转基因病毒可以“炸死”癌细胞

英国肿瘤中心和伦敦大学玛丽皇家医学院科学家发现了一种防治恶性肿瘤的新方法,以尼克·列莫伊教授为首的研究小组建议在癌肿块中植入转基因病毒,转基因病毒会在受损细胞内部“爆炸”。 通常在病毒侵入健康细胞时,细胞会发现侵入并激活自杀过程,从而阻止疾病的传播。但是某些传染病带有能“欺骗”人体细胞的特殊基因,以确保自身能快速增生。 英国科学家试图切断腺病毒中的一个基因(E1B-19kD),然后研究其在人体中的感染情况。

牛津大学研发转基因病毒,可杀死癌细胞

据英国《每日邮报》报道,牛津大学的科学家研发出一种可以杀死癌细胞的转基因病毒。这种病毒可以同时攻击肿瘤细胞和成纤维细胞——一种被“欺骗”以保护癌细胞免受免疫系统攻击的健康细胞。就目前来说,任何已经存在的杀死成纤维细胞的治疗方法,都可能破坏骨髓和皮肤中的成纤维细胞。牛津大学肿瘤科的克里·费舍尔博士领导了这项研究,他表示,即使大多数癌细胞都被杀死,成纤维细胞也能保护剩余的癌细胞,帮助它们恢复和生长。到目前为止,还没有可以同时杀死癌细胞和保护它们的成纤维细胞,又不伤害身体其他部位的方法。

牛津大学研发转基因病毒可杀死癌细胞

日前,牛津大学的科学家研发出一种可以杀死癌细胞的转基因病毒。这种病毒可以同时攻击肿瘤细胞和成纤维细胞——一种被'欺骗'以保护癌细胞免受免疫系统攻击的健康细胞。就目前来说,任何已经存在的杀死成纤维细胞的治疗方法,都可能破坏骨髓和皮肤中的成纤维细胞。

应用基因工程创造抗黄矮病毒转基因小麦新种质

应用花粉管通道法和基因枪法将大麦黄矮病毒ＧＰＶ株系外壳蛋白基因导入小麦栽培品种，获得了抗大麦黄矮病毒ＧＰＶ株系的转基因小麦株系（文献检索证明世界上无任何其它抗病毒转基因小麦报道）。转基因植株经ＰＣＲ、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ检测，证明ＣＰ基因可稳定遗传到Ｔ３代；经Ｗｅｓｔｅｒｎ测定，证明ＣＰ基因在转基因小麦中已经得到表达；经带毒蚜温室和田间人工接种试验，获得了一些抗病性明显的后代。

抗病毒基因工程与转基因植物释放的环境风险评估

全面介绍了抗病毒转基因植物释放的风险性，包括重组（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）、衣壳转移（ｔｒａｎｓｏａｐ－ｓｉｄａｔｉｏｎ）和协生作用（ｓｙｎｅｒｇｉｓｍ）等；并指出，我国应对抗病毒转基因植物释放产生的风险进行系统评估，在缺乏对可能产生的风险的认识之前，应控制进行大规模的田间试验。

转基因抗黄瓜花叶病毒蕃茄安全性评价研究

对转基因抗黄瓜花叶病毒 (CMV)蕃茄进行了安全性评价。结果 :CMV蕃茄急性毒性半数致死量LD50 >1 0 g/kg ,属实际无急性毒性物质。经微核试验、精子畸变试验及Ames试验均未发现有致突变作用 ;3 0d喂养试验也未发现引起异常改变。提示 :在本实验范围内 (相当于人口服 5 0 0 g/d)

抗病毒转基因植物释放的风险性研究进展

抗病毒转基因植物在农业生产上有着远大的发展前景和巨大的应用潜力,然而随着转基因植物田间试验数量的不断增加和商品化生产规模的不断扩大,抗病毒转基因植物的潜在风险也日益引起了广泛关注,其风险主要有3种:重组、协生和异源包壳.根据各种风险产生的机制,已发现一些减少风险的有效方法.

