转基因大米营养评价试验

目的: 探讨转基因大米和传统非转基因大米在营养学方面是否具有实质等同性,为转基因大米的安全性评价提供科学方法。方法: 以转豇豆胰蛋白酶抑制剂(cowpea trypsin inhibitor, CpTI)基因大米和蛋白含量与之相近的非转基因大米分别配成含蛋白10%(以其所含的大米蛋白为主,添加少量的酪蛋白)、其它营养成分同AIN-93G的饲料喂养断乳Wistar大鼠28 d,比较两组大鼠各营养指标、血液生化指标、体重身长、脏体比、蛋白质功效比(PER)、骨密度。结果: 饲喂转基因大米和非转基因大米的大鼠各项营养学指标无差异。结论: 转基因大米和非转基因大米的蛋白质的营养价值具有实质等同性,并且转基因大米中的CpTI并未明显干扰饲料中其它营养素的吸收,因此,从营养学角度看,转CpTI基因大米基本是安全的。

不同加工条件下转基因大米潮霉素标记基因(hpt)稳定性研究

目的从DNA稳定性的角度,探讨转基因大米潮霉素标记基因hpt向食品或消化道微生物转移发生水平转移的可能性。方法利用针对hpt不同大小片段的PCR扩增体系,对hpt在转基因大米加工食品中的稳定性进行研究。结果建立的PCR体系能稳定扩增出hpt236bp-910bp不同大小的5个片段。利用这一PCR体系对s86转基因大米不同加工食品的检测显示,加工米饭、粥大于500bp的片段已降解,爆米花和锅巴大于236bp的hpt片段已降解。对照M86大米加工米饭和粥仅能扩出植物叶绿体基因rbcl片段,爆米花、锅巴及空白对照所有扩增均为阴性。结论hpt在转基因大米加工食品中均已不同程度的发生了降解,不同加工方式对hpt片段降解影响显著,在加工后hpt以较大或完整片段向食品或消化道微生物转移的可能性减小。

Xa21转基因大米对大鼠致畸作用的实验研究

目的 观察Xa2 1转基因大米对大鼠胚胎生长、发育的影响。方法 将初断乳Wistar大鼠按雌雄分别随机分为 4组 :转基因大米组、非转基因大米组、AIN93G对照组和敌枯双阳性对照组。单笼喂养 ,饲相应鼠料 ,喂满 90天 ,雌雄合笼。观察母鼠和胎鼠的生长发育情况。结果 转基因大米组孕鼠增重、活胎体重、身长、尾长均显著高于阳性对照组 ,而死胎数、吸收胎数、畸形率 (外观、内脏、骨骼 )均显著低于阳性对照组。转基因大米组与非转基因大米组、AIN93G对照组相比 ,所有观察指标均无统计学差异。结论 转Xa2 1基因大米与非转基因大米相比 ,对大鼠受孕率、胚胎生长发育无显著性差异。

Xa21转基因大米的营养学评价

目的 观察转基因大米对幼鼠喂养的营养学功效。方法 将初断乳Wistar大鼠按雌、雄分别随机分为三组 ,即转基因大米组、非转基因大米组和AIN93G正常对照组。饲相应饲料 ,自由进食 ,喂养 2 8天。观察指标 :大鼠进食量、蛋白质功效比、体重、身长、血常规、血生化、脏体比值和骨密度。结果 雄性组 :转基因大米组除肝 体比高于非转基因大米组外 ,其他所有观察指标和非转基因大米组均无显著性差异。雌性组 :转基因大米组肝 体比、血钙和干骺端骨密度高于非转基因大米组 ,其他所有指标转基因大米组和非转基因大米组均无差异。与正常对照组相比 ,转基因大米组血钙和干骺端骨密度显著增加。结论 转基因大米 2 8天动物喂养实验未发现有明显毒副作用。

转基因大米的免疫毒理学评价

目的 评价转基因大米和非转基因大米对小鼠免疫功能的异同。方法 以转豇豆胰蛋白酶抑制剂 (cowpeatrypsininhibitor ,CpTI)基因大米和母系非转基因大米喂养BALB C小鼠 30天 (均配成AIN 93G的全价营养饲料 ,并且含有最大量的转基因大米或非转基因大米 ) ,比较各组小鼠的各项免疫毒理指标 :体重、脏器指数、血常规、淋巴细胞分类、血清抗体滴度、空斑试验 (PFC)、迟发型皮肤过敏反应 (DTH)、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验。结果 发现转基因大米和非转基因大米喂养的小鼠各项免疫毒理指标无差异。结论 转基因大米对小鼠的免疫功能的影响与非转基因大米基本相同 ,转基因大米与非转基因大米在免疫毒理学方面的评价具有“实质等同性”。

