血清转化生长因子β1、白细胞介素-6、Toll样受体-4、核转录因子κB联合评估非小细胞肺癌放射性肺炎病情严重程度的价值

目的探讨血清转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素-6(IL-6)、Toll样受体-4(TLR-4)和核转录因子κB(NF-κB)联合评估非小细胞肺癌(NSCLC)放射性肺炎(RP)病情严重程度的价值。方法选取104例NSCLC放疗后继发RP患者作为研究组,另选取52例NSCLC放疗后未继发RP患者作为对照组。比较2组患者放疗前后血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB水平。比较研究组不同程度RP患者放疗前后血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB水平,分析各血清指标单独及联合评估NSCLC放疗后RP病情程度的价值。结果放疗结束后,研究组患者血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);放疗结束后,随着RP病情程度的增加,研究组患者血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB水平呈升高趋势,差异有统计学意义(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线分析结果显示,放疗结束后血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB水平评估1级RP的曲线下面积(AUC)分别为0.787、0.718、0.783、0.801,评估≥2级RP的AUC分别为0.729、0.740、0.793、0.825;血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB阳性表达患者发生≥2级RP的风险分别是阴性表达患者的2.473、2.275、2.610、5.267倍(P<0.05);血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB联合评估≥2级RP的AUC为0.939,敏感度为76.00%,特异度为97.47%。结论NSCLC患者放疗结束后血清TGF-β1、IL-6、TLR-4、NF-κB水平均与RP病情严重程度呈正相关,四者联合评估≥2级RP的价值显著,可为临床控制RP病情提供参考依据。

原发性肾病综合征患儿血清高迁移率族蛋白B1、转化生长因子-β1的表达及意义

目的探讨原发性肾病综合征(PNS)患儿血清高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达及意义。方法选取山东省青岛市胶州中心医院2020年1月至2021年12月收治的86例PNS患儿为PNS组,选取同期40例健康体检儿童为对照组。检测两组患儿血清HMGB1、TGF-β1水平,分析不同疗效PNS患儿血清HMGB1、TGF-β1水平差异。结果PNS组患儿血清HMGB1及TGF-β1水平明显高于对照组(P<0.05),PNS组患儿血清HMGB1、TGF-β1水平分别与血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、β2-微球蛋白(β2-MG)均呈正相关(P<0.05)。PNS患儿经标准化治疗后,血清HMGB1、TGF-β1水平较治疗前均明显降低(P<0.05);其中完全缓解组治疗前后血清HMGB1、TGF-β1水平低于部分缓解组,部分缓解组治疗前后血清HMGB1、TGF-β1水平又低于未缓解组(P<0.05);且完全缓解组和部分缓解组治疗前后HMGB1、TGF-β1水平差值显著大于未缓解组(P<0.05)。随访复发组患儿治疗前后血清HMGB1、TGF-β1水平明显高于未复发组(P<0.05)。结论PNS患儿血清HMGB1、TGF-β1水平升高,两者可作为评估PNS疗效及预后的参考指标。

益消方经转化生长因子β1信号通路干预糖尿病合并脂肪肝的实验研究

目的:探索益消方对糖尿病合并脂肪肝的影响和作用机制。方法:观察组为12周龄雄性自发糖尿病(KKAy)小鼠,按照随机数字表法随机分为模型组、中药组(益消方干预)、西药组(氯沙坦干预);对照组为同周龄雄性近交系(C57BL/6J)小鼠。干预周期为12周。观察干预前后血糖、血脂-、肝功能变化,肝脏组织进行病理染色,检测肝脏组织转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))信号通路蛋白和信使核糖核酸(mRNA)的变化。结果:与模型组比较,益消方干预8周体质量、肝重指数显著降低(P<0.05,P<0.01),干预第4、8、12周空腹血糖显著降低(P<0.01),干预8周胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、谷丙转氨酶水平降低(P<0.05,P<0.01)。病理形态方面益消方干预4周脂肪变性评分下降(P<0.05)。益消方干预12周后,TGF-β_(1)及其信号蛋白、mRNA的表达均显著下调(P<0.05,P<0.01)。结论:益消方可显著改善KKAy小鼠的肥胖和糖脂代谢紊乱,调节TGF-β_(1)信号通路蛋白和基因表达,减轻肝脏脂肪变性。