CpG-ODN增强乙型肝炎病毒转基因小鼠对重组乙肝疫苗的细胞免疫应答

[目的 ]探讨CpG -ODN作为佐剂对重组乙肝疫苗诱导乙肝病毒转基因小鼠产生细胞免疫应答的影响。[方法 ]用重组干扰素 (rIFNα - 2b)、重组乙肝疫苗 (rHBsvaccine)和重组乙肝疫苗 +CpG -ODN分别免疫HBV转基因小鼠后 ,流式细胞仪检测免疫小鼠的外周血T淋巴细胞亚群 ,ELISA法检测免疫小鼠的外周血IL - 2、IL - 12 (p70 )和IFN -γ的含量 ,MTT法和乳酸脱氢酶法分别检测免疫小鼠的淋巴细胞增殖和杀伤功能。[结果 ]重组乙肝疫苗组CD3+、CD4 +、CD8+细胞在T细胞中所占百分比分别为 (2 5 .0 0 8± 2 .85 2 ) %、(13.6 40± 1.6 16 ) %、(9.989± 1.12 3) %均明显高于对照组 ,(P <0 .0 5 ) ;IL - 2、IL - 12 (p70 )和IFN -γ的含量分别为 (130 4 .2 88± 5 72 .2 12 ) pg/mL、(2 0 3.810± 91.80 7) pg/mL、(86 0 .736± 336 .888)pg/mL均明显高于对照组 ,(P <0 .0 5 ) ;淋巴细胞特异性增殖和杀伤效应与对照组相比均有明显差异 ,(P <0 .0 5 )。疫苗 +CpG -ODN组与疫苗组比较 ,免疫小鼠产生更强的HBV特异性细胞应答 (P <0 .0 5 ) ,且以Th1型细胞免疫应答为主。而干扰素组由于给药次数和剂量等原因 ,与对照组无显著差异。 [结论 ]CpG -ODN作为佐剂可以较好的增强重组乙肝疫苗诱导HBV转基因小鼠产生细胞免疫应答。

疏肝健脾补肾方对乙型肝炎病毒转基因小鼠脾T淋巴细胞及病毒载量的影响

目的观察疏肝健脾补肾方对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)转基因(transgenic,Tg)小鼠脾T淋巴细胞及病毒载量的影响,探讨其抗病毒疗效及作用机制。方法 60只SPF级BALB/C雄性小鼠,设10只HBV非Tg小鼠为正常对照组,50只HBVTg小鼠随机分为模型组、阿德福韦(ADV)组及中药小、中、大剂量组,每组10只。中药小、中、大剂量组分别给予疏肝健脾补肾方10、20、40g生药/kg灌胃;ADV组给予ADV50mg/kg灌胃;正常对照组和模型组以等量灭菌等渗生理盐水灌胃,均每天1次,连续21天。采用实时荧光PCR定量检测HBVTg小鼠给药前1天(T0)、给药后10天(T1)、21天(T2)、停药后3天(T3)血清HBVDNA;采用ELISA法检测其T3时血清HBsAg。流式细胞仪测定所有小鼠脾T淋巴细胞百分比。结果各给药组T0时血清HBsAg均为阳性,T3时ADV组HBsAg转阴数高于中药大剂量组,差异有统计学意义(P<0·01)。与本组T0时比较,给药后中药大剂量组可持续降低HBVDNA含量,差异均有统计学意义(P<0·01);ADV组HBVDNA含量亦逐渐下降(P<0·01),但在T3时有所回升。中药各剂量组及ADV组均可提高CD3+细胞百分比(P<0·05,P<0·01);中药各剂量组均可明显降低CD8+百分比(P<0·01)。与其他给药组比较,中药大剂量组CD4+、CD4+/CD8+升高,CD8+降低,差异均有统计学意义(P<0·01)。中药中剂量组CD3+及中药大剂量组CD4+、CD8+、CD4+/CD8+均与本组给药前后HBVDNA滴度减少呈显著正相关(r=0·654,P<0·05;r=0·53,r=0·79,r=0·80,P<0·01)。结论疏肝健脾补肾方具有抑制HBVTg小鼠HBVDNA复制的能力,改善T淋巴细胞亚群的异常,提高机体免疫功能可能是其抗HBV的机制之一。

