜基质细胞(HESCs)中PVT1、胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、转化生长因子-β1(TGF-β1)、SMAD2及SMAD3的表达水平。结果PVT1过表达促进HESCs增殖(P<0.05),而PVT1沉默抑制HESCs增殖(P<0.05)。过表达PVT1在HESCs中上调胶原蛋白Ⅰ和胶原蛋白ⅢmRNA的表达(P<0.05),而PVT1被敲除时,胶原蛋白Ⅰ和胶原蛋白ⅢmRNA的表达水平被显著下调(P<0.05)。过表达PVT1在HESCs中可以进一步上调TGF-β1/SMAD信号相关基因(TGF-β1、SMAD2、SMAD3)的表达(P<0.05)。当PVT1被敲除时,TGF-β1/SMAD信号相关基因胶原蛋白Ⅰ和胶原蛋白ⅢmRNA的表达水平被显著下调(P<0.05)。PVT1可诱导HESCs上清液中TGF-β1的产生(P<0.05)。结论PVT1可通过TGF-β1/SMAD通路促进子宫内膜基质细胞过度纤维化而产生胶原蛋白。同时,PVT1可能是一个用于治疗子宫内膜粘连的新靶点。

转化生长因子-β1对肺成纤维细胞中lncRNA-ATB和纤维化因子mRNA水平的影响

[目的]研究转化生长因子(TGF)-β1刺激肺成纤维细胞MRC-5后被TGF-β活化的长链非编码RNA(lncRNA-ATB)和I型胶原蛋白(Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(Col Ⅲ)以及纤连蛋白(FN)等纤维化因子基因mRNA水平的变化及其相关性。[方法 ]将成纤维细胞株MRC-5以5×103个/孔的密度种于96孔板中,分别经浓度为0、2.5、5.0、10.0 ng/mL的TGF-β1刺激24 h后,通过MTT法测定细胞增殖活性,采用实时荧光定量PCR法检测MRC-5细胞中lncRNA-ATB、Col Ⅰ、Col Ⅲ、FN的mRNA相对水平。采用Spearman秩相关检验分析lncRNA-ATB与Col Ⅰ、Col Ⅲ、FN 3个基因mRNA相对水平之间的相关性。[结果 ]随着TGF-β1刺激浓度的增加,MRC-5细胞增殖活性增高,5.0、10.0 ng/mL组的细胞增殖活性分别是0 ng/mL组的1.07倍和1.12倍(P <0.05)。随TGF-β1浓度的增加,2.5、5.0、10.0 ng/mL组中FN的mRNA水平分别是0 ng/mL组的2.11倍(P=0.018)、3.58倍(P=0.03)和6.51倍(P <0.01);2.5、5.0、10.0 ng/mL组中Col Ⅰ的mRNA水平分别是0 ng/mL组的1.28倍(P=0.324)、4.64倍(P <0.01)和3.97倍(P <0.01);2.5、5.0、10.0 ng/mL组中Col Ⅲ的mRNA水平分别是0 ng/mL组的1.21倍(P=0.400)、1.42倍(P=0.120)和4.23倍(P <0.01)。2.5、5.0、10.0 ng/mL组中lncRNA-ATB的mRNA水平分别是0 ng/mL组的1.80倍(P=0.073)、3.57倍(P <0.01)和4.55倍(P <0.01)。此外,相关性分析结果显示,lncRNA-ATB与FN(r=0.86)、Col Ⅰ(r=0.85)和Col Ⅱ(Ir=0.82)的mRNA相对水平呈正相关关系(均P <0.05)。[结论] TGF-β1可刺激成纤维细胞增殖,升高lncRNA-ATB、Col Ⅰ、Col Ⅲ、FN的mRNA相对水平。lncRNA-ATB与纤维化因子的表达呈正相关,提示其可能与肺纤维化的发生有关。

LncRNA-ATB在肿瘤中的表达及调控作用研究

长链非编码RNA(lncRNA)是长度>200 nt非编码RNA家族中的重要成员。随着研究的不断深入,人体恶性肿瘤内异常表达的lncRNA对肿瘤发生、发展所起到的调控作用正逐渐被认知。被转化生长因子b激活的长链非编码RNA(lncRNA-ATB)在诸多肿瘤中呈现异常表达,并能够调控肿瘤增殖、侵袭转移、抗凋亡及耐药等恶性生物学行为。

长链非编码RNA MYOSLID 在急性心肌梗死患者血清中的水平及临床意义

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)MYOSLID在急性心肌梗死(AMI)患者血清中的表达及其临床意义。方法选取2019年1月至2021年7月收治的95例AMI患者为AMI组,另选取同期95例健康体检者为对照组。比较两组基本资料;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清lncRNA MYOSLID表达水平,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清转化生长因子-β1(TGF-β1)水平,荧光免疫吸附法测定血清肌酸激酶同工酶-MB(CK-MB)水平,电化学发光法测定血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平;Pearson法分析AMI患者血清lncRNA MYOSLID、TGF-β1水平与CK-MB、cTnI的相关性。结果AMI组患者总胆固醇(TG)、白细胞计数、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、中性粒细胞计数、CK-MB、总胆固醇(TC)、cTnI高于对照组(P<0.05),血清lncRNA MYOSLID、TGF-β1水平低于对照组(P<0.05);AMI患者血清lncRNA MYOSLID、TGF-β1水平与CK-MB、cTnI水平均呈负相关(P<0.05)。AMI患者血清lncRNA MYOSLID表达水平与TGF-β1呈正相关(P<0.05)。结论AMI患者血清lncRNA MYOSLID表达水平较低,与CK-MB、TGF-β1、cTnI显著相关,lncRNA MYOSLID可能是治疗AMI的潜在靶点。