胰岛素样生长因子1对人RPE细胞分泌TGF-β2、MMP-2的影响及机制研究

目的研究胰岛素样生长因子1(IGF-1)对人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)表达转化生长因子β2(TGF-β2)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的影响,并探索其作用机制。方法ARPE-19细胞分别按不同浓度IGF-1和不同浓度LY294002培养6 h、12 h、24 h、48 h,采用CCK-8法检测细胞活力,确定IGF-1、LY294002的最佳作用浓度与时间。细胞划痕法检测细胞迁移活性。ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β2浓度。将ARPE-19细胞分为对照组、IGF-1组(80μg·L^(-1) IGF-1)、IGF-1+LY294002组(80μg·L^(-1) IGF-1+30 mmol·L^(-1) LY294002)、LY294002组(30 mmol·L^(-1) LY294002),使用无血清DMEM/F12培养基培养,对照组不做任何处理,分别采用RT-PCR、Western blot检测细胞中TGF-β2、MMP-2、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)的mRNA和蛋白表达量。结果与0μg·L^(-1) IGF-1比较,80μg·L^(-1) IGF-1的细胞活力24 h变化显著(P<0.05),故确定其为IGF-1最佳作用浓度和时间。与0 mmol·L^(-1) LY294002比较,24 h的30 mmol·L^(-1) LY294002接近半数抑制浓度,故确定其为LY294002最佳作用时间和浓度。细胞划痕法检测结果显示,0μg·L^(-1) IGF-1组、40μg·L^(-1) IGF-1组、80μg·L^(-1) IGF-1组细胞迁移率整体比较及两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。ELISA检测结果显示,0μg·L^(-1) IGF-1组、40μg·L^(-1) IGF-1组、80μg·L^(-1) IGF-1组细胞上清液中TGF-β2浓度整体比较及两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。RT-PCR、Western blot检测结果显示,IGF-1、LY294002培养24 h,与对照组比较,IGF-1组细胞中TGF-β2、MMP-2、PI3K、AKT的mRNA与蛋白表达水平均升高,而LY294002组细胞中TGF-β2、MMP-2、PI3K、AKT的mRNA与蛋白表达水平均下降(均为P<0.05);与IGF-1组比较,IGF-1+LY294002组细胞中TGF-β2、MMP-2、PI3K、AKT的mRNA与蛋白表达水平均下降(均为P<0.05)。结论IGF-1能促进ARPE-19细胞增殖、迁移;IGF-1可能通过PI3K/AKT信号通路上调ARPE-19细胞中TGF-β2、MMP-2的表达,参与近视的发生与发展。

LncRNA FAM95B1调控胰岛素样生长因子2的表达对宫腔粘连发生的影响

目的探究lncRNA FAM95B1及蛋白编码基因胰岛素样生长因子2(insulin-like growth factor 2,IGF2)对宫腔粘连发生的作用,为宫腔粘连的防治提供新的分子靶点。方法在宫腔粘连组织中采用反转录实时定量聚合酶链反应(reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)方法检测lncRNA FAM95B1的mRNA表达水平,采用Western blotting方法检测IGF2及纤维化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、I型胶原蛋白(collagen type I alpha 1 chain protein,COL1A1)的蛋白表达水平。在经过转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)处理的子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)中,采用RT-qPCR方法检测lncRNA FAM95B1、IGF2、纤维化标志物(α-SMA、COL1A1、Snail)及上皮标志蛋白E-cadherin的mRNA表达水平。在ESCs中,分别下调lncRNA FAM95B1和IGF2基因,验证二者的调控关系;免疫共沉淀实验检测lncRNA FAM95B1与IGF2的结合关系。然后,si-FAM95B1转染入ESCs中并经过TGF-β1处理,进一步探究lncRNA FAM95B1及IGF2在ESCs向成纤维细胞分化的上皮-间质转化(epithelial-to-mesenchymal transition,EMT)过程中的作用。结果宫腔粘连组织中lncRNA FAM95B1、IGF2及纤维化标志物α-SMA、COL1A1的表达水平上调;经过TGF-β1处理的ESCs中lncRNA FAM95B1、IGF2、纤维化标志物(α-SMA、COL1A1、Snail)的表达水平上调,上皮标志蛋白E-cadherin的表达水平下调。IGF2随lncRNA FAM95B1的变化而变化,而下调IGF2后,lncRNA FAM95B1的表达无明显变化,lncRNA FAM95B1正向调节IGF2;lncRNA FAM95B1与IGF2在TGF-β1处理的ESCs中结合。si-FAM95B1在ESCs向成纤维细胞分化的EMT过程中抑制IGF2的表达,发挥抗纤维化作用。结论si-FAM95B1可通过下调IGF2的表达抑制宫腔粘连的发生,lncRNA FAM95B1/IGF2轴可能为宫腔粘连的靶向治疗提供新的分子靶点。

