转基因番茄植株Mi1.2表达水平的Real Time PCR检测体系的建立

[目的]为转基因番茄植株的高通量筛选奠定基础。[方法]利用CTAB法提取番茄叶片总RNA进行Real Time PCR扩增，分析转MI1、2基因的番茄植株表达水平的检测体系。[结果]提取RNA的A260／A280为1．78～1．88，RNA无明显降解。在严谨扩增条件下，引物SYBR2的扩增效率高于SYBR1。Mg^2＋的适宜浓度为2．0mg／L。Real Time PCR扩增产物具有良好的特异性，熔解曲线特异峰出现在84．5℃附近，在熔解曲线略低于83℃附近有极微弱的非特异峰。因此在定量反应中信号检测步骤应放在84℃。以4种不同模板分子数条件下扩增曲线Ct值得到的回归方程为Y=-3．78×log（copynumber）＋39．50，相关系数为0．998。[结论]该试验获得的Real Time PCR体系可用于转基因植株表达水平的检测。

干旱胁迫下CO2浓度升高对转StAPX番茄植株耐旱能力的影响

在干旱胁迫伴随大气CO2浓度以及升高的CO2浓度(加倍)条件下,以过量表达番茄类囊体膜抗坏血酸过氧化物酶基因(StAPX)的转基因番茄为试材,探明干旱胁迫下CO2浓度升高对转基因及其野生型番茄植株清除活性氧及耐旱能力的影响。结果表明:升高的CO2浓度明显增加了干旱胁迫下植物的光合水平;升高的CO2浓度明显降低了干旱导致的植物体内H2O2和O2ˉ的积累,影响了干旱胁迫下番茄植株的水-水循环系统的活性氧清除酶活性和小分子抗氧化物质含量;干旱胁迫下即使伴随升高的CO2浓度,测试番茄植株体内的渗透调节物质含量变化也不太明显;升高的CO2浓度明显降低了干旱胁迫下的植物细胞膜伤害程度;干旱胁迫下,升高的CO2浓度对转基因番茄株系比对野生型植株的影响更加明显。结果证明干旱逆境下,升高的CO2浓度能够在一定程度上进一步提高转基因番茄植株的耐旱性。