痕量及微量转基因大米成分半巢式PCR检测方法的建立

采用半巢式PCR技术建立了食品中痕量及微量转基因大米成分的检测方法。根据大米内源SPS基因以及转基因大米Bt63含有的外源Cry1A(b)/Cry1A(c)融合基因和Btc基因,分别设计了6对普通与半巢式PCR引物。扩增结果显示,针对理论DNA浓度的检测灵敏度,普通PCR扩增灵敏度为1ng/μl左右,半巢式PCR扩增灵敏度达到10-3～10-4ng/μl,半巢式PCR比普通PCR方法提高了103～104倍;在质量百分比的检测灵敏度方面,普通PCR方法扩增灵敏度在0.1%～1%之间,半巢式PCR方法的检测灵敏度能够达到0.001%～0.01%,半巢式PCR比普通PCR方法要提高10倍以上。在实际样品的检测中,速冻汤圆、婴儿米粉及芝士小圆饼等食品经普通PCR扩增,其内源SPS基因条带模糊或未扩增到,进一步采用半巢式PCR扩增后,能够得到清晰明亮的特异性条带。所有样品均未扩增到外源Cry1A(b)/Cry1A(c)和Btc基因。

转基因大米与亲本大米猪回肠蛋白质及氨基酸消化率的比较研究

目的:比较表达豇豆胰蛋白酶抑制剂基因大米(转SCK基因大米)和亲本大米蛋白质和氨基酸消化率的差异,并探讨其生物利用率的异同。方法:选用猪为实验动物,通过外科手术法在回肠末端放置T型瘘管,分别喂饲转SCK基因大米和亲本大米,收集动物回肠末端消化产物,分析和计算两种大米蛋白质和氨基酸的消化率。结果:转SCK基因大米与亲本大米中蛋白质的表观和真消化率相似;氨基酸消化率测定结果显示,除亲本大米中赖氨酸的表观消化率与SCK基因大米相比有差异外,其余氨基酸的表观和真消化率均无显著性差异。结论:外源性基因的插入未改变大米中蛋白质和氨基酸的消化率,在蛋白质和氨基酸消化率方面基本满足“实质等同性”的要求。

转基因大米的免疫毒理学评价

目的 观察转基因大米对小鼠免疫功能的影响。方法 将Balb/c小鼠随机分为 4组 ,即转基因大米组、非转基因大米对照组、美国营养学会配方饲料 (AIN93G)正常对照组和阳性对照组 ,相应饲料喂养 30d ,比较各组小鼠免疫功能改变情况。结果 转基因大米组 ,所有观察指标与非转基因大米组相比均无显著性差异 ;与AIN93G组相比 ,脾脏 /体比值、自然杀伤 (NK)细胞活性高于AIN93G组 ,其余指标无显著性差异。阳性对照组的各项指标 ,绝大多数均显著低于其他 3组。结论 转基因大米在小鼠免疫毒理学方面的评价是安全的。

转基因大米中氨基酸含量超高效液相色谱定量

建立了一种6-氨基喹啉基--羟基琥珀酰亚氨基甲酸酯（AQC）柱前衍生，超高效液相色谱（UPLC）对大米中17种氨基酸进行快速定量的方法。优化了6M盐酸和0．2％苯酚的加入量、水解时间等大米水解条件，采用1．7txm粒径的AccQ·TagULTRAC18色谱柱分离，260nnl检测，可在9．5rain内实现17种氨基酸衍生物的分离。结果表明，17种氨基酸的标准工作曲线的线性回归相关系数（r）均大于0．999，加标回收率在85．9％～102％之间，日内相对标准偏差（RSD）（n=5）2．64％-4．59％，日间相对标准偏差（n=3）1．43％-5．06％，方法简单、准确、快速、重复性和再现性良好。将该方法用于大米中氨基酸含量的分析，比较了4对转基因大米及其非转亲本之间氨基酸含量的差异，检验结果表明，所取样分析的转基因大米及其亲本之间在氨基酸含量上没有显著性差异。

安徽省转基因大米情况普查评析

应用实时荧光PCR技术对转基因大米进行了定性检测,对安徽省转基因大米进行了普查评析,并就加强转基因大米的宣传和管理提出了相关建议。

转基因大米TT51-1品系精准定量检测方法的比较研究

基于大米蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因和TT51-1品系特异性基因序列筛选适用于数字PCR的内、外源基因特异性引物探针并建立转基因大米TT51-1品系的双重数字PCR定量方法。其定量的绝对灵敏度和相对灵敏度分别达2 copies/μL和0.1%。当样品中TT51-1转基因大米成分含量低至0.1%时,6次定量值的相对标准偏差在7.30%~18.63%之间,偏差在-8.77%~9.62%之间,精密度和稳定性均较为理想,而同样的引物探针所建立的实时荧光PCR方法定量的相对灵敏度仅达到1%。为促进该方法的标准化应用,将微滴式数字PCR平台上建立的定量方法在芯片式数字PCR平台上进行室内验证,结果表明该方法的定量精密度和准确性符合要求。该方法可应用于大米、稻谷及其初加工产品中TT51-1转基因大米成分的精准定量检测。