基于转化生长因子-β1观察三七总皂苷对大鼠跟腱异位骨化的组织学影响

目的:从组织学观察三七总皂苷(PNS)对大鼠跟腱异位骨化(HO)的影响,并基于转化生长因子-1(TGF-1)/Sma和Mad相关蛋白(Smad)同源物2/3信号通路探讨其潜在作用机制。方法:将126只SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组、西药组、高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组18只。HO造模术后分别给予不同浓度PNS或对照西药或生理盐水灌胃2周。于术后2周、5周及10周分别行小动物X线及CT平扫评估HO发生情况。采用一般组织学染色,包括苏木精-伊红染色、Masson三色染色及番红O固绿软骨染色,观测HO病灶内组织学改变。经免疫组织化学法比较各组病灶局部TGF-β1、磷酸化Smad同源物2(p-Smad2)及p-Smad3表达的差异。结果:术后10周,X线检测可见各手术大鼠成骨率差异无统计学意义(P>0.05)。术后2周,手术大鼠跟腱细胞显著增加(P<0.05),跟腱纤维排列紊乱;5周可见大量增殖肥大软骨细胞;10周可见大量成熟异位骨组织形成。中剂量组术后10周相对骨量显著低于模型组(P<0.05)。免疫组织化学染色显示,假手术组TGF-β1、p-Smad2及p-Smad3表达术后与正常对照组比较均显著增加,差异均有统计学意义(均P<0.01)。与模型组比较,中剂量组TGF-β1的表达在术后2周显著降低(P<0.05),表达峰值延后。结论:TGF-β1的表达在大鼠跟腱HO造模术后具有显著增加。一定浓度的PNS可降低异位骨组织的相对骨量,这可能与PNS延后TGF-β1的表达峰值并下调其表达量有关。

miR-23b对风湿关节炎大鼠滑膜组织转化生长因子β1及破骨细胞的影响

背景:研究表明,miR-23b水平升高与风湿关节炎的发生发展密切相关,故抑制miR-23b的表达可作为治疗该病的一个新靶点。目的:探究miR-23b对风湿关节炎大鼠滑膜组织转化生长因子β1调节及对破骨细胞活性的抑制作用。方法:选取60只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常对照组、模型组、miR-NC组、miR-23b inhibitor组。除正常对照组外,其他3组大鼠采用弗氏完全佐剂法进行风湿关节炎建模,建模成功后,对miR-NC组尾静脉注射20μL 1×10^(8) L^(-1)的miR-NC,miR-23b inhibitor组尾静脉注射20μL 1×10^(8) L^(-1)的miR-23b inhibitor,正常对照组、模型组同期尾静脉注射同体积生理盐水。21 d后,苏木精-伊红染色法检测大鼠关节组织病理形态;Real-time PCR法检测大鼠血清中miR-23b的mRNA相对表达;免疫组化法检测大鼠滑膜组织中转化生长因子β1蛋白表达;抗酒石酸酸性磷酸酶染色法及鬼笔环肽染色法检测破骨细胞活性。结果与结论:①正常对照组大鼠关节滑膜细胞结构正常且排列整齐,模型组、miR-NC组出现明显滑膜细胞增生且排列紊乱,同时可见毛细血管及纤维结缔组织明显增生,且出现大量炎性细胞浸润现象,miR-23b inhibitor组可见滑膜细胞轻度增生及少量炎性细胞浸润,水肿、充血情况明显改善;②与正常对照组比较,模型组大鼠血清中miR-23b相对表达明显升高(P<0.05),模型组与miR-NC组相比无明显差异(P>0.05),miR-23b inhibitor组血清中miR-23b相对表达较miR-NC组明显降低(P<0.05);③与正常对照组比较,模型组大鼠滑膜组织转化生长因子β1蛋白表达显著升高(P<0.05),模型组与miR-NC组相比无明显差异(P>0.05),miR-23b inhibitor组滑膜组织转化生长因子β1蛋白表达较miR-NC组明显降低(P<0.05);④与正常对照组比较,模型组大鼠滑膜成纤维细胞抗酒石酸酸性磷酸酶染色可见大量阳性表达的典型多核破骨细胞(P<0.05),模型组与miR-NC组相比无明显差异(P>0.05),miR-23b inhibitor组破骨细胞体积及数目较miR-NC组明显减少(P<0.05);⑤与正常对照组比较,模型组大鼠破骨细胞鬼笔环肽染色可见明显纤维肌动蛋白环形成(P<0.05),模型组与miR-NC组相比无明显差异(P>0.05),miR-23b inhibitor组纤维肌动蛋白环面积较miR-NC组明显缩小(P<0.05);⑥上述结果说明,降低miR-23b表达可对风湿关节炎起到治疗作用,其可有效抑制大鼠滑膜组织转化生长因子β1表达,降低破骨细胞活性。

