真养产碱杆菌聚羟基烷酸合成酶基因在欧文氏菌中的表达

将含有真养产碱杆菌（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｅｕｔｒｏｐｈｕｓ）合成聚羟基烷酸（ＰＨＡ）基因（ｐｈａＣＡＢ）的质粒ｐＴＺ１８ＵＰＨＢ改造成为具有卡那霉素抗性的质粒ｐＪＭＣ１，并以电击法将ｐＪＭＣ１引入利用碳源广泛的胡罗卜软腐欧文氏菌（Ｅｒｗｉｎｉａｃａｒｏｔｏｖｏｒａ）非致病菌系（Ｅｃｃ１３Ｂ）中，ｐｈａＣＡＢ可获得高效表达，膨大的转基因菌［Ｅｃｃ１３Ｂ（ｐＪＭＣ１）］细胞内几乎充满ＰＨＡ颗粒。以蔗糖为碳源，初步在５Ｌ发酵罐中对转基因菌进行分批补料培养３５ｈ，菌体干重达２８ｇ／Ｌ，ＰＨＡ占菌体干重的６８％，具有生产潜力。将该菌合成的ＰＨＡ提取纯化（纯度达９９％）后，进行核磁共振分析。