激素抵抗型肾病综合征患者血清和尿转化生长因子-β1、白细胞介素-18的表达水平检测及其临床意义

目的探讨激素抵抗型肾病综合征(SRNS)患者血清、尿转化生长因子(TGF)-β1和白细胞介素(IL)-18的表达水平及其临床意义。方法选择2016年1月～2017年12月上海市杨浦区市东医院收治的原发性肾病综合征(PNS)患者120例作为研究对象,其中激素敏感型肾病综合征89例(SSNS组)和SRNS组31例,另选择同期健康体检者50例(对照组)。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测治疗前、治疗后1周、4周(对照组体检当天)血清和尿TGF-β1与IL-18水平,分析尿TGF-β1和IL-18与肾功能指标的相关性。结果治疗前,SSNS组和SRNS组血清、尿TGF-β1,IL-18水平明显高于对照组血清(4.87±0.96,5.41±1.15vs 3.64±0.63)μg/L,(0.58±0.19,0.69±0.22vs 0.28±0.09)μg/L,尿(29.17±4.21,31.48±5.11vs 18.64±3.17)pg/ml,(47.81±14.65,50.12±17.98vs 21.14±9.06)pg/ml,SRNS组血清TGF-β1和IL-18水平明显高于SSNS组(P<0.05)。治疗后1,4周,SSNS组血清、尿TGF-β1和IL-18水平随时间明显下降,明显低于同期SRNS组(P<0.05),治疗后4周与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。SRNS组血清、尿TGF-β1,IL-18水平治疗后1,4周分别与治疗前比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。尿和血清TGF-β1,IL-18与24h尿蛋白,Scr,BUN水平均呈显著正相关(尿:r=0.459,0.396,0.387,0.418,0.404和0.391,血清:r=0.467,0.405,0.399,0.426,0.416和0.387,均P<0.05)。结论 SRNS患者血清和尿TGF-β1,IL-18水平明显升高,其持续升高对SRNS有一定预测价值。

TGF-β1与子宫内膜异位症

子宫内膜异位症(EM)是一种雌激素依赖性慢性妇科疾病,与盆腔疼痛和不孕有关,其发病机制至今未明。转化生长因子-β(lTGF-βl)在子宫内膜异位症患者的异位内膜及腹腔液中表达显著升高,参与子宫内膜异位的免疫逃逸,种植、浸润和盆腔粘连及不孕等过程,在EM的发生发展中的作用受到越来越多的关注。

卡托普利抗肝纤维化实验研究

目的 :建立大鼠肝纤维化模型 ,探讨卡托普利抗大鼠肝纤维化作用及机制。方法 :Wistar大鼠 4 0只随机分为正常对照组、实验对照组A、实验对照组B、卡托普利预防组、卡托普利治疗组 ,采用混合损害因素构建肝纤维化模型 ;行HE染色和VG胶原染色 ,判断炎症和肝纤维化程度。免疫组化检测各组肝组织TGF - β1、α-SMA的表达。结果 :卡托普利预防组、治疗组的大鼠肝细胞坏死、脂肪变性、炎性细胞漫润及纤维结缔组织增生等较实验对照组明显减轻 ;实验对照组A平均肝纤维化积分值为 2 .17± 0 .75、卡托普利预防组为 1.33±0 .5 2 ;实验对照组B为 2 .86± 0 .6 9、治疗组为 1.6 7± 0 .82 ,两者比较均P <0 .0 5。实验对照组A、卡托普利预防组α-SMA阳性表达细胞数分别为 72± 8.1/视野、31± 5 .5 /视野 ;实验对照组B、治疗组分别为 110± 8.6 /视野、6 7± 4 .3/视野 ,两者比较均P <0 .0 0 1。实验对照组A、卡托普利预防组TGF - β1阳性表达面积比分别为 3.15± 0 .5 3%、2 .2 4± 0 .2 6 % ,两者比较P <0 .0 5 ;实验对照组B、治疗组分别为 4 .77± 0 .4 4 %、3.5 8±0 .4 9% ,两者比较P <0 .0 0 1。各组大鼠肝组织中α -SM阳性细胞数与TGF - β1阳性表达面积比呈正相关 (r=0 .86 7,P =0 .0 0 7)。结论 :各组大鼠?