加味小柴胡汤对乙肝病毒转基因小鼠白介素-12、白介素-4、干扰素-γ mRNA表达的影响

目的:通过实验研究观察加味小柴胡汤对HBV转基因小鼠IL-12、IL-4、IFN-γmRNA表达的影响。方法:36只经筛选HBV DNA阳性的转基因小鼠随机分为3组,每组12只,中药组给予加味小柴胡汤水煎剂、西药组给予拉米夫定、空白对照组(简称盐水组)给予生理盐水,观察各组实验动物血清IL-12、IL-4和肝组织中IFN-γmR-NA活性的变化情况。结果:对IL-12、IL-4活性的影响,与盐水组和西药组比较,给药后中药组小鼠血清IL-12明显升高,而IL-4显著降低,差异有显著性意义(P<0.01,P<0.05);而对小鼠肝组织IFN-γmRNA的表达,中药组与盐水组和西药组比较,差异均有显著性意义(P<0.01)。结论:加味小柴胡汤有明显的调节和改善HBV转基因小鼠IL-12、IL-4、IFN-γmRNA活性的作用。

小干扰RNA长期作用乙型肝炎病毒转基因小鼠对机体免疫系统的影响

目的:探讨小干扰RNA(siRNA)长期作用乙型肝炎病毒(HBV)转基因小鼠对机体免疫系统的影响。方法:siRNA表达载体经微静脉注射转染HBV转基因小鼠,设立特异性siRNA组(pSilencer4.1/C2)、PBS对照组和正常BALB/c小鼠组(n=10);分别于注射后1、3、6、9和12个月经其内眦静脉采血,采用散射比浊法测定IgG、IgA、IgM水平的变化,ELISA测定细胞因子IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ,流式细胞术检测小鼠外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群。结果:pSilencer4.1/C2长期作用转基因小鼠后可以改善机体的先天免疫反应,转基因小鼠机体内的体液免疫和细胞免疫水平较治疗前均有所上调,高于PBS组,几乎接近正常BALB/c小鼠组。结论:pSilencer4.1/C2长期作用转基因小鼠可以上调机体的先天免疫,可为以后免疫疫苗提供应用时机。

佐剂CpG-ODN与重组HBsAg疫苗联合免疫乙型肝炎病毒转基因小鼠的免疫应答研究

目的以CpG-ODN为佐剂与重组HBsAg(rHBsAg)疫苗合用,研究其对乙型肝炎病毒转基因(HBV Tg)小鼠模型的免疫应答效果。方法40只HBV Tg小鼠随机分为4组,每组小鼠分别注射rHBsAg疫苗(单用rHBsAg组)、rHBsAg疫苗+ CpG-ODN(试验组)、rIFNα-2b(IFN组)、生理盐水(对照组)。经多次免疫HBV转基因小鼠,于免疫前、后不同时间采血,动态观察各组小鼠血清中HBsAg量、抗-HBs阳性率和HBV DNA的变化,检测肝组织中HBsAg的表达。检测免疫小鼠的外周血T淋巴细胞亚群和白细胞介素2(IL-2)、IL-12(pTO)以及γ干扰素(IFN-γ)的含量,分别检测免疫小鼠的脾细胞增殖和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤功能并计算各组小鼠肝组织活性指数(HAI)。结果rHBsAg组和rHBsAg+CpG组在免疫小鼠后2周100％诱导抗-HBs;rHBsAg+CpG组能显著降低血清中的HBsAg量或使HBsAg转阴,rHBsAg+CpG组肝组织中HBsAg的表达量与血清中一样降低,并降低血清中HBV DNA的拷贝数。rHBsAg组的CD3^+、CD4^+、CD8^+细胞在T细胞中所占百分比,IL-2、IL-12 (p70)和IFN-γ的含量以及淋巴细胞特异性增殖和杀伤效应均明显高于对照组(P＜0．05)。rHBsAg+CpG组与rHBsAg组比较,免疫小鼠产生更强的HBV特异性细胞应答(P＜0．05),且以Th1型细胞免疫应答为主。在rHBsAg+CpG组肝组织中出现大量淋巴细胞,肝脏的HAI在4个组中最高。结论CpG-ODN作为佐剂可以增强重组HBsAg疫苗诱导HBV转基因小鼠产生抗病毒免疫应答,重组HBsAg疫苗辅以CpG ODN可作为免疫治疗慢性HBV感染的可行性途经。

