农作物种子转基因检测的总结与思考

农作物种子的转基因检测涉及试验研究、南繁育种、品种审定(登记)、生产经营等多个环节,全覆盖检测能够有效遏制违规转基因扩散、保证生物育种产业健康有序发展。转基因种子检测也存在如检测范围不够、检测效率低下、检测方法落后等亟需解决的问题。做好农作物种子的转基因检测,可为政府加大对非法转基因监测力度、净化种子市场、杜绝恶性转基因扩散事件、维护社会稳定提供重要技术支撑。

线上线下混合式教学模式在通识类非限制性选修课教学中的应用——以“转基因检测及安全评价”课程为例

文章基于相关概念,以“转基因检测及安全评价”课程为例,首先分析了线上线下混合式教学模式在通识类非限制性选修课教学中应用的优势,然后提出了线上线下混合式教学模式在通识类非限制性选修课教学中的应用策略,最后阐述了线上线下混合式教学模式在通识类非限制性选修课教学中的应用成效。

种子转基因检测实验室污染原因排查和分析应对

污染防控是种子转基因检测实验室结果质量控制的核心,对种子转基因检测实验室的污染产生原因进行了回顾性分析,总结了在种子转基因检测污染防控中获取的经验和教训,对不同类型实验样品污染情况进行了深入分析,并提出了对应的解决方法,为加强种子转基因检测实验污染防控获取真实可靠的结果提供参考。

实时荧光定量PCR技术在转基因检测中的应用

实时荧光定量PCR技术是一种新型的核酸定性、定量检测、分析技术。随着转基因产品大规模商业化,转基因生物的环境安全和食用安全性问题引起了全球范围内广泛的争论和关注。实时监测、定量准确、灵敏度高、反应速度快、重复性好及PCR反应后不需电泳检测等优点,使RQ-PCR逐步成为转基因检测的重要工具。

番茄叶片基因组DNA快速制备技术及其在基于实时荧光定量PCR的转基因检测中的应用

以番茄（Solanum lycopersicum L.cv.Micro-Tom）叶片为试材,建立了一种简便快速制备叶片基因组DNA的方法。2~20 mm2的叶片即可满足制备要求,制备过程只需一种提取试剂、只涉及1次移液和1次离心操作,不涉及沉淀。确定了所制备的DNA用于实时荧光定量PCR的合适用量为0.1~0.2μL（反应总体积为12.5μL）,发现过量模板的使用可降低PCR效率且可导致扩增失败。该项DNA快速制备及相适应的实时荧光定量PCR技术已成功应用于番茄转基因植株检测。

定性PCR技术及卡那霉素对8个番茄品种的转基因检测

本研究利用定性PCR技术对8个不同番茄品种中外源基因35S启动子、NPTⅡ基因和NOS终止子进行检测。实验结果表明,阳性对照可以稳定扩增到预期的大小片段,而待检测品种和阴性对照则没有扩增到预期产物。利用100mg/L的卡那霉素对8个不同番茄品种的种子进行萌发试验,再用50mg/L的卡那霉素对番茄外植体(子叶和下胚轴)进行抗性验证,结果显示卡那霉素抗性筛选实验结果与定性PCR结果一致。本文通过对这两种检测方法的优缺点进行研究分析及比较,初步建立了一个对不同品种番茄进行转基因检测的体系。

国内外转基因检测标准体系现状与启示

全球转基因作物产业化已经23年,种植面积增长了113倍,我国转基因技术已跻身国际先进行列,转基因作物产业化也有所突破。转基因检测标准体系是转基因生物安全管理必不可少的技术支撑。本研究对国内外主流的转基因检测标准体系进行检索,分析其转化体覆盖度、技术先进性等特点,并从定量检测方法、新型转基因产品检测方法、检测标准国际化等方面提出建议,以期为我国转基因检测标准体系进一步发展提供思路。

应用定性PCR技术对番茄品种转基因检测

研究应用定性PCR技术对山东菜区22个不同番茄品种和一个阳性对照、一个阴性对照中外源基因35S启动子、NPTⅡ基因和NOS终止子进行检测。实验结果表明,阳性对照可以稳定扩增到预期大小的片段,而21个待检测品种和阴性对照则没有扩增到195 bp、180 bp特异片段。待检品种瑞芬扩增到195 bp、180 bp、263 bp和274 bp的特异片段,初步确定该品种含有可疑外源基因。

市场销售大豆的转基因检测

在市场随机购买大豆样品,采用试剂盒法提取基因组总DNA,并通过扩增大豆凝集素参照基因验证基因组总DNA的完整性,进一步通过检测转基因常用的Ca MV35S启动子和NOS终止子,分析检测样品是否为转基因品种。检测结果显示市售大豆80%为转基因大豆。

甘蔗转基因改良及转基因检测机构的角色

我国甘蔗转基因研究取得了长足进展,现对我国甘蔗转基因研究实践中使用的改良方法进行回顾总结,并结合国际甘蔗转基因研究的现状指出未来甘蔗转基因研究的发展方向。针对转基因研究的高度社会敏感性,阐述法定转基因检测机构对保护和促进我国甘蔗转基因研究健康发展将起到的重要作用。

浅述转基因检测实验室内审管理

内部审核是实验室质量管理体系的重要组成部分,是确保检测工作有效性的重要手段和必然要求。文章根据转基因检测实验室的特点,从仪器设备管理、样品管理、试剂耗材管理和环境控制等方面阐述了转基因检测实验室内审的关键点,并提出相应的内审管理实施措施,以期提高转基因检测实验室的内审工作效率和水平,促进转基因检测实验室质量管理体系的持续改进,保证检测数据的准确性和可靠性。