转化生长因子β1对膀胱癌细胞增殖与迁移能力的影响及其机制

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)对膀胱癌T24细胞增殖、迁移能力的影响及其机制。方法以浓度为0、1、5、10、20、40μg/L的TGF-β1处理T24细胞24 h,采用MTT法检测细胞的增殖活性,采用细胞划痕方法检测其迁移能力,采用Western blot检测细胞中程序性死亡配体-1(PD-L1)蛋白的相对表达量;使用浓度为5μg/L的TGF-β1处理T24细胞0、0.5、1、2、6、24 h,采用Western blot实验检测细胞PD-L1蛋白及磷酸化丝苏氨酸蛋白激酶(p-AKT)和磷酸化细胞外调节激酶(p-ERK)蛋白的相对表达量;将T24细胞分为A~C组,A组使用正常培养基培养,B组培养基中加入终浓度为5μg/L的TGF-β1培养,C组培养基加入终浓度为5μg/L的TGF-β1及SB431542培养,Western blot方法检测A~C组细胞中PD-L1相对表达量;将T24细胞分为D~G组,D组使用正常培养基培养,E组培养基中加入终浓度为5μg/L的TGF-β1培养,F组培养基中加入终浓度为5μg/L的TGF-β1、AKT抑制剂MK2206培养,G组培养基加入终浓度5μg/L的TGF-β1、ERK抑制剂U0126处理T24细胞,均处理24 h,Western blot方法检测D~G组细胞中p-AKT、p-ERK和PD-L1相对表达量。结果浓度0、1、5、10、20、40μg/L的TGF-β1处理T24细胞24 h,其他浓度的TGF-β1处理T24细胞的增殖能力相较于0μg/L时均显著增强(t=3.59~12.18,P<0.05),各浓度之间T24细胞的迁移率没有显著差异(P>0.05),浓度为5μg/L时相较于其他浓度,PD-L1蛋白表达明显升高(t=3.22~5.64,P<0.05);浓度为5μg/L的TGF-β1处理T24细胞0、0.5、1、2、6、24 h后,T24细胞PD-L1蛋白表达随时间延长逐渐升高(F=199.20,P<0.05),并且处理时间为0.5 h相较于其他处理时间,p-AKT、p-ERK表达量显著升高(t=6.26~64.24,P<0.05);B组与A组比较,T24细胞PD-L1蛋白表达水平明显升高(t=31.24,P<0.05),C组与B组比较,PD-L1蛋白的表达水平降低(t=17.04,P<0.05);E组与D组比较,T24细胞的PD-L1、p-AKT、p-ERK蛋白水平明显升高(t=9.44~37.29,P<0.05),G组与E组比较,p-AKT、PD-L1蛋白表达水平显著降低(t=104.40、6.74,P<0.05);F组与E组比较,p-ERK、PD-L1蛋白表达水平显著降低(t=24.26、17.01,P<0.05)。结论TGF-β1可以促进膀胱癌T24细胞增殖和细胞内PD-L1表达,不影响其迁移,其作用机制可能是通过促进细胞内PD-L1、p-ERK和p-AKT表达实现的。