抗性淀粉转基因大米和亲本大米营养成分的比较研究

对抗性淀粉转基因大米和亲本大米的营养成分进行了比较研究,营养成分的检测包括抗性淀粉、宏量营养素、脂肪酸、氨基酸、维生素和矿物质。研究发现抗性淀粉转基因大米中除了碳水化合物,脂肪酸中肉豆寇酸、棕榈酸、硬酯酸、油酸、α-亚麻酸,氨基酸中天冬氨酸,铁和叶酸含量略低于亲本大米外,其余营养素含量均不低于亲本大米。因此,认为抗性淀粉转基因大米中营养成分并没有因为抗性淀粉含量的提高而受到影响,两者之间营养成分具有实质等同性。

加强对转基因大米管理和检测,以应对欧盟严格检查

2011年11月15日,欧委会发出通报,为防止非法转基因成分传入,欧盟各成员国于2012年2月1日起对来自中国米制品实施更为严格入境检查―批批进行转基因检测。新规出台后,我国输欧所有米制品到达欧盟口岸后将被要求对100%批次进行转基因抽查检测,在实验室分析结果出来前不得进入市场销售。欧盟提出4种新的实验室筛查方法,以最大程度避免我国当前正处研发试种阶段、

转基因大米的安全性与核酸检测技术的进展

转基因大米通常指通过基因技术获得外源基因的大米品种,相对于传统大米,其核酸组成发生了一定的变化。总结了对于转基因大米安全性的认识——关于转基因大米的食品安全性,目前在世界范围内仍然存在部分争议。就转基因大米的核酸检测技术的最新进展作了综述,指出PCR技术和改进的PCR技术仍然是主流检测技术,但是基因芯片等技术的发展为快速进行转基因大米的检测提供了更多的选择。

消费者对转基因大米的购买意愿——基于价格反应的消费者分类研究

基于2013年15省份城镇居民的调查数据,对转基因偏好者、转基因排斥者以及价格敏感者人群的消费行为及其影响因素进行了分析。研究结果显示,转基因排斥者与价格敏感者是社会经济层次不同的两个群体;随着转基因大米主观认知水平的提高,转基因排斥者对转基因大米愈加排斥,表明这个群体对转基因技术及食品的负面认知主导了其消费行为;"2012年黄金大米事件"对价格敏感者产生了显著的负向影响,表明媒体对转基因技术及食品的客观报道会有助于提高这个人群对转基因大米的购买意愿;转基因偏好者和价格敏感者均视转基因大米为"正常品",而转基因排斥者则视转基因大米为"劣等品",表明收入水平的提高,并不必然导致消费者对转基因大米的排斥。

转基因大米中科丰6号和克螟稻的检测研究

本研究采用实时荧光定量PCR技术，建立了转科丰6号和克螟稻基因大米成分的快速检测方法。根据国内外文献查阅的科丰6号和克螟稻引物信息，确立了转科丰6号和克螟稻基因大米快速检测方法，并对其特异性、灵敏度和PCR扩增效率进行了验证。结果表明本研究建立的方法具有良好的特异性和PCR扩增效率，灵敏度可达到0．01％。

转基因大米育种及其食用安全性研究进展

伴随着环境的恶化及资源的短缺,世界范围内正面临着一场粮食危机,转基因育种技术也因此得以迅速发展与应用。主要介绍了转基因大米的育种技术,同时对转基因大米的食用安全性进行了论述。

基于近红外光谱和LSSVM方法的转基因大米鉴别研究

采用近红外漫反射光谱结合主成分分析(principal component analysis,PCA)和最小二乘支持向量机(least squares support vector machine,LSSVM)研究转基因大米的鉴别方法。采用PCA方法分析大米样品光谱空间分布;不同的光谱预处理方法:5点平滑、多元散射校正(multiplicative scatter correction,MSC)和标准正态变量变换(standard normal variate transformation,SNV)结合LSSVM用于定性判别模型的建立和优化;采用格点搜索方法对LSSVM模型的惩罚因子(c)和径向基核函数宽度(g)进行优化;正确识别率(correct recognition rate,CRR)用于判别模型的评价。结果表明:MSC结合LSSVM可用于转基因大米定性判别模型的建立,最优模型的CRR为97.50%。该方法有望成为转基因食品快速鉴别的一种辅助方法。

科教人群对转基因大米接受态度的研究——基于排序选择模型的实证分析

转基因大米一直备受公众关注和争论,并渐已成为相关科学研究的重点。以高校教师和科研人员为实地调查对象,采用排序选择模型分析了个体特征变量、专业背景特征、对转基因相关知识的了解程度,以及政府监管规范程度是否会显著影响高校教师和科研人员对转基因大米的接受态度。结果表明,个体特征变量、专业背景特征并不显著影响教师和科研人员对转基因大米的接受态度,而对转基因相关知识的了解程度以及政府对转基因技术管理的规范程度显著影响教师和科研人员对转基因大米的接受态度,且呈现正相关的关系。