lncRNA-ATB、miR-34a和miR-145在高龄肺腺癌患者癌组织中的表达水平及临床价值

目的探讨高龄肺腺癌患者癌组织内转化生长因子-β激活的长链非编码RNA(lncRNA-ATB)、微小RNA34a(miR-34a)和微小RNA-145(miR-145)的表达水平与其生存情况的关系。方法选取2014年8月至2016年8月在该院治疗的112例高龄肺腺癌患者为研究对象,采用qRT-PCR检测患者癌组织及癌旁组织中lncRNA-ATB、miR-34a和miR-145表达水平,分别根据lncRNA-ATB、miR-34a和miR-145的表达水平将患者分为高、低表达组,以总生存率(OS)作为检测指标,采用Kaplan-Meier法分别分析两组患者的预后情况,并采取Cox法探讨影响患者预后的独立危险因素。结果肺腺癌组织lncRNA-ATB表达水平显著高于癌旁组织,肺腺癌组织miR-34a和miR-145表达水平显著低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。随访发现共24例患者死亡,所有患者的3年OS为78.57%。其中lncRNA-ATB高、低表达组3年OS分别为71.43%、85.71%;miR-34a高、低表达组3年OS分别为91.07%、66.07%;miR-145高表达组高、低表达组3年OS分别为89.29%、67.86%,Log-rank检验显示,各指标高、低表达患者的OS比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。影响患者预后的多因素Cox分析结果显示,肿瘤TNM分期升高、发生淋巴结转移和胸膜侵犯、lncRNA-ATB高表达以及miR-34a、miR-145低表达是影响患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论lncRNA-ATB在高龄肺腺癌患者癌组织中呈高表达,miR-34a、miR-145在高龄肺腺癌患者癌组织中呈低表达,且lncRNA-ATB高表达,miR-34a、miR-145低表达是影响患者预后的独立危险因素。

lncRNA-ATB促进结肠癌细胞侵袭与转移的机制研究

目的研究被转化生长因子β活化的长链非编码RNA(LncRNA-ATB)对人结肠癌细胞侵袭和转移的影响及其潜在机制。方法通过荧光实时定量聚合酶链反应检测LncRNA-ATB在结肠癌细胞系及人正常结肠上皮细胞中的表达、LncRNA-ATB shRNA沉默效果和pcDNA3.1-LncRNA-ATB的过表达效果,以及LncRNA-ATB和白介素11(IL-11)mRNA的表达;细胞侵袭和转移实验检测LncRNA-ATB对结肠癌细胞侵袭和转移能力的影响;RNA结合蛋白免疫沉淀实验检测LncRNA与IL-11 mRNA的结合能力;酶联免疫吸附法检测结肠癌细胞上清中IL-11蛋白的表达。结果 LncRNA-ATB在结肠癌细胞系中的表达较人正常上皮细胞增高;LncRNA-ATB-shRNA可有效沉默HT29细胞中LncRNA-ATB的表达,pcDNA3.1-LncRNA-ATB可有效上调SW620细胞中LncRNA-ATB的表达;LncRNA-ATB可促进结肠癌细胞的侵袭和转移能力。LncRNAATB可与IL-11 mRNA结合并调控其表达,增强其mRNA稳定性,促进其分泌。结论 LncRNA-ATB可通过介导炎症因子IL-11的分泌,在结肠癌细胞的侵袭和转移过程中发挥重要作用。

LncRNA CCAT1通过TGF-β/Smad信号通路对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的:探讨长链非编码核糖核酸(LncRNA)CCAT1对子宫内膜癌细胞增殖、侵袭和迁移及转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路的影响,阐明LncRNA CCAT1在子宫内膜癌发生发展中的作用及可能机制。方法:将人子宫内膜癌Ishiwaka细胞分为空白对照组、阴性对照组、CCAT1-siRNA组和CCAT1-siRNA+LY364947组,阴性对照组细胞转染阴性对照siRNA,CCAT1-siRNA组转染CCAT1-siRNA,CCAT1-siRNA+LY364947组细胞转染CCAT1-siRNA同时加入TGF-β/Smad抑制剂LY364947(3μL),空白对照组细胞不转染。采用RT-PCR法检测各组细胞中CCAT1 mRNA表达水平,CCK8法检测各组细胞增殖能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭和迁移能力,Western blotting法检测各组Ishiwaka细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、锌指转录因子(snail)、凋亡抑制蛋白(Twist)、白细胞抑制因子2/3(Smad2/3)、磷酸化Smad(p-Smad2/3)和转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达水平。结果:Ishiwaka细胞中CCAT1 mRNA表达水平明显高于人子宫内膜基质T-HESC细胞(t=12.929,P<0.01);与空白对照组和阴性对照组比较,CCAT1-siRNA组和CCAT1-siRNA+LY364947组Ishiwaka细胞中CCAT1 mRNA表达水平、细胞增殖能力、侵袭细胞数和迁移细胞数均明显降低(P<0.05),PCNA、vimentin、snail、Twist、p-Smad2/3和TGF-β1蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与CCAT1-siRNA组比较,CCAT1-siRNA+LY364947组Ishiwaka细胞增殖能力、侵袭细胞数和迁移细胞数均明显降低(P<0.05),PCNA、vimentin、snail、Twist、p-Smad2/3和TGF-β1蛋白表达水平降低(P<0.05),E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.05);空白对照组与阴性对照组Ishiwaka细胞中各指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:沉默LncRNA CCAT1可通过抑制TGF-β/Smad信号通路抑制子宫内膜癌细胞增殖、侵袭和迁移。