丹酚酸B对转化生长因子β_1诱导的人胚肺成纤维细胞生物学行为的影响

目的观察丹酚酸B(salvianolic acid B,SAB)对人胚肺成纤维细胞MRC-5增殖及分泌Ⅰ型前胶原、内源性转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的影响。方法将MRC-5细胞随机分为4组,对照组未加入TGF-β1或SAB;TGF-β1组加入10ng/mLTGF-β1;SAB1组加入10ng/mLTGF-β1和1μmol/LSAB;SAB2组加入10ng/mLTGF-β1和10μmol/LSAB。采用MTT法观察各组细胞增殖能力;放射免疫法测定各组细胞Ⅰ型前胶原蛋白含量;ELISA法检测各组细胞内源性TGF-β1水平。结果与对照组比较,TGF-β1组MTT吸光度、Ⅰ型前胶原蛋白含量及内源性TGF-β1水平均明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与TGF-β1组比较,SAB1组及SAB2组细胞吸光度明显减少,Ⅰ型前胶原蛋白含量和内源性TGF-β1水平降低,且SAB2组效果优于SAB1组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 SAB可以抑制TGF-β1促MRC-5细胞增殖的作用,减弱分泌胶原和内源性TGF-β1的作用,具有阻止或延缓肺纤维化进行性发展的潜能。

慢性阻塞性肺疾病患者肺组织中核转录因子-κB、转化生长因子-β1表达与气道重塑的关系

目的观察COPD患者肺组织中核转录因子(NF)-κB、转化生长因子(TGF)-β1的表达及与气道重塑的相关性。方法标本取自40例因肺部孤立性结节行肺叶切除术患者的肺组织,按术前肺功能分为非COPD组(A组,20例)及COPD组(B组,20例)。所取肺组织HE染色后光镜下观察肺组织的病理形态学改变,以半定量图像分析法测量小气道管壁和平滑肌层厚度。用Western印迹法检测肺组织中NF-κB、TGF-β1的表达。结果 1B组NF-κB、TGF-β1表达均高于A组(均P<0.05),且NF-κB与TGF-β1表达存在正相关(P<0.05);2肺组织中NF-κB、TGF-β1的表达与单位长度的管壁面积(WAt/Pi,μm2/μm)及单位长度的平滑肌层面积(WAsm/Pi,μm2/μm)表达均呈正相关(P<0.05)。3 FEV1/FVC、FEV1%预计值分别与NF-κB、TGF-β1的表达呈负相关(P<0.05)。结论 COPD肺组织中NF-κB、TGF-β1的表达增加,细胞因子的表达增加使其发挥的生物学效应增强,从而促进气道重塑,进一步影响肺功能。

丹参酚酸B对转化生长因子β_1和血小板衍生生长因子-BB在肝星状细胞内信号传导的影响

目的探讨丹参酚酸B(SA-B)抗肝纤维化作用机制。方法分离大鼠肝星状细胞(HSC),于无包被塑料培养皿中原代培养7天,继以10-6mmol/L SA-B孵育,再加10ng/ml的转化生长因子β1(TGF-β1)或血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)刺激。以Western blot法观察SA-B对TGF-β1或PDGF-BB刺激的HSC内ERK蛋白及其磷酸化表达的影响及对TGF-β1或PDGF-BB刺激的HSC表面TGF-β1Ⅰ型受体(TβRⅠ)、Ⅱ型受体(TβRⅡ)或PDGF受体β(PDGFR-β)表达的影响。结果SA-B可抑制原代正常培养9天的HSC及TGF-β1刺激的HSC中ERK1/2的磷酸化;对正常培养的HSC和TGF-β1刺激的HSC表面TβRⅠ和TβRⅡ的表达无明显影响。SA-B抑制原代正常培养9天的HSC和经PDGF-BB刺激的HSC中PDGFR-β的表达,但对PDGF-BB刺激的HSC中ERK1/2磷酸化没有明显作用。结论SA-B抑制TGF-β1诱导的HSC内ERK信号传导通路。这一抑制作用与HSC上TβR的表达无关,也与PDGF-BB在HSC内的ERK信号传导通路无关。SA-B对PDGF-BB在HSC内的信号传导通路的抑制作用在于抑制了HSC上PDGF受体的表达。