重组hTGF-β1腺病毒转染BMSCs及其转录增强因子TAZmRNA表达变化的研究

目的 探讨Ad-hTGF-B1转染骨髓间充质干细胞（BMSCs）并诱导其向成软骨细胞分化的可行性及其相关转录凶子TAZmRNA表达的变化．方法全骨髓法获取和培养大鼠骨髓间充质干细胞，取第三代细胞接种于细胞培养板。实验分成三组：Ad－hTGF．B1转染组、Ad－EGFP转染组、空白对照组，前两组分别使用含Ad－hTGF－B1与Ad－EGFP的无札清培养基，空白对照组使用不做任何处理的完全培养基。7d后，运用实时荧光定量PCR与Westernblot检测TGF－βl的表达，利用免疫组织化学方法与Westernblot检测Collagen1I的表达．采用实时荧光定量PCR检测TAZmRNA的表达。结果转染后7d，实时荧光定量PCR结果显示TGF—β1表达量的平均相对比值分别为：Ad．hTGF－β1转染组O．863、Ad—EGFP转染组0．183、空白对照组0．180；TAZ表达量的平均相对比值分别为：Ad－hTGF－β1转染组0．810、Ad—EGFP转染组O．416、空白对照组0．366。TGF－β1和TAZ的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。Westernblot和免疫组化发现Ad－hTGF－β1转染组的细胞内Collagen11表达呈强阳性，而Ad－EGFP转染组及空白对照组细胞内的CollagenII表达很弱。结论Ad－hTGF－β1能够成功且稳定的诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞表型分化．同时．在骨髓间充质干细胞向软骨细胞表型分化过程中，转录增强因子TAZ的mRNA水平随之上调，认为TGF－β1可能通过TAZ的作用促进骨髓间充质干细胞向软骨细胞表型分化。

缬沙坦联合苯那普利对糖尿病大鼠足细胞损伤的影响及肾脏保护机制的研究

目的:研究缬沙坦联合苯那普利对糖尿病大鼠足细胞损伤的影响及肾脏保护机制的作用。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组(A组),糖尿病对照组(B组),糖尿病苯那普利治疗组(C组),糖尿病缬沙坦治疗组(D组),缬沙坦联合苯那普利(E组)。分别于实验第4、6周末各组随机取8只测定大鼠平均动脉压、血糖、血肌酐、尿肌酐、肾重/体重、尿白蛋白排泄率,对肾脏标本进行光镜、电镜观察,用图像分析仪测量各组大鼠的平均肾小球横截面积、平均肾小球体积,并于6周末用逆转录-PCR(RT-PCR)方法检测各组肾皮质TGF-β1 mRNA表达。采用免疫组织化学染色检查足细胞特异标记物nephrin、desmin,对足细胞进行准确的定位及其密度定量观察,同时结合临床和肾组织病理有关指标进行分析。结果:苯那普利、缬沙坦、缬沙坦联合苯那普利治疗均使Ccr、肾重/体重、尿白蛋白排泄率、TGF-β1 mRNA表达降低,而缬沙坦联合苯那普利组对TGF-β1 mRNA抑制程度最大,同时肾脏病理变化亦最轻。B组、E组均伴肾小球足细胞数目及密度的减少,其中以B组最为显著,C组、D组次之,E最轻。足细胞数目及其密度与尿蛋白量呈显著负相关(P<0.01)。nephrin、desmin在A组沿肾小球基底膜呈连续、线形分布。C组、D组、E组nephrin、desmin的表达量降低,与正常组织比较,无统计学意义,B组nephrin、desmin的表达呈点状、短线条状,与正常组织比较,有统计学意义(P<0.05)。糖尿病大鼠足细胞数目的减少还与肾小球病理改变相关,足细胞融合、微绒毛化改变较多,肾小球硬化数明显增多。结论:糖尿病大鼠表现出肾小球足细胞数目及其密度的减少,肾小球足细胞中nephrin、desmin的表达和分布的减少,足细胞病变不仅导致大量白蛋白尿的发生,而且还与肾小球硬化和肾功能损伤的发生有关。缬沙坦联合苯那普利与单独用药治疗相比,较ACEI、ARB单独应用有更好的减轻足细胞损伤,起到肾脏保护作用。