猪传染性胃肠炎病毒纤突糖蛋白在转基因玉米中的表达

本研究拟构建携带猪传染性胃肠炎病毒纤突糖蛋白基因(TGEV-S)的转基因玉米植株并检测其表达情况。首先利用PCR方法自携带TGEV-S基因的重组质粒中扩增2.2kb的S基因片段,然后插入植物表达载体pBAC176中,该表达载体以编码除草剂草甘膦抗性的EPSP基因作为选择标记,目的基因以双增强子的CaMV35S(E35S)及其玉米Hsp70第一内含子为驱动。以授粉后10～12d约0.5～1mm大小的玉米幼胚为受体,用基因枪进行转化,经过愈伤组织诱导、草甘膦抗性筛选和分化再生培养,先后获得74株转化再生植株。利用PCR和Southern blot检测表明,T0代转基因苗有9株检测结果为阳性。T1代转基因玉米株系经PCR检测有14个转基因株系为阳性,初步确定了目的基因在这些转基因玉米中的稳定整合。进而通过间接ELISA分析初步确定目的基因在7个T1代转基因玉米株系获得了表达。研究结果为进一步研究表达TGEV-S转基因玉米的生物学活性奠定了基础。

抗病毒转基因大豆事件外源T-DNA序列分析及定性检测

转基因作物的T-DNA插入及其与宿主基因组的连接序列构成的侧翼区域,是转基因事件检测的关键组成部分,也是转基因作物开发、评估和监管所必需的。前期研究得到2个携带大豆花叶病毒P3(soybean mosaic virus P3)基因干扰片段的转基因大豆事件,即L13和L104,可显著提高大豆对大豆花叶病毒、大豆花叶坏死病毒和西瓜花叶病毒的抗性,具有较强的光谱性。为了便于对该转基因事件进行监管以及建立事件特异性检测方法,本研究通过Illumina Xten平台,对L13和L104进行全基因组测序(whole genome sequencing,WGS),并结合生物信息学分析和PCR技术,对转基因事件L13和L104的旁侧序列进行了分析。通过全基因组测序,每一个事件获得了超过12.13 Gb的原始数据,测序深度为11×,与大豆参考基因组(Wm82.a2.v1)和转化载体序列做比较,初步识别出这两个转化事件T-DNA的边界及其旁侧序列。转化事件L13和L104的T-DNA分别位于Chr04和Chr11染色体上。进一步的PCR检测和序列测定表明转基因事件L13的T-DNA为单位点双拷贝整合到大豆基因组Chr04:46747946位点;转基因事件L104的T-DNA为单拷贝插入,整合位点为Chr11:30461895位点。结果证明了全基因组测序在识别转基因作物T-DNA插入和旁侧序列区域方面的有效性和稳定性。此外,插入位点的鉴定和事件特异性检测的建立将有助于广谱抗病毒转基因大豆品种的应用和发展。

转基因病毒或可杀死癌细胞

据英国《每日邮报》报道,牛津大学的科学家研发了一种可以杀死癌细胞的转基因病毒。这种病毒可以同时攻击肿瘤细胞和成纤维细胞,后者是一种保护癌细胞免受免疫系统攻击的健康细胞。牛津大学肿瘤科的克里-费舍尔博士领导了这项研究,他表示,即使大多数癌细胞都被杀死,成纤维细胞也能保护剩余的癌细胞,帮助它们恢复和生长。