ApoCⅢ转基因小型猪的表型特征

应用体细胞核移植方法制备ApoCⅢ转基因小型猪,并分析其表型特征。通过血浆脂质检测、口服脂肪负荷试验、肝素后血浆脂蛋白酶活性测定以及静脉葡萄糖耐量试验,分析转基因小型猪的脂质和糖代谢特点。该小型猪表现出显著的高甘油三酯血症,与非转基因小型猪相比,转基因小型猪对甘油三酯(TG)的清除显著延迟,且肝素后血浆脂蛋白脂酶活性也显著降低,但静脉糖耐量未有改变。

hApoCⅢ转基因小型猪的脂蛋白构成变化

为分析hApoCⅢ转基因小型猪的脂蛋白构成变化,探讨载脂蛋白ApoCⅢ在代谢调节中的作用,应用Western blot和免疫组织化学方法检测人ApoCⅢ在转基因小型猪体内的表达和分布,并通过脂蛋白的快速蛋白液相色谱分析试验分析转基因小型猪的脂蛋白构成特点。结果显示,在转基因小型猪的肝脏和小肠组织中能检测到hApoCⅢ蛋白,且转基因小型猪血浆极低密度脂蛋白(VLDL)颗粒较非转基因小型猪显著增高。这表明,hApoCⅢ转基因小型猪过表达ApoCⅢ蛋白造成其VLDL颗粒显著增高。

hApoCⅢ转基因小型猪的生物安全初步评估

为评估hApoCⅢ转基因小型猪的环境生物安全性,采用PCR技术,通过检测其粪便、接触的土壤、肠道菌、代孕母猪的血液DNA以及与之接触的普通猪DNA是否发生了水平基因转移。同时通过大鼠90d经口毒性试验,检测大鼠的血液、生理生化指标和脏器系数是否发生了显著性变化。结果显示:与对照组相比,hApoCⅢ转基因小型猪的肠道内微生物菌群、普通猪的血液和代孕母猪的血液、周围环境土壤都没有发生基因水平转移现象。与对照组相比,试验组大鼠各项观察指标及病理检测均正常,血液、生化指标均在正常范围;初步显示hApoCⅢ转基因小型猪对生物环境是安全的,没有对环境造成不利影响。