丹红注射液对小鼠感染人巨细胞病毒肝炎的干预研究

目的研究丹红注射液对小鼠感染人巨细胞病毒(HCMV)病毒性肝炎的干预机制,为临床治疗HCMV提供理论依据。方法 BALB/c品系小鼠80只,随机数字表编号法分对照组、模型组、丹红注射液A、B、C组(腹腔注射丹红注射液,剂量分别为0.5、1、2 mg·10 g^(-1)·d^(-1)),对照组、模型组用生理盐水干预治疗,连续28 d。28 d后尾静脉采血,放免法检测小鼠血清肝纤维化血清学指标[Ⅳ型胶原(cⅣ)、层黏连蛋白(LN)、转化生长因子-βl(TGF-βl)、透明质酸(HA),Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)],用小鼠尾静脉血血清检测肝功能五项[天冬氨酸氨基转移酶(AST)、胆汁酸(TBA)、总胆红素(TBil)、谷氨酰转移酶(GGT)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)];检测肝脏组织中肝微粒体细胞色素P450亚型酶[CYP2E1、CYPIA2、CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9]活性。结果与模型组比较,丹红注射液B、C组治疗28 d后,P450亚型酶CYP2E1、CYPIA2、CYP3A4酶活性、血清肝纤维化血清学指标cIV、TGF-βl、PC-Ⅲ及肝功能AST、ALT均有不同程度降低(P<0.05),均差异有统计学意义。丹红注射液A组各指标间比较,差异无统计学意义,B、C组组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论丹红注射液可抑制小鼠P450亚型酶活性,降低药物代谢时对肝脏的毒性,并通过降低TGF-βl而促进肝功能恢复,对小鼠感染,HCMV病性肝炎有明确的治疗作用。

玫及乳膏促进大鼠Ⅲ期压疮溃疡愈合的实验研究

目的观察玫及乳膏对大鼠Ⅲ期压疮模型新生肉芽组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、纤维结合蛋白(FN)、转化生长因子-β1(TGF-β1)及血管内皮生长因子(VEGF)的影响并分析其作用机制。方法 SD大鼠120只,随机选取其中的80只采用左侧臀肌下埋置铁片外加磁片循环压迫造成局部表皮缺血-再灌注损伤的方法建立Ⅲ期压疮模型,成模后随机分为模型组和实验组,另40只不造模设为空白对照组。实验组在压疮溃疡面涂敷玫及乳膏,空白对照组和模型组外敷生理盐水纱布对照。于治疗的1、3、7、14 d时取新生肉芽组织采用免疫组化检测MMP-2、FN、TGF-β1及VEGF含量,并统计显效、愈合时间、愈合速度和愈合率。结果与模型组比,实验组显效和愈合所需时间缩短、创面愈合率和愈合速度提高(P<0.05);实验组在第7日时MMP-2含量降低达低峰,在第14日时FN、TGF-β1及VEGF含量最高且达峰值,实验组与模型组在第7日和14日时MMP-2、FN、TGF-β1及VEGF含量的差异有统计学意义(P<0.05)。结论玫及乳膏可通过抑制MMP-2合成来降低纤维蛋白及细胞基质、并能促进大鼠Ⅲ期压疮溃疡面新生肉芽组织中FN、TGF-β1及VEGF的表达,提高创面愈合率和愈合速度,从而加速压疮溃疡面组织修复。