丹酚酸B对转化生长因子β_1促肝星状细胞分泌胶原的影响

目的 观察丹酚酸B(SA B)对肝星状细胞 (HSC)分泌转化生长因子 β1(TGFβ1)与TGFβ1促HSC分泌胶原的影响。方法 用ELISA法测定培养 4d的原代与传代HSC的TGFβ1分泌量 ;添加TGFβ1于原代HSC中温育 2 4h后 ,[3 H]脯氨酸掺入与胶原酶消化法观察TGFβ1促进HSC分泌胶原的作用 ;Western印迹法检测HSCⅠ型胶原的表达 ;添加SA B ,观察对上述实验的干预。结果 传代HSC分泌TGFβ1的量明显高于原代HSC ;添加SA B后 ,对原代HSC的TGFβ1分泌量无明显影响 ,而传代HSC的TGFβ1分泌量显著减少。TGFβ1可显著促进HSC胶原的分泌和Ⅰ型胶原的表达 ,而SA B可拮抗TGFβ1的效应。结论 SA B可抑制传代HSC的TGFβ1分泌与减弱TGFβ1促HSC胶原的合成 ,这两个环节可能是SA B抗肝纤维化的主要作用机制。

转化生长因子β_1对A系小鼠胚腭突细胞增殖代谢的影响

目的 研究不同剂量转化生长因子 β1(TGFβ1)对A系小鼠胚腭突细胞增殖和DNA、蛋白质及PGE2合成的影响。方法 实验分为 9组 ,每组设平行 4孔 (瓶 ) ,每组分别加入TGFβ1使其终浓度为 0 .0 0 5ng/ml,0 .0 1ng/ml,0 .0 5ng/ml,0 .1ng/ml,0 .5ng/ml,1ng/ml,5ng/ml,10ng/ml,5 0ng/ml,每组均设空白对照 ,在实验后第 1、3、5天分别检测细胞的OD值、DNA、蛋白质和PGE2 的含量。结果 在高浓度血清条件下 ,TGFβ1可显著刺激腭突细胞的增殖 ,但在低浓度血清条件下 ,TGFβ1对A系小鼠胚腭突细胞具有双重效应 ,即在其 0 .0 0 5～ 0 .0 1ng/ml时促进腭突细胞增殖 ,而随着TGFβ1浓度的增大 ,逐渐抑制腭突细胞的增殖。TGFβ1使腭突细胞PGE2 及蛋白质合成增加。结论 TGFβ1对A系小鼠胚腭突细胞的增殖具有双重作用 ,可能是腭突正常发育的重要调节因子。

选择性环氧化酶2抑制剂对梗阻性肾病大鼠肾组织中核因子кB和转化生长因子β_1的调节

目的:探讨塞来昔布与吲哚美辛比较对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠模型肾脏的保护作用及可能机制。方法:将塞来昔布和吲哚美辛应用于UUO大鼠,4周后测定血清肌酐及尿素氮水平,放射免疫法测定大鼠尿液血栓烷素B(2TXB2)浓度,免疫组化法检测肾脏核因子кB(NF-кB)和转化生长因子β(1TGF-β1)的表达。结果:塞来昔布及吲哚美辛均降低尿TXB2浓度,塞来昔布组更为显著;与对照组相比,其余3组NF-кB及TGF-β1的蛋白表达水平均显著上升,肾间质纤维化严重;塞来昔布治疗后,上述蛋白表达水平显著下调,肾间质纤维化程度明显减轻。结论:塞来昔布能减轻UUO大鼠肾间质纤维化,下调NF-кB的表达,减少肾间质单核巨噬细胞浸润可能是其机制之一。

丹参酚酸B盐对转化生长因子β1活化的大鼠肝星状细胞内细胞外信号调节激酶信号转导通路的抑制作用(英文)

