进口油菜籽中不同转基因品系的检测与分析

对我国27批进口油菜籽进行了转基因成分检测和转基因油菜品系组成情况分析。利用已知转基因油菜RT73、T45、Oxy235、Topas19/2、MS1、RF1、RF2、MS8和RF3的特异性检测体系,对初检为阳性的转基因油菜籽样品进行扩增,扩增基因包括bar、PAT、GOX和NPTII。结果共检出25批转基因油菜籽,检出率为92.6%。所有批次均检出品系RT73和MS8×RF3,表明二者为目前我国进口的主要转基因油菜籽。约40%的批次检出MS1×RF1和MS1×RF2,有少量批次检出T45、Oxy235和Topas19/2,每批次均为多品系混合样品。研究表明,列入农业转基因生物安全生产证书(我国农业部颁发)名单的7个转基因油菜品系均有进口,其中以RT73和MS8×RF3为主。

转基因油菜Ms8品系的LAMP检测

目的建立一种快速敏感的转基因油菜籽Ms8品系应用环介导等温扩增技术检测方法。方法针对转基因油菜籽Ms8品系外源基因与内源基因结合处序列设计1组特异性引物,对反应体系进行优化。结果 LAMP检测方法反应速度快,在60min内即可完成扩增,检测结果易于观察,通过肉眼观察染色情况即可分辨,该方法灵敏度高,检测限可达到65.12pg/?L,并且具有良好的特异性。结论 LAMP检测方法快速、灵敏、特异性强,适用于转基因油菜籽Ms8品系基层和现场检测。

实时荧光聚合酶链式反应检测转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2品系

目的:建立实时荧光聚合酶链式反应检测转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2品系的鉴定方法。方法:以转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2为研究对象,在转基因小麦外源片段与小麦染色体重组的边界序列分别设计引物和探针,以其他多种转基因产品和非转基因小麦为对照进行特异性实验,以B73-6-1样品模拟制备10个含量梯度的添加样品进行灵敏度实验。结果:本研究设计的引物和探针具有很好的品系鉴定特异性,检测灵敏度可达到0.01%(m/m)。结论:该方法特异性好、灵敏度高,可快速、准确地鉴定转基因小麦B73-6-1、B72-8-11b和B102-1-2品系。