红芪多糖对早期糖尿病肾病db/db小鼠肾间质纤维化的影响

目的通过研究红芪多糖(HPS)对早期糖尿病肾病(DN)db/db小鼠肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)与结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨HPS对早期DN小鼠肾脏的保护作用机制。方法 SPF级6周龄雄性小鼠60只,其中db/db小鼠50只,用随机数字表法分为5组:HPS高、中、低剂量组(200、100、50 mg/kg HPS溶液灌胃)、替米沙坦组(5 mg/kg替米沙坦溶液灌胃)、模型组(等体积蒸馏水灌胃),每组10只;db/m小鼠10只,作为正常对照组,给予等体积蒸馏水灌胃。连续灌胃8周,于治疗前及治疗后每2周检测血糖浓度,第4周末及第8周末收集小鼠24 h尿液,ELISA法检24 h尿微量白蛋白水平。框后静脉取血,血清用于检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)。处死小鼠,剥离肾脏,左肾皮质用于HE染色,观察肾脏病理学变化;右肾皮质用于RT-PCR、Western blotting检测肾组织TGF-β1及CTGF mRNA和蛋白的表达量。结果与正常组比较,模型组小鼠血糖、Scr、BUN 24 h尿微量白蛋白水平显著升高(P<0.01);肾小球肥大,系膜区明显增宽,毛细血管基底膜增厚;TGF-β1及CTGF mRNA和蛋白的表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,除HPS低剂量组外(P>0.05),其余各治疗组小鼠血糖、Scr、BUN和24 h尿微量白蛋白水平均明显下降(P<0.05);肾小球肥大,系膜区明显增宽,毛细血管基底膜增厚情况均有不同程度改善;TGF-β1及CTGF mRNA和蛋白的表达水平明显降低(P<0.01);HPS中剂量组疗效明显优于替米沙坦组。结论 HPS能够防治db/db小鼠早期DN,其机制可能与HPS抑制TGF-β1及CTGF mRNA在肾脏的表达有关。

九味肝泰胶囊联合恩替卡韦治疗儿童慢性乙型肝炎的临床研究

目的观察九味肝泰胶囊联合恩替卡韦治疗儿童慢性乙型肝炎的临床疗效。方法选取2013年7月—2015年3月十堰市太和医院收治的慢性乙型肝炎患儿189例,随机分为九味肝泰组、恩替卡韦组和联合治疗组,每组各63例。九味肝泰组口服九味肝泰胶囊,1粒/次,3次/d。恩替卡韦组口服恩替卡韦分散片,0.5片/次,1次/d。联合治疗组口服九味肝泰胶囊和恩替卡韦分散片,用法用量同上。3组患者均治疗6个月。观察两组的临床疗效,比较两组肝功能、白细胞介素(IL-10)、透明质酸(HA)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的情况。结果治疗后,九味肝泰组、恩替卡韦组和联合治疗组愈显率分别为73.01%、82.53%、95.23%,总有效率分别为88.88%、93.65%、98.41%,联合治疗组组愈显率和总有效率明显优于九味肝泰组和恩替卡韦组,3组比较差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,3组总胆红素(TBIL)、谷氨酸转移酶(GGT)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆汁酸(TBA)和天氨酸转氨酶(AST)水平均显著降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05);且联合治疗组这些观察指标的下降程度明显优于恩替卡韦组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,3组IL-10、HA和TGF-βl水平均显著下降,而恩替卡韦组和联合治疗组HBV-DNA水平均显著下降,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05);且联合治疗组这些观察指标的下降程度明显优于九味肝泰组和恩替卡韦组,3组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,3组GSH和SOD水平均明显升高,MDA水平均明显降低,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05);且联合治疗组这些观察指标的改善程度明显优于恩替卡韦组,两组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论九味肝泰胶囊联合恩替卡韦治疗儿童慢性乙型肝炎具有较好的临床疗效,可显著改善肝功能,调节炎性反应,安全性较好,具有一定的临床推广应用价值。

星形胶质细胞调节促性腺激素释放激素神经元

星形胶质细胞(astrocytes,Ast)是一种特殊的胶质细胞,其数量约为神经元的10倍,它们连续地分布于整个中枢神经系统,执行着复杂的功能。近年来,随着学者们对星形胶质细胞的深入研究,其新功能不断被发现和证实。研究发现,星形胶质细胞通过分泌前列腺素E2(prostaglandin2,PGE2)、转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)等胶质因子,调节促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasinghormone,Gn RH)神经元的活性和分泌,进而参与对动物繁殖的调控。该文主要综述了星形胶质细胞分泌的PGE2和TGF-β1对Gn RH神经元的调节及其分子机制,试图揭示星形胶质细胞在动物繁殖调控中的作用。