目的:探讨丹参酚酸B盐(salvianolic acid B,SA-B)对转化生长因子β1(transforming growthfactor-β1,TGF-β1)活化的大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)内细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号转导通路的影响。方法:采用原位灌流酶消化及Nycodenz密度梯度离心的方法分离正常大鼠HSC,将TGF-β1和SA-B直接添加于原代HSC的无血清培养液中。蛋白印记法检测HSC内磷酸化和总ERK,以及有丝分裂原激活蛋白激酶激酶MEK、有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶Raf、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白的表达。结果:SA-B可抑制正常原代HSC及TGF-β1刺激的HSC内ERK上游激酶MEK的磷酸化;而对正常原代HSC及TGF-β1刺激的HSC内MEK上游激酶Raf-1的磷酸化无明显抑制。SA-B对TGF-β1刺激的HSC内α-SMA表达有明显的抑制作用,SA-B与ERK阻断剂联用,几乎接近完全阻断α-SMA的表达。SA-B对正常培养的HSC和经TGF-β1刺激的HSCⅠ型胶原蛋白的合成都有明显的抑制作用。结论:SA-B抑制TGF-β1刺激的HSC内ERK信号转导通路的作用环节在于抑制了MEK的磷酸化。SA-B通过抑制TGF-β1的ERK信号转导通路,减少了因HSC活化导致的α-SMA表达和Ⅰ型胶原蛋白合成增加。

肾上腺髓质素及转化生长因子β_1与血小板源性生长因子B在糖尿病大鼠中的变化

目的:观察肾上腺髓质素(adrenomdedullin,ADM)在糖尿病大鼠血、尿、肾组织中的浓度变化以及转化生长因子β1(transforming growthing factor beta-1,TGF-β1)与血小板源性生长因子B(platelet derived growth factor-b,PDGF-B)的变化,探讨ADM在糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)形成过程中的作用。方法:将实验大鼠分成正常对照组、糖尿病组、氯沙坦组。检测各组8周的血尿肌酐、尿蛋白、ADM、TGF-β1与PDGF-B及肾脏肥大指标的变化。结果:糖尿病组、氯沙坦组中的大鼠血、尿、肾组织ADM均明显增加(P<0.05),尿中ADM浓度高于血浆。氯沙坦组高于糖尿病组,但无统计学差异。糖尿病组TGF-β1与PDGF-B表达显著升高(P<0.05),氯沙坦组低于糖尿病组,但无统计学差异。氯沙坦可降低尿白蛋白及阻遏早期肾小球肥大。结论:ADM与TGF-β1与血PDGF-B有相关关系,ADM与DN的发展关系密切,可能起代偿性保护作用。

参芪通脉方防治糖尿病肾病患者自体动静脉内瘘早期失功的疗效及对纤溶系统功能、脂质代谢与转化生长因子-β_(1)的影响

目的观察参芪通脉方防治糖尿病肾病(DN)患者自体动静脉内瘘(AVF)早期失功的疗效及对纤溶系统功能、脂质代谢与转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))的影响。方法将2017年3月—2019年3月在内蒙古医科大学附属医院接受AVF血液透析的86例终末期DN患者随机分为2组,对照组43例于内瘘成熟首次透析后给予阿司匹林干预,观察组43例在对照组基础上给予参芪通脉方干预,疗程均为12周。记录2组AVF早期失功发生率,观察2组AVF使用前及使用6周、12周后内瘘血流速度与内瘘静脉血管内径、纤溶指标、脂代谢指标与血清TGF-β_(1)的变化。结果观察组AVF使用12周AVF早期失功发生率为16.3%(7/43),对照组为32.6%(14/43),观察组明显低于对照组(P<0.05)。与AVF使用前比较,2组AVF使用6周、12周后内瘘血流速度均减慢(P均<0.05),内瘘静脉血管内径均缩短(P<0.05),但观察组上述指标均优于对照组(P均<0.05)。与AVF使用前比较,2组AVF使用6周、12周后的纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体水平均明显增高(P均<0.05),但观察组上述时间的FIB、D-二聚体水平均明显低于对照组(P均<0.05)。与AVF使用前比较,2组AVF使用6周、12周后的三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、TGF-β_(1)水平均明显增高(P均<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平均明显降低(P均<0.05),但观察组上述时间的TG、TGF-β_(1)水平均明显低于对照组(P均<0.05),HDL-C水平高于对照组(P<0.05)。结论参芪通脉方可显著降低DN患者AVF早期失功发生率,有效维持AVF功能,机制可能与调节纤溶功能、脂质代谢紊乱及TGF-β_(1)表达水平有关。

