载脂蛋白(a)促进表达人apo(a)基因的WHHL转基因家兔产生复合动脉粥样硬化

目的:研究载脂蛋白(a)[apo(a)]对表达人apo(a)基因的WHHL转基因家免动脉粥样硬化的影响。方法:制备表达人apo(a)的WHHL转基因家兔,比较WHHL转基因家兔与WHHL非转基因家兔的动脉粥样硬化病变程度及病变特点。结果:WHHL转基因家兔血浆中apo(a)浓度大约为150 mg·L-1,血浆脂质水平与WHHL非转基因兔相近。WHHL转基因家兔的病变以纤维斑块和粥样变即复合病变为主,而非转基因家兔的病变则大多为脂肪条纹。兔疫组化研究结果表明转基因WHHL家兔的病变中的纤维帽主要由平滑肌细胞构成,病变的坏死灶内含有大量的有巨噬细胞衍变而来的泡沫细胞。apo(a)主要沉积在平滑肌比较丰富的区域,另一个比较明显的特征是转基因家兔的病变内有大量钙化形成,而在非转基因家兔体内则几乎没有。结论:apo(a)促进表达人apo(a)基因的WHHL转基因家兔产生复合动脉粥样硬化。

脂蛋白(a)对转基因家族性高脂血症家兔冠状动脉粥样硬化发生的影响

目的应用载脂蛋白(a)转基因家族性高脂血症家兔模型评价脂蛋白(a)在冠状动脉粥样硬化发展过程中的长期作用结果,以进一步探讨脂蛋白(a)在动脉粥样硬化中的作用机制。方法繁殖人类载脂蛋白(a)转基因家族性高脂血症家兔及同窝生非转基因家族性高脂血症家兔,24月龄,标准普通饲料喂养。测量家兔血浆脂蛋白(a)、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇及C反应蛋白水平,组织学染色测量病变内膜面积及狭窄率,并采用免疫组织化学染色分析病变的组成。结果24月龄的转基因家族性高脂血症家兔血浆脂蛋白(a)水平为9.1±3.5nmol/L;转基因与非转基因家族性高脂血症家兔的总胆固醇、甘油三酯和高密度脂蛋白胆固醇水平差异无显著性,但转基因家族性高脂血症家兔右冠状动脉病变面积比非转基因家族性高脂血症家兔高3.5倍(P<0.05)。转基因家兔右冠状动脉的病变大小并没有发生相应的管腔狭窄(狭窄率在非转基因组为26.9%±6.6%,转基因组为27.7%±5.0%),转基因家兔右冠状动脉直径由于血管的代偿性重塑而发生了显著的增加(血管面积在非转基因组为1.8±0.6mm2,转基因组为5.3±1.1mm2;P<0.05)。人类载脂蛋白(a)转基因家兔的病变与载脂蛋白B有关,主要分布在细胞外基质的周围。病变富含细胞外基质,病变中细胞成分所占的比例较少,不足10%。发现有33%转基因家兔及9%非转基因家兔发生了明显的心肌梗死。结论增加血浆脂蛋白(a)水平可加重有高脂血症背景家兔的冠状动脉粥样硬化。

转基因兔在动脉粥样硬化研究中的应用及其进展

家兔脂蛋白组成和脂代谢特点适合研究人的动脉粥样硬化疾病 ,携带与动脉粥样硬化相关人基因的转基因兔又成为研究人脂蛋白代谢和动脉粥样硬化一个独特工具。到目前为止 ,携带人载脂蛋白 (a)、载脂蛋白AI、载脂蛋白B、载脂蛋白E2、载脂蛋白、肝脂酶、卵磷脂 -胆固醇酰基转移酶、脂蛋白脂酶、1 5 脂质氧化酶、基质金属蛋白酶 1 2 ,以及家兔的载脂蛋白BmRNA编码蛋白催化多肽 1基因等已经在家兔身上表达。另外 ,人的载脂蛋白 (a)、载脂蛋白AⅠ、卵磷脂 -胆固醇酰基转移酶和脂蛋白脂酶基因也已经被导入到低密度脂蛋白受体缺陷的WHHL家兔体内。

转猪生长激素基因家兔的研究

微注射法向家兔受精卵原核注入重组猪生长激素基因(pSMTPGH/BglI片段)。449枚注射卵经移植后共成胎和产仔56只。采集其中50只仔兔耳组织(约1克)提取总体DNA,用经Djgoxigenin-11-dUTP标记的3-5KbSMT-PGH探针对总体DNA斑点杂交,结果表明有15只仔兔为检测阳性。对上述阳性兔Southern印迹杂交进一步检测表明,有7只仔兔整合了导入的猪生长激素基因。出生仔兔中外源基因整合率为14％(7/50)。