转基因检测标准物质研制关键环节质量控制研究

在转基因产品检测方法开发、身份鉴定和产品成分定性、定量检测过程中,标准物质是不可缺少的物质基础。本研究对标标准物质申报要求,着重对比了基体标准物质、基因组DNA标准物质、质粒标准物质三种类型转基因检测标准物质的研制过程,提出关键环节的质量控制要求,为促进转基因检测标准物质研制过程标准化、提升研制报告编制质量、提高申报通过率提供技术支撑。

大豆制品转基因检测中PCR技术的应用进展及展望

近年来,世界范围内转基因大豆的应用率已高达78%左右,转基因大豆主要用于大豆油生产,其制品已越来越广泛地参与到消费者的饮食生活中。我国自产大豆量不足进口大豆量的20%,进口大豆以转基因大豆为主。为规范转基因大豆的流通、加工和消费等环节,我国对转基因制品采用按目录强制性标识管理,这就对转基因大豆制品的检测技术提出了较高要求。目前广泛采用的检测方法是核酸扩增检测技术,其中聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术应用最普遍,主要包括普通定性PCR、巢式PCR、实时荧光定量PCR、多重PCR、数字PCR等。本文对不同PCR技术在大豆制品转基因检测中的应用进行综述,对其优缺点进行了对比,对不同加工程度大豆制品适用的PCR技术进行了探究,最后对大豆制品相关PCR技术未来潜在的研究方向进行了展望,以期提高PCR检测效率,助力我国转基因大豆制品生物安全管理工作的推进实施。

大米和米制品Bt63转基因检测PCR方法的灵敏度研究

采用普通PCR法和荧光定量PCR法对Bt63转基因大米的检测灵敏度进行对比研究。根据大米内源蔗糖磷酸合成酶基因SPS和结构特异性基因Btc的基因序列,选用特异性的引物和探针进行研究,经验证试验表明具有专一性,能用于品系鉴定。在灵敏度试验中,阳性转基因大米按照不同质量百分比进行梯度稀释,提取DNA进行PCR扩增。结果表明,普通PCR检测的灵敏度在0.1%左右,而荧光定量PCR检测的灵敏度为0.01%,是普通PCR检测的10倍以上。应用两种方法对实际样品进行检测,都得到了较明显的内源SPS基因的扩增,而Btc基因都是阴性。荧光定量PCR方法避免了电泳检测的步骤,具有更高的安全性和简便性,因此日常检测中,利用荧光定量PCR技术检测Bt63转基因大米及其产品是一种快速、灵敏和准确的检测手段。

烟草转基因检测标准及PCR反应体系的研究

通过对PCR体系和反应条件的优化 ,确定了针对 3 5s启动子序列进行转基因检测的最佳反应体系和反应条件 ,利用纯阳性模板经PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳确认 1ng模板DNA为纯阳性样品理想扩增下限 ,同时以不同阳性含量的干烟叶为材料 ,确定了烟叶转基因检测的标准为 0 .1%,建立了转基因外标定量法 。

烟草转基因检测方法的研究

通过试验研究，提出了烟草转基因检测方法和标准，首先提取样品DNA采用260－280nm波长扫描测定提取物DNA浓度和纯度，并利用叶绿体不编码蛋白基因序列PCR扩增确定模板质量，同时进行35s启动于，NOS终止子的PCR扩增，对于未出现特异性扩增的样品进行35s和NOS的巢式PCR反应，对于出现目标长度片段扩增的样品再次提取DNA重复检测，并利用限制性内切酶酶切、巢式PCR、探针杂交和目的基因序列扩增进行验证，确定所转目的基因种类。并应用竞争性PCR测定样品中转基因阳性成分含量。

改良十六烷基三甲基溴化铵-磁珠核酸提取方法及在植物转基因检测中的应用

目的建立一种快速、高效、便捷的植物基因组DNA提取方法并运用于植物转基因检测。方法改良传统的十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimethylammonium ammonium bromide,CTAB)方法,并结合磁珠吸附基因组DNA,配合核酸自动提取系统提取水稻和加工米粉中的核酸,荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测Bt63大米转基因成分,并与另外4种提取方法的结果进行对比,评价提取效果。结果 5种不同方法中CTAB-磁珠法提取的样品基因组DNA浓度和质量最佳,荧光PCR检测低浓度Bt63转基因成分(0.01%)的Ct值最小,检测结果最好。结论该方法可高效快速地提取植物核酸,在低含量的转基因成分检测中相比其他几种方法具有绝对优势。

种子转基因检测方法及应用

目前,中国转基因技术仍不够完善,还存在一定的缺陷。为了对主要农作物转基因种子进行鉴定,文章介绍了种子转基因检测方法及应用,为其他农作物种子的转基因检测提供更多可参考的数据和经验,促进农作物转基因检测技术的发展。

食用油脂的转基因检测

随着生物技术的发展，除卫生标准中的酸值过氧化值、羰基值和黄曲霉毒素外，人们对食用油脂的检验需求已逐渐扩展到核酸和蛋白质等生物大分子。当转基因食品成为又一食品安全话题之后，如何鉴别食用油脂是否为转基因食品就变得尤为重要。本文提供了一种食用油成品的转基因检测方法，供业内人士参考。