老年胃癌患者血清转化生长因子-β_(1)、核转录因子-κB、热休克蛋白60水平与幽门螺旋杆菌感染的相关性研究

目的探讨老年胃癌患者血清转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))、核转录因子-κB(NF-κB)、热休克蛋白60(HSP60)水平与幽门螺旋杆菌(Hp)感染的相关性。方法选取2017年2月至2019年8月河南中医药大学第一附属医院收治的92例老年胃癌患者作为研究对象,比较不同临床病理特征患者血清TGF-β_(1)、NF-κB、HSP60水平,不同感染程度Hp感染患者与未感染患者血清TGF-β_(1)、NF-κB、HSP60水平,探讨血清TGF-β_(1)、NF-κB、HSP60水平与老年胃癌患者Hp感染的关系及三者对老年胃癌患者Hp感染的预测价值。结果老年胃癌患者血清TGF-β_(1)、NF-κB、HSP60水平与肿瘤直径、分化程度、浸润深度、TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05)。不同Hp感染程度患者血清TGF-β_(1)、NF-κB、HSP60水平均高于未感染患者(P<0.05),且随Hp感染程度的增加,血清TGF-β_(1)、NF-κB、HSP60水平也随之升高。Logistic回归分析发现,随着血清TGF-β_(1)、NF-κB、HSP60水平升高,老年胃癌患者Hp感染风险逐渐升高(P均<0.05)。血清TGF-β_(1)、NF-κB、HSP60水平联合预测老年胃癌患者Hp感染的曲线下面积为0.870,大于各指标单一预测的0.805、0.761、0.816,联合预测的最佳敏感性、特异性分别为71.43%、86.67%。结论老年胃癌患者血清TGF-β_(1)、NF-κB、HSP60表达与患者临床病理特征关系密切,且各指标表达水平与患者Hp感染呈正相关,通过检测各指标表达水平有助于预测Hp感染风险。

3I、7b型腺病毒感染对人胚肺成纤维细胞转化生长因子β_1 mRNA及其蛋白表达的影响

目的探讨3I、7b型腺病毒型感染对体外培养的人胚肺成纤维细胞转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA及其蛋白表达的影响。方法以3I、7b型腺病毒分别攻击体外培养的人胚肺成纤维细胞,另设正常细胞组。采用酶联免疫吸附试验及原位杂交法检测各组细胞TGF-β1蛋白及TGF-β1mRNA表达。结果3I、7b型病毒感染组较正常细胞组TGF-β1蛋白及mRNA表达均明显增强(Pa<0.01),而3I、7b型病毒感染组间比较无显著性差异(Pa>0.05)。结论肺成纤维细胞和TGF-β1可能参与腺病毒肺炎的发病过程。

丹酚酸B对转化生长因子β_1诱导人肺成纤维细胞增殖和分化的影响

目的:观察丹酚酸B(Sal B)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人肺成纤维细胞增殖及分化的影响。方法:将人胚肺成纤维细胞(MRC-5)随机分为6组:对照组(未加入TGF-β1或Sal B);1μmol/L Sal B组;10μmol/L Sal B组;10ng/mL TGF-β1组;TGF-β1(10ng/mL)+1μmol/L Sal B组;TGF-β1(10ng/mL)+10μmol/L Sal B组。采用MTT法观察各组细胞增殖情况;RT-PCR和Western blot方法分别检测各组细胞α-SMA mRNA和蛋白的表达情况;免疫荧光方法检测细胞内纤维形肌动蛋白(Factin,Fibrous Actin)重组及观察细胞形态变化。结果:与对照组比较,TGF-β1组细胞增殖率、α-SMA mRNA和蛋白的表达水平均明显增加,细胞形态发生明显改变,胞内可见大量F-actin聚合形成的应力纤维(stress fiber)(P<0.01);与对照组比较,单纯加入Sal B对细胞增殖、α-SMA表达、细胞形态和F-actin重组均未产生影响(P>0.05);与单纯TGF-β1组比较,TGF-β1+Sal B两组细胞增殖率、α-SMA mRNA和蛋白表达水平均下降,发生形态改变的细胞减少,胞内F-actin聚合形成的stress fibers减少(P<0.05),且10μmol/L Sal B对TGF-β1抑制效应优于1μmol/L Sal B,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:Sal B体外能够抑制TGF-β1诱导的人肺成纤维细胞增殖和向肌纤维母细胞分化。